PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９份乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比斑点杂交高（Ｐ＜０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５７．１％（１２／２１）；血清阳性率为６１．３％（１３／２１）；两者总阳性率为８０．９％（１７／２１），说明用ＰＣＲ同时检测肝组织和血中ＨＢＶＤＮＡ，可明显提高ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV－DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７例临床各类型乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６６％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．１７％（１７／２０８）；抗－ＨＢｓ阳性者为１２．５％（５／４０）。２３例非乙型肝炎患者均未检出血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。检测结果表明本方法是一种快速、简便、特异、敏感、无同位素污染的方法。     

湖南地区输血传播肝炎病毒感染者的初步观察

为观察湖南地区输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染情况,合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清ＴＴＶＤＮＡ。共检测７０例肝炎病人血清和４３例献血员血清。结果显示：在３８例血清ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴性的病人中,１０例ＴＴＶＤＮＡ阳性（２６．３％）,ＡＬＴ平均为（４５２±２３６）Ｕ·Ｌ＾－１;３２例血清甲－戊型和庚型肝炎标志物的阴性的病人中,１２例ＴＴＶＤＮＡ阳性（３７．５％）     

丁型肝炎病毒感染对乙型肝炎病毒复制的影响研究

用ＥＬＩＳＡ测定１８１例各型ＨＢＶ感染者血请中ＨＤＶ标志物，结果ＨＤＶＭ阳性５７例，阳性率为３１．４９％。各型肝炎间ＨＤＶ感染卒的差异有显著性（Ｐ＜０．０５），依次为ＳＨ＞ＬＣ＞ＣＡＨ＞ＣＰＨ＞ＡＨ＞ＡＳＣ。用异羟基洋地黄毒试元标记的ＨＢＶＤＮＡ探针测定其中５７例ＨＢＶ／ＨＤＶ及单纯ＨＢＶ感染病人血清中ＨＢｖＤＮＡ及其含量，结果ＨＢＶＤＮＡ的检出率在ＨＢＶ／ＨＤＶ组（６７．９２％）明显低于单纯ＨＢＶ感染组（８４．６２％）（Ｐ：０．０１５２），且前组中ＨＢＶＤＮＡ含量也明显低于后组（Ｐ＜０．０５）。以上结果提示：ＨＤＶ感染多见于严重的及慢性肝脏疾病；在ＨＢＶ／ＨＤＶ感染的急性期，ＨＢＶ复制受到抑制；而在重症型、慢性期和肝硬化时则未见这种抑制现象，说明在ＨＢＶ／ＨＤＶ感染的不同阶段可表现出不同的病毒复制现象。     

生物素探针分子杂交试验检测乙型肝炎患者血清HBV—DNA的意义

用生物素探针分子杂交试验检测６１７临床各类乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，总阳性率为３５．６５％（２２０／６１７），各临床类型间无差异性。ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率：在ＨＢｅＡｇ阳性患者中为６７．０２％（１８７／２７９），而ＨＢｅＡｇ阴性性患者中为９．７６％（３３／３３８）；在ＨＢｓＡｇ阳性患者中为３９．１５％（２１１／５３９），而ＨＢｓＡｇ阴性患者中为１１．５４％（９／７８）；抗－ＨＢｅ阳性者为８．     

PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

有用聚合酶链反庆（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９例乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比为杂交高（Ｐ〈０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ一率为５７．１％；血清阳性率为６１．３％；两者总阳性率为８０．９％，说明ＰＣ     

血清,白细胞HBV—DNA的PCR检测结果与HBV血清复制标志的关系

３０例慢性乙型肝炎患者中，有５３．３％的病人用ＰＣＲ可从血清和白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ；ＨＢｅＡｇ阳性和抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者１００％可以检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，而仅抗－ＨＢｃＩｇＭ阳性的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率为６６．７％。１３例乙肝血清学复制标志阴性的病人中有５例（３８．５％）也可检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。在ＨＢｓＡｇ转阴的３例病人中有１例可从白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV.DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性率分别为７６．７％和４５％，尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳性或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ．ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高血清，提示ＨＢＶ．ＤＮＡ普遍存在乙肝患者甚至ＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病病变反复活动及病毒重复感染的来源。因此也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传     

聚合酶链反应检测血清HBVDNA及与HBV五项标记的关系

对１７４例各型乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者应用聚合酶链反应检测血清ＨＢＶＤＮＡ，及酶联免疫吸附试验检测血清ＨＢＶ五项标记，结果表明ＨＢｅＡｇ阳性者，ＨＢＶＤＮＡ的阳性率为１００．００％；抗－ＨＢｅ阳性者，ＨＢＶＤＮＡ的阳性率为２２．９５％，其中以慢性活动性肝炎及肝硬化患者阳性率较高，分别为５８．３３％和３３．３３％。同时发现血清ＡＬＴ异常者ＨＢＶＤＮＡ的阳性率明显高于血清ＡＬＴ正常者。     

54例HBsAg阴性慢性肝炎乙肝病毒感染的分析

用聚合酶链反应方法检测５４例乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性的慢性肝炎患者血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，结果３１例阳性（５７．４％）。其中单项抗─ＨＢｃ（＋）１０例，检出９例，ＨＢＶ标志物三抗体阳性５例中，检出１例；ＨＢＶ标志物全阴性１４例中检出９例。提示慢性肝炎即使ＨＢｓＡｇ阴性，仍有可能是ＨＢＶ感染，尤其是抗─ＨＢｃ（＋）者。     

丁型肝炎病人肝组织HDAg与HBsAg/HBcAg和HBV DNA表达及关系

目的：探讨丁型肝炎病人肝组织中ＨＤＡｇ与ＨＢｓＡｇ／ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达及关系。方法：应用免疫组化双重染色和原位杂交,检测７９例丁型肝炎病人肝组织ＨＤＡｇ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达,以５２例乙型肝炎作对照。结果：丁型肝炎ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ检出率（８１％、７１％）较乙型肝炎（９４％、９２％）低（Ｐ〈０．０５或０．０１）。ＨＤＡｇ以肝细胞核表达为主,ＨＢｓＡｇ以肝细胞浆表达     

重型乙型肝炎的病毒复制状况

为了解重型乙型肝炎时乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的复制状况，应用酶联免疫吸附实验和聚合酶链反应测定了５６例乙型肝炎病人的ＨＢＶ复制指标。慢性重型肝炎病人的ＨＢｅＡｇ和／或ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ阳性率明显低于非重型慢性肝炎（Ｐ＜０．０１），表明ＨＢＶ复制活跃不一定是重型肝炎发生的因素之一。进一步证明ＨＢＶ本身并无致肝细胞损伤作用     

微板核酸杂交-ELISA方法对肝炎病人血清中HBV DNA的定量检测与分析

目的采用微板核酸杂交-ELISA技术测定肝炎病人血清中HBVDNA含量。方法用PCR法将病人血清标本扩增后,与两条特异性探针夹心杂交,然后通过酶联显色对69例不同临床表现的肝炎患者血清中HBVDNA进行定量检测。结果20例急性重型肝炎血清中的DNA含量超过2μg/L,88.24％的急性轻型肝炎患者和54.55％轻度慢性肝炎患者血清中的HBVDNA含量少于2μg/L,66.67％中度慢性肝炎患者血清HBVDNA含量在2-1000μg/L的范围,75％重度慢性肝炎和45％急性重型肝炎血清中的HBVDNA含量超过1000μg／L。结论做饭核酸杂交-ELISA检测方法能准确、快速进行核酸定量测定,特异性强,灵敏度高,稳定可靠,易自动化,对于研究病毒感染量与临床病程的关系具有较大的现实意义。     

血清HBV DNA与乙肝病型及e系统之间关系探讨

目的 探讨血清ＨＢＶ ＤＮＡ与乙肝病型及ｅ系统之间的关系。方法 采用ＰＣＲ法对３１０例乙肝病毒携带者及乙肝患者进行血清ＨＢＶ ＤＮＡ检测,同时用ＥＬＩＳＡ法进行乙肝标志物测定。结果 各病型ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率以慢性肝炎和无症状携带者最高,与急性肝炎肝硬变组比较差异显著;ＨＢｅＡｇ阳性病例中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率以无症状携带者,急性肝炎、慢性肝炎（轻）组最高,与慢性肝炎（中）、肝硬变组比较差异显著;在     

应用聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液中的乙肝病毒

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了４５例肺科病人的支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中乙肝病毒（ＨＢＶ），同时对其中２４例作血清ＨＢＶ检测，发现ＢＡＬＦ中ＨＢＶ阳性率为２６．６７％（１２／４５）、血清ＨＢＶ阳性率为４１．６７％（１０／２４）；血清ＨＢＶ阳性者其ＢＡＬＦ方有可能检出ＨＢＶ、血清ＨＢＶ阴性者其ＢＡＬＦ不能检出ＨＢＶ，ＢＡＬＦ中ＨＢＶ脱氧核糖核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ）可以复制、有传染性。     

乙肝患者e系统转换对HBV DNA的影响

采用ＥＬＩＳＡ法和聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了９４例乙肝患者及４０例乙肝病毒血清标志物（ＨＢＶＭ）阴性的肝炎患者，结果发现ＨＢｅＡｇ阳性者，有８６．０％ＨＢＶＤＮＡ阳性，二者具有明显一的相关性，而抗ＨＢｅ阳性的病人，约４０．５％ＨＢＶＤＮＡ阳性，说明抗一ＨＢｅ的转换，不完全是病毒复制的终止，尤其是在慢性肝病患者中，抗－ＨＢｅ出现部分患者全内仍不检出ＨＢＶＤＮＡ病为仍处于活动中。     

非放射性分子杂交法检测HBV感染

用非放射性标记的ＨＢＶ－ＤＮＡ探针检测３７１份至少有一项ＨＢＶ免疫学标志阳性血清和５１０份对照血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果表明：５１０份对照血清和７９份仅抗－ＨＢｓ阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ均为阴性，８２份ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为１００％，１０３份ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性血清的检出率为７９．６％，７６份ＨＢｓＡｇ阳性。ＨＢｅＡｇ阴性、但抗－ＨＢｅ阳性血清的检出率为８０．３％，２９２份ＨＢＶ不同感染阶段血清总检出率为７５％。非放射性分子杂交法可直接检测出ＨＢＶ的复制，由于该法亦可定量，故还可用于判断血清传染程度和血清病毒的含量。     

聚合酶链反应检测HBV—DNA及临床意义的再认识

采用聚合酶链反应检测１１４例肝病患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：１１４例患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３５．９６％，其中ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＨ、ＬＣ组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为４１．６７％、２１．４３％、５３．６６％和２６．３１％；ＨＢｅＡｇ（＋）组３９．０２％，抗ＨＢｃ（＋）组２２．７３％，ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｃ（＋）组４３．３７％，抗ＨＢｓ（＋）组４１．１８％；ＨＢＶＭ（－）组１１．１１％。结果     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV·DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ·ＤＮＡ，阳性率分别为７６．７％与４５％。尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳生或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ·ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高于血清。提示ＨＢＶ·ＤＮＡ普遍存在于乙肝患者甚ＩＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病变反复活动及病毒重复感染的来源．因而也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传播ＨＢＶ的可能。     

沈阳地区乙型肝炎病毒DNA前C区变异研究

用限制性酶切片段长度多态性分析对沈阳地区７０例血清经巢式聚合酶链反应扩增ＨＢＶ ＤＮＡ阳性的乙型肝炎患者的Ｃ基因前Ｃ区１８９６位点进行分析。结果：（１）急性乙型肝有Ｃ区变异检出率为４％（１／２０），慢性迁延肝炎为２５％（５／２０），慢性活动性肝炎为３８％（５／１３），肝硬化为３３％（４／１２）；（２）ＡＬＴ升高组中，ＨＢｅＡｇ及抗ＨＢｅ均阴性患者和ＨＢｅＡｇ阴性，抗ＨＢｅ阳性患者ＨＢＶ ＤＮＡ前Ｃ