检测乙、丙型肝炎病毒基因芯片的制备

目的：探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法：以HBV、HCV高度保守的基因片段为探针,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸,进行RT－PCR扩增及荧光标记,然后与双检基因芯片杂交,结交结果用ScanArray3000扫描仪扫描。结果：双检基因芯片的内参照结果能做到绝对阳性和绝对阴性,同时对不同血清（正常人血清,乙肝E抗原阳性血清,丙肝RNA阳性血清,乙肝、丙肝阳性混合血清）能有效检测区分。结论：本研究成功地制作了乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片,可望使用于临床。     

基因芯片技术检测乙、丙型肝炎病毒临床研究

探讨基因芯片技术在乙、丙型病毒检测的作用。方法用迈科锐HBV、HCV联合基因芯片检测血清HBV-DNA和HCV-RNA。结果基因芯片检测42例HBV-DNA的检出率为86％(26/30),符合率为88％(37/42),假阳性为8％(1/12)。检测HCV-RNA检出率为71％(5/7)。符合率为92％(39/42),假阳性为2％(1/35)。结论 HBV、HCV联合基因芯片检测HBV-DNA和HCV-RNA有较好的敏感性和特异性。     

乙,丙型肝炎病毒重叠感染临床研究

目的 了解徐州地区慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）重叠感染情况。方法 对徐州地区２４７例慢性乙型肝炎患者（ＣＨＢ）进行血清丙型肝炎抗体（抗－ＨＣＶ）及丙型肝炎病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ）重叠感染与单纯ＨＢＶ感染患者的临床资料进行比较。结果 （１）徐州地区ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染率为１２．９６％（３２／２４７）。（２）重叠感染者的年龄、血清丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）     

基因芯片技术检测乙型肝炎病毒基因型

目的建立乙型肝炎病毒（HBV）基因分型检测芯片方法,并检测其特异性、敏感性和稳定性。方法收集HBV各基因型序列,并对比分析后,设计7支探针,制成HBV基因型检测芯片;对芯片检测的实验条件进行探索,分析其检测特性。结果实验条件优化为杂交温度39℃,试验统计结果判定为荧光信号软件输出值在30以上为阳性,30以下为阴性。正常对照组的健康人和非HBV的常见病毒芯片检测结果均为阴性,实际应用检测30份HBV DNA阳性临床留取的样本,结果 19份为C型,11份为B型,抽查2份标本测序观察,结果与芯片检测结果完全一致。用HBV基因B型、C型标准品考察,检测符合率为100%,芯片检测的最低病毒拷贝数为104拷贝/ml,芯片检测的总变异度为9%、芯片内变异度为2%,芯片能同时检测不同基因型的重叠感染。用加速试验评价芯片的稳定性,结果检测荧光信号值有所下降,但下降后的信号值未低于检测临界值30,试剂盒性能较为稳定。结论使用HBV基因型检测芯片进行HBV基因分型操作简便、敏感性高、特异性好、方法可靠。     

基因芯片检测血清标本的丙型肝炎病毒基因型

目的：探讨丙型肝炎病毒(HCV)基因分型检测芯片在临床的初步应用及意义。方法：基因芯片检测150例血清标本中HCV基因型，并与HCVRNA定性及测序结果进行比较。结果：HCV基因分型检测芯片检出的阳性结果与HCV—RNA定性及测序结果的相对符合率为100．0％。结论：HCV基因分型检测芯片是一种准确性好、灵敏度高、特异性强、操作简便快速的基因检测方法，可以为临床诊断、治疗提供有力保证。     

基因芯片技术检测丁型肝炎病毒的研究

目的 制备检测丁型肝炎病毒(HDV)基因芯片。方法 针对HDV基因保守区域设计多对PCR引物。用芯片点样仪将PCR产物点到玻片上制成基因芯片。样品标记采用限制性显示技术，样品标记后进行杂交。结果 运用PCR技术得到多个HDV特异性基因片段，序列分析表明，所扩增的片段均属于HDV特异基因。杂交结果显示，样品和HDV诊断基因芯片杂交的敏感性和特异性均佳。结论 用基因芯片检测HDV具有敏感、高效、检测结果可靠的优点，有着较大的应用前景。     

基因芯片技术在检测乙型肝炎病毒 P区YMDD变异中的研究

目的 用基因芯片检测未经抗病毒治疗的HBV DNA阳性血清中HBV P区YMDD变异情况,从分子生物学角度了解YMDD两种变异的状态,为科学合理地指导临床抗病毒治疗及预测患者临床预后提供有力的依据。方法 将150份未经抗毒治疗的HBV DNA阳性血清,用PCR方法扩增P区,扩增产物与基因芯片上的寡核苷酸进行杂交,杂交结果通过扫描仪扫描到计算机上,经软件分析可得到HBVY MDD野生型及其YVDD和／或YIDD变异型结果,并对部分阳性标本用基因序列测序证实。结果 150份HBV DNA阳性血清,用基因芯片方法检出阳性标本(包括YMDD野生型和变异型)共122例,占81．3％,阴性标本28例,占18．7％;在122例阳性标本中,单纯YMDD野生型(即无变异标本)有90例,占73．8％;YVDD变异28例,占22．9％;YIDD变异2例,占1．6％;YVDD和YIDD混合变异2例,占1．60A,,变异株检出率为26．2％,而且变异株均与野生株共存。其中8份阳性标本进行基因序列测序,证实与芯片检测结果完全一致。结论(1)用当前先进的基因芯片技术检测HBVP区YMDD变异,操作简便,结果可靠,特异性高。(2)基因芯片可快速、同时、多人份检出HBVYMDD野生株及其YIDD和／或YVDD突变株的共同感染。(3)部分HBV感染者在未经抗病毒治疗情况下已自然存在HBV YMDD变异,而且变异株均与野生株共存,其中以YVDD变异为多。(4)HBV感染患者在治疗前后有必要检测是否存在HBV YMDD变异株感染,为指导临床科学合理用药和制定治疗方案提供依据。     

基因芯片技术及其在肝炎病毒检测中的应用

基因芯片(或DNA芯片、微阵列)是近年发展起来的新的分子生物学研究工具。在1cm左右的芯片上可以同时分析几百至数万个基因，具有高通量、快速获取有关生物学信息的特点，在基因表达谱分析、疾病诊断和预测、病原体检测、药物筛选等方面具有广阔的应用前景。病毒性肝炎是一种重要传染病，基因芯片将在肝炎病毒的检测中显示其价值。     

PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较5

目的：探讨PCR与ELISA2种方法检测丙型肝炎病毒和惭型肝炎病毒的差异和临床意义。方法：随机抽取无偿献血者标本300份，分为ALT升高组和ALT正常组，用ELISA法检测抗－HCV和HbsAg，用RT－PCR检测HCV－RNA和HBV－DNA。结果：抗－HCV阳性标本26例阳性率为8．7％，经RT－PCR检测，HCV－RNA均为阳性，抗HCV阴性的标本中有2例HCV－RNA为阳性。HCV－RNA的阳性率为16％，2种方法检测结果差异有统计学意义（P＜0．01）；300份标本中HBsAg阳性和HBV－DNA阳性比率分别为11．3％和12．7％，两者无明显差异（P＞0．05）。结论：ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象，应用RT－PCR检测HCV－DNA利于早期诊断，也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法。     

丙型肝炎病毒抗原检测

目的 探讨在HCV感染早期,HCV Ab为阴性时用酶联免疫法检测HCV核心抗原的试验方法的可行性.方法 用重组HCV核心抗原,免疫小鼠制备单克隆抗体,对HCV核心抗原进行酶联免疫法检测.结果 HCV核心抗原检测灵敏度高可达5ng/ml,用酶联法对11份HCV Ab阴性,HCV RNA阳性标本检测9份阳性.结论 酶联免疫法检测HCV核心抗原可作为HCV感染早期的抗原检测方法 ,较HCV RNA检测法简便、快速,可以作为核酸检测法的一种简易替代方法.     

196例乙,丙型肝炎病毒混合感染的临床分析

分析ＨＢＶ合并ＨＣＶ感染的慢性肝炎３２例的临床表现、肝功能和病毒标示物的检测结果，提示ＨＢＶ合并ＨＣＶ感染的慢性肝炎病情重、并发症多、易复发、重型肝炎和肝硬化发生率高、肝功能损害严重和病死率高，与冱ＨＢＶ或ＨＣＶ感染的慢性肝炎的病例比较，有非常显示性差异（Ｐ〈０．０１）。未提示ＨＣＶ干扰ＨＢＶ复制现象。     

丙型肝炎病毒实验室检测技术进展

分子生物学技术是临床诊断和治疗监测慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染的常用手段。这些技术可以检测和定量病毒核酸并且分析核酸序列,确定HCV的基因型和亚型,识别病毒的耐药突变位点。实时荧光技术,由于敏感性高,特异性好,已广泛应用于HCV感染的临床诊断和治疗监测;下一代基因测序技术可明显提高测序深度,但目前多限于科学研究。该文回顾性分析了用于HCV感染诊断的实验室检测技术。     

甲乙丙型肝炎病毒重叠感染检测分析

目的　了解甲型肝炎病毒 (HAV)、乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV)重叠感染情况。方法　应用ELISA法分别对 2 83重叠感染者检测血清抗 -HAV、抗 -HCV和HBV -M ,并比较各型临床类型各型病毒的感染情况。结果　肝炎病毒感染者中HBV的感染率最高 86.9% ,HAV和HBV的重叠感染最多 42 8% ,HBV和HCV重叠感染次之 3 2 9%。结论　甲、乙、丙型肝炎病毒可以重叠感染 ,以HBV的感染为主 ,重叠感染加重病情。     

丙型肝炎病毒检测与抗体检测的比较

应用ELISA法检测抗-HCV抗体的阳性检出率不及PCR法检测HCV RNA。据文献报道HCV的感染率高于抗-HCV抗体检测的结果,而PCR法可检出携带者血内少量的丙型肝炎病毒,因此被视为较有效的检测手段。我们对本院各科送检丙型肝炎的部分标本及少量献血员标本进行抗-HCV抗体和HCVRNA的检测,以比较两种方法在临床检验中的意义。     

丙型肝炎病毒抗体的临床检测分析

丙型肝炎病毒（HCV）曾称为肠道外传播的非甲非乙型肝炎病毒。1988年Coo等用分子克隆技术获得HCV的基因克隆。1991年将其归类为黄病毒科丙型肝炎病毒属。主要经血液、体液传播。随着对HCV认识的不断深入，许多检测方法问世。从抗体检测到病原体检测以及感染性、生化指标的检测，形成了对HCV的全方位检测，极大地提高了HCV诊断的准确率。丙型肝炎病毒抗体的检测，是目前应用最广泛的用于流行病学调查、临床丙型肝炎患者的筛查和诊断的检测项目，为丙型肝炎的早发现、早治疗提供可靠的依据。     

丙型肝炎病毒在乙型肝炎病毒感染中的作用

<正> 丙型肝炎病毒(HCV)与乙型肝炎病毒(HBV)和丁型肝炎病毒(HDV)具有相似的传播途径。30％的HCV感染病例有肠道外暴露史或属于高危人群,像接触血液或血液制品,静脉内药物滥用,以及血液透析。有一部分HCV感染被解释如隐匿型感染像反复使用接种针头,甚至咬伤和抓伤都可能传播HCV。然而仍有一部分HCV感染无法解释其传播途径。尽管感染HCV不如感染HBV或HDV那么容易,但感染HBV或HDV时也有感染HCV的危险。而且有可能同时或共同感染,即在已慢性感染一种病毒的患者体内可以附加另一种病毒的感染。以往研究肝炎病毒标志物时,已有慢性HBsAg携带者又附加甲型肝炎病毒(HAV)的急性感染的报道,还发现     

住院儿童甲、乙、丙型病毒性肝炎的发病分析

作者对７６３例住院患儿甲、乙、丙三型肝炎病毒感染情况进行了调查。调查结果：ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ感染率分别为１９．８％、６．０％、１．６％，３种肝炎病毒总感染率２７．４％，单纯抗－ＨＢｓ阳性１１４例，占１４．９％。     

丙型肝炎病毒实验室检测技术的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)是一种主要经血液传播的肝炎病毒,是造成慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌的主要病原之一。HCV属于黄病毒属,为单股正链的RNA病毒,基因组长度约9.6kb,含有单个开放阅读框架(ORF),编码一个由约3010个氨基酸组成的多聚蛋白。到目前为止,丙型肝炎的实验室检测技术主要有抗-HCV检测、HCVRNA核酸扩增检测、HCV核心抗原的检测三种类型。现就HCV实验室检测的研究现状作一综述,为致病机理的研究及抗HCV药物的开发和疫苗的研制等提供理论依据。