非酒精性脂肪性肝病患者外周血恒定自然杀伤T细胞和CD4+/CD8+T细胞活化差异研究*

目的 分析不同非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血恒定自然杀伤T细胞(iNKT)、CD4⁺和CD8⁺ T细胞活化标记物(CD69、CD25、HLA-DR和NKG2D)的表达差异。方法 2020年1月～2022年7月我院诊治的NAFLD患者64例和同期健康体检者50例,对NAFLD患者行肝穿刺活检,使用流式细胞仪检测外周血iNKT、CD4⁺和CD8⁺T细胞CD69、CD25、HLA-DR和NKG2D表达。结果 在64例NAFLD患者中,经组织病理学检查,诊断NAFL 37例和NASH 27例;健康对照者、NAFL和NASH患者健康对照者、NAFL和NASH患者外周血CD69⁺iNKT细胞百分比分别为(10.1±1.7)%、(6.1±1.3)%和(26.7±3.6)%(P<0.05),CD25⁺iNKT细胞百分比分别为(83.0±5.9)%、(94.1±8.0)%和(90.8±7.5)%(P<0.05),HLA-DR⁺iNKT细胞百分比分别为(15.3±1.7)%、(15.8±2.0)%和(22.3±2.0)%(P>0.05),NKG2D⁺iNKT细胞百分比分别为(44.5±3.5)%、(59.7±4.0)%和(71.3±6.0)%(P<0.05);外周血CD69⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(0.7±0.2)%、(0.4±0.1)%和(0.5±0.1)%(P>0.05),CD25⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(1.4±0.6)%、(3.0±1.3)%和(1.5±0.7)%(P>0.05),HLA-DR⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(2.7±0.7)%、(4.1±1.0)%和(3.9±1.0)%(P<0.05),NKG2D⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(1.6±0.5)%、(0.6±0.2)%和(0.9±0.2)%(P<0.05);外周血CD69⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(2.0±0.4)%、(1.6±0.3)%和(2.1±0.6)%(P>0.05),CD25⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(1.3±0.3)%、(1.1±0.2)%和(1.0±0.2)%(P>0.05),HLA-DR⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(5.0±0.7)%、(6.5±1.0)%和(9.6±1.4)%(P<0.05),NKG2D⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(0.6±0.1)%、(0.5±0.1)%和(0.9±0.2)%(P<0.05)。结论 本研究发现NAFL与NASH患者可能存在外周血iNKT细胞、CD4⁺和CD8⁺ T细胞活化的免疫表型差异,显示NASH患者CD69⁺iNK T细胞百分比增高,可能对诊断有帮助,值得进一步研究。     

脐带间充质干细胞联合双重血浆分子吸附治疗慢加急性肝衰竭患者临床效果初步观察

目的 探讨采用脐带间充质干细胞(UC-MSCs)联合双重血浆分子吸附系统(DPMAS)治疗慢加急性肝衰竭(ACLF)患者的临床效果。方法 2016年1月～2019年5月收治的ACLF患者45例,其中20例接受DPMA(对照组),另25例接受UC-MSCs移植联合DPMAS治疗(观察组),观察8周。使用BD公司FACScaliber流式细胞仪检测外周血CD3⁺T细胞、CD3⁺CD4⁺T细胞和CD3⁺CD8⁺T细胞百分比,采用ELISA法检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10和肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平。结果 在治疗8周末,观察组血清胆红素水平为(43.3±14.5)μmol/L,终末期肝病模型评分为(16.8±4.1),显著低于对照组【分别为(56.6±10.5)μmol/L和(20.6±4.8),P＜0.05】,而血清白蛋白水平为(32.1±6.8)g/L,PTA为(57.9±5.3)%,显著高于对照组【分别为(27.2±7.3)g/L和(53.8±5.5)%,P＜0.05】;外周血CD3⁺CD8⁺T细胞百分比为(13.1±2.5)% ,显著低于对照组【(17.1±3.3)%,P＜0.05】,而CD3⁺T细胞为(63.1±3.1)%,显著高于对照组【(59.7±4.2)%,P＜0.05】,CD3⁺CD4⁺T细胞百分比为(39.1±4.3)%,显著高于对照组【(34.9±4.1)%,P＜0.05】;观察组血清TNF-α水平为(7.1±4.3)ng/L,显著低于对照组【(11.2±5.2)ng/L,P＜0.05】,血清IL-6水平为(8.4±2.7)ng/L,显著低于对照组【13.2±3.2)ng/L,P＜0.05】;对照组生存12例(60.0%)例,观察组生存22例(88.0%,P＜0.05)。结论 在DPMAS治疗的基础上适时给予UC-MSC移植治疗ACLF患者近期疗效较好,其远期疗效还有待观察。     

慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者胃粘膜病变研究

目的 了解慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化患者胃粘膜病变发生率及其特征表现。方法 2017年1月～2019年1月海南医学院附属海南医院收治的70例慢性乙型肝炎、56例乙型肝炎肝硬化和同期在该院体检的50例健康人,接受胃镜检查,采用ELISA法检测血清胃蛋白酶原(PG)I和PGII水平,使用流式细胞仪检测外周血CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺细胞百分比。结果 乙型肝炎肝硬化组血清PGI水平(93.8±28.3)μg/L,显著低于健康人【(135.7±21.6)μg/L,P<0.05】或CHB患者【(116.3±32.4)μg/L,P<0.05】,血清PGII水平为(13.3±5.7)μg/L,显著高于健康人【(9.2±2.4)μg/L,P<0.05】,血清PGI/PGII比例为(7.1±2.3),显著低于健康人【(14.8±3.4),P<0.05】或CHB患者【(9.6±2.9),P<0.05】;健康人、CHB和肝硬化组浅表性胃炎发生率分别为68.0%、32.9%和19.6%,差异显著(P<0.05),肝硬化组轻、中、重度萎缩性胃炎发生率分别为37.5%、25.0%和17.9%,与健康人(分别为8.0%、6.0%和2.0%,P<0.05)或CHB组(分别为37.1%、11.4%和5.7%,P<0.05)比,差异显著;肝硬化组外周血CD3⁺细胞百分比为(62.4±7.9)%,显著低于健康人【(68.3±5.8)%,P<0.05】或CHB组【(66.4±7.4)%,P<0.05】,CD4⁺细胞百分比为(35.7±7.4)%,显著低于健康人【(50.3±6.6)%,P<0.05】或CHB组【(45.4±6.4)%,P<0.05】,而CD8⁺细胞百分比为(34.4±4.7)%,显著高于健康人【(27.2±4.3),P<0.05】,CD4⁺/CD8⁺细胞比值为(1.8±0.3),显著低于健康人【(2.8±0.9),P<0.05】。结论 乙型肝炎肝硬化患者慢性萎缩性胃炎发生率高,血清PGI和PGII水平变化明显,其发生机制需要进一步探讨。     

聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林标准抗病毒治疗慢性丙型肝炎患者疗效再研究*

目的 分析比较应用聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗慢性丙型肝炎(CHC)患者的疗效。方法 2017年2月～2020年4月我院收治的102例CHC患者,采用随机数字表法将其分为对照组50例和观察组52例,分别给予利巴韦林(RBV)联合普通α-2b干扰素治疗或应用RBV联合聚乙二醇干扰素α-2a治疗6个月。采用实时荧光定量PCR法检测血清HCV RNA载量,使用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群。结果 观察组治疗结束时病毒学应答率(ETVR)为88.5%,显著高于对照组的62.0%(P＜0.05),持续病毒学应答率(SVR)为82.7%,显著高于对照组的62.0%(P＜0.05);在治疗结束时,观察组血清ALT水平为(36.8±4.1)U/L,显著低于对照组【(61.5±4.3)U/L,P＜0.05】,血清AST水平为(38.4±3.4)U/L,显著低于对照组【(51.6±3.6)U/L,P＜0.05】;在治疗4 w、12 w和24 w,观察组血清HCV RNA水平分别为(4.6±1.2)Ig IU/mL、(4.1±1.1)Ig IU/mL和 (3.6±0.9)Ig IU/mL,显著低于对照组【分别为(5.1±1.1)Ig IU/mL、(4.7±1.2)Ig IU/mL和(4.2±1.0)Ig IU/mL,P＜0.05】;在治疗结束时,观察组外周血CD3⁺细胞百分比为(73.8±7.5)%,显著高于对照组【(65.6±6.9)%,P＜0.05】,CD4⁺细胞百分比为(49.5±6.3)%,显著高于对照组【(34.8±5.8)%,P＜0.05】,而CD8⁺细胞百分比为(17.6±3.8)%,显著低于对照组【(25.9±4.6)%,P＜0.05】,CD4⁺/CD8⁺细胞比值为(1.0±0.2),显著低于对照组【(1.4±0.3),P＜0.05】。结论 应用聚乙二醇干扰素α-2a联合RBV抗病毒治疗CHC患者疗效尚可,在不能应用直接抗病毒药物的情况下继续应用标准疗法仍可获得一定的抗病毒治疗效果。     

儿童和青少年自身免疫性肝炎患者外周血淋巴细胞亚群变化及其临床意义探讨

目的 研究儿童和青少年AIH患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。 方法 2015年6月～2019年1月我院收治的儿童和青少年AIH患者42例和健康儿童和青少年50例,使用流式细胞仪检测外周血单个核细胞表面标志物。结果 AIH患者外周血CD4⁺T细胞百分比为53.1(42.5,57.8)%,显著高于健康人,而CD14⁺T细胞百分比为62.2(40.1,76.8)%,显著低于健康人,而两组外周血CD8⁺T细胞百分比无显著性差异【25.9(12.5,32.4)%对18.7(12.8,28.5)%,P>0.05);AIH患者外周血CD4⁺T淋巴细胞表面CD45RA、CD45RO、CCR3和CD28表达百分比分别为26.1(15.2,32.8)%、19.2(13.5,27.3)%、15.4(2.1,53.8)%和51.2(34.4,56.9)%,均显著高于健康人;AIH患者外周血CD8⁺T淋巴细胞表面CD45RA、CCR3和CD25表达百分比分别为18.0(14.1,26.8)%、1.2(0.5,3.2)%和0.6(0.3,7.8)%,显著高于健康人【分别为13.6(8.2,18.3)%、0.5(0.3,0.6)%和0.3(0.2,0.5)%, P<0.05],而外周血CD8⁺T淋巴细胞表面CD45RO表达百分比为2.7(2.3,4.8)%,显著低于健康人;AIH患者外周血CD14⁺T淋巴细胞表面CD45R0表达百分比为 34.7(16.3,57.8)%,显著低于健康人。结论 外周血CD4⁺、CD8⁺和CD14⁺T 细胞比例失衡及其细胞表面分子表达异常与AIH患者发病或病情进展密切相关,值得进一步研究。     

原发性肝癌根治术后恶性胸腹水患者T淋巴细胞及NK细胞水平观察

目的 观察原发性肝癌根治术后恶性胸腹水患者T淋巴细胞及自然杀伤(NK)细胞水平。方法 2019年3月—2022年3月陕西省榆林市第二医院收治的100例原发性肝癌根治术后胸腹水患者，根据胸腹水良恶性将患者分为恶性组(24例)和非恶性组(76例)。检测胸腹水T淋巴细胞和NK细胞，以受试者工作特征曲线(ROC)分析CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、NK细胞水平诊断恶性胸腹水的价值，以Spearman等级相关系数分析CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、NK细胞水平与恶性胸腹水发生风险的的相关性。结果 恶性组CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、NK细胞水平分别为(61.2±11.3)%、(67.2±13.1)%、(20.4±3.4)%,显著低于非恶性组[分别为(75.3±9.9)%、(73.6±8.5...     

乙型肝炎肝硬化患者外周血T细胞亚群变化

目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者外周血T细胞亚群的变化。方法 2015年8月～2018年2月我院诊治的乙型肝炎肝硬化患者120例和同期健康体检者120例,使用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群。结果 肝硬化组外周血CD4⁺T淋巴细胞百分比为(35.3±2.4)%,显著低于健康人组【(42.9±3.2)%,P<0.05】,CD8⁺T淋巴细胞百分比为(36.4±3.2)%,显著高于健康人组【(32.9±4.2)%,P<0.05】,CD4⁺/CD8⁺细胞比值为(0.9±0.1),显著低于健康人组【(1.3±0.2),P<0.05】。结论 乙型肝炎肝硬化患者存在T细胞亚群计数的显著变化,可能也存在相应的免疫功能紊乱,系肝功能受损后的结果抑或是诱因,值得研究。     

替诺福韦与恩替卡韦再治疗对α-干扰素治疗不应答的慢性乙型肝炎患者疗效比较研究*

目的 比较替诺福韦与恩替卡韦再治疗对α-干扰素治疗不应答的慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效。方法 2016年6月～2020年3月我院诊治的CHB患者77例,均为接受过聚乙二醇α-干扰素治疗6个月后不应答的患者,其中接受替诺福韦治疗者41例,接受恩替卡韦治疗者36例。采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量,采用ELISA法检测血清HBsAg和HBeAg,使用CytoFLEX型流式细胞仪检测外周血CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群。结果 在治疗6个月和12个月末,替诺福韦治疗组血清ALT复常率分别为80.5%和90.2%,与恩替卡韦治疗组的77.8%和86.1%比,差异均无统计学意义(P＞0.05),血清HBV DNA转阴率分别为65.9%和95.1%,与恩替卡韦治疗组的63.9%和88.9%比,差异也无统计学意义(P＞0.05);替诺福韦治疗组外周血CD4⁺细胞百分比分别为(33.9±3.9)%和(38.6±5.6)%,显著高于恩替卡韦治疗的【(30.2±3.7)%和(35.1±3.6)%,P＜0.05】,CD4⁺/CD8⁺细胞比值分别为(1.2±0.1)和(1.5±0.1),显著高于恩替卡韦治疗组[(1.0±0.0)和(1.3±0.1),P＜0.05];在12个月的观察期内,替诺福韦治疗组耐药发生率为4.9%,与恩替卡韦治疗组的2.8%比,差异无统计学意义(x²=0.013,P=0.908)。结论 替诺福韦与恩替卡韦治疗对聚乙二醇α-干扰素治疗不应答的CHB患者均可获得很好的疗效,但替诺福韦在提高免疫功能方面优于恩替卡韦治疗,延长疗程观察是否能提高血清HBeAg转阴率值得研究。     

肺结核及肺外结核患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

目的 探讨肺外结核患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺、CD8 ⁺T淋巴细胞亚群及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值的变化及其临床意义方法 搜集2017年11月至2019年1月在成都市公共卫生临床医疗中心结核病区住院的147例患者(包括63例单纯肺结核、60例肺结核并发肺外结核和24例单纯肺外结核患者,分别为肺结核组、肺结核并发肺外结核组和肺外结核组)作为研究对象。采用流式细胞仪及四色淋巴细胞亚群检测试剂盒检测纳入的各组患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺、CD8 ⁺T淋巴细胞的绝对计数及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值,分析上述各组患者外周血T淋巴细胞亚群的差异。结果 肺结核并发肺外结核患者外周血CD3 ⁺和CD4 ⁺T淋巴细胞计数分别为596.000(377.500,823.250)个/μl和347.500(214.000,479.250)个/μl,均低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.507,P=0.012;Z=-2.431,P=0.015)。肺结核并发肺外结核患者的CD8 ⁺T淋巴细胞计数与CD4 ⁺/CD8 ⁺比值分别为195.500(137.250,278.750)个/μl和1.670(1.258,2.273),较肺结核患者的244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)降低,但差异均无统计学意义(Z=-1.892,P=0.058;Z=-0.546,P=0.585)。单纯肺外结核患者外周血CD3 ⁺和CD4 ⁺ T淋巴细胞计数分别为551.500(283.750,949.000)个/μl和295.500(134.250,461.750)个/μl,低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.089,P=0.037;Z=-2.460,P=0.014);单纯肺外结核患者外周血的CD8 ⁺T淋巴细胞计数[185.000(92.000,366.250)个/μl]及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值[1.455(1.018,2.128)]与单纯肺结核患者[分别为244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)]相比,差异均无统计学意义(Z=-1.315,P=0.188;Z=-1.429,P=0.153)。结论 随着肺结核患者外周血CD3 ⁺、CD4 ⁺ T淋巴细胞计数的逐步降低,结核分枝杆菌可能更易播散至肺外;外周血CD8 ⁺T淋巴细胞计数及CD4 ⁺/CD8 ⁺比值在肺外结核发生机制中的作用尚需进一步探讨。     

慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞杀伤细胞凝集素样受体G1表达及其对NK细胞杀伤功能的影响*

目的 探讨CHB患者外周血NK细胞杀伤细胞凝集素样受体亚家族G成员1(KLRG1)表达的变化以及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法 在120例CHB患者和120例健康体检者,抽取外周血,提取外周血单个核细胞,使用流式细胞仪检测NK细胞、KLRG1⁺ NK细胞和分泌γ-干扰素的NK细胞百分率,体外检测NK细胞对LX-2细胞的杀伤力。结果 CHB患者外周血NK细胞百分率为(17.2±7.7)%,显著高于对照组 [(11.3±6.9)%,t=9.85,P=0.01】, KLRG1⁺NK细胞百分率为(52.2±20.3)%,显著高于对照组 【(30.3±16.9)%,t=6.57,P=0.01】,分泌IFN-γ的NK细胞百分率为(14.6±3.8)%,显著低于对照组【(42.5±9.5)%,t=11.24,P=0.01】;CHB患者外周血NK细胞CD38、CD69、HLA-DR和TRAIL表达均显著高于对照组(P=0.012,P=0.015,P=0.025,P=0.019);CHB患者NK细胞诱导LX-2细胞发生早期凋亡率为11.5% (6.6%～13.7%),晚期凋亡率为7.2% (5.1%～8.5%),与对照组的15.4% (11.5%～24.3%)和13.5% (8.1%～20.4%) 比,显著降低 (U=6.50, P=0.025;U=2.02,P=0.002) 。结论 CHB患者NK细胞表达KLRG1增强,通过减少分泌INF-γ而导致其杀伤功能减弱,可能系造成慢性感染的重要原因。     

慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞的表达及意义

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL在慢性乙型肝炎患者外周血和肝组织中的表达和临床意义.方法 流式细胞分析技术和流式细胞术细胞因子测定法(CFC)检测157例HBV感染者(包括急性乙型肝炎20例、慢性乙型肝炎115例、乙型肝炎肝硬化22例)和20例健康对照组外周血和部分肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达.组间分析采用t检验.结果急性乙型肝炎,慢性乙型肝炎轻、中、重度患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞分别为(2.87±0.94)%、(3.53±1.56)%、(4.59±2.98)%和(3.65±1.73)%,明显高于对照组的(2.36±0.60)%(t值分别为2.04、5.97、3.30和3.17,P<0.01);慢性乙型肝炎轻、中、重度和乙型肝炎肝硬化患者外周血HBV特异性CTL为(0.189土0.152)%、(0.103±0.110)%、(0.118±0.120)%和(0.098±0.101)%,明显低于急性乙型肝炎患者的(0.815±0.360)%(t值分别为10.09、11.87、9.17和8.96,P<0.01).肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达高于外周血.结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制CD8+T淋巴细胞在机体抗病毒过程中发挥重要作用.     

替诺福韦补救治疗rtM204位点突变的慢性乙型肝炎患者效果研究

目的 探讨应用替诺福韦补救治疗核苷(酸)类经治的rtM204位点突变的慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果。方法 2016年4月～2019年2月我院收治的94例经阿德福韦酯或拉米夫定治疗失败的且经检测为rtM204位点突变的CHB患者,将患者分为两组,分别接受替诺福韦治疗47例和恩替卡韦治疗47例,观察18个月。采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量,使用全自动生化分析仪检测血肌酐(sCr),并计算内生肌酐清除率(Crcl),采用ELISA法检测血清HBsAg和HBeAg,使用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞CD3⁺和CD4⁺百分比。结果 在治疗6 m、12 m和18 m,替诺福韦治疗组血清HBV DNA转阴率分别为66.0%、76.6%和93.6%,均显著高于恩替卡韦治疗组的38.3%、55.3%和78.7%(P均＜0.05);在治疗18 m,替诺福韦治疗组血清HBeAg转阴率为12.8%,显著高于恩替卡韦治疗组(0.0%,P＜0.05);在治疗6 m和18 m,替诺福韦组血清AST水平分别为(50.2±8.1)U/L和(31.7±6.9)U/L,显著低于恩替卡韦治疗组[(57.7±8.3)U/L和(38.4±7.1)U/L,P＜0.05];在治疗6 m、12 m和18 m,替诺福韦治疗组外周血CD3⁺细胞百分比分别为(31.6±5.2)%、(38.1±5.7)%和(40.2±6.2)%,与恩替卡韦治疗组比,无显著性差异[(32.1±5.5)%、(37.6±5.8)%和(39.1±5.9)%,P＞0.05],CD4⁺细胞百分比分别为(28.6±3.9)%、(31.2±5.3)%和(36.1±5.7)%,与恩替卡韦治疗组比,无显著性差异[(29.3±3.7)%、(32.4±5.9)%和(34.5±5.3)%,P＞0.05],Crcl分别为(103.4±39.3)mL/min、(101.2±30.2)mL/min和(97.6±23.8)mL/min,与恩替卡韦治疗组比,无显著性差异【(106.7±40.1)mL/min、(103.5±31.6)mL/min和(99.5±25.4)mL/min,P＞0.05】。结论 应用替诺福韦补救治疗rtM204位点突变的CHB患者可快速抑制病毒复制,稳定肝功能,可能比应用恩替卡韦效果好。     

恩替卡韦治疗乙型肝炎病毒携带者合并肺结核患者临床疗效分析

目的 探讨在抗结核治疗过程中应用恩替卡韦预防性治疗肺结核合并HBV携带者对肝损伤的保护作用。方法 2017年5月～2018年12月我院诊治的HBV携带者合并肺结核患者164例,随机将患者分为观察组82例和对照组82例。两组均接受4HREZ/4ER方案抗结核治疗,观察组在抗结核治疗的基础上应用恩替卡韦预防性抗病毒治疗。结果 在治疗8周末,观察组血清ALT和AST水平分别为(44.2±1.1)U/L和(38.8±1.3)U/L,显著低于对照组【(81.7±1.5) U/L和(78.2±1.5) U/L,P＜0.05】,血清HBV DNA全部阴转,而对照组仍保持在治疗前水平【(7.9±0.6)lg copies/mL,P＜0.05】;在治疗8周末,观察组肺结核病灶显著吸收、吸收和痰菌阴转率分别为41.5%、42.7%和48.8%,显著高于对照组的24. 4%、28.1%和34.2% (P＜0.05);观察组外周血CD4⁺细胞、CD8⁺细胞百分比和CD4⁺/CD8⁺比值分别为(39.5±3.1)%、(23.9±1.8)%和(1.7±0.2),与对照组的【(37.1±2.5)%、(26.3±1.3)%和(1.4±0.3),P<0.05】比,差异显著;观察组乏力、肝区不适、食欲减退和肝功能损害发生率分别为3.7%、2.4%、1.2%和1.2%,显著低于对照组(分别为15.9%、12.2%、4.9%和53.7%,P<0.05);在治疗3月末,观察组发生抗结核药物耐药、因肝损害被迫停用某些药物和终止抗结核治疗发生率分别为7.3%、4.7%和1.2%,显著低于对照组的18.3%、12.2%和36.6%(P<0.05)。结论 肺结核合并HBV携带者在抗结核治疗的同时应用恩替卡韦治疗能显著降低肝损害发生率,保证抗结核治疗的顺利和按计划进行,可能与抑制了病毒被激活,保持了正常的免疫监视功能,减少了不良反应的发生。由于抗结核持续进行,就不会或尽可能少地发生耐药菌株的出现,具有重要的临床意义。     

恩替卡韦联合苦参素治疗慢性乙型肝炎患者疗效及其对外周血辅助性T淋巴细胞的影响*

目的 探讨恩替卡韦联合苦参素治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效及其对外周血淋巴细胞百分比的影响。方法 随机将180例CHB 患者分为对照组90例和观察组90例。两组患者均接受恩替卡韦治疗,观察组患者在此基础上加用苦参素口服,观察6个月。采用ELISA 法检测血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和转化生长因子-β1(TGF-β1),采用RIA 法测定血清血管紧张素II(Ang-II)水平,使用流式细胞仪检测外周血辅助性T细胞及CD80 和CD86 阳性细胞百分比。结果 在治疗6个月末,观察组血清ALT 复常、HBeAg 和HBV DNA 阴转率分别为34.4%、91.1% 和86.7%,显著高于对照组的18.9%、78.9%和63.3%(P<0.05);血清MMP-9、TGF-β1 和Ang-II 水平分别为(30.5±3.6)ng/ml 、(19.5±2.2) ng/ml 和(33.7±4.1)ng/dL,与对照组【(22.4±2.7)ng/ml 、(22.6±2.8) ng/ml 和(46.3±4.9)ng/dL,P<0.05】比,差异显著;Th2和Th1细胞及CD80和CD86阳性细胞百分比分别为(6.6±1.5)%、(9.8±2.3)%、(2.5±0.7)%和(1.6±0.5)%,与对照组【(9.0±2.7)%、(7.9±1.4)%、(1.9±0.3)%和(1.1±0.2)%,P<0.05】比,差异显著。结论 应用恩替卡韦联合苦参素治疗CHB患者可能通过改善机体的免疫功能而提高近期疗效。     

系统检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞免疫表型的临床意义

目的:系统研究慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞免疫表型以及与临床的关系.方法:用流式细胞术测定28例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞膜CD3,CD4,CD5,CD25,CD28及CD38等相关CD分子的表达情况,并与22例健康对照组比较,并分析其与HBVDNA及临床的相关性.结果:28例慢性乙型肝炎患者外周血中CD4 CD25 ,CD8 HLADR CD38 ,CD3-CD19 ,CD5-CD19 及CD19 CD38 淋巴细胞数明显高于健康对照组(t=2.37,3.71,4.10,2.31,2.17,P<0.05),而CD3-CD8 ,CD8 CD28-及CD3-CD(16 56) 淋巴细胞数明显低于健康对照组(t=3.14,3.20,2.51,P<0.05).外周血中HBVDNA含量>109copies/L的患者其CD3 CD8 ,CD8 CD28 ,CD4 CD45RA CD62L ,CD8 CD45RA CD62L 及CD4 CD38 淋巴细胞数均显著高于HBVDNA含量<109copies/L的患者,差别有统计学意义(t=2.16,2.42,2.83,3.01,2.50,P<0.01或P<0.05).结论:慢性乙型肝炎患者T、B两种淋巴细胞的活化程度均较高,NK细胞数量减少;体内HBV复制活跃的患者其T淋巴细胞活化程度较高.     

胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的数量及其功能

目的 了解胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血CD4 +CD25+调节性T细胞(Treg)数量和功能的变化.方法 筛选40例HLA-A2+慢性丙型肝炎患者(其中20例合并胰岛素抵抗),流式细胞仪检测患者CD4+CD25+Treg细胞占外周血中CD4+T细胞的频率,液闪计数仪检测对HCV特异性CD8+T细胞增殖的抑制作用,ELISA法检测IFN-y水平.统计学处理采用t检验.结果 胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血CD4 +CD25+ Treg细胞占CD4+T细胞的(9.5±1.9)％,明显低于慢性丙型肝炎患者的(11.2±2.2)％(t=2.615,P＜0.05).胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)≥4患者的CD4+CD25+ Treg细胞比例为(9.0±1.8)％,明显低于HOMA-IR＜4患者的(10.8±2.3)％(t=2.413,P＜0.05).胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者CD4+CD25+ Treg细胞和去除Treg的外周血单个核细胞(PBMC)共培养上清液中IFN-y为(4 050±580) pg/mL,明显高于慢性丙型肝炎患者的(2 005±330)pg/mL(t=13.705,P＜0.01).HOMA-IR≥4患者IFN-y为(5 682±986)pg/mL,明显高于HOMA-IR＜4患者的(2 819±660) pg/mL(t=7.630,P＜0.01).结论 随着胰岛素抵抗程度加重,慢性丙型肝炎患者外周血CD4+ CD25+ Treg细胞频率减低,对HCV特异性CD8+T细胞增殖的抑制作用减弱.     

慢性HBV感染者外周血CXCR5~+CD4~+Tfh细胞的测定及其与FoxP3~+Treg细胞的相关性

目的:探讨慢性乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)感染不同阶段患者外周血CD4+T淋巴细胞中CD4+CXCR5+Tfh细胞及CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的百分比及其意义.方法:应用流式细胞术检测15例慢性无症状HBV携带者(chronic asymptomatic HBV carriers,AsC)、42例慢性乙型肝炎(chronic hepatitisB,CHB)患者(HBeAg阳性25例、HBeAg阴性17例)、11例非活动性HBsAg携带者(inactive HBsAg carriers,InC)外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞及CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,并与15例健康对照(healthycontrol,HC)进行比较.结果:AsC、HBeAg(+)CHB、HBeAg(-)CHB组外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞的比例分别为17.66(15.34%-20.56%),21.95(19.60%-26.32%),22.33(17.58%-24.85%),显著高于HC组的13.67(9.80%-15.32%),差异具有统计学意义(P<0.001).与AsC及InC组的16.11(12.33%-19.73%)相比,HBeAg(+)、HBeAg(-)CHB组外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞的比例显著升高(P<0.05).此外,AsC组外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为7.70(6.35%-9.13%),显著高于HC组的6.53(5.54%-7.35%),P<0.05.HBeAg(+)CHB组外周血CD4+T淋巴细胞中CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的频率为7.52(6.09%-8.49%),与AsC组相比呈降低的趋势.外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞的比例与HBVDNA载量呈负性相关(r=-0.275,P<0.05);而与血清ALT水平、HBsAg滴度无相关性.结论:CD4+CXCR5+Tfh细胞可能参与了慢性HBV感染所介导的免疫反应,外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞及CD4+CXCR5+Tfh细胞的消长可能与疾病的活动性相关.     

慢性乙型肝炎患者外周血Treg/Th17比值平衡及其对替比夫定治疗效果的影响

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血调节性T淋巴细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡及其对替比夫定治疗应答的预测能力。方法 2019年2月～2020年3月我院诊治的123例CHB患者和112例乙型肝炎病毒携带者,另选同期健康人95例,给予CHB患者替比夫定治疗48 w,使用流式细胞仪检测外周血Treg细胞和Th17细胞百分比,计算Treg/Th17比值。采用Logistic多因素回归模型分析影响替比夫定治疗应答的因素,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析Treg/Th17比值预测替比夫定治疗应答的价值。结果 CHB患者外周血Treg细胞和Th17细胞百分比及Treg/Th17比值分别为(4.8±1.1)%、(6.1±1.7)%和(0.8±0.1),显著高于HBV携带者[分别为(1.1±0.3)%、(2.5±0.8)%和(0.4±0.0),P＜0.05]或健康人[分别为(0.9±0.2)%、(2.1±0.6)%和(0.4±0.0),P＜0.05);在治疗12 w、24 w和48 w, CHB患者血清ALT复常率分别为65.9%、77.2%和93.5%,HBV DNA阴转率分别为61.8%、72.4%和82.9%;在治疗48 w末,21例(17.1%)CHB患者不应答;不应答组复治、服药依从性差、血清ALT水平低、基线HBV DNA载量高、Treg细胞百分比高和Treg/Th17比值高的比率显著高于应答组(P均<0.05);Logistic回归分析显示,复治、基线HBV DNA载量、ALT水平和Treg/Th17比值均为影响替比夫定治疗不应答的独立预测因素(OR=3.695、OR=3.232、OR=3.866、OR=4.039,P均<0.05);ROC分析显示,Treg/Th17比值预测替比夫定治疗不应答的最佳截断点为0.83,AUC为0.923(95%CI:0.860～0.963),其灵敏度为81.0%,特异度为87.3%,准确度为91.1%。结论 CHB患者外周血Treg细胞百分比和Treg/Th17细胞比值异常升高,可能影响替比夫定抗病毒治疗效果,其机制值得进一步研究。     

Interleukin-10 expression: is there a neglected contribution of CD8+ T cells in rheumatoid arthritis joints?

OBJECTIVE: To search for RA specific processes among T cell accumulation, T cell activation, or cytokine expression in CD4+ and CD8+ synovial fluid (SF) T cells. METHODS: Flow cytometry of CD4+, CD8+, CD45RA+, CD45RO+, CD69 double or triple stained peripheral blood (PB) and SF T cells. IL-2, IL-10, and IFN-gamma expression was determined in PMA + ionomycin stimulated T cells on the single cell level. Concentrations of secreted IL-2, IL-4, IL-10, and IFN-gamma were quantified in the sera and synovial fluids by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS: A preferential recruitment of CD45RO+ memory T cells was found for CD4+ helper T cells, and in similar also for CD8+ suppressor T cells. An elevated CD69 expression was detected in memory, but also in CD45RA+ naive CD4+ and CD8+ SF T cells, whilst IL-2 expression was only demonstrable in a minor proportion of T cells populations. Preferential recruitment of memory T cells, but incomplete activation of naive and memory, CD4+ and CD8+ T cells were in similar found in RA and control patients. In RA but not in the control patients, a relevant proportion of CD4+ and CD8+ PB and SF T cells expressed IL-10 and IFN-gamma. High concentrations of IL-10, that were correlated with the amounts of secreted TNF-alpha, were only detected in RA joints. CONCLUSION: Memory and naive T cell state of CD4+ and CD8+ T cell accumulates in the joints, and early T cell activation occur in similar patterns in RA and control patients. High IL-10 SF concentrations in contrast, and elevated percentages of IFN-gamma and IL-10 expressing CD4+ and CD8+ T cells in the PB and SF were characteristic for RA. Here, CD8+ T cells may contribute to high IL-10 concentrations in RA joints.