基于滑膜巨噬细胞焦亡探讨针刺治疗膝骨关节炎“筋骨并重”的科学内涵

筋、骨是骨关节主要的组成部分,其功能的失衡在关节疾病的发生和发展中起到重要作用,从中医整体观念出发,“筋骨并重”理论得到重视。近年来膝关节滑膜组织在膝骨关节炎疾病中的作用受到广泛关注,滑膜组织属于中医“筋膜”范畴,针刺治疗骨关节炎临床疗效显著,有研究显示针刺治疗骨关节炎通过改善滑膜巨噬细胞功能起到抗炎效果,而细胞焦亡即作为细胞的一种死亡方式,又于炎症反应密切相关,其机制与骨关节炎发生密切相关,应能为针刺治疗骨关节炎作用机制提供实验依据。     

电针对膝骨关节炎模型兔滑膜组织信号通路的影响机制研究

目的:探讨电针对不同造模时间下膝骨关节炎(KOA)模型兔滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路的影响.方法:采用改良Hulth法建立兔KOA模型,将44只家兔随机分为6组,其中空白组4只,假手术组、模型1组、模型2组、电针1组、电针2组各8只.空白组、假手术组、模型1组和模型2组不予治疗,电针1组及电针2组分别在造模后...     

电针对兔膝骨关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响

目的 观察电针对兔膝骨关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响.方法 40只新西兰大白兔随机分成空白对照组、模型组、电针组和西药组.除空白对照组外,各组动物采用左后肢膝关节伸直位石膏固定7周建立膝骨关节炎动物模型.造模成功后,电针组取左后肢梁丘、血海、阳陵泉、足三里和内外膝眼6个穴位,用毫针斜刺或直剌得气后,进行电针操作,连续治疗3周;西药组灌服氨基葡萄糖胶囊,治疗3周.处理前后,对各组家兔膝关节滑膜和软骨标本,进行HE染色、免疫组化法染色观察膝关节滑膜和软骨的病理变化;采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡并计算凋亡指数（AI）.结果 经治疗后,电针组和西药组关节软骨细胞凋亡、凋亡指数与模型组比较明显降低（P＜0.05）.结论 电针能改善膝骨关节炎家兔模型软骨细胞的过度凋亡,降低膝骨关节炎软骨细胞的凋亡率.     

电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响,探讨电针治疗膝骨关节炎的作用机制.方法:将30只健康新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组和电针治疗组,每组10只.采用Hulth法对模型对照组及电针治疗组实验兔左膝关节进行造模,造模后第5周开始对电针治疗组实验兔进行电针治疗,正常对照组、模型对照组同期正常饲养,不作任何治疗.治疗4周后同时处死3组实验兔,取左膝关节股骨端制成切片,观察各组实验兔软骨组织形态及软骨细胞凋亡情况.结果:①软骨组织形态.正常对照组软骨表层光滑、平整,4层结构清晰,软骨细胞分布均匀、无簇聚,潮线完整;模型对照组关节软骨厚度减小,表面毛糙,可见明显纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂;电针治疗组关节软骨厚度减小,表面不光滑,少见纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂.②软骨细胞凋亡情况.3组实验兔软骨细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(F=126.753,P=0.000);进一步两两比较,模型对照组软骨细胞凋亡率大于正常对照组和电针治疗组(LSD -t=3.769,P=0.000;LSD-t=7.000,P =0.000),电针治疗组软骨细胞凋亡率大于正常对照组(LSD -t=10.769,P =0.000).结论:电针治疗可以通过抑制软骨细胞凋亡,减轻膝骨关节炎软骨的损伤,这可能是电针治疗膝骨关节炎的机制之一.     

电针对膝骨关节炎MIA模型大鼠滑膜组织中MMP-3／TIMP-1表达的影响

目的：观察电针与塞来昔布治疗大鼠膝骨关节炎后,大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶-3（ MMP-3）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）含量的变化。方法：选用SD大鼠40只,采用随机数字表随机分成正常组、模型组、药物组和电针组,每组各10只。通过向SD大鼠左侧关节腔内注射单体碘乙酸钠（ MIA）并驱赶大鼠运动来建立膝骨关节炎MIA模型。造模两周后,对电针组取“后三里”穴、“阳陵泉”穴进行电针治疗;对药物组给予塞来昔布灌胃治疗;正常组跟造模组不做任何干预。结果：模型组滑膜组织中MMP-3和TIMP-1的含量较正常组显著提高（ P＜0．05）,但MMP-3和TIMP-1的变化不同步;经过两周的治疗,电针组跟药物组滑膜组织中的MMP-3和TIMP-1含量较造模组显著降低（P＜0．05）,但仍然略高于正常组。电针治疗组和药物治疗组中两者含量相近（P＞0．05）,无统计学意义。结论：电针能有效平衡MIA膝骨关节炎模型大鼠中MMP-3和TIMP-1的异常表达,这可能是电针治疗膝骨关节炎有效的机制之一,为针灸治疗膝骨关节炎提供了有力的证据。     

电针对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞焦亡非经典途径的调控作用研究

目的：观察电针对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）肝细胞焦亡非经典途径的影响及其作用机制。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为普通饮食组（n=15）和高脂造模组（n=45）,高脂造模组以定制高脂饲料喂养8周建立NAFLD模型。从造模成功的大鼠中选取30只随机分为模型组（n=10）、电针组（n=10）和非穴浅刺组（n=10）,另从普通饮食组中随机选取10只大鼠作为对照组。电针组大鼠于双侧“丰隆”“肝俞”穴行电针干预,予疏密波,频率4 Hz/20 Hz,电流强度3 mA;非穴浅刺组大鼠于双侧“丰隆”“肝俞”穴旁5 mm处浅刺,电针刺激参数同电针组。两组干预均每日1次,每次20 min,每周5 d,连续干预4周。干预后,采用油红“O”染色法观察各组大鼠肝脏形态;ELISA法检测各组大鼠血清脂多糖（LPS）、白细胞介素（IL）-1β、IL-18以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;Western blot法检测各组大鼠肝脏组织消皮素D(GSDMD)、GSDMD末端氨基结构域（GSDMD-N）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-11、IL-1β、IL-18及TNF-α蛋白表达;实时荧光定量...     

电针对原发性痛经大鼠子宫组织NLRP3炎性小体和焦亡蛋白GSDMD的影响

目的：观察电针对原发性痛经（PDM）大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)及其下游gasderminD(GSDMD)蛋白的影响,探讨电针治疗PDM的可能机制。方法：将40只健康未孕雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和布洛芬组,各10只。采用苯甲酸雌二醇和缩宫素制备PDM模型,除对照组外,各组大鼠连续皮下注射苯甲酸雌二醇10 d,第11天注射缩宫素。电针组大鼠在造模同时于“关元”“三阴交”行电针干预,予密波,频率50Hz,每天1次,每次20 min,连续干预10d。布洛芬组造模同时进行布洛芬灌胃,每只大鼠灌胃给药0.8 mL（布洛芬溶液浓度为1.25 mg/mL）,连续灌胃10 d。造模后,观察大鼠扭体反应;干预后,HE染色法观察大鼠子宫组织形态并评定子宫病理损伤评分,ELISA法检测大鼠血清前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)含量及PGF2α/PGE2值,Western blot法检测大鼠子宫组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、GSDMD、GSDMD-N和炎性因子[白介素（IL）-1β、...     

膝痹宁对膝骨关节炎模型大鼠滑膜纤维化的影响

目的观察膝痹宁对膝骨关节炎(KOA)模型大鼠滑膜纤维化的影响。方法大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组;KOA组、膝痹宁组造模。分别在膝痹宁灌胃治疗的第1、14、28、42、56天测量各组大鼠的膝关节横径;第56天处死大鼠提取滑膜组织,解剖学观察滑膜组织形态;天狼星红染色评估滑膜组织胶原沉积情况;WB和PCR检测纤维化标记物生长转化因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原α1链(COL1α1)、金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)的蛋白和基因表达。结果膝痹宁用药14天,28天时,膝关节横径变化并不显著,但膝痹宁用药42天,56天时,膝关节横径则较KOA模型明显减小,差异具有统计学意义(P<0.05);用药56天后对大鼠进行膝关节解剖学观察,KOA大鼠滑膜组织较正常大鼠有一定程度的增厚、充血、欠规则;而上述表现在膝痹宁大鼠有所减轻;天狼星红染色显示膝痹宁用药大鼠滑膜组织胶原沉积较少;纤维化标记指标物TGF-β、COL1α1、TIMP1的基因和蛋白表达在膝痹宁组均较KOA组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论膝痹宁对能有效减轻KOA滑膜纤维化,以“温经活血”立法的中药复方对组织纤维化具有良性干预效应。     

电温针治疗膝骨关节炎的临床观察

目的:观察电温针治疗膝骨关节的临床疗效.:198例膝骨关节炎患者随机分为电温针治疗组100例和电针治疗对照组98例,分别采用电温针和单纯电针治疗.结果:电温针治疗组症状改善率明显优于电针对照组,ISOA评价:治疗组也明显优于对照组(P<0.05).结论:电温针治疗膝骨关节炎疗效确切.     

电针对膝骨关节炎家兔关节液中自由基的影响

目的:探讨电针治疗膝骨关节炎的机制。方法:新西兰大白兔40只随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、手法治疗组(C组)、电针治疗组(D组)。左膝关节伸直位石膏固定7周制成骨性关节炎动物模型。造模成功后,C组给予推拿按摩加功能训练;D组取左后肢"阳陵泉"血海"足三里"和"梁丘"穴电针治疗,电压6 V,疏密波型,频率1.6~2 Hz,输出强度1~2 mA,每天1次,每次留针25 min,连续治疗21 d。分别于造模成功后和治疗结束后采集4组动物的关节液,用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量。结果:与模型对照组比较,电针和手法治疗组均可以显著降低关节液中MDA和NO的含量,提高SOD的活力,(P<0.05);电针组和手法组处理前后比较差异有显著性意义(P<0.05);而电针组与手法组比较,各指标间差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:电针和手法治疗可明显降低膝骨关节炎关节液中MDA和NO的含量,提高SOD活力,这可能是此两种疗法改善骨关节炎的机制之一。     

电针结合TDP照射治疗膝骨关节炎56例

膝骨关节炎(OA)是临床常见病、多发病,多见于中老年人。随着社会老龄化发展的趋势,该病对老年人生活质量造成的不利影响日渐加大。治疗以解除关节疼痛、活动受限等临床症状     

电针对脑缺血再灌注大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD轴及神经功能的影响

目的：探讨电针“曲池”“足三里”对脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及其与小胶质细胞焦亡相关的作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组与电针组,每组20只。模型组和电针组大鼠参照Zea Longa法制备左侧大脑中动脉栓塞再灌注（MCAO/R）模型,电针组造模后次日于右侧“曲池”“足三里”行电针干预,予疏密波,频率4 Hz/20 Hz,电流强度0.2 mA,每次30 min,每日1次,连续干预7 d。采用激光多普勒血流仪检测术中大鼠脑血流下降率;Zea Longa神经行为学评分观察大鼠神经功能;TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;免疫荧光法检测缺血侧皮质小胶质细胞阳性表达;透射电镜观察缺血侧皮质小胶质细胞超微结构;实时荧光定量PCR法检测缺血侧皮质组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)及焦孔素-D(GSDMD)m RNA表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠术中脑血流下降率升高（P<0.001）,Zea Longa神经行为学评分、脑梗死体积百分比升高（P<0.001）,缺血侧...     

电针对膝关节骨关节炎患者血清IL-1β及TNF-α水平的影响

目的:探讨电针治疗对膝关节骨关节炎(osteoarthritis,OA)的疗效及其对血清白细胞介素(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的影响.方法:43例膝OA患者予电针治疗,穴取梁丘、血海、阴陵泉等,观察治疗前后患膝疼痛程度、下肢日常活动能力以及IL-1β、TNF-α水平的变化.结果:经电针治疗后,OA患者的患膝疼痛目测类比定级法(VAS)评分治疗后(32.50±10.79)较治疗前(64.22±14.55)明显降低,下肢功能评分治疗后(9.05±1.89)较治疗前(7.38±2.01)明显增加,即患者的疼痛症状及下肢功能均有显著改善(均P<0.01);同时,血清中IL-1β、TNF-α水平均明显降低(均P<0.05).结论:电针治疗对膝OA患者的短期疗效较好,其治疗作用可能与抑制IL-1β及TNF-α的活性有关.     

夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠脊髓组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3介导的细胞焦亡的影响

目的：观察夹脊电针对脊髓损伤（SCI）大鼠运动功能、脊髓组织形态、脊髓组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及活化的半胱氨酸蛋白酶-1(cleaved Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)-N表达的影响,探讨夹脊电针治疗SCI的作用机制。方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、激动剂+电针组,每组分为3、7 d两个亚组,每个时间点6只大鼠。采用改良Allen’s法制备急性SCI大鼠模型。电针组大鼠电针双侧胸（T）9、T11“夹脊”治疗,每次30 min,每日1次,分别治疗3、7 d。激动剂+电针组除电针外造模后腹腔注射单钠尿酸盐200μg/kg。采用BBB评分对各组大鼠运动功能进行评价;HE染色法观察各组大鼠脊髓组织形态结构;免疫组织化学染色法检测各组大鼠脊髓组织焦亡相关因子NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N阳性表达;Westernblot法检测各组大鼠脊髓组织NLRP3、cleavedCaspase-1、GSDMD-N的蛋白表达水平;免疫荧光双标法检测各组大鼠离子钙接头蛋白1(Iba-1)与GSDMD-N在脊髓组织中的表达及定...     

基于转录组测序技术探讨电针对膝骨关节炎兔关节软骨表达谱的影响

摘要：目的：基于转录组测序技术探讨电针干预对膝骨关节炎软骨表达谱的影响。方法：12只新西兰兔按体质量随机分为空白组(4只)及KOA造模组(8只),KOA造模组应用改良Videman法制动6周复制KOA兔模型,拆除固定装置后根据Lequesne评分再随机分为模型组和电针组(每组4只),干预4周。干预后进行行为学评价,对兔膝关节软骨进行转录组学测序并进行GO和KEGG富集等生物信息学分析。结果：干预后,与模型组比较,电针组Lequesne评分显著降低(P<0.01);与空白组比较,模型组共筛选出1 055条差异基因,GO分析生物过程主要涉及炎症反应、免疫反应、血管生成和细胞外基质组织等功能,KEGG分析主要富集细胞因子受体相互作用、吞噬体、EB病毒感染和细胞粘附等通路;与模型组比较,电针组初步筛选出396条差异表达基因,进一步GO分析(生物过程)主要涉及炎症反应、免疫反应以及细胞外基质组织等功能,KEGG分析主要富集细胞因子受体相互作用、吞噬体、补体和凝血级联反应等通路;通过交集分析得到电针干预KOA的主要分子机制为白细胞激活、对细菌反应和炎症反应等白细胞-炎症反应,防御反应、免疫反应和对外部刺激反应等免疫功能。结论：在关节软骨层面,电针干预KOA主要通过影响白细胞-炎症反应、免疫功能等表达谱变化而发挥治疗作用。     

针刀松解法对膝骨关节炎大鼠中枢P物质的影响

目的 观察针刀松解法对膝骨关节炎(KOA)模型大鼠脊髓及脊髓以上水平P物质(SP)的调节作用,探讨针刀松解法的中枢镇痛机制.方法 将60只健康SD大鼠按照随机数字表分为空白组、KOA模型组、电针组和针刀组.将4%木瓜蛋白酶溶液与0.3 mol/L半胱氨酸溶液按1∶1混合静置0.5 h后分别于造模第1、4、7 d注射于后三组大鼠左膝关节腔,20 μl/次.4周后相应给予针刀松解法治疗或电针治疗.治疗3周后取大鼠腰膨大处脊髓及脑组织,放免法测定脊髓、中脑、垂体、丘脑、下丘脑的SP含量.结果 与空白组比较,KOA模型组的SP含量在脊髓水平(29.094±6.854)pg/mg、脊髓以上水平丘脑(31.043±8.744)pg/mg、下丘脑(75.158±19.546)pg/mg均显著增加(P＜O.05,P＜0.01);电针组的SP含量在脊髓、中脑、丘脑和下丘脑均显著增加(P＜0.05,P＜0.01);针刀组的SP含量在脊髓(29.925±5.286)pg/mg、垂体(55.806±11.152)pg/mg、丘脑(26.500±5.511)pg/mg水平均显著增加(P＜0.05,P＜0.01),在中脑和下丘脑则未见增加.与KOA模型组相比,电针组脊髓SP含量(36.912±6.548)pg/mg显著升高(P＜0.05),电针组和针刀组下丘脑SP含量[分别为:(57.487±14.164)pg/mg、(45.362±6.048)pg/mg]显著降低(P＜0.05,P＜0.01).在下丘脑针刀组较电针组含量低(P＜0.05),在其他部位电针组和针刀组比较,差异无统计学意义.结论 针刀松解法对膝骨关节炎模型大鼠中枢的SP水平有良性调节作用.

Abstract：

Objective To observe the regulatory effect of acupotomy lysis on SP level in spinal cord and tissues above spinal cord of rats with knee osteoarthritis.Methods 60 healthy SD rats were randomly divided into normal control group,model group,electro-acupuncture(EA)group,and acupotomy lysis(AL)group.Mix 4%papain solution with 0.3 mol/L cysteine solution in the ratio of 1∶1.After pausing for 0.5h,inject the mixture,20 μl each time,into the left knee joint cavities of rats in model,AL,and EA groups on the day of 1,4,7.After 4 weeks AL group was treated with acupotomy lysis and EA group with electro-acupuncture.Three weeks after treatment,take samples of spinal cord,midbrain,pituitary gland,thalamus,and hypothalamus from the swellings of rats'waists.Measure the content of SP therein separately.Results Compared with normal control group,there was a significant rise in the content of SP in spinal cord and the tissues above spinal cord of model group rats (P＜0.05,P＜0.01),and there was a significant rise in spinal cord,pituitary gland,thalamus and hypothalamus of EA group rats (P＜0.05,P＜0.01);in AL group,there was a significant rise in spinal cord,pituitary gland,thalamus,and there was no statistically difference in hypothalamus and midbrain.Compared with normal control group,there was a significant rise in spinal cord (P＜0.05)and a significant decrease in the SP contents in hypothalamus(P＜0.05,P＜0.01)in EA group.There was no statistically difference between EA group and AL group except in hypothalamus(P＜0.05).Conclusion Acupotomy lysis has positive functions in regulating SP content in centrum of rats with knee osteoarthritis,which helps easing pain.     

电针治疗膝骨关节炎的步态特征研究

目的对膝骨关节炎患者进行步态功能分析,观察电针治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法将60例膝骨关节炎患者随机分为电针组和针刺组,每组患者均为30例。治疗组采用"髌四穴"电针治疗,对照组仅取常规体针。于治疗4周前后对患者进行步态功能比较。结果治疗组各项步态时空参数均优于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05),尤其在步行速度,跨步长度方面,治疗组与对照组比较差异具有极显著性统计学意义(P0.01)。结论电针疗法可明显提高步行速度,增加步行稳定性,进一步有效改善膝骨关节炎的步行能力。