基于指纹图谱及多元统计分析评价藿香清胃片质量

摘要：目的:建立藿香清胃片的HPLC指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法:采用CAPCELL PAK C18?MGⅡ色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,流动相为乙腈（A）-0.15%磷酸溶液（B）,梯度洗脱,流速：0.95 ml·min-1,切换检测波长：210 nm（检测熊果酸）、240 nm（检测栀子苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷及甘草苷）、258 nm（检测栀槲皮素及香草酸）、309 nm（检测广藿香酮、藿香黄酮醇及毛蕊花糖苷）,柱温：30℃,进样量：10μl。建立藿香清胃片的指纹图谱,根据相似度评价,结合化学计量学方法对藿香清胃片进行质量评价。结果:建立15批藿香清胃片的HPLC指纹图谱,共确定24个共有指纹峰,通过与对照品比对指认了10个成分;15批藿香清胃片的指纹图谱相似度为0.972～0.998,通过聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,15批样品分成3类,分类结果与厂家呈相关性,并发现5个差异性标志物。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法重复性好、专属性强,可为藿香清胃片的质量控制提供依据和参考。     

消乳散的UPLC指纹图谱

目的建立中药复方制剂消乳散的UPLC指纹图谱,对制剂进行质量控制。方法采用Kromat Universil XB C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm),以乙腈-质量分数为0.1%的磷酸水为流动相,进行梯度洗脱,柱温:30℃,流速:0.1 m L·min-1,检测波长:254 nm;建立消乳散的UPLC指纹图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件"对10批制剂进行相似度评价,并指认其特征峰。结果建立的消乳散UPLC指纹图谱共标示出16个共有峰,10批制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度的均值为0.989~0.998,均大于0.90,满足质量要求。结论上述建立的UPLC指纹图谱精密度、重复性和稳定性均良好,可以用于消乳散的质量评价,可为消乳散的整体质量控制提供科学依据。     

葛花配方颗粒的UPLC指纹图谱研究

目的:建立葛花配方颗粒的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱。方法:采用UPLC法。色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.5 mL/min,检测波长为264 nm,柱温为25℃,进样体积为1μL。以鸢尾苷元为参照物,测定10批葛花配方颗粒的UPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004 A版)进行共有峰指认和相似度评价。结果:10批葛花配方颗粒的UPLC图谱有14个共有峰,相似度均>0.90。经验证,10批样品UPLC图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论:该研究所建UPLC指纹图谱可为葛花配方颗粒的鉴别和质量评价提供参考。     

中药复方制剂补肾壮阳胶囊高效液相指纹图谱研究

目的：建立中药复方补肾壮阳胶囊（WSKY）的HPLC指纹图谱,对不同批次间制剂进行质量控制。方法：色谱柱：采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-水（各含体积分数为0.1%的甲酸）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,进样量10 μL,柱温30℃,检测波长270 nm;建立补肾壮阳胶囊HPLC指纹图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件"对12批制剂进行相似度评价,通过比对化学分离对照品的保留时间对主要特征峰进行明确化学指认并初步确定组方中药来源。结果：建立的补肾壮阳胶囊HPLC指纹图谱的专属性、精密度、重复性和稳定性均良好;12批制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.921~0.970之间;覆盖该复方13味组方中药的13个共有特征指纹峰得到明确的化学指认。结论：上述建立的主要特征峰化学成分明确的HPLC指纹图谱基本反映该中药复方制剂中各味组方中药,多成分的整体特征,可以用于市售前产品的质量评价,以上工作可为提高WSKY整体质量控制方法提供实验依据。     

不同厂家雷公藤多苷片的超高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱结合化学计量学方法,评价不同厂家生产的雷公藤多苷片质量。方法 采用Waters Cortecs T3色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.6μm）;乙腈-水系统为流动相,梯度洗脱;流速0.4mL·min-1;检测波长220 nm。采用ChemPattern软件建立指纹图谱共有模式,并进行相似度评价、主成分分析和聚类分析。同时采用超高压液相色谱-飞行时间质谱（UPLC-QTOF-MS）技术对共有峰进行鉴定。结果 建立了9个厂家共25批雷公藤多苷片的UPLC指纹图谱,标识51个共有峰,鉴定了其中23个色谱峰的结构,发现多数为生物碱类成分。25批样品的相似度为0.18～0.99,存在不同厂家制剂成分差异较大、部分厂家批次间质量不稳定的问题。主成分分析和聚类分析将9个厂家制剂分为3类,并筛选出3个主要差异性成分。结论 UPLC指纹图谱能够反映不同厂家雷公藤多苷片的成分差异,结合化学计量学方法,可为雷公藤多苷片的质量评价提供参考。     

小儿柴桂退热颗粒的UPLC指纹图谱及聚类、主成分分析

目的:建立小儿柴桂退热颗粒的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并进行聚类分析与主成分分析。方法:采用UPLC法,色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18,流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.5 m L/min,检测波长为260 nm,柱温为40℃,进样量为0.5μL。以葛根素为参照,测定14批小儿柴桂退热颗粒样品的UPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)对14批样品进行相似度评价,确定共有峰。采用SPSS 19.0软件进行聚类分析与主成分分析。结果:14批样品的UPLC图谱有15个共有峰,相似度均>0.90;经验证,14批样品UPLC图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。14批样品可聚为两大类。结论:所建指纹图谱可为小儿柴桂退热颗粒的质量评价提供参考。     

小儿宣肺止咳糖浆HPLC指纹图谱的建立

摘要：目的:建立小儿宣肺止咳糖浆的HPLC指纹图谱,为其质量研究提供依据。方法:采用HPLC法,色谱柱:Inert Sustain C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相:乙腈-0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1;检测波长:280 nm;柱温:30℃。测定10批小儿宣肺止咳糖浆样品,运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012版）建立小儿宣肺止咳糖浆指纹图谱共有模式,并对色谱峰进行指认。结果:建立的小儿宣肺止咳糖浆HPLC指纹图谱精密度和稳定性均良好,标定了17个共有峰,指认了7个色谱峰,10批小儿宣肺止咳糖浆样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度值均大于0.9。结论:首次建立了小儿宣肺止咳糖浆的HPLC指纹图谱,该方法简单可靠,为小儿宣肺止咳糖浆的质量控制和评价标准提供了依据。     

痰热清注射液中熊胆粉提取物的UPLC指纹图谱研究

摘要：目的:建立痰热清注射液中熊胆粉提取物的UPLC指纹图谱产品质量控制方法,缩短分析时间。方法:采用高分辨质谱技术对痰热清注射液（TRQI）中熊胆粉提取物的共有峰进行了归属,共鉴定出4个胆酸类成分。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（0.3 cm×10 cm,1.7μm）,以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速:0.6 ml·min-1,柱温:35℃,检测波长:203 nm,建立了痰热清注射液中熊胆粉提取物的UPLC指纹图谱分析方法。结果:采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版"对33批痰热清注射液指纹图谱进行评价分析,各批次痰热清注射液与对照指纹图谱间的相似度均大于0.99。结论:本方法首次建立了痰热清注射液中熊胆粉提取物的UPLC指纹图谱,分析时间小于10 min,大幅提升了质控效率。     

心可舒系列制剂UPLC特征图谱的研究

目的： 建立心可舒系列制剂的UPLC特征图谱，为全面评价其内在质量提供参考。方法： 采用Thermo Syncronis C18 (2.1 mm×150mm, 5μm)色谱柱；以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，流量为0.3 ml?min-1；柱温30℃；检测波长287nm。结果： 心可舒系列制剂特征图谱共有12个特征峰，采用对照品及质谱信息推断，指认了10个特征峰；采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版本）》对特征图谱进行相似度分析，以特征峰峰面积为变量，采用SIMCA-P软件进行主成分分析，很好地区分了各剂型与各企业产品。结论： 建立的特征图谱专属性强，重现性好，可用于心可舒系列制剂的质量评价。     

茵栀黄颗粒的HPLC指纹图谱研究及共有峰归属分析

目的：建立茵栀黄颗粒的HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行归属分析和指认,以科学评价及有效控制该制剂质量。方法：采用Kromasil C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长238 nm,柱温30℃。测定20批茵栀黄颗粒样品指纹图谱,建立共有模式,并采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2004A版）进行相似度评价;通过与各对照品保留时间比对,对共有峰进行归属分析和确认。结果：以栀子苷峰为参照峰,建立了茵栀黄颗粒的HPLC指纹图谱,确定了29个共有峰,并对其中的16个色谱峰进行了指认及归属。20批茵栀黄颗粒样品指纹图谱经相似度评价,其相似度均大于0.95。结论：该法所建立的指纹图谱能较全面地体现茵栀黄颗粒中组分的整体特征,为茵栀黄颗粒的质量控制提升提供了依据。     

三叉神经散的UPLC指纹图谱研究

目的建立三叉神经散的UPLC指纹图谱研究方法,为三叉神经散质量标准的制定提供参考。方法采用反相超高效液相色谱法,以体积分数0.2%磷酸水-乙腈溶液为流动相,进行梯度洗脱,采用Kromat Universil XB C_(18)(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,流速为0.2 m L·min~(-1),检测波长为320 nm,柱温为30℃,进样量为2μL,建立三叉神经散的UPLC指纹图谱。运用"中药色谱指纹图谱相似度评价"系统软件进行相似度评价,并进行特征峰指认。结果以咖啡酸为内参比峰,对三叉神经散的18个共有峰进行药材归属,并指认出4个色谱峰。结论本方法建立的三叉神经散指纹图谱重复性佳,可进行有效部位的主要色谱峰指认,为三叉神经散的图谱鉴定和质量控制提供了依据。     

安徽产留兰香药材超高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立安徽产留兰香药材的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱。方法采用UPLC法,色谱柱为Agilent EclipsePlus C_(18),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.30 mL·min~(-1),检测波长为210 nm,柱温为30℃,进样量为1.0μL。以迷迭香酸为参照,测定10批药材样品的UPLC-UV图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行共有峰标定和相似度评价。结果 10批留兰香药材UPLC指纹图谱共标定12个共有峰,10批样品的相似度均在0.9以上。结论本文所建立的指纹图谱可为安徽产留兰香药材的质量评价提供参考。     

穿山龙超高效液相色谱特征指纹图谱的研究

目的建立穿山龙药材的超高效液相色谱(UPLC)特征指纹图谱分析方法。方法采用Agilent Poroshell 120Bonus-RP色谱柱(50 mm×3.0 mm,2.7μm);流动相:乙腈–水,梯度洗脱;体积流量:0.8 m L/min;检测波长:203 nm;柱温:25℃;进样量:10μL。应用相似度分析软件建立穿山龙药材指纹图谱的共有模式,并对色谱峰进行指认。结果建立了穿山龙药材的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了14个共有峰,指认了其中3个共有峰,10批穿山龙药材的相似度为0.9以上。通过聚类分析,将13批穿山龙药材聚为4类。结论该方法快速,可用于评价穿山龙药材质量。     

用HPLC指纹图谱全定性全定量控制通宣理肺丸质量

目的建立通宣理肺丸HPLC指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法,以色谱指纹图谱指数F为目标函数优化选择指纹图谱条件,以双定性相似度（SF与SF′）和双定量相似度（C与P）评价通宣理肺丸真实质量。结果以黄芩苷峰为参照物峰,确定了77个共有峰,通过聚类分析确定用10个厂家制剂生成对照指纹图谱（RFP）,以此评价14个不同厂家的通宣理肺丸质量。结论所建立的HPLC指纹图谱特征性、专属性强且有较好的稳定性,为通宣理肺丸质控提供了新参考。     

柴银口服液快速HPLC特征指纹图谱研究

目的：建立柴银口服液的快速HPLC特征指纹图谱,为质量控制与评价提供依据.方法：对 10 批次柴银口服液进行分析.色谱柱：Purospher STAR RP-18 endcapped（55 mm×215;4 mm,3 μm）;流动相：甲醇（A）-2%冰醋酸（B）,梯度洗脱.检测波长：254 nm;流速：1.0 m·min^-1;柱温：30 ℃;进样量：10 μl;运行时间：15 min.结果：采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版》进行分析,确定 16个共有峰,精密度、稳定性和重复性试验结果均符合指纹图谱研究的要求,建立了柴银口服液的对照特征图谱,并进行相似度分析.结论：该法快速、简单、可靠,可以为现有柴银口服液的质量控制提供有益的补充.     

艾叶挥发性成分与非挥发性成分指纹图谱分析

摘要：目的:建立艾叶挥发性成分与非挥发性成分指纹图谱分析方法,为艾叶综合质量评价提供依据。方法:采用GC方法,色谱柱为HP-5毛细管柱（30 m×320μm,0.25μm）,程序升温,对艾叶的挥发性成分进行指纹图谱分析。采用HPLC方法,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,以0.2%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,对艾叶非挥发性成分进行指纹图谱分析。采用质谱技术鉴定艾叶的主要成分。采用国家药典委员会2012年版“中药指纹图谱相似度评价系统”对上述结果进行相似度评价。结果:挥发性成分指纹图谱共标定了9个共有峰（主要包含单萜、烯烃、烷烃类成分）,22批艾叶相似度在0.936～0.997之间,以湖北蕲春所产艾叶（蕲艾）的挥发性成分质量最好;非挥发性成分指纹图谱共鉴定了10个共有峰（主要包含有机酸、黄酮类成分）,22批艾叶相似度在0.902～0.991之间,以安徽太和所产艾叶的非挥发性成分质量最好。结论:所建立的分析方法,稳定可靠,重复性好,为艾叶的综合质量评价提供了实验依据。     

基于指纹图谱及多元统计分析法评价杞菊地黄丸的质量

摘要：目的:建立杞菊地黄丸的HPLC指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法:色谱柱:Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm, 5μm）;流动相:乙腈-0.3%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量:0.6 ml·min-1;检测波长:254 nm;柱温:40℃;进样量:10μl。建立杞菊地黄丸的指纹图谱,根据相似度评价,结合化学计量学方法对杞菊地黄丸进行质量评价。结果:建立25批杞菊地黄丸的HPLC指纹图谱,共确定26个共有指纹峰,通过与对照品比对指认了8个成分;25批样品指纹图谱相似度为0.731～0.981,通过聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,25批样品分成4类,分类结果与厂家呈相关性,并发现16个差异性标记物。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法重复性好、专属性强,可为杞菊地黄丸的质量控制提供依据和参考。     

复方穿心莲片HPLC指纹图谱研究

目的：建立复方穿心莲片指纹图谱研究方法,为复方穿心莲片的质量标准提出修订建议。方法：采用Thermoscientific Syncronis aQ C18（4.6 mm × 250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱;以270 nm为检测波长,柱温为30 ℃,流速为1.0 mL·min-1,建立复方穿心莲片指纹图谱,利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）”对市售65批次复方穿心莲片进行相似度评价。 结果：建立的复方穿心莲片指纹图谱共确定6个共有峰,65个批次相似度在0.449~0.994之间差异较大,平均值为0.927,考虑到药材的来源及大生产带来的影响,认为供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度应不得低于0.90较为合理。结论：本方法稳定可控,可用于复方穿心莲片的质量控制。     

辛夷UPLC指纹图谱及化学模式识别研究

摘要：目的:采用UPLC法建立辛夷的指纹图谱,并结合化学模式识别对辛夷药材质量进行分析和评价。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18?RRHD（2.1 mm×50 mm,1.8μm）色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为278 nm,建立18批辛夷药材的指纹图谱,通过相似度分析并结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）对辛夷药材的质量进行分析评价。结果:建立的指纹图谱共标定19个共有峰,根据对照品保留时间、紫外吸收光谱和质谱等信息,鉴别5个共有峰,18批辛夷药材指纹图谱的相似度均大于0.90,表明该药材总体质量较为稳定,但通过CA及PCA均发现不同产地药材之间存在差异,通过OPLS-DA筛选出对不同产地药材差异影响最大的5个共有峰。结论:建立的药材分析方法能够更加全面、快捷、准确地评价辛夷药材的质量,为辛夷药材的质量控制提供科学依据。     

牡丹皮炒制前后UPLC特征指纹图谱比较

目的:建立牡丹皮炒制前后的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并进行比较。方法:采用UPLC法。色谱柱为Acquity UPLC BEH C18,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为0.4 ml/min,检测波长为254 nm,进样量为2μl。以丹皮酚为参照峰分别测定10批牡丹皮、丹皮炭的特征指纹图谱,并采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对所建立的指纹图谱进行评价。结果:牡丹皮炒制前后特征指纹图谱有明显差异,其中以5-羟甲基糠醛和芍药苷的变化最为显著。结论:该方法能快速、有效地反映出牡丹皮炒制前后的成分变化。本研究所建立的指纹图谱可为牡丹皮饮片的炒制工艺与质量评价提供科学依据。