NMDA受体对乙醇、乙醛调控大脑皮质神经元神经甾体水平的影响

 目的研究乙醇、乙醛对原代培养大鼠大脑皮质神经元神经甾体水平的影响以及与N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体调控的相关性。方法应用不同浓度乙醇或乙醛处理神经元,同时应用地佐环平(dizocilpine,MK801)阻断NMDA受体,收集细胞培养上清,采用HPLC-MS/APCI法分离测定游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、脱氢表雄酮(DHEA)、别孕烯醇酮(AP)及结合型神经甾体脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)、孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)的含量,观察乙醇、乙醛对原代培养神经元神经甾体水平的影响以及与NMDA受体调控的相关性。结果与PBS对照组相比,25,50,100mmol·L^-1的乙醇均可显著升高神经元培养液中PREGS的水平(P<0.05);25和50mmol·L^-1的乙醇均可显著升高神经元培养液中AP的水平(P<0.05);50mmol·L^-1的乙醇还可显著升高神经元培养液中PREG的水平(P<0.05)。与PBS对照组相比,12.5,25,50mmol·L^-1的乙醛可显著升高神经元培养液中DHEA的水平(P<0.05,P₅₀<0.01);25,50mmol·L^-1的乙醛可显著升高神经元培养液中PREG和DHEAS的水平(P<0.05),12.5mmol·L^-1的乙醛显著降低神经元培养液中DHEAS的水平(P<0.05)、显著升高其AP的水平(P<0.05),50mmol·L^-1的乙醛却显著降低其AP的水平(P<0.05);25mmol·L^-1乙醛还可使神经元培养液中PREGS的水平显著升高(P<0.05)。MK801反转了50mmol·L^-1乙醇升高PREGS水平的作用(P<0.01)以及25mmol·L^-1乙醛升高PREG和DHEAS水平的作用(P<0.01)。结论乙醇、乙醛对神经元神经甾体水平的影响存在着一定的量效关系且对游离型和结合型神经甾体的影响各不相同;NMDA受体阻断了乙醇上调PREGS以及乙醛上调PREG和DHEAS的作用。     

星形胶质细胞和小胶质细胞介导的神经病理痛研究进展

<正>神经病理痛(neuropathic pain,NPP)是一种由疾病或躯体感觉系统的损伤引起的慢性难治性疼痛,可起源于外周或中枢神经系统损伤(三叉神经痛、脊髓损伤)、病毒感染(带状疱疹后遗神经痛)、代谢紊乱(糖尿病性神经痛)、卡压、肿瘤等[1],常表现为自发性疼痛、痛觉过敏或痛觉超敏,严重影响患者的生活质量。目前,神经病理痛的发病机制尚未完全明     

采用脑脊液药理学方法对中药影响星形胶质细胞神经营养作用的观察

目的：探求一种合理有效的研究中药作用于中枢神经系统药效的方法。方法：利用体外细胞培养的方法,以三种不同浓度观察血清、中药血清、脑脊液、中药脑脊液对于星形胶质细胞和神经元的影响。结果：台盼兰染色和ＬＤＨ检测证明正常血清和中药血甭在三种浓度均出现对细胞的毒害作用（Ｐ〈０．０５）,尤以１００μｌ、２００μｌ为重,且在同一浓度时,两组之间没有明显的差异（Ｐ〉０．０５）;ＭＴＴ检测证明中药脑脊液组ＯＤ值明显     

中药对星形胶质细胞活性的影响

星形胶质细胞 (Astroglia ,As)亦即星形细胞(Astrocyte) ,为中枢神经系统 (CNS)内多种胶质细胞中的一类。在正常中枢神经组织中 ,胶质细胞与神经元的比例是 10～ 5 0 :1,而星形细胞是中枢神经系统最主要的大胶质细胞 ,因此是脑内数目最多的细胞 ,对神经元起支持、保护、分隔和营养等作用。近年来 ,中药对星形细胞活性影响的研究有了长足的发展 ,本文对此进行综述。1　As的特征及其在CNS中的意义1 1　星形胶质细胞概况 :人脑中神经元被认为是其基本的构成单位 ,在脑内它们彼胶质细胞紧紧包围 ,胶质细胞的数目较神经元多出 10～ 5 0倍并占…     

中药脑脊液药理学研究方法的初建——对中药影响星形胶质细胞神经营养作用的观察

目的：探求一种合理有效的中药作用于中枢神经系统药效研究的方法。方法：利用体外细胞培养的方法,以３种不同浓度观察血清、中药血清、脑脊液、中药脑脊液对于星形胶质细胞和神经元的影响。结果：苔盼蓝染色和ＬＤＨ检测证明正常血清和中药血清在３种浓度均出现坚细胞的毒害作用,尤以１００,２００μＬ为重,且在同一浓度时,两组之间没有明显的差异。而正常脑脊液组和中药脑脊液进行中药对中枢神经系统的药效观察明显优于血清,     

银杏内酯B作用于星形胶质细胞对神经干细胞趋化影响的体外研究

[目的]考察银杏内酯B(GB)通过作用于脑微环境内星形胶质细胞(AC)对神经干细胞(NSCs)趋化的影响,并探讨其作用机制。[方法]利用Millicell小室建立体外趋化迁移模型,采用糖氧剥夺(OGD)方法损伤AC。GB(10、20、40μM)作用于AC 12 h,计数趋化迁移至Millicell小室下层细胞数目;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GB对AC趋化相关基因VEGF mRNA表达的影响。[结果]GB(10、20μM)作用于AC可显著增加GFP-NSC定向迁移数目(P0.05)。RT-PCR结果显示,GB(102、0μM)可显著上调AC VEGF mRNA表达(P0.05)。[结论]GB可以促进NSCs向损伤的AC趋化,这一过程可能是由VEGF介导的。     

中药对星形胶质细胞活性影响的研究进展

星形胶质细胞在神经系统中的作用越来越受到重视,其功能复杂、分布广泛,已成为生命科学研究的热点.中药对星形胶质细胞新的功能和作用逐渐被发现并证实,研究通过动物实验和体外实验从不同角度探讨可能机制,以期予临床治疗神经系统疾病提供新的有效途径.同时从单味提取物、复方两方面,将中药对星形胶质细胞作用的研究进展作一综述.指出目前中药研究虽选用了祛瘀活血通络及芳香开窍类药物,但多局限在药物有效成分上,未以中医基础理论为指导、辨证的进行药物选择,若在此方面加以改进可能更有效的促进实验及临床研究的发展.     

中药脑脊液药理学研究方法的初建——对中药影响星形胶质细胞神经营养作用的观察

目的 :探求一种合理有效的中药作用于中枢神经系统药效研究的方法。方法 :利用体外细胞培养的方法 ,以 3种不同浓度观察血清、中药血清、脑脊液、中药脑脊液对于星形胶质细胞和神经元的影响。结果 :苔盼蓝染色和L DH检测证明正常血清和中药血清在 3种浓度均出现对细胞的毒害作用 ,尤以 10 0 ,2 0 0 μL 为重 ,且在同一浓度时 ,两组之间没有明显的差异。而正常脑脊液组和中药脑脊液组与空白对照组相比 ,未见明显差异 ,MTT检测证明中药脑脊液组吸光度 (A)明显高于其余各组。结论 :利用脑脊液进行中药对中枢神经系统的药效观察明显优于血清 ,提出“脑脊液药理学”的概念 ;中药可诱导星形胶质细胞产生神经营养作用。     

黄芩苷干预缺氧星形胶质细胞对神经前体细胞迁移的影响

[目的]探讨黄芩苷的神经保护作用与促进内源性神经前体细胞(NPC)的关系。[方法]以Wistar大鼠双侧大脑皮质为标本,培养星形胶质细胞,采用聚合酶链式反应(PCR)方法检测趋化因子mRNA的表达。[结果]黄芩苷处理的缺氧星形胶质细胞能促进NPC的迁移。[结论]黄芩苷对神经有保护作用,为临床应用提供了实验依据。     

五子衍宗丸对脱髓鞘模型小鼠脑组织星形胶质细胞神经营养因子分泌的影响

目的 探讨五子衍宗丸对脱髓鞘模型小鼠髓鞘的影响及可能分子机制.方法 24只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组、模型组和五子衍宗丸组,每组8只.模型组和五子衍宗丸组小鼠采用含0.2％双环己酮草酰二腙的饲料饲喂6周,空白组给予正常饲料.饲喂第2周末,五子衍宗丸组给予五子衍宗丸药液16g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组小...     

吗啡依赖大鼠额叶皮质内神经甾体水平的变化

 目的探讨吗啡依赖和戒断对雄性大鼠额叶皮质内神经甾体水平的影响。方法腹腔注射递增剂量吗啡建立大鼠吗啡躯体依赖模型,纳洛酮诱发戒断症状;条件性位置偏爱实验建立吗啡精神依赖模型。高效液相色谱-质谱法测定大鼠额叶皮质和血浆中脱氢表雄酮(DHEA)及其硫酸酯(DHEAS)、孕烯醇酮(PREG)及其硫酸酯(PREGS)和别孕烯醇酮(AP)的含量。结果与对照组比较,大鼠吗啡躯体依赖形成时额叶皮质内DHEA水平显著升高(P<0.05),精神依赖形成时额叶皮质内DHEA,PREG水平显著升高(P<0.05);与纳洛酮对照组比较,纳洛酮催促吗啡戒断时大鼠额叶皮质内PREG,AP的含量显著升高(P<0.01),DHEAS水平显著降低(P<0.05)。结论吗啡依赖、戒断可影响大鼠额叶皮质内某些神经甾体的水平,表明内源性神经甾体可能参与吗啡依赖的形成。     

应激诱发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠伏隔核和血浆中神经甾体水平的变化

 目的检测吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)重现大鼠伏隔核和血浆中神经甾体水平的变化。方法建立大鼠对吗啡的CPP,CPP消退后用足底电击(footshock)诱发CPP的重现。将大鼠断头取血并取出伏隔核,制备组织匀浆,采用液-液萃取和固相萃取法提取脑组织和血浆中的神经甾体,经衍生化后,采用高效液相色谱-质谱法测定神经甾体含量。结果与对照组相比,重现组大鼠伏隔核中的脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)水平升高50%(P<0.05)。与消退组相比,重现组大鼠伏隔核中的别孕烯醇酮(allopregnanolone,AP)水平升高75%(P<0.05);吗啡CPP重现组大鼠血浆中的脱氢表雄酮硫酸酯(dehydroepiandrosterone sulfate,DHEAS)水平下降33%(P<0.01)。结论足底电击应激所致的CPP重现时,大鼠伏隔核中的DHEA,AP和DHEAS水平的变化不依赖于外周血中相应甾体水平的变化,其中枢作用可能与应激诱发的吗啡CPP重现行为有关。足底电击使伏隔核DHEA和AP水平升高可能是应激诱发吗啡CPP重现的神经机制之一。     

Protection of Salidroside on Primary Astrocytes from Cell Death by Attenuating Oxidative Stress

Objective To investigate whether salidroside(SAL) has protective and anti-oxidative effects on astrocytes. Methods Firstly, SAL was extracted from the roots of Rhodiola rosea with 70% ethanol and butanol to obtain crude phenylethyl alcohol glycosides which have been known as bioactive part of R. rosea; Secondly, WST-1 assay was carried out to assess the cell viability of astrocytes and cortical neurons under the treatment of the purified(>95%) SAL. Moreover, WST-1 assay was also used to evaluate the cytoprotective effects of SAL preventing astrocytes from staurosporine-induced cell death; Thirdly, we examined the spontaneous reactive oxygen species(ROS) and staurosporine-induced ROS generation in astrocytes in the absence or presence of SAL. Results SAL was observed to improve the astrocytes viability but not cortical neurons. In addition, SAL was able to ameliorate staurosporine-induced cell death. Moreover, SAL was able to attenuate the spontaneous ROS and staurosporine-induced ROS generation. Conclusion We here confirm that the anti-oxidative effect of SAL on primary astrocytes might be an important mechanism accounting for the cytoprotective effects from SAL.     

丹参中丹参素、原儿茶醛来源的初步研究

目的：考察丹参药材中丹参素和原儿茶醛的来源。方法：以丹参素、原儿茶醛为指标成分，用高效液相色谱法测定其含量；采用液相色谱与多级质谱联用法鉴定丹酚酸。结果：丹参素、原儿茶醛并非丹参固有成分，随煎煮时间增加而增加，而丹酚酸B随煎煮时间增加而减少。结论：丹参素、原儿茶醛是丹酚酸B的降解产物。     

丹红注射液中丹参素和原儿茶醛在大鼠体内的药代动力学研究

目的：研究大鼠单剂量静脉注射丹红注射液后丹参素和原儿茶醛的药代动力学。方法：大鼠实施颈静脉插管手术后,单次尾静脉注射丹红注射液（10 mL·kg^-1,含丹参素1.472 9 g·L^-1,原儿茶醛0.229 0 g·L^-1）,用建立的超高效液相色谱法测定大鼠血浆中丹参素和原儿茶醛的浓度,并计算药代动力学参数。结果：丹参素和原儿茶醛的主要药动学参数如下：最大浓度（C_max）分别为（73.73±11.46）,（4.60±3.39）mg·L^-1,消除半衰期（t_1/2）分别为（0.88±0.20）,（1.13±0.61）h,血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-t）分别为（30.19±5.12）,（2.15±1.56）mg·L^-1·h。结论：丹参素和原儿茶醛在大鼠体内的动力学过程符合二室模型。     

HPLC法测定香丹注射液中的丹参素和原儿茶醛

目的 :采用 HPL C法测定香丹注射液中的丹参素和原儿茶醛。方法 :以甲醇 - 1%冰醋酸 =12 .5∶87.5为流动相 ,对羟基苯甲酸为内标物 ,检测波长为 UV2 80 nm。结果 :丹参素 (0 .5～ 4μg)直线回归方程为 Y=3.912 0 x- 0 .0 0 2 5 0 0 ,相关系数 r=0 .9999。原儿茶醛 (0 .1～ 1μg)直线回归方程为 Y=2 3.40 6 2 X-0 .0 0 6 488,相关系数 r=0 .9999。丹参素平均回收率为 10 0 .0 % ,原儿茶醛平均回收率为 99.8%。结论 :该方法简便、准确、无干扰 ,能够有效地控制香丹注射液的质量     

桂皮醛对人舌癌Tca8113细胞体外增殖的影响

目的：探讨中药桂皮醛对人舌癌Tca8113细胞株增殖的影响。方法：体外培养人舌鳞癌Tca8113细胞,采用256,128,64,32,16,8μg／mL浓度的桂皮醛对其进行干预,用倒置相差显微镜及扫面电镜观察桂皮醛对细胞生长形态的影响,用细胞增殖检测法（MTT）检测桂皮醛对细胞增殖的影响。结果：16,8μg／mL组的桂皮醛对Tca8113细胞生长形态无明显影响,128,64,32μg／mL组Tca8113细胞的生长形态发生改变。8μg／mL的桂皮醛对Tca8113细胞生长有促进作用,256,128,64,32,16ug／mL的桂皮醛对Tca8113细胞生长有抑制作用,呈明显浓度依赖性。结论：桂皮醛对人舌癌Tca8113细胞的增殖有明显浓度依赖性,低浓度能促进其生长。     

补阳还五汤对沙土鼠脑缺血再灌注星形胶质细胞的影响

目的 :探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注后星形胶质细胞 (AS)的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈动脉夹闭脑缺血模型 ,于脑缺血 15min、再灌注24h和48h后 ,运用免疫组织化学技术观察星型胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的动态表达。结果 :缺血 15min再灌注 24h后 ,GFAP免疫阳性反应达高峰 ,补阳还五汤可使GFAP免疫反应减轻 ;缺血 15min再灌注 48h后GFAP表达减弱 ,补阳还五汤可使其增强。结论 :补阳还五汤对脑缺血再灌注后星形胶质细胞的调节作用可能与脑缺血损伤后神经功能的恢复有关。     

买提布合艾菲提蒙方醇提物对高脂血症大鼠血脂水平的影响

目的探讨维吾尔医经典方剂买提布合艾菲提蒙方醇提物的毒性、降血脂作用及其机制。方法(1)用简化机率单位法测定小鼠买提布合艾菲提蒙方醇提物半数致死量或最大耐受量。(2)高脂乳剂灌胃SD大鼠形成高脂血症动物模型,观察买提布合艾菲提蒙方醇提物不同浓度对血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总脂酶[包括脂蛋白脂酶(LPL)及肝脂酶(HL)]水平的影响。结果(1)买提布合艾菲提蒙方醇提物小鼠最大耐受剂量为64 g(生药)/kg。(2)买提布合艾菲提蒙方醇提物(0.8、1.6、3.2 g/kg)能降低血清TC水平(P0.05,P0.01),对血清LDL-C、HDL-C、TG水平的影响无统计学意义(P0.05)。同时,买提布合艾菲提蒙方醇提物(0.8、1.6、3.2 g/kg)升高肝匀浆MDA水平(P0.01);对肝匀浆GSH-PX、SOD、总脂酶水平的影响无统计学意义(P0.05)。结论买提布合艾菲提蒙方醇提物对小鼠毒性小,且对实验性高脂血症大鼠有降低血清TC水平的作用。