Ski对脂多糖诱导大鼠星形胶质细胞炎症因子释放的影响

目的探讨Ski对激活星形胶质细胞炎症因子分泌的影响。方法从3日龄Sprague-Dawley大鼠大脑皮质分离星形胶质细胞,分为空白对照组、阴性对照组、siRNA组,siRNA组沉默Ski基因。48 h后,采用Western blotting和免疫荧光染色检测Ski表达;再以脂多糖激活星形胶质细胞24 h。ELISA检测各组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的浓度。结果 siRNA组Ski蛋白表达显著降低(P0.001);激活后,TNF-α、IL-1β浓度显著减少(P0.001)。结论 Ski可能参与星形胶质细胞炎症反应。     

奈诺沙星对脂多糖诱导炎性反应的免疫调控作用

目的通过体外细胞学实验和体内动物实验来研究奈诺沙星是否对脂多糖(LPS)诱导的炎性反应具有调控作用。方法 (1)体外细胞学实验检测奈诺沙星对LPS诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生炎性反应的调控作用。RAW264.7细胞液中先加入奈诺沙星,后加入LPS,在不同时间点收集奈诺沙星+LPS组和LPS组等各组细胞上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测白介素(IL)-6、IL-10以及肿瘤坏死因子(TNF)-α等细胞因子的含量;(2)低剂量LPS诱导小鼠炎性反应及奈诺沙星干预实验。小鼠先腹腔注射奈诺沙星再注射低剂量LPS(5 mg/kg),ELISA方法检测小鼠血清中IL-6、IL-10以及TNF-α等细胞因子的含量;(3)奈诺沙星对注射高剂量LPS小鼠保护作用的实验:小鼠腹腔注射高剂量的LPS(12.5mg/kg),2 h后开始腹腔注射奈诺沙星40 mg/kg,1次/12 h,记录0～72 h实验组和对照组小鼠的死亡率。结果 (1)体外细胞学实验显示奈诺沙星对LPS诱导RAW264.7产生的炎性反应有抑制作用,表现为奈诺沙星抑制IL-6、TNF-α等促炎因子的分泌,促进IL-10等抑炎因子的分泌;(2)体内动物实验结果显示奈诺沙星对低剂量LPS诱导小鼠的炎性反应也有抑制作用;(3)奈诺沙星能降低因高剂量LPS引起严重内毒素血症小鼠的死亡率。奈诺沙星+LPS组总体死亡率为0/5,而LPS组总体死亡率为3/5。结论奈诺沙星对宿主感染LPS具有免疫调节作用,可以抑制宿主产生的过度免疫反应,对宿主具有保护作用。     

microRNAs在脂多糖诱导的结肠癌细胞炎性反应模型中的表达

目的:研究microRNAs(miRNAs)在脂多糖(LPS)诱导的结肠癌细胞HT-29炎性反应模型中的表达。方法:用400 ng/mL的LPS处理HT-29细胞48 h,构建HT-29细胞炎性反应模型(LPS组),将未经LPS处理的HT-29细胞作为对照组;抽提细胞总RNA,检测HT-29细胞中白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)的表达水平;用颈环结构引物反转录miRNAs,应用实时荧光定量PCR测定其表达水平。结果:LPS组中IL-6和CRP的表达较对照组显著升高(P0.01),表明建模成功。LPS组miR-22、miR-26、miR-214的表达水平较对照组低,而miR-23的表达水平较对照组高(P0.05);两组miR-24、miR-30、miR-181的表达水平差异无统计学意义。结论:miRNAs可能参与LPS诱导的HT-29结肠癌细胞的炎性反应过程。     

脂多糖对大鼠星形胶质细胞Ski蛋白表达的影响

目的探讨内毒素脂多糖对大鼠星形胶质细胞ski蛋白表达规律及胞定位的影响。方法新生3 d内Sprague-Dawley大鼠,取大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。采用0μg/ml、0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml脂多糖诱导6 h;采用0.1μg/ml脂多糖诱导0 d、2 d、4 d、6 d、8 d。Western blotting法检测星形胶质细胞中ski蛋白的表达,间接免疫荧光双标法检测ski在星形胶质细胞中的定位。结果 0.1μg/ml脂多糖诱导下,ski蛋白表达最高(F=46.656,P0.001)。0.1μg/ml脂多糖诱导4 d时最高,6 d时逐渐降低。在无脂多糖诱导及脂多糖诱导6 d时,ski蛋白主要表达于细胞核;脂多糖诱导2 d、4 d时,细胞质中出现ski表达。结论脂多糖可诱导星形胶质细胞ski蛋白表达,可能参与炎症反应。     

细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质细胞前体的毒性作用

背景:已有实验证实,脑白质病变如多发性硬化症和脑室周围白质软化等一些神经病变的发病机制,均涉及到局部小胶质细胞的激活.目的:探讨细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质细胞前体的毒性作用.方法:取2 d龄SD大鼠脑内小胶质细胞和少突胶质细胞前体共培养,分为共培养对照组和共培养脂多糖组.对共培养细胞经脂多糖100 μg/L 诱导48 h,分别应用硝酸还原比色法检测一氧化氮含量,还原-比色法检测超氧阴离子含量,免疫细胞染色法检测过氧亚硝酸盐含量,Hochest33342/PI荧光染色法观察细胞死亡的形态学改变,以及流式细胞仪检测细胞成活率.结果与结论:与共培养对照组比较,脂多糖诱导导致共培养细胞内一氧化氮、超氧阴离子、过氧亚硝酸盐含量均明显增加,少突胶质细胞前体的凋亡率亦显著增加.通过体外观察,确认脂多糖诱导少突胶质细胞前体的死亡通路,是由于脂多糖诱导小胶质细胞激活,导致小胶质细胞表达一氧化氮合酶和活化NADPH氧化酶,致使其产物一氧化氮和超氧阴离子大量生成,两者进一步反应生成大量的毒性因子过氧亚硝酸盐,作用于少突胶质细胞前体,从而导致少突胶质细胞前体的死亡.     

富血小板血浆与洗涤血小板对人牙髓细胞矿化的作用

背景：此前课题组的研究表明富血小板血浆和洗涤血小板在一定浓度范围内均可促进人牙髓细胞的增殖。目的：进一步观察不同浓度富血小板血浆和洗涤血小板对人牙髓细胞矿化的作用效果。方法：实验使用健康志愿者正畸拔除牙齿内牙髓培养的4～6代牙髓细胞。将由该志愿者采集的静脉血制备富血小板血浆和洗涤血小板作用于牙髓细胞,使用碱性磷酸酶及蛋白定量试剂盒测定矿化诱导7d后牙髓细胞的碱性磷酸酶活性,并通过茜素红染色观测牙髓细胞经矿化诱导10d及20d后的矿化结节形成情况。结果与结论：10%～30%的洗涤血小板与富血小板血浆均明显提高了牙髓细胞碱性磷酸酶活性,其中,以20%浓度尤为明显;10%～30%的洗涤血小板与富血小板血浆均明显促进了矿化诱导后10d的牙髓细胞矿化结节形成,其中,10%浓度在矿化诱导后20d促进牙髓细胞形成的矿化结节最大。但相同浓度的洗涤血小板与富血小板血浆之间在作用效果上没有明显差异。     

脂多糖诱导小胶质细胞活化对多巴胺能神经元的损伤作用

目的 在建立原代培养多巴胺能神经元和小胶质细胞的基础上,研究脂多糖(LPS)激活的小胶质细胞对多巴胺能神经元的毒性作用及损伤的分子机制.方法 通过细胞免疫化学方法 检测原代培养的神经元和神经胶质细胞中TH、OX-42阳性细胞的表达,以明确原代培养多巴胺能神经元和小胶质细胞的纯度.通过加入不同条件培养液分为A~E五组.通过MTT方法 检测小胶质细胞条件培养液对多巴胺能神经元的毒性作用.通过Western-blotting方法 检测多巴胺能神经元中caspase-3、caspase-9蛋白的表达水平.结果 小胶质细胞条件培养液培养24 h(C组)、48 h(D组)后,多巴胺能神经元的存活率分别为(87.4±4.6)%、(87.5±7.3)%,与A、E、B三组比较有统计学意义(P<0.05);同样C、D两组中caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量分别为(30.127±0.431)%、(30.823±0.403)%和(29.806±0.410)%、(31.337±0.462)%,与A、B、E组比较有统计学意义(P<0.05);B组中caspase-9蛋白相对表达量为(14.623±0.340)%,与A组比较有统计学意义(P<0.05).结论 小胶质细胞的激活是构成多巴胺能神经元损伤的重要环节.     

星形胶质细胞在阿尔茨海默病中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是一类病因未明的神经系统变性疾病,它以老年斑(SP),神经元纤维缠结(NFT)和突触丢失为主要病理改变[1-2]。在AD患者脑组织中可观察到某些脑区神经     

小胶质细胞与阿尔茨海默病炎性反应的相关研究

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是老年人常见的神经系统变性疾病,临床特征为隐袭起病,进行性智能衰退,多伴有人格障碍,其病因迄今不明。目前认为,β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)沉积引起的炎性反应是AD的病理机制核心。小胶质细胞(microglial,MG)是AD炎性反应中最主要的炎性细胞,介导并贯穿AD病理发展全程。本文就MG及AD的炎性反应的相关研究作一概述。     

甲基汞对原代大鼠星形胶质细胞的毒性作用

目的初步研究甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞产生毒性的机制。方法用甲基汞作用于原代SD大鼠星形胶质细胞,用高效液相色谱检测细胞氧化还原水平,用Western-blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平。结果随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞的还原水平明显下降。在甲基汞浓度较小时,随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞Nrf2表达水平呈增长趋势;在甲基汞浓度较大时,随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞Nrf2表达水平呈减少趋势。结论甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞的毒性作用可能通过改变还原型谷胱甘肽(GSH)和Nrf2的功能而实现。     

抑肽酶对凝血酶所致星形胶质细胞损伤的保护作用

目的观察抑肽酶对凝血酶所致大鼠星形胶质细胞损伤的保护作用。方法将体外培养的大鼠星形胶质细胞随机分为正常对照组、凝血酶组及抑肽酶干预组。24h后,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法比较细胞损伤程度(OD值)。用末端脱氧核糖核苷酸转移介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测不同抑肽酶浓度作用培养星形胶质细胞后的凋亡细胞。结果抑肽酶干预组的OD值(0.67±0.11,0.78±0.07和0.80±0.13)高于凝血酶组的OD值(1.05±0.09)(P<0.05);抑肽酶干预组的LDH活力(154.31±10.74、101.38±13.59和92.72±11.92)明显低于凝血酶组的LDH活力(267.09±25.35)(P<0.05)。抑肽酶干预组的星形胶质细胞凋亡数(13.20±1.52、9.10±1.20和4.80±0.89)明显低于凝血酶组星形胶质细胞凋亡数(26.10±1.82)(P<0.05)。结论抑肽酶可能是通过减轻凝血酶诱导星形胶质细胞损伤并增加其活力、减轻其凋亡,对其实施保护作用。     

海带多糖对脂多糖致血管内皮细胞炎性反应的影响

目的:探讨海带多糖(LP)对脂多糖(LPS)致血管内皮细胞(Vascular endothelial cells,VECs)炎性反应的调整作用。方法:将70只昆明小鼠随机分为7个组:LP高剂量组(LP-H)、LP中剂量组(LP-M)、LP低剂量组(LP-L),此三组分别于尾静脉注射LP 50、25、10 mg/kg和LPS 3 mg/kg;依诺肝素组(依诺肝素2 IU/kg+LPS3 mg/kg),模型组(LPS 3 mg/kg),LP对照组(LP 50 mg/kg),空白对照组(生理盐水)。检测小鼠肛温;ELISA法测定小鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)含量;RT-PCR法测定主动脉内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧合酶-2(COX-2)m RNA的表达。结果:LP能够降低LPS炎症小鼠体温(P0.05),降低血清IL-1β、IL-8、TNF-a、NO、PGI2水平(P0.05-0.01);上调e NOS m RNA表达(P0.01);下调i NOS m RNA、COX-2 m RNA表达(P0.01)。结论:LP在LPS炎性反应中抑制炎症因子产生,调整内皮相关基因的表达。     

氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞损伤的作用

背景氯胺酮是临床常用的静脉全麻药,静脉或硬脊膜外腔用药都有镇痛作用,它是N-甲基-D-天冬氨酸受体非竞争性拮抗剂,可拮抗兴奋性氨基酸的毒性作用.目的观察氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡的影响,探讨其可能的作用机制.设计随机对照观察.单位郧阳医学院附属太和医院麻醉科.材料实验于2003-09/2005-01在郧阳医学院基础医学研究所细胞生物学实验室完成.由武汉大学动物实验中心提供新生两三天Wistar大鼠.方法取Wistar大鼠T11～L6脊髓背角星形胶质细胞原代纯化培养.胶质纤维酸性蛋白鉴定星形胶质细胞纯度达98%后用于实验.将培养细胞24孔板随机分为6组(每组9份)①对照组加Hanks液50μL.②N-甲基-D-天冬氨酸组加药浓度为100μmol/L.③氯胺酮组加药浓度为1 mmol/L.④100μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+0.1 mmol/L氯胺酮组.⑤100μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+0.5 mmol/L氯胺酮组.⑥100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+1mmol/L氯胺酮组.1 mmol/L氯胺酮为临床镇痛剂量.培养24 h后检测超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量,免疫细胞化学观察Bcl-2蛋白和形态学变化,流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率.主要观察指标①Bcl-2蛋白免疫组织化学苏木精-伊红复染细胞着色及形态学变化.②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率.③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化.结果①Bcl-2平均吸光度值(A)作为半定量测量Bcl-2蛋白表达水平100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组低于对照组,差异显著[分别为0.054±0.021,0.108±0.039,P＜0.01],100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+1 mmol/L氯胺酮组高于100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组,差异显著[分别为0.148±0.045,0.054±0.021,P＜0.01].②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组高于对照组,差异显著[分别为(25.26±6.13)%,(5.66±2.24)%,P＜0.01],100μmol/LN-甲基-D-天冬氨酸+1 mmol/L氯胺酮组低于100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组,差异显著[分别为(24.41±4.82)%,(25.26±6.13)%,P＜0.01].③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸使星形胶质细胞内丙二醛含量显著升高,而超氧化物歧化酶活性明显降低;1 mmol/L氯胺酮明显降低丙二醛含量,显著增强超氧化物歧化酶活性,该效应在临床镇痛剂量以内有明显量效关系,与N-甲基-D-天冬氨酸组相比差异显著(P＜0.01).1 mmol/L氯胺酮组与对照组相比、100μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+0.1 mmol/L氯胺酮组与N-甲基-D-天冬氨酸组相比差异均无显著性.结论N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活可诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞大量凋亡,适量氯胺酮显著抑制细胞凋亡,其机制可能增强星形胶质细胞Bcl-2蛋白表达,同时抑制自由基的产生和增强超氧化物歧化酶活性.     

氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞损伤的作用

背景：氯胺酮是临床常用的静脉全麻药，静脉或硬脊膜外腔用药都有镇痛作用，它是N-甲基-D-天冬氨酸受体非竞争性拮抗剂，可拮抗兴奋性氨基酸的毒性作用。 目的：观察氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡的影响，探讨其可能的作用机制。 设计：随机对照观察。 单位：郧阳医学院附属太和医院麻醉科。 材料：实验于2003-09／2005-01在郧阳医学院基础医学研究所细胞生物学实验室完成。由武汉大学动物实验中心提供新生两三天Wistar大鼠。 方法：取Wistar大鼠T11～L6脊髓背角星形胶质细胞原代纯化培养。胶质纤维酸性蛋白鉴定星形胶质细胞纯度达98％后用于实验。将培养细胞24孔板随机分为6组（每组9份）：①对照组加Hanks液50μL。（爹N-甲基-D-天冬氨酸组加药浓度为100μmol／L。（爹氯胺酮组加药浓度为1mmol／L。④100μmol／L N-甲基-D-天冬氨酸＋0．1mmol／L氯胺酮组。⑤100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋0．5mmol／L氯胺酮组。⑥100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋1mmol／L氯胺酮组。1mmol几氯胺酮为临床镇痛剂量。培养24h后检测超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量，免疫细胞化学观察Bcl-2蛋白和形态学变化，流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率。 主要观察指标：①Bcl-2蛋白免疫组织化学苏木精-伊红复染细胞着色及形态学变化。②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率。③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化。 结果：①Bcl-2平均吸光度值似）作为半定量测量Bcl-2蛋白表达水平：100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组低于对照组，差异显著[分别为0．0544&;#177;．021，0．108&;#177;0．039，P〈0．01]，100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋1mmol／L氯胺酮组高于100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组，差异显著[分别为0．148&;#177;0．045，0．054&;#177;0．021，P〈0．01]。②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率：100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组高于对照组，差异显著[分别为（25．26&;#177;6．13）％，（5．66&;#177;2．24）％，P〈0．01]，100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋1mmol／L氯胺酮组低于100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组，差异显著[分别为（24．41&;#177;4．82）％，（25．26&;#177;6．13）％，P〈0．01]。③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化：100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸使星形胶质细胞内丙二醛含量显著升高，而超氧化物歧化酶活性明显降低；1mmol／L氯胺酮明显降低丙二醛含量，显著增强超氧化物歧化酶活性，该效应在临床镇痛剂量以内有明显量效关系，与N-甲基-D-天冬氨酸组相比差异显著（P〈0．01）。1mmol／L氯胺酮组与对照组相比、100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋0．1mmol/L几氯胺酮组与N-甲基-D。天冬氨酸组相比差异均无显著性。 结论：N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活可诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞大量凋亡，适量氯胺酮显著抑制细胞凋亡，其机制可能增强星形胶质细胞Bcl-2蛋白表达，同时抑制自由基的产生和增强超氧化物歧化酶活性。     

星形胶质细胞与雌激素的脑保护作用

目的：认识星形胶质细胞在雌激素脑保护机制中的重要作用。 资料来源：应用计算机检索PubMed数据库1994—06／2005—07期间的相关文章，检索词“estrogen，astrocyte，brain”，并限定文章语言种类为英文。同时计算机检索数据库万方数据库2001-01／2005—10期间的相关文章，检索词“雌激素，星形胶质细胞，脑”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：对资料进行初审，选取试验研究查找全文。纳入标准：①研究原著。②设有对照的动物试验和体外组织细胞培养试验。排除标准：综述文献、重复研究、Meta分析类文章。 资料提炼：共收集到87篇文献，有22篇符合纳入标准。 资料综合：反应性星形胶质细胞可合成雌激素。雌激素可引起胶质源性神经营养生长因子表达的上调，可以使胰岛素样生长因子1及其胰岛素样生长因子1结合蛋白2在脑组织内表达增加，可以上调星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白tRNA、mRNA表达而发挥神经保护和修复作用。雌激素不仅具有雌激素受体介导的基因转录通路，还能够通过增加细胞内Ca^2＋水平等非基因途径快速激活细胞，促进星形胶质细胞对谷氨酸的摄取，影响星形胶质细胞和小胶质细胞在神经炎症反应和神经元退行性疾病中免疫神经递质的表达，影响神经胶质介导的炎症通路而起保护作用。 结论：雌激素与星形胶质细胞在诸多方面存在交互对话，星形胶质细胞在雌激素脑保护机制中发挥重要作用，这将有助于更好地明确和诠释雌激素广泛神经保护的确切机制，而不局限于以往依赖于脑内神经元有限的雌激素受体介导的保护机制，最终更好的指导其临床应用。     

星形胶质细胞与雌激素的脑保护作用

目的:认识星形胶质细胞在雌激素脑保护机制中的重要作用。资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1994-06/2005-07期间的相关文章,检索词“estrogen,astrocyte,brain”,并限定文章语言种类为英文。同时计算机检索数据库万方数据库2001-01/2005-10期间的相关文章,检索词“雌激素,星形胶质细胞,脑”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取试验研究查找全文。纳人标准:①研究原著。②设有对照的动物试验和体外组织细胞培养试验。排除标准:综述文献、重复研究、Meta分析类文章。资料提炼:共收集到87篇文献,有22篇符合纳入标准。资料综合:反应性星形胶质细胞可合成雌激素。雌激素可引起胶质源性神经营养生长因子表达的上调,可以使胰岛素样生长因子1及其胰岛素样生长因子1结合蛋白2在脑组织内表达增加,可以上调星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白tRNA、mRNA表达而发挥神经保护和修复作用。雌激素不仅具有雌激素受体介导的基因转录通路,还能够通过增加细胞内Ca2 水平等非基因途径快速激活细胞,促进星形胶质细胞对谷氨酸的摄取,影响星形胶质细胞和小胶质细胞在神经炎症反应和神经元退行性疾病中免疫神经递质的表达,影响神经胶质介导的炎症通路而起保护作用。结论:雌激素与星形胶质细胞在诸多方面存在交互对话,星形胶质细胞在雌激素脑保护机制中发挥重要作用,这将有助于更好地明确和诠释雌激素广泛神经保护的确切机制,而不局限于以往依赖于脑内神经元有限的雌激素受体介导的保护机制,最终更好的指导其临床应用。     

磁刺激通过星形胶质细胞磷酸化蛋白影响星形胶质细胞迁移

目的 研究1.0Hz 60%最大刺激强度的磁刺激通过调控星形胶质细胞磷酸化蛋白（PEA-15）对星形胶质细胞迁移的影响。 方法 取第3～4代体外分离培养的大鼠星形胶质细胞,分为对照组、转染组、磁刺激组和转染+磁刺激组。对照组进行阴性siRNA转染,转染组应用化学合成的siRNA进行脂质体瞬时转染,干扰PEA-15的蛋白表达;磁刺激组的星形胶质细胞在铺板24h后接受60%最大强度磁刺激;转染+磁刺激组进行PEA-15的siRNA转染,并给予60%最大强度磁刺激。用细胞划痕试验检测星形胶质细胞的迁移程度,用免疫印迹试验检测PEA-15的蛋白表达和磷酸化水平变化。 结果 ①PEA-15 siRNA的转染效果明显,Western Blot检测与对照组比较,PEA-15的蛋白表达明显降低。②体外划痕实验中,转染组、磁刺激组、转染+磁刺激组的细胞迁移面积分别与对照组比较,其星形胶质细胞迁移程度增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。③与对照组相比,磁刺激组的PEA-15磷酸化明显增加。 结论 干扰PEA-15表达后的星形胶质细胞迁移增加明显;磁刺激可通过增强PEA-15磷酸化促进星形胶质细胞的迁移。     

星形胶质细胞与阿尔茨海默病

阿尔茨海默氏病(AD)是目前最常见的神经退行性疾病,主要表现为进行性的认知和记忆力下降,其发生、发展与星形胶质细胞在内的多种因素有关。近年来发现,星形胶质细胞可通过多种机制影响AD病理过程,如增加Aβ的产生及沉积、加速异常Tau蛋白的缠结、通过炎症因子加剧Aβ的神经毒性、能量供应不足及神经递质释放障碍损害神经功能正常活动等。各个因素在AD不同阶段反复作用,互相影响,形成恶性循环,导致淀粉样斑块形成、神经元纤维缠结、突触减少及神经元丢失。保护星形胶质细胞的正常功能可能成为AD治疗的新靶点。     

何首乌苷对奥沙利铂诱导大鼠星形胶质细胞凋亡的影响

目的探讨何首乌苷保护大鼠星形胶质细胞免于奥沙利铂诱导凋亡的作用及可能机制。方法原代培养大鼠星形胶质细胞,并利用流式检测所培养细胞胶质纤维酸性蛋白的表达情况。利用10μmol/L奥沙利铂处理胶质细胞24 h建立凋亡模型,加入浓度梯度的何首乌苷预处理胶质细胞24 h后与奥沙利铂共同作用24 h,台盼蓝染色法观察细胞存活。随后通过Annexin V-FITC/PI双染法流式检测各组凋亡率和检测Caspase-3的活性水平。进而利用JC-1染色法流式检测细胞线粒体膜电位,并利用实时定量RT-PCR与免疫印迹检测BAX与BCL2的m RNA水平和蛋白表达量。结果培养的大鼠星形胶质细胞表达胶质纤维酸性蛋白率达95%以上。奥沙利铂处理诱导凋亡24 h后,对照组胶质细胞凋亡率及Caspase-3活性上升并降低线粒体膜电位,加何首乌苷处理后凋亡率及Caspase-3活性下降而线粒体膜电位上升。相对于对照组,加入何首乌苷处理后BAX基因的m RNA及蛋白表达水平降低,BCL2基因的m RNA及蛋白表达水平上升。结论何首乌苷能恢复凋亡相关基因BAX与BCL2的平衡,保护大鼠皮质星形胶质细胞的线粒体膜电位,并使胶质细胞免于奥沙利铂诱导的凋亡作用。