针灸调控TNF-α/TLR4/NF-κB改善顺铂小鼠肝损伤的作用机制

目的 通过观察针灸对顺铂(Cisplatin,DDP)所致肝损伤小鼠与肝细胞炎症反应相关的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)表达含量的变化,以及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和谷氨酸脱氢酶(GLDH)活性变化,并结合小鼠肝脏病理变化,阐释针灸对DDP引起肝损伤小鼠的作用机制。方法 选用SPF雄性KM小鼠,随机分为4组,按照10 mL·kg^-1空白组腹腔注射0.9%NaCl溶液,其余3组按照体质量腹腔注射同剂量DDP溶液,24 h后模型成功。干预组采用“大椎”“肝俞”“肾俞”“足三里”,分别给予针刺和艾灸干预,其余两组陪同固定不干预,每天1次,持续5天。断食1天后取材,生化检测血清中ALT、AST、GLDH含量,Western blot测定肝脏中TNF-α、TLR4、NF-κB蛋白表达含量。结果 与空白组比,模型组血清中ALT、AST、GLDH活性增高,肝脏中TNF-α、TLR4、NF-κB蛋白表达升高,均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比,针刺组和艾灸组ALT、AST、GLDH活性...     

姜黄素灌胃对顺铂所致小鼠肝损伤的防护效应

目的探讨姜黄素对顺铂所致小鼠肝损伤的防护效应。方法 30只SD雄性小鼠被随机分为对照组、顺铂组、联合用药组3组。顺铂组给予顺铂腹腔注射;联合用药组先给予姜黄素液灌胃10 d,而后给予顺铂腹腔注射。末次注射24 h后,检测各组小鼠肝/体质量比,血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝匀浆中的琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na+,K+-ATP酶活性,并观察比较肝组织的形态学变化。结果顺铂组小鼠血清中ALT和AST活性显著增高;肝匀浆中的SDH和Na+,K+-ATP酶活性明显降低,肝细胞呈现气球样变。联合用药组小鼠注射顺铂后上述变化均明显减轻(P0.01或P0.05)。结论口服姜黄素对顺铂所致小鼠肝损伤有防护效应。     

针灸调控STAT3和CyclinD1改善DDP小鼠肝损伤的作用机制

目的：通过观察针刺和艾灸对顺铂(DDP)所致肝损伤小鼠肝脏中信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达的变化,以及血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性变化,并结合小鼠肝脏超微病理,阐释针灸对DDP所致肝损伤小鼠的保护机制。方法：选用40只清洁级雄性KM小鼠,随机分为4组,空白组按照0.01 mL/g腹腔注射0.9%NaCl溶液,模型组、针刺组、艾灸组按照体质量腹腔注射同剂量DDP溶液,24 h后模型成功。治疗组配伍腧穴“大椎”“肝俞”“肾俞”“足三里”,分别给予针刺和艾灸治疗,其余2组陪同固定不治疗,1次/d,持续5 d。断食24 h后取材,生化检测血清中GLDH、ALT、AST活性,Western Blot测定肝脏中STAT3、CyclinD1蛋白表达量,电镜下观察肝脏超微病理变化。结果：与空白组比,模型组GLDH、ALT、AST活性升高,STAT3蛋白表达升高,CyclinD1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比,针刺组和艾灸组GLDH、ALT、AST活性降低,STAT3蛋...     

基于Nrf2-HO-1信号通路的针灸改善顺铂肾损伤小鼠的作用机制研究

目的 从氧化应激方面阐释针灸改善顺铂所致小鼠肾损伤的作用机制。方法 选用清洁级雄性昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组。对空白组外的3组小鼠按体重腹腔注射顺铂10 mg/kg造模,空白组注射同等剂量的0.9%NaCl溶液,24 h后模型即成。针刺组与艾灸组均选取“大椎”“肝俞”“肾俞”“足三里”,分别进行针刺或艾灸,其余2组陪同固定不予干预。运用ELISA法检测各组小鼠血清中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、半胍氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)以及肾脏组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)的含量,运用Western Blot法及Real-time PCR法检测各组小鼠肾脏组织中Nrf2、HO-1及NQO1的蛋白表达以及基因转录情况。结果 与空白组比,模型组血清NGAL、CysC含量均增多(P<0.05);与模型组比,针刺组和艾灸组血清NGAL、CysC含量均减少(P<0.05);与空白组比,模型组肾脏组织Nrf2、HO-1、NQO1含量及蛋白表达均减少,mRNA相对表达量均升高(P<0.05...     

基于Lable-free蛋白质组学技术研究大黄素致大鼠肝损伤作用机制

目的:探索连续4周服用大黄素对大鼠肝组织蛋白表达的影响。方法:选取以大黄折算临床剂量100倍的大黄素灌胃SD大鼠4周(HG1,HG2,HG3,HG4)为模型,采用Lable-free蛋白质组学方法检测肝组织蛋白表达,并对所得结果进行分析。结果:通过筛选,HG1、HG2、HG3、HG4组中分别有158个、650个、219个、378个差异蛋白,这些差异蛋白经GO分析发现主要与细胞和代谢过程相关。其中,4组中共有差异蛋白25个,GO分类表明25个蛋白中有10个为与催化活性相关的蛋白。大黄素的存在使α-2-HS-糖蛋白(热稳定性糖蛋白)表达上调,该蛋白的浓度与肝病的严重程度正相关;并且组织蛋白酶家族蛋—富含半胱氨酸的蛋白酶表达下调。结论:长期服用大黄素会增加肝损伤的概率,其可能是由于含半胱氨酸蛋白酶的表达下调,使组织功能出现紊乱,导致肝损伤的出现,并且这一结果在低剂量组中也得到了印证。     

二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制

目的：探讨二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的防护作用及分子机制。方法本实验采用大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂造模的方法。通过选取22-24 d的SD大鼠提取 原代卵巢颗粒细胞,进行细胞培养并建立顺铂致卵巢颗粒细胞凋亡模型,将成模卵巢颗粒细胞随机分为：模型组、阳性对照组、二仙汤组,加入相应药理血清连续培养48 h后,用TUNEL法检测各组颗粒细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测各组akt、p-akt蛋白的表达情况;RT-PCR检测各组akt基因表达情况。结果：通过TUNEL法对各实验组卵巢颗粒细胞凋亡形态学观察发现：与正常组相比,模型组凋亡情况十分明显。阳性对照组与模型组相比凋亡情况改善;二仙汤组与模型组相比较凋亡情况也得到了缓解。蛋白印迹分析显示：akt、p-akt蛋白表达量总体趋势走向、强度、结果相似。顺铂造模后的各实验组中的akt、p-akt蛋白表达量均减少,模型组akt、p-akt蛋 白表达量最少;和模型组比较,各治疗组均akt、p-akt蛋白表达量表达增多,其中二仙汤组akt、p-akt蛋白表达量 略低于补佳乐组akt、p-akt蛋白表达量。RT-PCR检测akt基因表达情况,与蛋白表达大体一致。结论二仙汤 能明显减轻顺铂引起的卵巢颗粒细胞凋亡,其作用机制与激活AKT信号通路有关。     

针刺不同穴位防治顺铂致家兔消化道反应的实验研究

目的 研究针刺不同穴位对化疗药－－顺铂（ＤＤＰ）致消化道反应的防治作用。方法 以家兔为研究对角，通过检测血浆中脑肠肽－胃动素（ＭＴＬ），观察胃电（ＥＧＣ）变化。同时对比观察了针刺不同穴位对上述改变的影响。结果 针刺可使ＤＤＰ所致的家兔紊乱的胃电图趋于恢复，使血浆胃动素水平降低。结论 合理的穴位配伍应用，可提高疗效。从而为临床肿瘤化疗消化道副反应的针灸防治方法及配穴应用提供了实验依据。     

枇杷叶协同顺铂对小鼠抗肿瘤作用的实验研究

目的研究枇杷叶水提液联合顺铂对小鼠抗肿瘤的效果。方法建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,观察不同剂量枇杷叶水提液与顺铂联用对H22荷瘤小鼠的抑瘤率、体重变化、生存时间及免疫功能的影响。结果不同剂量枇杷叶与顺铂联用组较单用顺铂组小鼠瘤重明显减轻、体重增加、白细胞数明显增加,高剂量联合组效果显著,可明显延长小鼠生存时间,有效避免免疫器官萎缩;中剂量联合组效果最佳。结论枇杷叶能抑制肝癌小鼠H22肿瘤的生长,且能增强顺铂的化疗效果,提高机体免疫力。     

叶黄素对顺铂所致大鼠急性肝损伤的防治作用

目的:观察叶黄素(LU)对顺铂(CP)诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将30只SD大鼠随机分为5组,分别为对照组、顺铂组、不同剂量叶黄素(10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg)+顺铂组。大鼠连续灌胃叶黄素10天,第7天灌胃后l h腹腔注射顺铂(5mg/kg)。顺铂处理后,在第5天采血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)。采血后处死动物,测定肝脏系数、肝匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时观察肝组织结构变化。结果:肝损伤模型组大鼠血清ALT、AST含量均明显高于对照组,肝组织匀浆中MDA及NO含量显著增加,而GSH含量及SOD活性显著下降。叶黄素可降低肝损伤大鼠血清ALT及AST水平,降低肝组织匀浆MDA及NO水平,提高组织GSH含量及SOD活性,并可改善顺铂损伤大鼠肝病理组织学变化,随着叶黄素剂量增加,其保护作用增强。结论:叶黄素通过抗氧化作用减轻顺铂诱导的大鼠肝损伤作用。     

顺铂耐药机制的研究进展

顺铂在肿瘤化疗中的应用受到细胞获得的或固有的耐药性的影响。顺铂进入细胞中，由氯化物配合体所形成的水合物可以与细胞大分子的亲核性位点相作用，并在细胞的DNA中形成顺铂加合物，这被认为可激发细胞循环的停止和凋亡过程。对顺铂作用机制的认识已经提高了我们对其耐药性的理解。减少的胞内蓄积导致了药物流出的增加，巯基分子例如GSH的过度流入及其钝化作用都导致了细胞对顺铂的耐药性。还有，DNA修复途径中顺铂加合物的过度清除也能导致对顺铂的耐药性。最后，控制细胞凋亡途径有关的信号传导通路调节蛋白的错误表达也能影响对药物的敏感度。     

附子理中丸通过调节MAPK信号通路改善顺铂诱导CIPN模型小鼠损伤的作用机制

目的 基于丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路,探讨附子理中丸改善顺铂诱导化疗所致周围神经病变（CIPN）模型小鼠损伤的作用机制。方法 KM雌性小鼠40只,随机分为正常组,模型组,附子理中丸组（3.5 g·kg^-1）,阿司匹林组（0.026 g·kg^-1）。每日腹腔注射顺铂（3 mg·kg^-1）,连续5 d,制备CIPN模型;造模同时灌胃给予相应药物,连续12 d。观察其一般情况和行为学表现;末次给药后取材,苏木素-伊红（HE）染色观察足掌部皮肤组织病理变化。采用生化学检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）,过氧化氢（H₂O₂）,丙二醛（MDA）,一氧化氮（NO）的水平;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肾脏组织中白细胞介素-6（IL-6）,白细胞介素-1β（IL-1β）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,谷胱甘肽过氧化物酶-3（GPX-3）的含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾脏组织中细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）及其磷酸化（p-ERK1/2）,p38 MAPK及其磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）的表达水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠足掌部皮肤病理损伤明显,表皮角化过度呈网篮状结构,棘层萎缩,细胞数量减少,细胞内水肿;与模型组比较,附子理中丸组足掌部皮肤组织的病理损伤明显降低。与正常组比较,模型组小鼠体质量、机械痛阈值、热痛阈值显著下降（P<0.01）,SOD活性明显降低（P<0.05）,H₂O₂,MDA,NO含量显著升高（P<0.01）,IL-6,IL-1β,TNF-α表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,附子理中丸组小鼠体质量、机械痛阈值、热痛阈值显著升高（P<0.01）,SOD活性明显升高,H₂O₂,MDA和NO含量明显降低（P<0.05）,IL-6,IL-1β,TNF-α表达显著降低（P<0.01）;与正常组比较,模型组ERK1/2,p-ERK1/2,p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白表达显著上升（P<0.01）;与模型组比较,附子理中丸组ERK1/2,p-ERK1/2,p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白表达显著下降（P<0.01）。结论 附子理中丸能够改善顺铂诱导CIPN模型小鼠的神经功能损伤,提高小鼠的疼痛阈值,其作用机制可能与调节MAPK信号通路,抑制炎性反应及机体氧化应激水平相关。     

艾灸足三里治疗顺铂所致迟发性呕吐的临床观察

目的:观察艾灸足三里治疗顺铂所致迟发性呕吐的临床效果.方法:100例患者随机分A、B两组各50例,A组(治疗组):枢星3mg 0.9%NS20ml化疗前30min iv d1-3 艾灸足三里d1-7;B组(对照组):枢星3mg 0.9%NS20ml化疗前30min iv d1～3,观察化疗后7d内呕吐情况.结果:A组控制迟发性呕吐的有效率明显高于B组(P＜0.05).结论:艾灸足三里治疗顺铂所致迟发性呕吐疗效好、经济、方便、安全.     

灯盏花素对小鼠顺铂肾损害的防治作用

目的:观察灯盏花素对小鼠顺铂肾损害的防治作用及可能的作用机制.方法:将昆明小鼠随机分为空白组、模型对照组、灯盏花素25,50 mg· kg-1治疗组共4组.除空白组外,其余各组以顺铂8 mg·kg-1单次ip制备小鼠肾脏损害模型,两个治疗组随即分别给予25,50 mg· kg-1的灯盏花素ig,1次/d,连续给药7d.观察小鼠肾脏的改变及检测血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的变化,检测血清及肾皮质中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:与空白组对照比较,模型对照组肾脏损害严重,SCr及BUN含量升高(P＜0.01),血清及肾皮质MDA升高而SOD降低(P＜0.01).而各灯盏花素组小鼠肾脏病变较模型对照组明显改善,剂量依赖性降低Scr及BUN含量(P＜0.05,P＜0.01),使血清及肾皮质MDA含量降低而SOD活性升高(P＜0.05).结论:灯盏花素可减轻顺铂引起的肾毒性,其机制可能与抑制顺铂肾损害所致血液和肾皮质脂质过氧化反应增强有关.     

山楂酸保护顺铂致人肾小管上皮细胞氧化应激损伤作用机制研究

目的：研究山楂酸对顺铂（cisplatin）致近段人肾小管上皮细胞（HK-2）氧化应激损伤的保护作用机制。方法：实验共分四组：空白组、顺铂组、山楂酸保护组、维生素E保护组;培养HK-2细胞,加入顺铂及预先加入山楂酸或维生素E进行孵育,采用试剂盒测定细胞内MDA及GSH含量,采用荧光素DCFH-DA探针法测定细胞内ROS含量,采用流式细胞术测定细胞凋亡及坏死情况。结果：经山楂酸干预后,HK-2细胞内MDA明显减少,GSH明显增加,表明山楂酸能显著抑制顺铂诱导的细胞内ROS水平升高;流式细胞术测定结果表明山楂酸对顺铂所致的细胞毒性有保护作用。结论：山楂酸对顺铂诱导的HK-2氧化应激损伤具有保护作用。     

香菇多糖联合顺铂诱导Lewis荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的研究

目的观察香菇多糖联合顺铂对Lewis荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的影响。方法选用小鼠Lewis肺癌肿瘤细胞株(1×107)皮下注射接种,制作肿瘤动物模型后,随机分为正常对照组、肿瘤对照组、香菇多糖组、顺铂组、香菇多糖加顺铂组,进行光、电镜形态学观察。结果形态学观察治疗组与对照组比较,肿瘤团块较小,异型性不明显,病理性核分裂和间质血管较少,淋巴细胞浸润明显。电镜下均可见凋亡小体形成,其中以香菇多糖加顺铂组最明显。结论香菇多糖具有协同顺铂抗肺癌作用,其作用机制是通过诱导肿瘤细胞凋亡及刺激淋巴细胞增生的作用而实现的。     

N-乙酰半胱氨酸对顺铂诱导急性肾损伤后肾脏组织氧化应激水平的影响

目的:研究顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)后肾脏组织氧化应激水平及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)的干预作用.方法:静脉注射CDDP制备大鼠AKI模型.大鼠随机分为空白对照组、AKI模型对照组、NAC低、中、高剂量组(50,100,200 mg· kg-1)、维生素C(Vit C)对照组(100 mg· kg-1).大鼠预先连续给药3d后,给予CDDP,再继续给药5d.测定大鼠体质量、肾质量、肾脏指数、尿蛋白排泄率.试剂盒测定肾脏组织乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、15-F2t-异前列烷(15-F2t-Isop)水平.免疫组化法观察8-OHdG阳性细胞.Western blot测定Cu-Zn-SOD蛋白表达.结果:与空白对照组相比,CDDP诱导AKI模型组体质量、肾质量、肾脏指数下降,尿蛋白排泄率由(0.43±0.09)g显著增加为(2.24±0.41)g,LDH,MDA,15-F2t-Isop,8-OHdG阳性细胞显著增加,CAT,SOD,GSH,GSH-Px和Cu-Zn-SOD表达显著下降(P＜0.01).与AKI模型组相比,NAC组尿蛋白排泄率降低为(0.56±0.19)g,具有显著差异.同时,AKI模型组肾脏指数,LDH,MDA,SOD,CAT,15-F2t-Isop,GSH,GSH-Px水平和8-OHdG阳性细胞数分别为(2.71±0.55) ×10-2,(6.92±0.51)KU·mg-1,(68.6±9.2) nmol·mg-1,(61±15) U·mg-1,(5.12±1.04) U·mg-1,(63.2±9.62) ng·mg-1,(159±18) nmol·mg-1,(72±15) U·mg-1,(12.25±2.23)个,NAC组200 mg·kg-1组分别为(2.96±0.32) ×10-2,(4.62±0.26) KU·mg-1,(39.5±7.9) nmol·mg-1,(109±20) U·mg-1,(9.85±1.21) U·mg-1,(41.8±4.65)ng· mg-1,(225±16) nmol· mg-1,(128±22) U·mg-1,(3.26±0.96)个,两组相比较,具有非常显著差异(P＜0.01),Cu-Zn-SOD表达显著增加(P＜0.01).结论:NAC有效拮抗CDDP的肾损伤作用,可能与其增强肾脏组织抗氧化活性、降低CDDP诱导AKI时肾脏组织氧化应激水平有关.     

四物合剂对顺铂作用小鼠血细胞的影响

目的 观察四物合剂对化疗药物顺铂作用小鼠血液中几种血细胞的影响.方法 小鼠腹腔注射顺铂,3.0mg/kg体重/日,连续7天,并灌饲四物合剂14天,观察红细胞、红细胞压积、血红蛋白、白细胞、淋巴细胞、血小板和血小板体积等指标变化.结果 给顺铂模型小鼠灌饲四物合剂后,与模型组比较各指标均有变化:红细胞在第1天时虽有下降,但在第4天时显著升高,并高于生理盐水对照组,但于第7天时又显著降低;血红蛋白在第4天时升高,第7天降低;白细胞计数第1天最高,后回落与生理盐水组水平相近;血小板计数显示在第4天时显著下降,甚至低于顺铂模型组,第7天时又显著升高.结论 四物合剂对顺铂诱导的骨髓抑制有一定的对抗作用,这种作用主要体现在血小板指标.     

黄芪注射液对顺铂所致小鼠肾损害的保护作用

目的:观察黄芪注射液(AI)对顺铂(DDP)化疗模型小鼠肾脏损害的保护作用,并探讨其作用机制。方法:建立小鼠S180移植瘤模型,随机分为5组,即对照组(生理盐水)、DDP组(3.5 mg.kg-1)、AI(12,8,4 g.kg-1)干预组,剥离皮下肿瘤称重计算抑瘤率,血清标本检测尿素氮(BUN)、肌酐(CR),取肾组织称重计算肾脏系数,病理切片观察肾组织形态学改变,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,免疫组化检测Bax,Bcl-2蛋白表达。结果:与对照组比较,DDP及AI各干预组抑瘤率均显著提高(P0.05);中、高剂量AI干预组还可提高DDP抑瘤率(P0.05)。与对照组比较,DDP组调亡细胞数及Bax/Bcl-2均明显增加(P0.05);与DDP组比较,AI高剂量干预组调亡细胞数及Bax/Bcl-2均显著下降(P0.05),中、低剂量干预组效果不明显;各AI干预组动物肾功能损害及肾组织病理改变均得到明显改善。结论:AI能在不影响DDP抗瘤作用前提下防护DDP所致小鼠肾损害,其机制可能与调节肾组织Bax,Bcl-2的蛋白表达有关。