基于“热证可灸”理论研究艾灸对胃热证大鼠肠道微生态的影响

目的:采用16S rDNA测序分析艾灸胃经穴对胃热证大鼠肠道微生态的影响。方法:24只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、胃经穴组和对照点组各6只。运用Illumina Hiseq高通量测序技术分析胃热证大鼠和艾灸胃经穴干预胃热证大鼠的肠道菌群结构,利用LEfSe分析比较组间微生物的物种差异。结果:与空白组比较,模型组中红蝽菌科(Coriobacteriaceae)、柯林斯氏菌属(Collinsella)及梭菌属(Clostridium)等致病菌丰度显著上调。与模型组大鼠比较,胃经穴组中放线菌门(Actinobacteria)、双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和瘤胃球菌属(Ruminococcus)等益生菌丰度显著上调。结论:艾灸胃经穴"梁门""足三里"能显著上调胃热证大鼠益生菌丰度水平,对大鼠的肠道微生物组成及物种影响具有调节作用,可能是其治疗胃热证的机制之一。     

电针不同经穴对胃黏膜细胞EGFR信号转导通路影响的比较研究

目的：探讨电针胃经穴的大鼠血清对胃黏膜细胞表皮生长因子受体（EGFR）信号转导通路的影响。方法：60只大鼠随机分为正常组、胃经组、胆经组、胃经＋PD153035组和胆经＋PD153035组,采用水浸束缚法制作胃黏膜损伤大鼠模型,链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用EGFR抑制剂PD153035和血清孵育胃黏膜细胞,应用酶联免疫吸附法检测PLC7—1活性,同位素掺入法检测蛋白激酶C（PKC）活性,逆转录聚合酶链反应法检测c—myc基因的表达水平。结果：模型组大鼠胃黏膜细胞PLC7～1、PKC和c—myc基因有微弱表达;胃经组和胆经组大鼠胃黏膜细胞PLCy-1、PKC和c—myc基因呈现较强表达,其中胃经组大鼠表达最强烈,两组相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;胃经＋PD153035组和胆经＋PD153035组大鼠胃黏膜细胞PLC7—1、PKC和c—myc基因的表达较弱,胃经组与胃经＋PD153035组相比,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：电针胃经穴后提取的血清能诱导大鼠胃黏膜细胞EGFR信号转导通路的活化,提示存在经脉-脏腑的特异性联系。     

艾灸对应激性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞凋亡蛋白质磷酸化的影响

目的:研究艾灸对应激性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞凋亡蛋白质磷酸化的影响,探讨艾灸促进胃黏膜损伤修复的信号转导机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、胃经穴组和对照点组,采用束缚冷应激法制作应激性胃溃疡大鼠模型,肉眼观察大鼠胃黏膜损伤程度,Apoptosis Microarray Slides芯片检测胃黏膜细胞凋亡蛋白质磷酸化水平。结果:与模型组比较,胃经穴组和对照点组大鼠胃黏膜损伤指数值均显著降低(P<0.05);与对照点组比较,胃经穴组大鼠胃黏膜损伤指数显著降低(P<0.05);Apoptosis Microarray Slides芯片检测结果显示:与模型组比较,胃经穴组大鼠胃黏膜细胞10种蛋白质磷酸化水平上调,其中Bcl-XL、Mcl-1、Bcl-2、IAPs 4种蛋白磷酸化水平差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);18种蛋白质磷酸化水平下调,其中TNF、Fas、Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9、Bax 6种蛋白质磷酸化水平差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸可促进胃黏膜的损伤修复,调节多种凋亡相关信号蛋白质的磷酸化水平,并且存在一定的经脉脏腑相关性。     

艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体、磷酸化细胞外信号调节激酶的影响

目的:观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白表达的影响,初步探讨其作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组,每组10只。采用大黄浓缩液灌胃法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃法制备脾虚胃溃疡大鼠模型。四君子汤组予以四君子汤灌胃,艾灸组大鼠隔日交替灸"足三里""中脘"或"脾俞""胃俞",艾灸非穴位组灸艾灸组穴位的对照点,每日1次,共治疗8d。按脾虚动物模型标准观察大鼠脾虚症状,按Guth法计算胃黏膜损伤指数,光镜下观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃组织EGFR的表达和蛋白质印迹法检测p-ERK1/2蛋白的水平。结果:与空白组比较,其余各组造模大鼠脾虚症状明显,模型组大鼠胃黏膜损伤指数显著增加(P0.01),光镜下胃黏膜损伤严重,胃组织EGFR、p-ERK1/2蛋白表达升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组胃黏膜损伤指数显著降低(P0.01,P0.05),光镜下胃黏膜损伤改善,且胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01);与艾灸非穴位组相比,四君子汤组和艾灸组胃黏膜损伤指数呈降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05),而光镜下胃黏膜损伤恢复较艾灸非穴位组好,胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01,P0.05)。结论:激活EGFR/ERK信号转导通路是艾灸启动机体的内源性保护机制之一,艾灸治疗脾虚胃溃疡可能是通过提高胃组织表皮生长因子、转化生长因子的表达,两者均结合并激活EGFR,激活后的EGFR介导ERK磷酸化从而激活EGFR/ERK信号转导通路,因而起到保护胃黏膜、促进胃黏膜增殖修复的作用。     

联合用药对胃癌细胞生长的抑制作用

目的 研究雷帕霉素联合阿霉素对胃癌细胞(BGC-823 )增殖抑制及凋亡的影响,并探讨机制.方法 细胞培养,通过甲基噻唑基四唑(MTT)法检测雷帕霉素(RAPA )干预组、阿霉素干预组及联合干预组对胃癌细胞系增殖抑制作用;流式细胞仪法分别检测各组细胞周期及凋亡率;western 试验检测抑癌基因p53、APC、DPC4 蛋白表达水平.结果 RAPA 能抑制胃癌细胞的增殖,其促凋亡作用最弱;单独应用阿霉素及阿霉素联合20.0nmol/L RAPA 均可显著抑制胃癌细胞的增殖,且联合应用抑制率显著升高(P＜0.01); 流式细胞仪检测显示阿霉素及联合应用均可增加胃癌细胞的凋亡率(P＜0.01);western 试验提示联合应用组p53、APC、DPC4 蛋白表达水平升高.结论 RAPA 能抑制胃癌生长,mTOR 信号通路参与调控胃癌细胞的增殖与凋亡,mTOR 信号通路抑制剂RAPA 可提高抑癌基因p53、APC、DPC4 蛋白表达、增强阿霉素的抗肿瘤效应.     

艾灸对幽门螺杆菌胃炎大鼠血清免疫学作用研究

目的:探讨艾灸保护胃黏膜损伤的免疫学机制。方法:将40只健康SD大鼠随机分为4组,即空白组、模型组、艾灸穴位组(模型+艾灸穴位)、艾灸非穴组(模型+艾灸穴位对照点),每组10只。艾灸穴位组和艾灸非穴组于造模前8天即予艾灸干预,穴取"足三里""中脘""关元""脾俞""胃俞"穴或以上穴旁开对照点,模型组仅捆绑不治疗,均每日1次,连续16d。采用幽门螺杆菌(Hp)灌胃建立大鼠Hp胃炎模型,观察大鼠胃黏膜苏木精-伊红(HE)染色镜检炎性反应程度,酶联免疫法(Elisa)检测各组大鼠血清热休克蛋白72(HSP72)及胃组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量,实时定量聚合酶链式反应(PCR)法检测外周血单核细胞Toll样受体(TLR2mRNA、TLR4mRNA、CD14mRNA)、髓样分化因子88(MyD88mRNA)的表达,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测外周血单核细胞NFκB核因子κB、IκBα核因子κB的抑制蛋白的含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜涂片革兰氏染色检测出Hp,胃黏膜组织HE染色镜检炎性反应程度评分积分值增高,血清HSP72含量及胃组织TNF-α、IL-1β含量明显升高,单核细胞TLR2mRNA、4mRNA、CD14mRNA、MyD88mRNA、NFκB表达增加(P0.01),IκBα表达降低(P0.05);经艾灸"足三里"等穴预处理者,艾灸穴位组大鼠胃黏膜组织HE染色镜检炎症程度积分值减低,血清HSP72含量升高,胃组织TNF-α、IL-1β含量及单核细胞TLR2、4mRNA、CD14mRNA、MyD88mRNA、NFκB表达降低(P0.01),IκBα表达升高(P0.05);艾灸非穴组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾灸穴位预处理可诱导血清HSP72的高表达,通过与TLR2、4受体结合启动受体后信号转导途径,调控下游信号物质的释放,从而调节机体相关免疫物质的释放,减轻Hp胃炎大鼠胃黏膜损伤。     

电针胃经穴对大鼠胃黏膜细胞ERK免疫组化的影响

目的:探讨电针大鼠胃经穴对胃黏膜细胞细胞外信号调节激酶(ERK)免疫组化的影响。方法:72只大鼠随机分为6组,利用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用PD153035和100mL/L血清孵育胃黏膜细胞,免疫组化法检测ERK的表达。结果:胃经组和胆经组胃黏膜细胞ERK的表达明显高于正常组和模型组(P<0.01);胃经组胃黏膜细胞ERK的表达与胆经组比较显著增强(P<0.01);胃经+PD153035组胃黏膜细胞ERK的表达明显低于胃经组(P<0.01)。结论:电针能上调胃黏膜细胞ERK的表达,ERK可能是胃经与胃相关的客观物质基础之一。     

电针促进胃黏膜损伤修复的时效关系及分子机制

目的:动态观察电针对胃溃疡模型大鼠胃黏膜损伤修复的影响,探讨电针治疗胃溃疡的时效关系和分子机制。方法:72只SD大鼠分为空白组、模型组、胃经穴组、对照点组,并按干预时间1、4、7 d分为3个亚组,每个亚组6只。采用乙醇灌胃方法制备胃溃疡大鼠模型,胃经穴组电针"足三里""梁门",对照点组电针"梁门""足三里"外旁开5 mm处,每日1次,每次电针30 min。空白组和模型组用鼠板束缚但不进行电针处理,每日1次,每次30 min。用逆转录-聚合酶链反应(PR-PCR)法检测胃增殖细胞核抗原(PCNA)、P物质(SP)的表达,Western blot检测胃神经降压素(NT)的表达。结果:干预1 d后,模型组溃疡指数显著高于空白组(P0.01),PCNA、SP、NT表达降低(P0.01,P0.05);胃经穴组与模型组、对照点组相比,溃疡指数降低(均P0.05),上调PCNA m RNA、SP m RNA的表达(均P0.05)且显著上调NT蛋白表达(均P0.01)。干预4 d后,模型组溃疡指数降低但仍高于空白组(P0.05),PCNA m RNA、SP m RNA、NT蛋白的表达上升且高于空白组(均P0.01);胃经穴组溃疡指数接近空白组(P0.05),PCNA m RNA、SP m RNA低于模型组(P0.01,P0.05),NT蛋白与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。干预7 d后,各组以上指标组间比较差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:电针胃经穴能在胃溃疡发展的不同病理状态下对PCNA m RNA、SP m RNA进行双向调节的平衡作用同时促进NT蛋白高表达,进而促进溃疡的修复。     

艾灸对功能性消化不良大鼠SCF、Cx43表达的影响

目的探讨艾灸对功能性消化不良大鼠SCF、足三里穴局部Cx43蛋白表达的影响。方法建立功能性消化不良大鼠模型,进行艾灸足三里穴和足三里穴旁开对照点,采用免疫印迹法(Western blot)分别检测各组大鼠胃窦SCF及穴位、穴位旁开对照点局部Cx43蛋白的表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠胃窦SCF及穴区局部Cx43蛋白水平显著降低(P0.01);与模型组比较,艾灸穴位组SCF及Cx43蛋白表达量高于模型组(P0.05),艾灸非穴组SCF及Cx43蛋白表达量无显著差异(P0.05);与艾灸非穴组相比,艾灸穴位组SCF及Cx43蛋白表达量显著升高(P0.05)。结论艾灸干预能够显著升高FD大鼠胃窦SCF及足三里局部Cx43蛋白表达水平,改善胃动力,调节胃肠道活动。     

黄芪多糖对肌源性干细胞Wnt信号相关基因表达的影响

目的 探讨黄芪多糖干预的肌源性干细胞Wnt/β-catenin信号通路的相关基因表达的变化。方法 将经混合酶消化法、多次差速贴壁法分离纯化的MDSCs随机分为6组,进行实验干预,即空白对照组、APS组、Wnt激动剂组、APS+Wnt激动剂组、Wnt抑制剂组及APS+Wnt抑制剂组。Realtime PCR检测MDSCs Wnt信号通路上下游节点基因Wnt3、β-catenin及MDSCs增殖分化相关基因CyclinD1、c-myc、CD34mRNA的表达变化。结果 流式细胞仪检测结果表明MDSCs CD34、Sca-1阳性。倒置显微镜下观察,APS组、Wnt激动剂组、APS+Wnt激动剂组MDSCs较空白对照组生长密集,APS+Wnt激动剂组聚团明显,Wnt抑制剂组MDSCs增殖明显受到抑制。PCR检测结果显示:APS+激动剂干预组的Wnt信号通路各节点基因表达水平最高,Wnt激动剂组与APS组其次,空白对照组最低。结论 在黄芪多糖的干预作用下,持续激活Wnt信号通路能够促进MDSCs的增殖分化。     

隔药灸对急性胃黏膜损伤家兔穴区线粒体及I型胶原蛋白的影响

目的：观察隔药灸对急性胃黏膜损伤家兔胃黏膜损伤指数、穴区局部线粒体结构、I型胶原蛋白表达的影响,从胃黏膜修复及腧穴局部能量代谢角度探讨隔药灸对急性胃黏膜损伤的起效机制。方法：新西兰兔随机分为正常组、模型组、隔药灸组和西药组。在成功制备急性胃黏膜损伤模型的基础上,隔药灸组取“后三里穴”进行治疗,西药组以硫糖铝灌胃治疗。各组治疗干预结束后,留取胃黏膜和穴区局部组织,采用Guth法对各组的胃黏膜损伤指数进行评分,透射电镜观察后三里穴位局部组织线粒体形态结构,免疫组化法检测穴区I型胶原蛋白的表达。结果：与正常组比较,模型组、西药组和隔药灸组家兔胃黏膜损伤指数均显著升高(均P<0.01);模型组穴区细胞线粒体空泡化,I型胶原蛋白表达降低（P<0.01）;隔药灸组仅有少数线粒体水肿;西药组线粒体数目少、出现肿胀,线粒体嵴不明显。与模型组比较,隔药灸组和西药组胃黏膜损伤指数显著下降(均P<0.01),I型胶原蛋白表达升高（P<0.01或P<0.05）。隔药灸组胃黏膜损伤指数低于西药组(P<0.01),I型胶原蛋白表达高于西药组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：隔药灸能够改善急性胃黏膜损伤家兔“后三里”穴穴区线粒体形态、提高急性胃黏膜损伤家兔后三里穴局部组织的I型胶原蛋白的表达,这可能是其修复胃黏膜损伤的起效途径之一。     

艾灸对慢性萎缩性胃炎大鼠外周血基因表达谱的影响

目的 探讨隔药饼灸对慢性萎缩性胃炎大鼠外周血基因表达谱的影响，为后续研究提供研究方向。方法 将雄性Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、隔药饼灸组、电针组和西药组，均采用MNNG诱导CAG大鼠模型，取穴中脘、气海，隔药饼灸每次每穴1壮，每日1次，共4周；电针频率100 Hz，强度1-3 mA，20 min，每日1次，共4周；西药采用叶酸悬浊液1.0 mL/100 g灌胃，每天1次，持续4周。采用Trizol法提取各组CAG大鼠的外周血总RNA，质控后建立文库，采用RNA-seq高通量测序，结合生物信息学的方法深入分析隔药饼灸逆转的差异表达基因。结果 与正常组比较，CAG组大鼠外周血有1 542个差异表达基因，涉及的通路主要有癌症、免疫疾病、能量代谢、消化系统、免疫系统通路。隔药饼灸干预CAG大鼠的外周血差异表达基因2 956个，涉及的通路与分子相互作用、信号转导、癌症、免疫疾病、氨基酸代谢、能量代谢、脂质代谢、维生素代谢、核苷酸代谢、消化系统、免疫系统、神经内分泌系统等相关；电针干预CAG外周血的差异表达基因3 136个，涉及的通路与癌症、免疫疾病、氨基酸代谢、能量代谢、脂质代谢、维生素代谢、核苷酸代谢、消化系统、免疫系统、神经内分泌系统等相关；西药干预CAG外周血差异表达基因1 308个，涉及的通路与蛋白翻译、信号转导、癌症、免疫系统、消化系统等相关。经RT-qPCR验证，各组外周血Foxo3、Uba52、S100a1、Nod2的结果和RNA-seq测序结果一致。结论 隔药饼灸、电针和西药干预CAG的外周血差异表达基因的数量不同，西药较针灸改变CAG的差异基因数目少。3种干预方法均能影响CAG大鼠外周血免疫相关、肿瘤相关的基因表达谱，隔药饼灸和电针干预的差异基因还涉及能量、氨基酸、脂质、维生素代谢。     

温和灸对溃疡性结肠炎大鼠天枢穴P2RX7的作用机理研究

目的：溃疡性结肠炎（UC）是艾灸治疗的有效病症,本研究从艾灸作用的始动环节与穴位响应密切相关的角度,探讨温和灸的对穴区P2X嘌呤受体7表达的影响。方法：将20只SD雄性大鼠随机分成正常组6只、模型组14只。采用自由饮用4%葡聚糖硫酸钠（DSS）法建立UC模型,连续饮用7天后,取2只大鼠进行模型鉴定,造模成功后将剩下的12只大鼠随机分成UC组、UC+温和灸组,第8天改为自由饮用1%DSS溶液,第8天开始采用温和灸天枢穴（双）干预7天,每天10min。疗程结束后,称量大鼠体质量、取双侧天枢穴皮肤,采用HE 染色观察病理组织学形态变化,采用免疫组化法对P2RX7 的蛋白检测,从分子水平观察温和灸对天枢穴皮肤的作用;采用qRT-PCR的方法检测P2RX₇在天枢穴皮肤中的表达。结果：与正常组比较,UC组体质量于第4天开始明显降低（P<0.05）,天枢穴P2RX₇基因的mRNA表达水平降低（P<0.05）,天枢穴皮肤中主要分布在真皮层皮脂腺中的P2RX₇明显减少（P<0.05）。与UC组比较,UC+温和灸组在第8天明显增加（P<0.05）,天枢穴P2RX₇基因mRNA表达水平增高（P<0.05）,天枢穴皮肤P2RX₇主要分布在皮脂腺中的明显增加（P<0.05）。温和灸干预后所增加体重与天枢穴P2RX₇免疫组化IOD值的相关系数r=0.823（P<0.05）。结论：温和灸能明显增加UC大鼠体重,其起效的机制可能与上调天枢穴位皮肤P2X嘌呤受体7密切相关。     

Effects of moxibustion pretreatment on extracellular signal-regulated kinase signaling transduction pathway in the gastric tissues of rats with gastric mucosal damage

Objective

To observe the effects of moxibustion pretreatment on the protein expressions of epidermal growth factor receptor (EGFR), phosphorylation extracellular signal-regulated kinase 1/2 (p-ERK1/2) and activated protein-1 (AP-1), the key factors of extracellular signal-regulated kinase signaling transduction pathway in gastric tissue of rats with stress-induced gastric mucosal damage, and to discuss the mechanisms of moxibustion therapy in promoting the restoration of damaged gastric mucosa.

Methods

Thirty Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into a normal group, a model group, and a moxibustion group using the random digits table, 10 in each group. Except the rats in the normal group, rats in the other two groups were used to make stress-induced gastric mucosal damage model using restraint and cold stress. Before modeling, rats in the moxibustion group were alternately treated with moxibustion at Zusanli (ST 36) and Zhongwan (CV 12), or Pishu (BL 20) and Weishu (BL 21), once a day, for a total of 8 d. Histological changes of gastric mucosa were observed under the light microscopy, the expression of gastric tissue p-ERK1/2 was detected by immunohistochemistry assay, and the protein levels of EGFR and AP-1 were measured by Western blots.

Results

Compared with rats in the normal group, gastric mucosal damage was more serious, and protein expressions of gastric tissue EGFR, p-ERK1/2 and AP-1 increased in the model group (P<0.01, P<0.05, P<0.05). Compared with rats in the model group, gastric mucosal damage was milder, and protein expressions of gastric tissue EGFR, p-ERK1/2 and AP-1 increased in the moxibustion group (all P<0.01).

Conclusion

Moxibustion at Zusanli (ST 36), Zhongwan (CV 12), Pishu (BL 20) and Weishu (BL 21) could increase EGFR, p-ERK1/2 and AP-1 expression levels in gastric tissue of stress-induced gastric mucosal damage rats, maintain the information transfer function of ERK signaling transduction pathway, and promote restoration of gastric mucosal damage.

     

隔药饼灸对急性胃黏膜损伤家兔腧穴局部能量代谢的影响

目的:观察隔药饼灸对急性胃黏膜损伤家兔黏液层阳性层厚度和腧穴局部组织Na+/K+-ATP酶活性的影响,探讨隔药饼灸治疗急性胃黏膜损伤的机制。方法:采用无水乙醇损伤造模法建立急性胃黏膜损伤模型,将40只家兔随机分成正常组和造模组,待模型在确定后,造模组家兔再随机分成模型组、隔药饼灸组和西药组,每组9只。隔药饼灸组将制好的药饼置于后三里穴上,灸6壮,1次/d,连续灸7 d。其他各组仅做与隔药灸组相同的固定,不予任何治疗,共7 d。干预后,收集胃黏膜组织和后三里穴组织,分别按照实验处理要求做相应的处理。结果:隔药饼灸组胃黏膜黏液层阳性厚度较模型组明显增厚(P0.05),隔药饼灸组后三里穴的Na+/K+-ATP酶活性较模型组显著升高。结论:改善"后三里"腧穴能量代谢可能是保护和修复胃黏膜损伤的作用途径之一。     

腧穴热敏化艾灸治疗慢性荨麻疹临床观察

目的:探讨腧穴热敏化艾灸疗法对慢性荨麻疹(CU)的临床疗效。方法:将65例患者随机分为两组,对照组32例,口服氯雷他定分散片(原研);治疗组33例,治疗组采用腧穴热敏化艾灸治疗,观察两组临床疗效及复发率。结果:治疗后,总有效率治疗组81.82%,对照组75.00%,经统计学分析无显著性差异(P>0.05)。治疗后6个月随访,治疗组复发率20.00%,对照组72.72%,差异有显著性(P<0.01)。结论:腧穴热敏化艾灸治疗慢性荨麻疹临床疗效显著,高效、速效,复发率低。     

艾灸对类风湿性关节炎家兔滑膜细胞CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响

目的:观察艾灸对实验性类风湿性关节炎(RA)家兔滑膜细胞的细胞周期蛋白D1(CyclinD1)及周期蛋白依赖激酶CDK4的影响,探索艾灸调控实验性RA家兔滑膜细胞增殖的分子信号机制。方法:以佐剂性关节炎(AA)作为RA疾病模型,艾灸实验性RA家兔双侧"肾俞"穴,采用Western-blot方法检测治疗前后家兔关节滑膜细胞的cyclinD1和CDK4蛋白表达。结果:RA模型组CyclinD1和CDK4蛋白表达明显高于空白组(P0.01),艾灸组CyclinD1和CDK4蛋白表达明显低于模型组(P0.01)。结论:艾灸抑制RA滑膜细胞CyclinD1及CDK4蛋白的过度表达,可能是其调控RA滑膜细胞增殖的重要分子机制。     

正交设计研究艾灸对溃疡性结肠炎大鼠穴区温度和Cx43表达的作用

目的采用正交实验设计方法,观察麦粒灸三因素三水平不同灸量对溃疡性结肠炎（UC）大鼠穴区温度和Cx43表达的影响。方法 90只SD大鼠随机抽取8只作为正常组,余82只大鼠采用免疫学方法加局部刺激制备UC模型,在确认模型成功的基础上分为模型组与麦粒灸干预组,麦粒灸干预组又随机分为9个不同灸量干预亚组,以三因素（频次、疗程、壮数）三水平组成的灸量于UC大鼠双侧天枢穴施麦粒灸。结果与结论麦粒灸三因素三水平组合的不同灸量对UC大鼠灸后即刻、灸后5min穴区皮肤温度以及Cx43阳性表达具有不同的影响,对灸后10min穴区皮肤温度的影响无显著差异。艾灸壮数是影响灸后即刻穴区皮肤温度的主效应因素,2次/d、3壮/次、5d的灸量组合作用最显著;频次是影响灸后5min穴区皮肤温度的主效应因素;疗程是影响灸后穴区Cx43阳性表达的主效应因素,1次/2d、3壮/次、10d的灸量组合作用最显著。     

槲皮素阻断热休克蛋白70表达对艾灸预处理抑制胃黏膜损伤细胞凋亡的影响

目的通过槲皮素灌胃阻断热休克蛋白（HSP）70表达,观察艾灸预处理对大鼠急性胃黏膜损伤指数及细胞凋亡的影响,以进一步探明艾灸的细胞保护作用及其与HSP70的关系。方法40只大鼠随机分为捆绑对照组（A组）、模型组（B组）、艾灸＋模型组（C组）、槲皮素＋艾灸＋模型组（D组）、槲皮素＋模型组（E组）。D、E组每日采用槲皮素灌胃。C、D组每日艾灸足三里、梁门,以上处理共8 d。第9日,B、C、D、E组均采用无水乙醇灌胃制作大鼠急性胃黏膜损伤模型。采用western-blot方法检测胃黏膜HSP70蛋白表达;TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡指数（AI）。结果与A组比较,模型组大鼠胃黏膜AI明显增高（P〈0.05）,胃黏膜HSP70表达升高（P〈0.01）。与B组相比,C组大鼠AI明显降低（P〈0.05）,HSP70表达显著升高（P〈0.01）;D组大鼠胃黏膜AI值明显增加（P〈0.01）,HSP70表达未见上调。与C组相比,D组大鼠胃黏膜AI值升高明显（P〈0.01）,HSP70表达明显下调。结论艾灸预处理上调胃黏膜HSP70表达,急性病胃黏膜损伤所致的细胞凋亡被抑制。槲皮素阻断HSP70合成后,艾灸预处理抑制急性胃黏膜...     

艾灸对HCC癌前病变大鼠细胞周期调控基因cyclinD1、cdk4影响的实验研究

目的:本文旨在研究艾灸对原发性肝细胞肝癌(HCC)癌前病变大鼠相关细胞周期调控基因cyclinD1、cdk4的影响。方法:将74只SD大鼠,分为3组,分别为空白组(20只)、模型组(27只)、艾灸组(27只),模型组用二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠逐步建立起HCC的模型,艾灸组从造模初期直至造模成功,全程给予足三里穴麦粒灸治疗,采用免疫组化检测方法观察对相关细胞周期调控基因cyclinD1、cdk4的影响。结果:艾灸对HCC癌前病变大鼠能较为明显抑制相关细胞周期调控基因cyclinD1c、dk4的过度表达。结论:艾灸可能对减缓HCC癌前病变的形成有一定作用,这种作用与抑制细胞周期调控基因cyclinD1c、dk4过度表达有关。