高脂高果糖饮食与维生素 D 缺乏对小鼠牙龈菌群影响的实验研究

目的：检测在高脂高果糖饮食和维生素 D 缺乏条件下小鼠龈下菌群变化，探讨其导致牙周病变的可能机制。方法正常型和维生素 D 受体敲出的野生型 C57BL ／6J 小鼠各20只，各自随机分成正常饮食组和高脂高果糖饮食组，每组10只。喂养10周后检测下颌第2磨牙牙周炎临床指标，提取龈沟液，采用 PCR-变形梯度凝胶电泳技术（PCR-DGGE）和 DNA 测序等方法分析龈沟液的菌群差异性。结果与正常型高脂高果糖组比较，维生素 D 受体敲出型高脂高果糖组在牙龈指数、牙周袋深度、牙松动度方面差异有统计学意义（P＜0．05）；正常型高脂高果糖组、维生素 D 敲出型组与正常型正常饮食组比较，小鼠龈沟液菌群分布差异有统计学意义（P＜0．05）；测序结果显示正常型高脂高果糖组和维生素 D 受体敲出型高脂高果糖组小鼠的优势菌群不完全相同。结论通过成功建立所需牙周炎动物实验模型，初步证明维生素 D 缺乏对高脂高果糖所致牙周炎的发展可能存在正协同作用。     

DMD模型小鼠基因突变及肌肉亚型表达特点研究

目的研究C57BL／10ScSn—Dmd^mdx／J模型小鼠子代基因突变情况及肌肉亚型的表达差异。方法选取2、3和4周龄C57BL／10ScSn—Dmd^mdx／J模型小鼠及C57BL／6J小鼠各3只，分别采集膈肌、背阔肌和腓肠肌的肌肉组织，利用RT-PCR方法扩增分析Dmd基因的结构特点；采用Western bolt方法分析β—dystroglycan的表达差异。结果模型小鼠基因编码抗肌萎缩蛋白基因（Dmd）的第3202位点出现C→T的自发突变，模型小鼠β—dystroglycan的表达比正常鼠有显著性升高。结论C57BL／10ScSn-Dmd^mdx／J模型小鼠的肌纤维在发育中出现断裂或是缺失，β-dystroglycan表达大幅度上调。     

高脂饮食对小鼠血脂的影响

目的探讨高脂饮食对C57BL/6J小鼠血脂影响。方法将20只C57BL/₆J小鼠随机分为普食组和高脂饮食组,普食组予100%基础饲料,高脂饮食组予肥甘饲料。各组自由进食,各10只。8周后,眼球取血处死检测指标。结果高脂饮食能够显著提高C57BL/6J小鼠血清中三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇含量。结论高脂饮食对C57BL/6J小鼠血脂有显著影响。     

还原型谷胱甘肽对C57BL/6J小鼠体外受精的影响

目的 探讨受精液中添加还原型谷胱甘肽(GSH)对C57BL/6J小鼠体外受精的影响.方法 以体外受精液(HTF)作为对照,在HTF液中添加不同浓度(0.25 mmol/L、0.50 mmol/L、0.75 mmol/L、1.00 mmol/L、1.25 mmol/L和1.50 mmol/L)的GSH,对C57BL/6J近交系小鼠进行体外受精实验,观察体外受精和早期胚胎发育情况.同时,用5种C57BL/6J小鼠背景的基因工程小鼠加以验证.结果 与对照组相比,实验组的体外受精率显著升高,浓度为0.50 mmol/L时,体外受精率提高显著(P＜0.05),浓度在1.25 mmol/L时,体外受精率最高(P＜0.01).受精卵的体外囊胚发育率实验组与对照组无显著性差异(P＞0.05).C57BL/6J背景的基因工程小鼠的体外受精率和体外囊胚发育率与C57BL/6J近交系小鼠相似.结论 在HTF中添加一定浓度的GSH能够提高C57BL/6J小鼠及C57BL/6J背景的基因工程小鼠的体外受精效果.     

不同剂量促排卵药物对小鼠焦虑行为和生育力的影响

目的 探讨不同剂量促排卵药物对小鼠焦虑行为及生育力的影响.方法 将5周龄的C57BL/6J雌鼠随机分为4组(排除运动能力障碍),每组12只,促排卵前1 d腹腔注射0.2 ml 0.9％氯化钠注射液作为对照,促排卵当天分别予5、7.5、10、15 U孕马血清促性腺激素(PMSG)/绒毛膜促性腺激素(hCG)促排卵药物0....     

白藜芦醇对高脂喂养C57BL/6J小鼠肝脏脂代谢的影响

目的探讨白藜芦醇对高脂饲料喂养的C57BL/6J小鼠肝脏脂代谢的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠30只,按体重分为对照组、高脂组和干预组,每组10只,对照组和高脂组分别喂饲基础饲料和高脂饲料并给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,干预组在喂饲高脂饲料的同时给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液溶解的白藜芦醇灌胃,第16周解剖分离小鼠肝脏,制作HE切片,测定肝脏甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)含量。结果肝脏HE切片可见高脂组肝细胞有大量脂肪空泡形成,而干预组与对照组相似,肝细胞未见脂肪变性改变;肝脏TG和TC含量,高脂组(TG为5.78±1.69 mmol/L,TC为2.69±1.20 mmol/L)均明显高于对照组(TG为4.22±1.41 mmol/L,TC为0.96±0.35 mmol/L)和干预组(TG为4.63±1.70 mmol/L,TC为1.65±0.89 mmol/L)(P<0.05),而干预组和对照组相比,差异均无显著性意义(P>0.05);肝脏FFA含量,各组间差异无显著性意义(P>0.05)。结论白藜芦醇可降低高脂喂养C57BL/6J小鼠肝脏TG、TC含量。     

GDF-15对糖尿病小鼠肝损伤保护作用的实验研究

目的 探讨GDF-15对STZ所致C57BL/6J小鼠糖尿病肝脏损伤保护作用.方法 将成模小鼠随机分为模型组、对照组及GDF-15注射组.监测血糖和体重.30 d后采集样本,检测各组小鼠血清中ALT、AST以及肝组织中TG、TC、SOD、MDA、HK及PK的表达.ELISA检测各组小鼠血清及肝组织中TNF-α、IL-1...     

克拉霉素对C57BL/6J小鼠动脉粥样硬化及炎症反应的影响

目的观察肺炎衣原体（Chlamydia pneumoniae,Cpn）与动脉粥样硬化的关系以及克拉霉素的抗炎作用。方法 60只健康雄性C57BL/6J小鼠根据喂养的饲料及是否感染Cpn分为4组：对照组（n=6）、高脂组（n=6）、感染组（n=24）和感染＋高脂组（n=24）。Cpn感染组于试验开始每隔2周1次,共6次,分别经鼻内接种0.05ml Cpn（6.6×106IFU/ml）。对照组及高脂组以同样方法接种链球菌蛋白G（SPG）缓冲液。感染Cpn后（感染组、感染＋高脂组）依据有或无克拉霉素的治疗及治疗的时间进一步分为未治疗、早期及延迟治疗亚组。全自动生化分析仪检测小鼠的血脂,免疫荧光法检测Cpn IgG抗体。12周后处死小鼠,放免法测定IL-6、IL-8的水平,并取升主动脉大血管检测主动脉动脉粥样硬化的情况。结果高脂组的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显高于对照组（P均〈0.01）。各组与对照组比较IL-6、IL-8的水平明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;未治疗组高于早期及延迟治疗组（P〈0.01）,且延迟治疗组高于早期治疗组（P〈0.01）。与延迟治疗组比较,克拉霉素早期治疗组可以延缓动脉粥样硬化的发生。结论 Cpn协同高脂血症与动脉粥样硬化的形成密切相关。克拉霉素治疗能够减轻Cpn感染所致动脉粥样硬化的炎症反应。     

组蛋白脱乙酰基酶2和4活性变化对小鼠肺纤维化影响的研究

目的:探讨组蛋白脱乙酰基酶（HDAC）2和HDAC 4活性变化对小鼠肺纤维化（PF）的影响。方法:博来霉素单次气管给药诱导C57BL/6J雄性小鼠发生PF,建立PF模型。实验动物分3组：博来霉素组（B组,16只）予博来霉素A2生理盐水溶液2.5 μl/g、盐水组（C组,16只）给予生理盐水溶液2.5 μl/g体重和无手...     

脂多糖诱导C57BL/6J小鼠急性炎症对听力损失的影响

目的 采用脂多糖(LPS)腹腔注射的方法诱导C57BL/6J小鼠机体产生急性炎症,观察急性炎症期小鼠听力情况,并分析其相关机制。方法 将C57BL/6J小鼠30只随机分为空白组、LPS组及对照组,每组10只,LPS组予以2.5 mg/kg的LPS,对照组输注相等体积的生理盐水,其余生活条件保持一致。注射LPS 3、7、15 d后,通过听性脑干反应(ABR)评估小鼠听力情况。冰冻耳蜗组织切片HE染色观察耳蜗组织形态学变化。ELASA方法观察小鼠体内TNF-α、IL-1β、IL-6的变化。同时观测小鼠饮水、饮食及体质量的变化。结果 与对照组比较,LPS组在注射3、7 d后的听力阈值均明显升高,P<0.05,但是注射15 d后两组听力阈值比较,差异无统计学意义,其余频率下阈值变化不明显。注射LPS 3 d后,LPS组的TNFα,IL-6及NF-κB水平明显高于对照组,P<0.05,IL-1β无明显变化。LPS组螺旋神经节细胞有丢失,血管纹部分空泡化,形态异常。但是,LPS不影响小鼠的饮食饮水及体质量。结论 LPS可以引发小鼠耳蜗急性炎症,造成听力损失,主要表现为高频听力损失。     

不同浓度H22肝癌细胞株对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模差异的影响

目的:使用H22肝癌细胞株建立C57BL/6J小鼠原位肝癌模型,比较不同浓度H22肝癌细胞悬液对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模成瘤率、肿瘤病理学特征及其体重变化情况的影响。方法:将66只C57BL/6J小鼠随机分为4个组,分别对应1×10~6、1×10~8、1×10~(10)、1×10~(12)4个细胞浓度。在无菌条件下,将不同浓度的H22肝癌细胞悬液注入60只C57BL/6J小鼠的肝左叶。从注射之日起,连续21 d测量小鼠体重,于第21 d时脱颈椎处死,测肝脏的重量,并行肝脏外观及病理组织学观察。结果:1×10~6、1×10~(10)、1×10~(12)组成瘤率40%(6/15),1×10~8组为27%(4/15)。病理检查证实为肝细胞性肝癌。结论:不同浓度H22肝癌细胞株对成瘤影响差异不明显,造模中可根据实际情况自行选择。     

SPF级C57BL/6J小鼠生长发育和繁殖性能指标的测定

目的 在SPF级动物饲养条件下，对本中心饲养的SPF级C57BL／6J小鼠生长发育和繁殖性能指标进行测定。方法 挑选80～90日龄C57BL／6J小鼠40只（雌、雄各半），采取1：1间歇同居，兄妹近交繁殖，并统计其生长发育和繁殖性能参数指标。结论 SPF级C57BL／6J小鼠离乳后体重增长较慢；第2、3胎繁殖性能较好，第5胎最差，种鼠连续繁殖5胎后要更换。     

C57BL/6小鼠和C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠行为学实验研究

目的:通过水迷宫实验、自主活动实验、听源性惊厥实验和悬尾实验来研究C57BL/6小鼠和C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠的行为学差异.方法:通过胚胎复苏获得3只雌性杂合的C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠后与C57BL/6小鼠进行繁殖,最终得到纯合的雌性和雄性C57BL/6 FMR1基因敲除小鼠各10只进行行为学实...     

清洁级C57BL/6剖腹产和正常产仔鼠成活率和生长的比较观察

本文对半屏障系统下清洁级Ｃ５６ＢＬ／６小鼠进行剖腹取胎,用触诊法确定妊娠鼠的临产期,剖腹产仔鼠成活率为８９５２％,部腹产和正常产仔鼠出生体重差异不显著（Ｐ＞００５）。用ＩＣＲ母鼠代乳与正常产的仔鼠１～４周龄同期体重比较差异显著或极显著（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）,４周龄头长、体长比较无显著差异（Ｐ＞００５）。     

C57BL/6J小鼠慢性束缚应激抑郁症模型的建立

目的 通过慢性束缚应激(CRS)建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型。方法 C57BL/6J小鼠经体重、糖水偏好、旷场实验初筛后从中选择20只小鼠并随机分为正常对照(NC)组和CRS组2组,每组10只。对CRS组小鼠进行连续21 d,每天4 h的束缚刺激,并最终进行糖水偏好检测和强迫游泳检测。结果 CRS组小鼠在水中不动的时间为(131.70±21.65)s,明显长于NC组的(68.88±8.43)s(P=0.0304)。CRS组小鼠0～24 h和0～48 h的糖水偏好百分比分别为(66.21±3.24)%和(73.25±1.50)%,均明显低于NC组的(79.46±3.85)%(P=0.0196)和(80.20±2.26)%(P=0.0248)。结论 通过慢性束缚应激成功建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型。     

新加香薷饮对湿热型流感小鼠的疗效机制研究

目的:探讨新加香薷饮治疗湿热型流感小鼠的免疫学机制。方法 :将50只C57BL/6小鼠随机分为5组:正常组,湿热组,湿热+病毒组,湿热+病毒+利巴韦林组,湿热+病毒+新加香薷饮组。正常组在正常环境下饲养,湿热组在湿热环境下造模,其他3组在湿热环境下给予甲1型流感病毒(FM1株)滴鼻造模。造模成功后湿热+病毒+利巴韦林组、湿热+病毒+新加香薷饮组分别给予利巴韦林、新加香薷饮干预治疗,其他组给予生理盐水灌胃。解剖取材后进行小鼠左肺叶苏木精-伊红(HE)染色,右肺叶肺组织血凝素(HA)、Toll样受体7(TLR7)与髓样分化因子(MyD88)基因逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)的检测。结果:成功构建湿热型流感小鼠模型,其TLR7、MyD88 mRNA表达量显著升高,与正常组相比,湿热型小鼠饮水量及摄食量下降,大便偏湿,肛门红肿。与湿热组相比,湿热+病毒组小鼠体质量下降、精神萎靡、扎堆、皮毛蓬松、挠鼻,肺组织充血肿大、肺泡壁增厚、大量淋巴细胞浸润,HA mRNA相对表达量比较亦有差异(P<0.05),并且TLR7、MyD88 mRNA表达显著上调(P<0.05)。与湿热+病毒组相比,湿热+病毒+利巴韦林组、湿热+病毒+新加香薷饮组体质量下降趋势较缓慢,活动量稍多,肺组织结构虽紊乱,但渗出液较少,无透明膜的形成,而TLR7、MyD88 mRNA与湿热+病毒组相比差异无统计学意义(P>0.05);与湿热+病毒+利巴韦林组相比,湿热+病毒+新加香薷饮组肺泡壁增生变厚程度较轻。结论:新加香薷饮可减轻病毒性肺炎的炎症反应,降低肺脏病理损伤,对湿热型流感小鼠有一定的治疗作用,然而其并未影响TLR7、MyD88基因的表达。     

链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠2型糖尿病模型研究

目的建立与2型糖尿病(非胰岛素依赖型糠尿病、NIDDM)病人临床特征和发病过程相似的NIDDM动物模型.方法用高脂肪饲料喂养C57BL/6J雄性断乳小鼠3周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ),继续喂养4周,测定给药前和给药后1、3、4周非空腹血糖、实验结束时非空腹胰岛素水平,观察胰腺形态学变化.结果喂养3周后(给药前)高脂饲料-STZ组及高脂饲料-柠檬酸组血糖浓度(7.0±0.39)mmol/L、( 6.8±0.45)mmol/L高于普通饲料-STZ组及普通饲料-柠檬酸组(5.3±0.40)mmol/L、(5. 4±0.39)mmol/L,P＜0.05;实验结束时,高脂饲料-STZ组血糖浓度(13 .1±2.01)mmo/L高于高脂饲料-柠檬酸(6.9±0.46)mmol/L、普通饲料-柠檬酸组(6.0± 0.46)mmol/L和普通饲料-STZ组(7.1±0.62)mmol/L(P＜0.05),各组间血浆胰岛素浓度、体重及饮水量差异无显著性,P＞0.05;实验过程中高脂饲料STZ组和柠檬酸组小鼠每天进食热量(64.49±9.2)kJ/只,(70.7±9.6)kJ/只, 显著高于普通饲料STZ组和柠檬酸组(52.7±7.9)kJ/只,(57.3±11.7)kJ/只;各组小鼠胰腺和胰岛细胞形态正常.结论高脂肪饲料和STZ是用C57BL/6J断乳幼鼠建立NIDDM模型所必须的,100mg/kg体重STZ对普通饲料小鼠血糖无影响;用高脂饲料和STZ 处理的小鼠血糖升高、胰岛素浓度正常,与NIDM病人临床特征和发病过程相似;C57BL/6J小鼠易得,建模方法简便,费用低,是在NIDDM实验研究中能广泛使用的较理想的非遗传性NID DM动物模型.     

高脂饮食+STZ诱导2型糖尿病动物模型的优化和评价

目的在原有基础上进一步缩短造模时间,优化模型,使模型更加接近于2型糖尿病并且明确模型的适用范围,为抗糖尿病药物的筛选和评价提供一个更好的平台。方法进行三因素三水平的正交实验,考察不同因素间的组合对模型的影响,筛选出最佳的组合。对最佳组合进行模型稳定性和重复性考察:按照正交实验结果,对最佳的组合进行8周以上的观察,以考察其稳定性;用不同批次小鼠进行造模以考察其重复性。对优化后的模型进行药效学评价。结果正交实验筛选出的最佳组合是第三周开始注射streptozotocin(STZ),注射剂量为85mg/kg(注射两次,每次间隔5d),病理切片显示胰岛有一定的破坏但又恰到好处。模型具有很好的重复性和稳定性,造模的成功率在90%以上,血糖水平在注射STZ后稳定上升,注射1周后(第5周)维持稳定并且可以持续到8周以上。模型对药物的评价效果:优化后的模型对二甲双胍和匹格列酮具有很好的评价效果;同时也很好地改善了对促胰岛素分泌类药物如格列美脲的评价功效。结论成功地优化了模型,使得其更加接近于人类2型糖尿病状态,能够更好地用于评价治疗2型糖尿病的常见药物以及新药的筛选。