如何建立一个良好的肝硬化动物模型

肝硬化动物模型（CM）是研究人类肝硬化门静脉高压和肝癌的基础，制作方法大体分为单因素造模和多因素造模两类。单因素造模可制作特定病因的模型。多因素造模可提高成功率，缩短造模时间及降低死亡率。目前问题是；缺乏与人类病因完全一致的肝炎CM，大型动物成功的报道少，致肝硬化所选用的药物鲜有对实验无损害，在提高造模成功率，降低死亡率方面仍有待改进。     

病证结合动物模型研究进展

在病证结合动物模型的构建思路中,疾病造模因素与证候造模因素相叠加的造模方法能够充分兼顾到疾病形成的中西医病因,造模因素更加全面,更容易建立实验研究所需要的疾病和证候,而且所建立的模型也更加贴近临床实际,但由于施加外在干预因素较多,可能会割裂病与证的内在联系。针对这一问题,应该通过临床调查研究,选择关联性较强的疾病和证候来建立病证结合,同时也要注意方药反证的评价中疾病相关指标的改变。模型的评价体系尚需不断完善,要以四诊信息为主,努力实现四诊信息的客观化采集与分析。     

肝癌研究中常用造模方法的应用概况及特点

近年来作为恶性肿瘤的肝癌其高发病率及高死亡率严重影响着人类健康,而其发病过程复杂、致病因素广泛、多阶段参与是严重影响其疗效的重要因素。据流行病学资料及相关实验研究表明,导致肝癌发生的高危因素主要有HBV感染、HCV感染、黄曲霉素及亚硝胺类物质的使用。如果能建立与人肝癌发病过程相一致的动物模型并在癌变前期加以阻断,则其死亡率将会大大下降,这也是目前研究的一大热点。资料显示,80%的肝癌研究中都需制备肝癌动物模型,而其建模方法各不相同,本文将系统总结在肝癌造模过程中不同方法的优缺点,以期能对肝癌的进一步研究打下基础。     

222例肝硬化患者影响预后因素分析

肝硬化是各种慢性肝病发展的终末阶段，并发症多，死亡率高，在人类主要死亡病因中居第4位或第6位。同时肝硬化又是一种常见病，占我国内科总住院人数的4．3％～14．2％。为探讨肝硬化患者影响预后的因素，提高治疗效果，我们对222例住院患者的年龄、性别、child—pugh分级、预后、并发症及救治成功率进行了回顾性分析，现报道如下。     

大鼠肝硬化模型制备的改良

目的对现有肝硬化大鼠造模方法进行改良，构建出稳定的肝硬化大鼠模型并降低制模过程中大鼠的死亡率，为相关的实验提供稳定可靠的疾病模型。材料与方法100只Wistar雌性大鼠，按0.5ml／100g剂量予以皮下多点注射50％CCI4的色拉油溶液，每周注射2次并称量其体重，同时以10％乙醇溶液为其惟一饮用水源；体重降低大于或等于10g以上时，暂停给药，并改用自来水为饮用水源，直到体重恢复到下降少于10g时继续上述方案。结果100只Wistar大鼠14周后，死亡14只，成模86只。结论经过改良的肝硬化大鼠制模方案可增加建模的成功率，并可形成由慢性肝炎转化而来的小结节性肝硬化模型。     

探讨线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型的影响因素

目的:为了提高线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型成功率,探讨大鼠局灶性脑缺血模型的有效方法及影响因素。方法:为观察高温外环境对造模的影响,将外环境温度控制在(25±1)℃和在夏季未控制外环境温度(30℃以上)分为温度控制组(n=15)和非温度控制组(n=15),其他制作过程一致;为观察栓线从颈总动脉和颈外动脉插入对造模的影响分为颈总动脉插入组(n=15)和颈外动脉插入组(n=15),其他制作过程一致;为观察术中术后2h内老鼠苏醒活跃状态对造模的影响分为麻醉状态组(n=15)和苏醒活跃状态组(n=15),其他制作过程一致。从造模24h后观察Zea-Longa评分在1～3分的大鼠且7d内观察大鼠未死亡视为造模成功。结果:在外环境温度控制在(25±1)℃组与夏季未控制外环境温度(30℃以上)比较,差异无统计学意义(P=0. 107> 0. 05);线栓从颈总动脉插入比从颈外动脉插入存活率高,具有统计学意义(P=0. 025 <0. 05);术后2h内大鼠处于苏醒活跃状态组死亡率高,与麻醉未清醒状态组比较差异具有统计学意义(P=0. 021 <0. 05)。结论:直接分离出颈总动脉(CCA)并从颈总动脉插入具有易操作、创伤性小、操作时间快、进线栓快、进线栓顺利以及模型稳定等优点,能降低造模的死亡数据;术中术后2h内大鼠处于苏醒活跃状态会对模型大鼠造成较大的刺激,造成死亡率增加。     

扩张型心肌病造模方法及机理

扩张型心肌病（DCM）病因迄今不明,预后不良,无特异、有效的治疗方法,严重威胁人类的健康,故建立 DCM 动物模型,研究其发病机制和治疗疗效等必要而迫切。目前 DCM 的造模方法主要包括药物诱导、免疫诱导、分子生物学方法诱导等。本文就目前应用较为普遍、成熟的 DCM 模型的几种造模方法及其机理作一综述。     

脑卒中的高危因素探讨

脑卒中是神经内科的一种常见病。多年来，脑卒中以其高发病率、复发率、致残率和病死率高，严重威胁着人类的健康。充分认识脑卒中的病因及危险因素，并采取有效措施是降低脑卒中发病率和死亡率的根本所在。     

CCl4等多因素复合法制备大鼠肝硬化造模方法的改进

目的:探讨建立一种理想的大鼠肝硬化模型的复制方法.方法:80只Wister大鼠雌雄各半,随机分为两组.实验组(40只)诱导期间CCl4浓度及用量随时间进行调整,并用食用60%白酒灌胃,给予正常饮水高脂低蛋白饲料喂养;对照组(40只)用传统的诱导方法进行诱导.观察两组大鼠在经CCl4等处理后的死亡率和肝脏假小叶的形成率.结果:实验组40只大鼠肝硬化模型诱导6周共死亡4只,死亡率10%;对照组6周死亡15只,死亡率37.5%,两组死亡率明显差异(P<0.05).实验组存活大鼠观察,肝硬化结节及光镜下假小叶形成率为91.6%;对照组形成率为72.0%,差异具有显著性(P<0.05).结论:适度调整CCl4的浓度并采用食用白酒灌胃,给予正常饮用水替代乙醇溶液作为唯一饮用水诱导大鼠肝硬化模型,可显著降低死亡率,并提高造模成功率.     

线栓法建立局灶性脑缺血模型的方法与探讨

目的 探讨成功建立大鼠局灶性脑缺血模型的有效方法及影响因素。方法 将大鼠分为250~300 g和350~400 g两个体重组。为观察禁食对造模的影响,250~300 g体重组又分为对照组(n=10)和禁食组(n=10);为观察栓线直径对造模的影响,350~400 g体重组又分为细栓线组(n=10)和粗栓线组(n=10)。栓线经颈总动脉、颈内动脉进入大脑中动脉的起始部位阻断大脑中动脉的血流。术后通过神经功能缺损评分和氯化三苯基四氮唑(TTC)染色对该模型进行评价。结果 在250~300 g体重组,造模成功率高,禁食组死亡率(11.1%)明显低于对照组(62.5%)(P<0.05);在350~400 g体重组,死亡率低,粗栓线组造模成功率(80%)明显高于细栓线组(20%)(P<0.05)。结论 术前禁食可降低动物死亡率,根据大鼠体重选择相应直径的栓线可提高造模的成功率。     

隐球菌抗原对隐球菌脑膜炎的早期诊断

为了提高隐球菌脑膜炎患者脑脊液检测的阳性率，首次使用隐球菌抗原乳胶凝结试验法，对１２例患者进行了检测，阳性率为１００％。该方法快速、敏感和可靠，是诊断隐球菌脑膜炎的一种新方法。     

A Preparation Model of Chinese Medicine Decoction Placebo

Chinese medicine (CM) decoction placebo is one of the key factors restricting the placebo-controlled clinical trial of CM. In this article, based on the analysis of the diffificulties in preparing CM placebo, the production requirements for placebo were put forward. Moreover, in accordance with clinical practices, a production method and evaluation process of CM decoction placebo was proposed, to provide a reference for clinical research.     

不同种鼠对实验脑型疟发生的影响研究

目的 比较昆明小鼠和C57BL/6小鼠作为种鼠对实验脑型疟模型的影响.方法 分别以伯氏疟原虫ANKA株感染C57BL/6小鼠和昆明小鼠作为传代用种鼠,当种鼠原虫率为5％～15％时接种子代C57BL/6小鼠,观察两组小鼠原虫率、脑型疟发生率以及死亡率.同时,通过脑组织切片和脑部淋巴细胞的流式检测,观察两组发生脑型疟小鼠的脑部微血管中感染疟原虫红细胞和CD8+T细胞的粘附情况,另外,通过感染CD8+T KO小鼠,证实CD8+T细胞在两组小鼠发生脑型疟中的作用.结果 用昆明小鼠作为种鼠的实验组的原虫率和脑型疟发生率均明显高于用C57BL/6小鼠作为种鼠的实验组,发生脑型疟小鼠的脑部组织切片发现,脑部微血管可见明显的感染疟原虫红细胞的粘附和CD8+T淋巴细胞浸润;而用昆明小鼠作为种鼠感染CD8+T细胞缺失的C57BL/6小鼠并不能诱导实验脑型疟的发生.结论 与C57BL/6小鼠相比,昆明小鼠作为种鼠的实验组的脑型疟发病率更高,而且感染疟原虫红细胞和CD8+T细胞在脑部微血管内的粘附也是该脑型疟发生的主要因素,因此,更适合用于实验脑型疟模型的建立及其机制的探讨.     

小型猪急性心肌梗死后心力衰竭模型的构建

目的研究开放拉长塑料细管法（OPS）对HBV转基因小鼠（P21^HBxPHBx）和白内障小鼠（cataract mice,cM）胚胎冷冻效果。方法采用乙二醇作为冷冻保护剂,以昆明小鼠为对照,用OPS法对CM及P21^HBxPHBx两种小鼠3．5d的胚胎进行玻璃化冷冻,并比较KM、CM及P21^HBxPHBx获得胚胎数,解冻后胚胎的复苏率及发育率。结果KM、CM及P21^HBxPHBx小鼠平均获得胚胎数分别为31．12、19．32、9．14枚;解冻后的复苏率分别为95．6％、79-3％、80．3％;发育率分别为94．7％、73．8％、56．6％。表明HBV转基因小鼠的获得胚胎数明显低于昆明小鼠,解冻后三种小鼠的胚胎复苏率之间无显著差别,而解冻后发育率,P21^HBxPHBx小鼠要明显低于KM小鼠。结论转基因小鼠超排数及解冻后发育率低于昆明小鼠,而白内障模型小鼠和昆明小鼠比较不显著。     

结缔组织病合并隐球菌脑膜炎的临床特点

目的：分析结缔组织病(connective tissue disease,CTD)合并隐球菌脑膜炎的临床特点及预后。方法：回顾 分析2000年1月至2017年1月期间中南大学湘雅医院风湿免疫科诊断的18例CTD合并隐球菌脑膜炎患者的临床资料。 结果：CTD合并隐球菌脑膜炎患者的常见症状为头痛、发热、恶心、呕吐,出现抽搐、意识障碍等严重临床表现的 患者均死亡。Logistic回归分析表明出现意识障碍、外周血淋巴细胞计数下降是造成CTD合并隐脑预后不良的相关因 素(P<0.05)。CTD合并隐球菌脑膜炎的病死率为61.11%,治疗有效率为38.89%。结论：CTD合并隐球菌脑膜炎患者死 亡风险高。出现意识障碍、外周血淋巴细胞计数降低与疾病预后不良相关。     

肝硬化大鼠模型的建立及其稳定性

目的：探讨肝硬化动物模型（CM）的建立及其稳定性。方法：80只Wistar大鼠,雌雄各半。分别采用复合因素法、四氯化碳（CCl4）加乙醇法及玉米面、胆固醇加乙醇法建立大鼠肝硬化的模型（假小叶形成为判定CM成功的唯一标准）。复合因素法：40只大鼠,饲料为80%的玉米面、20%的动物油、0.5%胆固醇,饮料仅为15%的酒精,首次皮下注射40% CCl₄-橄榄油溶液 5 mL·kg^-1（以下浓度相同）,以后每3 d皮下注射CCl₄ 3 mL·kg^-1。第6周末随机处死6只大鼠做肝脏病理,均符合肝硬化诊断标准。将余下存活的26只（逃逸2只、死亡6只）随机分为两组,每组13只均正常饲养,其中一组每7 d皮下注射 3 mL·kg^-1 CCl₄,观察第7、8周末的病理变化。CCl₄加乙醇法：20只大鼠,以正常饲料喂养,余条件同复合因素法前6周。玉米面、胆固醇加乙醇法：20只大鼠,不用CCl₄,余条件同复合因素法前6周。 结果：复合因素法6周末处死6只大鼠均形成CM,成模后正常饲养,2周后假小叶均消失,而继续应用CCl₄ 2周后,大鼠假小叶基本存在。其余2种方法大鼠均未见典型肝硬化改变。结论：采用复合因素法建立的CM形成率高,成模后CCl₄的应用能够保持CM的相对稳定。     

中医与西医治疗晚期非小细胞肺癌病人远期生存率的临床研究

Objective： To investigate the prognostic influence on long-term overall survival （OS） from treatment with Chinese medicine （CM） and chemotherapy or targeted therapy in advanced non-small-cell lung cancer （NSCLC） patients. Methods： The clinical data of 206 advanced NSCLC patients who were treated with CM and Western medicine in Beijing Cancer Hospital from April 1999 to July 2013 were retrospectively analyzed. Long-term survivors were defined as OS ≥ 3 years after treatment with CM and chemotherapy. Twenty-eight patients had OS ≥ 3 years, 178 had OS 〈 3 years, and all clinical data were statistically analyzed with the Cox model. Variables were gender, age, smoking status, performance status （PS） score, pathological type, clinical stage, first-line chemotherapy, targeted therapy, and use of CM. Univariate survival analysis was performed using the Kaplan-Meier method and log-rank sequential inspection. Multivariate survival analysis was used to analyze the meaningful factors of univariate survival analysis with the Cox model. Results： The survival rate of patients with OS ≥ 3 years was 13.6% （28/206）. Cox multivariate regression analysis showed that PS score, clinical stage, disease control rate to first-line chemotherapy, and use of CM were independent factors of long- term OS （all P〈0.05）. However, gender, age, smoking, and use of epidermal growth factor receptor tyrosine- kinase inhibitor were not significant （P〉0.05）. Conclusion： PS score, clinical stage, disease control rate to first- line chemotherapy, and use of CM are probably independent prognostic factors for long-term OS in patients with advanced NSCLC.     

Topic model for Chinese medicine diagnosis and prescription regularities analysis: Case on diabetes

Induction of common knowledge or regularities from large-scale clinical data is a vital task for Chinese medicine(CM).In this paper,we propose a data mining method,called the Symptom-Herb-Diagnosis topic(SHDT) model,to automatically extract the common relationships among symptoms,herb combinations and diagnoses from large-scale CM clinical data.The SHDT model is one of the multi-relational extensions of the latent topic model,which can acquire topic structure from discrete corpora(such as document collection) by capturing the semantic relations among words.We applied the SHDT model to discover the common CM diagnosis and treatment knowledge for type 2 diabetes mellitus(T2DM) using 3 238 inpatient cases.We obtained meaningful diagnosis and treatment topics(clusters) from the data,which clinically indicated some important medical groups corresponding to comorbidity diseases(e.g.,heart disease and diabetic kidney diseases in T2DM inpatients).The results show that manifestation sub-categories actually exist in T2DM patients that need specific,individualised CM therapies.Furthermore,the results demonstrate that this method is helpful for generating CM clinical guidelines for T2DM based on structured collected clinical data.     

Clinical Efficacy of Traditional Chinese Medicine on Acute Myocardial Infarction——A Prospective Cohort Study

<正>Objective:To evaluate the clinical effects of Chinese medicine(CM) on acute myocardial infarction (AMI) with a prospective cohort study.Methods:A total of 334 AMI patients from January 2007 to March 2009 were consecutively enrolled,and were assigned to a treatment group(169 cases) treated with combined therapy(CM for at least one month and Western medicine) and a control group(165 cases) with Western medicine alone.Clinical data including age,gender,smoking,medical history,infarction area,heart functional classification,CM syndrome scores,blood-stasis syndrome score,primary end-point(death,nonfatal myocardial infarction,and revascularization) and secondary end-point(ischemic stroke,rehospitalization due to angina,heart failure and shock),were collected. CM syndrome scores,blood-stasis syndrome score,primary end-point and secondary end-point were collected during the 6-month follow-up.Kaplan-Meier method was used for the survival analysis.The multifactor analysis was analyzed by Cox proportional hazards regression.Results:At the end of 6-month the CM syndrome score and blood- stasis syndrome score in the treatment group were lower than those in the control group(P0.01),especially the symptoms of chest pain,spontaneous perspiration and insomnia.Rehospitalization rate due to angina during the 6-month follow-up in the treatment group(2.96%) was lower than that in the control group(7.88%,P0.05).Kaplan- Meier survival curve showed that event-free cumulated survival of rehospitalization due to angina during the 6-month follow-up in the treatment group was higher than that in the control group(Log rank 4.700,P=0.03).Cox regression analysis showed that heart dysfunction[hazard ratio(HR)=1.601,95%CI=1.084-2.364,P=0.018]and diabetes mellitus(HR=1.755,95%Cl=1.031-2.989,P=0.038) were hazard factors to end-point,whereas CM(HR 0.405,95% Cl=0.231-0.712,P=0.002),percutaneous coronary intervention(PCI,HR=0.352,95%CI=0.204-0.607,P0.001) and angiotensin converting enzyme(ACE) inhibitors(HR=0.541,95%Cl=0.313-0.936,P=0.028) were protective factors.Conclusions:CM therapy could decrease CM syndrome scores and blood-stasis syndrome score,reduce the rehospitalization rate during 6-month follow-up due to angina.Heart dysfunction and diabetes mellitus were hazard factors to end-point,whereas CM,PCI and ACE inhibitors were protective factors.