人脐带间充质干细胞对大鼠受损子宫内膜的影响

目的 探讨人脐带华通氏胶间充质干细胞(WJ-MSCs)移植对大鼠受损子宫内膜的影响.方法 妊娠大鼠25只均分为五组.于妊娠第3天阻断子宫动脉血流30 min(A1组和B1组)或60 min(A2组和B2组),建立大鼠胚泡着床障碍的动物模型.A2和B2组子宫动脉夹闭同时经子宫角部注入WJ-MSCs;A1和B1组未注入WJ-MSCs.于妊娠第9天,观察胚泡着床情况,化学发光法检测血清雌二醇、孕酮,光镜及透射电镜观察子宫内膜的形态及超微结构变化.结果与空白对照组妊娠大鼠比较.结果 与对照组比较,A1和B1组胚泡着床率明显下降(P＜0.01),子宫内膜、腺体和间质细胞明显损伤;B1组比A1组明显,出现明显细胞凋亡.而A2及B2组子宫内膜改变明显轻于A1和B1组,胚泡着床数与对照组相仿(P＞0.05).五组大鼠血性激素水平无统计学差异(P＞0.05).结论 WJ-MSCs能明显促进胚胎着床期子宫内膜的生长及腺体的增生和发育.     

人源脐带间充质干细胞对膝骨关节炎模型大鼠的治疗作用

目的 观察人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）对SD大鼠膝骨关节炎的治疗效果。方法 8周龄近交系SD雄性大鼠6只,均采用自身双侧对照研究。应用手术方法切断双膝关节前交叉韧带,手术后不固定伤肢,笼内自由活动。术后4周,右侧作为模型侧,左侧膝关节注射hUC-MSCs 100 μL（1×10⁷ cells/mL）。注射后4周,处死所有实验组大鼠并收取双侧膝关节标本,进行HE和甲苯胺蓝染色。结果 模型侧细胞排列紊乱,细胞簇集明显,有细胞消失、基质染色不均、软骨结构改变、表面凹凸不平、软骨层次较差等现象,表明软骨蜕变,骨关节炎形成;hUC-MSCs治疗侧与模型侧相比,软骨细胞排列基本整齐,呈柱状,细胞增生较多,细胞簇集明显减少,潮线较完整。软骨表面相对平滑,表明软骨处于损伤修复中。结论 hUC-MSCs移植治疗有助于改善大鼠膝骨关节炎,使大鼠关节软骨破坏减轻,促进软骨组织修复。     

人脐带间充质干细胞对CCl_4致大鼠肝硬化的保护作用研究

目的:研究人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对CCl4致大鼠肝硬化的保护作用及其机制。方法:对大鼠皮下注射CCl4建立肝硬化模型,并于造模成功后继续半剂量注射CCl4,建模成功后随机分为模型组、生理盐水(NS)组、HUC-MSCs组(1×107个/mL),每组24只,后2组通过尾静脉注射,移植相应药物或细胞1mL,移植后第1、3、5周末观察各组大鼠肝组织病理学变化及其血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆固醇(CHO)、白蛋白(ALB)、转化生长因子β(1TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)水平和肝组织中人表皮生长因子受体(EGF-R)的表达情况;另选取8只正常大鼠设为正常对照组。结果:模型组和NS组相似,大鼠肝内胶原纤维增生明显,肝细胞排列紊乱,HUC-MSCs组移植后5周大鼠的肝内胶原纤维增生减少,有较多正常肝细胞;与正常对照组比较,模型组和NS组大鼠的ALT、AST、TGF-β1、HGF水平均明显升高,CHO、ALB含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,HUC-MSCs组上述指标均明显好转(P<0.05或P<0.01),其中ALT、ALB、TGF-β1水平与移植后的时间呈正相关;HUC-MSCs组移植后1、3、5周大鼠肝组织中均有人EGF-R的阳性表达。结论:HUC-MSCs可促进肝功能的改善,修复肝硬化损伤的肝脏组织。     

不同培养基对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

目的观察不同培养基对人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）生物学特性的影响,优化培养方法。方法采用贴壁法从正常足月胎儿脐带中分离出间充质干细胞,细胞贴壁后利用DMEM/F12,Mesen PRORSTM Medium这两种培养体系进行体外扩增,绘制生长曲线,流式细胞仪检测其表面标志。结果从人脐带中分离出的间充质干细胞为梭形,呈平行排列生长或漩涡状生长;细胞表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45和HLA-DR。结论加入Mesen PRORSTM Medium培养的细胞增殖速度快,更适合于脐带间充质干细胞的体外扩增。     

人脐带间充质干细胞对急性肺损伤氧化应激的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)氧化应激失衡的作用。方法人脐带间充质干细胞的分离,培养和鉴定。将30只Wistar大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组(A组)、LPS模型组(B组)和HUC-MSCs移植组(C组),每组10只。移植6h后,处死各组大鼠,取肺组织行病理学观察,肺湿/干重比测定,丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性检测。结果流式细胞术结果显示,纺锤样细胞高表达CD29、CD44和CD105,极低表达CD34,符合HUMSCs的特征。与A组比较,B组W/D和MDA含量明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05)。与B组比较,C组W/D和MDA含量明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05)。结论在大鼠模型中人脐带间充质干细胞移植能减轻肺损伤,并能降低肺组织MDA含量和提高SOD活性。     

人脐带间充质干细胞体外分化为胰岛素分泌细胞

目的探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)向胰岛素分泌细胞分化的可能性。方法采用直接贴壁法从脐带中分离UC-MSCs,取第3代细胞作流式细胞术鉴定其表型。用β-巯基乙醇、尼克酰胺和碱性成纤维生长因子(bFGF)诱导UC-MSCs(诱导组),对照组在未添加任何诱导试剂的培养基中培养。倒置显微镜下观察UC-MSCs的形态学变化;取诱导后3周的细胞进行双硫腙染色,采用化学发光免疫法测定培养上清液中胰岛素水平,RT-PCR检测胰岛细胞相关基因的表达。结果细胞高表达UC-MSCs相关抗原CD90、CD105和CD13,而低表达造血细胞相关抗原CD34、CD45和HLA-DR。UC-MSCs经诱导后细胞形态由梭形变为圆形或椭圆形,双硫腙染色为阳性。诱导组胰岛素水平明显高于对照组[(0.305±0.065)μU/ml vs.(0.085±0.024)μU/ml](P<0.01)。RT-PCR显示诱导后细胞表达胰岛细胞相关基因。结论 UC-MSCs具有向胰岛素分泌细胞分化的潜能。     

脐带间充质干细胞对小鼠急性肝损伤修复作用的研究

目的:探讨胎牛脐带间充质干细胞对小鼠急性肝损伤的修复作用.方法:通过腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导急性肝组织损伤小鼠模型,随后将脐带间充质干细胞注入脂多糖诱导的急性肝损伤小鼠体内,通过组织学和血清学检测对治疗组小鼠和损伤组进行比较.结果:与对照组相比,损伤组小鼠生化指标ALT、AST、ALP、GGT升高,急性实相反应蛋白CRP显著增高;细胞移植组和损伤组相比小鼠肝功能生化指标降低,CRP降低.结论:脐带间充质干细胞对小鼠肝损伤有修复作用,在急性肝损伤小鼠模型和临床的治疗中具有重要意义.     

骨髓间充质干细胞治疗皮肤深度烧伤的研究进展

烧伤是由热源引起的皮肤外伤性破坏,烧伤后瘢痕的形成及汗腺的丧失等是目前临床治疗尚未解决的难题。骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能及抗炎、分泌等生物学功能,在动物实验和临床研究中对治疗烧伤有显著疗效。     

脐带间充质干细胞治疗自身免疫性肝病患者的疗效

目的探讨脐带间充质干细胞(UC-MSCs)治疗自身免疫性肝病(AILD)的疗效。方法对7例AILD患者通过外周静脉移植UC-MSCs,分析治疗前后疗效及安全性。结果与治疗前比较,UC-MSCs治疗后,全部患者饮食、睡眠、体力、疲劳等临床症状均有明显改善,ALB、ALT及AST明显好转(P<0.05),TBil、ALP及GGT亦有所改善(P>0.05)。治疗前后的安全性指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 UC-MSCs治疗可明显减轻AILD患者的临床症状,改善其肝功能,且安全性好。     

人脐带间充质干细胞的体外培养及其对大鼠血液指标的影响

目的 研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的体外培养以及其不同浓度对大鼠血液指标的作用。 方法 体外培养hUC-MSCs,将SPF级SD雌性大鼠45只,平均体质量为(200±10)g,随机均分为5组:低、中、高浓度细胞移植组,生理盐水组,空白对照组,其中,低浓度为(0.5×10⁶/mL)、中浓度为(1×10⁶/mL)、高浓度为(2×10⁶/mL)、生理盐水组(0.9 % NS)。将培养成功的hUC-MSCs配比成相应的浓度,各取1 mL经过大鼠尾静脉输注到大鼠体循环内,空白对照组不做任何处理;分别按注射后1 d,5 d,10 d时间顺序,每次分别随机抽取5组中1个亚组的大鼠处死以收集腹主动脉内血液,检测其血常规及生化指标并进行数据分析,了解hUC-MSCs对大鼠血常规、生化指标是否存在影响。 结果 本实验通过收集胎儿脐带成功在体外培养出hUC-MSCs。另将不同浓度的hUC-MSC经大鼠尾静脉输注大鼠体循环内,血液数值上得到:① 大鼠白细胞随hUC-MSCs浓度的升高而升高,且各组之间差异有统计学意义(P <0.05),其数值随时间的改变没有降低;② 大鼠总胆红素在1 d后出现增高,低浓度组表现显著,随时间推移恢复正常。 结论 hUC-MSCs可在体外成功分离培养;经大鼠尾静脉输注大鼠体循环内,可引起白细胞的升高和总胆红素的一过性升高。     

脐带间充质干细胞治疗类风湿关节炎八例临床分析

类风湿性关节炎（RA）的发病原因至今尚未完全明了,传统治疗主要是非甾体类抗炎药（NSAID）和慢作用的抗风湿药（SAARDS）,这些药物副作用明显且治疗后复发率高。近年来随着组织细胞工程学和基因工程学的发展,干细胞治疗成为RA治疗的热点,其中间充质干细胞因其多向分化能力、免疫抑制性能、组织损伤修复能力及低风险,为RA治疗提供了新的前景。     

脐带间充质干细胞治疗再生障碍性贫血18例临床研究

目的 初步观察脐带间充质干细胞（umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC）治疗再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）患者的疗效和安全性.方法 18例AA患者,中位年龄28（7～49）岁,重型AA 10例,非重型AA 8例;7例曾接受免疫抑制治疗,均无效.从正常足月分娩胎儿的脐带分离培养UC-MSC,静脉输注给患者,每次输注细胞数为1×106/kg,每周输注1～2次.观察治疗前、后患者外周血细胞计数、骨髓细胞学、骨髓活检、外周血CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞亚群比例及临床症状等,观察治疗相关不良反应.结果 18例患者接受UC-MSC输注中位次数38 （12～96）次,中位治疗时间8（3～16）月,中位随访时间31 （6～36）月.其中3例患者基本治愈,7例缓解,1例明显进步,2例患者贫血和出血症状好转、输血间隔延长,5例无效;总有效率72.2％.7例既往对免疫抑制剂无效的患者中,4例有效.12例患者在治疗前外周血CD4＋/CD8＋细胞比值倒置,治疗后11例不同程度升高（其中7例恢复正常）.所有患者均未出现明显的治疗相关不良反应.结论 UC-MSC治疗有助于改善AA患者的骨髓造血功能,短期观察未发现不良反应,尤其对免疫抑制治疗无效、不适合移植或不能耐受相关副作用的AA患者具有重要的临床价值.     

体外诱导人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化

目的 通过体外培养将人脐带间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞.方法 将体外培养的人脐带间充质干细胞分为诱导组和对照组.诱导组先后予以1 mmol·L-12-巯基乙醇培养2 d,10 μg·L-1表皮生长因子、10 μg·L-1碱性成纤维细胞生长因子及2% B27培养7 d,之后添加20 mmol·L-1尼克酰胺及艾塞那肽培养7 d.对照组不添加诱导剂,继续换液培养.通过观察细胞形态变化、RT-PCR体外扩增两组细胞的胰腺-十二指肠同源框-1（PDX-1）基因、放射免疫法测定两组细胞胰岛素分泌量三种方法来鉴定胰岛素分泌细胞.结果 （1）通过形态学观察,诱导组细胞类似胰岛样细胞,对照组细胞则无明显改变;（2）应用RT-PCR方法,诱导组细胞可扩增出PDX-1基因,而对照组则没有.（3）诱导组细胞培养上清液可检测出胰岛素分泌,7 d时胰岛素浓度为（6.32±0.18）mIU·L-1,21 d时增至（34.57±4.54）mIU·L-1,而对照组则未测出.结论成功在体外微环境下将人脐带间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞.     

脐带来源间充质干细胞的免疫抑制功能研究

目的 观察人源脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）对异体总淋巴细胞和不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响,以及对细胞因子分泌的影响。方法 分离并培养hUC-MSCs及健康成人外周血淋巴细胞,以淋巴细胞为阴性对照,MTT法检测共培养（淋巴细胞：hUC-MSCs为1：0.5、1：1、1：5、1：10）3 d后淋巴细胞的增殖情况;流式细胞仪检测共培养体系中CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺、CD3^-CD16⁺CD56⁺、CD4⁺CD45RA⁺CCR7⁺的细胞比例;ELISA法检测白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-10、γ-干扰素（INF-γ）细胞因子分泌情况。结果 与阴性对照组比较,hUC-MSCs对淋巴细胞的增殖具有显著抑制作用（P<0.05）,抑制效果随数量增加而增强;hUC-MSCs能够显著增加共培养体系中CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺细胞比例（P<0.05）,显著降低CD4⁺CD45RA⁺CCR7⁺细胞比例（P<0.05）,对CD3^-CD16⁺CD56⁺细胞比例无显著影响;hUC-MSCs能够显著降低IL-2、IL-4、INF-γ水平,显著增加IL-10的分泌水平（P<0.05）。结论 hUC-MSCs具有免疫抑制功能。     

脐血干细胞与脐带间充质干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化的疗效比较

目的 比较经外周静脉移植脐血干细胞与脐带间充质干细胞治疗乙型肝炎肝硬化患者的临床疗效.方法 乙型肝炎肝硬化患者42例,分为脐血干细胞组20例,给予脐血干细胞治疗;脐带间充质干细胞组22例,给予脐带间充质干细胞治疗,2组均给予内科综合治疗.比较2组移植前及移植后2、4、12、24周生化指标、临床症状的改善情况及不良反应.结果 2组干细胞移植后白蛋白、胆碱酯酶及凝血酶原活动度均较移植前升高(P<0.05),移植后24周总胆红素较移植前降低(P<0.05),丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶移植后各时间点与移植前比较差异无统计学意义(P>0.05).2组间各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05).干细胞移植4周后,2组食欲、乏力、腹胀及腹水情况均较移植前改善,2组间比较无统计学意义(P>0.05).2组患者均未发生严重不良反应和并发症.结论 脐血干细胞与脐带间充质干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者安全有效,疗效差异无统计学意义.     

脐带间充质干细胞治疗1型糖尿病1例护理

<正>1型糖尿病(T1DM)是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,以胰岛β细胞选择性破坏,导致患者体内胰岛素分泌绝对不足为特征。目前,T1DM患者需要终生依赖外源性胰岛素,这种替代治疗不能从根本上治愈糖尿病。研究发现:干细胞具有很强的增殖能力和分化潜能,抽取的脐血可定向培养,在胰腺微环境下可分化为胰岛素分泌细胞,促进内源性     

脐带间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的临床观察

目的分析脐带间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的临床效果,更好地提高我国临床治疗的水平。方法将2009年5月至2012年7月在我院接受脐带间充质干细胞移植的50例脊髓损伤病患作为研究对象,分析病患治疗前后感觉及运动、生活自理的能力。结果患者治疗后和治疗前相比,脊髓损伤病患的生活自理能力、感觉以及运动评分等方面均有显著改善,患者的各项身体生化指标无异常,未见明显的不良反应与严重并发症现象,治疗前后病患的评分具有差异性,即P>0.05。结论采用脐带间充质干细胞移植方法对治疗脊髓损伤具有重要的意义,而且疗效明显,可提高病患的生活质量与我国的临床治疗水平。