miR-19b通过调节线粒体功能抑制H2O2诱导H9c2心肌细胞凋亡

目的：研究microRNA(miR)-19b抑制H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡并探讨其机制。方法：使用过氧化氢(H₂O₂)诱导H9c2心肌细胞损伤模型,将H₂O₂诱导的H9c2细胞分别转染miR-19b模拟物、抑制剂及其阴性对照。大鼠H9c2心肌细胞株分为6组,对照(Control)组,H₂O₂组,H₂O₂+miR-19b mimic阴性对照(NC)组,H₂O₂+miR-19b mimic组,H₂O₂+miR-19b inhibitor组,H₂O₂+miR-19b inhibitor NC组。采用活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激水平,JC-1法检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化,试剂盒检测细胞色素c与线粒体共定位,Western Blot...     

黄芪甲苷对新生乳鼠心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的: 探讨黄芪甲苷(ASⅣ ) 对培养的心肌细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法: 体外培养的新生Wistar大鼠心肌细胞分为对照组、 0.1%二甲基亚枫（DMSO）溶剂组、H₂O₂损伤组 (0.2 mmol•L^-1)、阳性药黄芪注射液及 ASⅣ小、中、大（3 、10及30　mg•L^-1）剂量组。药物预先处理心肌细胞30 min 后,加入H₂O₂损伤心肌细胞24 h,观察ASⅣ对心肌细胞形态学的影响,MTT法测定心肌细胞存活力以及测量乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮（NO）含量的变化。结果: H₂O₂ 损伤组心肌细胞部分皱缩,细胞核暗淡,伪足消失;ASⅣ各剂量组心肌细胞损伤程度减轻,心肌细胞核折光性较H₂O₂ 损伤组好,伪足略变细; ASⅣ各剂量组细胞存活力均高于H₂O₂ 损伤组(P<0.05 或 P<0.01); ASⅣ10及30 mg•L^-1剂量组LDH、MDA含量低于H₂O₂损伤组(P<0.05 或 P<0.01),SOD、 NO含量高于H₂O₂损伤组 (P<0.05 或 P<0.01)。 结论:ASⅣ可对抗H₂O₂ 对心肌细胞的损伤,其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力、诱导NO生成有关。     

CaN抑制剂对H2O2诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的影响

目的：探讨过氧化氢（H₂O₂）诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡以及钙调神经磷酸酶（CaN）抑制剂他罗利姆（FK506）对细胞的保护作用,为心肌缺血/再灌注所致的心肌损伤及拮抗机制提供实验依据。方法：将大鼠H9c2心肌细胞株体外培养进行实验,实验分为正常对照组（n=6）和H₂O₂各处理组（n=6）。正常对照组采用生理盐水,实验各组分别用50、100、200和400 μmol•L^-1 H₂O₂处理1、 6和24 h后,用罗丹明（Rhodamme-123）荧光探针检测心肌细胞线粒体膜电位(Δψmt)变化,用Annexin-Ⅴ/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;并采用100 μmol•L^-1 H₂O₂处理6 h建立大鼠心肌细胞凋亡的损伤模型,给予高、低剂量FK506（0.60和0.15 μmol•L^-1）干预,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率。结果：①100、200和400 μmol•L^-1 H₂O₂处理组1 h 时线粒体膜电位均较对照组显著升高（P<0.01）, 6和24 h时,200和400 μmol•L^-1组Δψmt值均低于100 μmol•L^-1 组（P<0.05）,且400 μmol•L^-1组低于200 μmol•L^-1组（P<0.05）;②200和400 μmol•L^-1 H₂O₂处理组1　h 时心肌细胞凋亡率和坏死率均较对照组显著增加（P<0.05）,24　h达高峰。③ 高、低剂量FK506干预组与单纯100 μmol•L^-1H₂O₂处理组比较,心肌细胞凋亡率均明显降低（P<0.01）,高、低剂量组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：H₂O₂可损伤心肌细胞线粒体,引起线粒体膜电位下降,导致细胞凋亡。CaN抑制剂对H₂O₂诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡具有保护作用。     

牛磺酸对原代培养新生大鼠乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的作用

目的：探讨牛磺酸（Tau）对原代培养的新生大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用及对心肌成纤维细胞的生长抑制作用。方法：将心肌细胞分为对照组、H₂O₂损伤模型组以及H₂O₂损伤加药物治疗组：阳性药川芎嗪（Lig）组及Tau大、中、小（80、40及20 mmol·L^-1）剂量组，预先24 h给予治疗药物后使用0.5 mmol·L^-1 H₂O₂损伤心肌细胞6 h，观察Tau对心肌细胞形态学的影响，MTT法测定反映心肌细胞存活力的A值以及测量乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的变化；将心肌成纤维细胞随机分为7组，分别给予0、10、20、40、80、160及320 mmol·L^-1 Tau，MTT法测定不同浓度Tau对心肌成纤维细胞生长的影响。结果：H₂O₂损伤心肌细胞6 h后，Tau（80、40及20 mmol·L^-1）剂量组A值分别为0.479±0.055、0.437±0.052及0.421±0.062，与H₂O₂组（0.304±0.050）比较，差异均具有显著性（P<0.001或P<0.01）；Tau（80及40 mmol·L^-1）剂量组使H₂O₂损伤的心肌细胞LDH释放减少、SOD含量增加、MDA含量降低，与H₂O₂损伤组比较差异均具有显著性（P<0.01或P<0.05）；40～320 mmol·L^-1 Tau抑制心肌成纤维细胞的生长，与空白对照组比较差异具有显著性（P<0.05，P<0.01或P<0.001）。结论：Tau可通过减轻自由基对心肌细胞的损伤，抑制心肌成纤维细胞生长，达到心脏保护作用。     

枫叶黄酮抑制脂多糖诱导破骨前体细胞Raw264.7细胞激活的作用

目的 探讨枫叶黄酮对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导破骨前体细胞Raw264.7细胞炎性因子释放的抑制作用.方法 用LPS(5 mg/mL刺激Raw264.7细胞构建炎症模型,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测Raw264.7细胞的活力影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测一氧化氮(N0)和前列腺素E2,PGE2表达;运用免疫荧光染色方法 检测诱导型一氧化氮合酶和环氧合酶-2,COX-2、子肿瘤坏死因子-αTNF-α和白介素-1β,IL-1β、核因子-κB,NF-κB蛋白与mRNA的表达变化.结果 不同浓度的枫叶黄酮明显抑制了LPS诱导的Row246.7细胞NO、PGE2,iNOS和COX-2,TNF-α和IL-1β与NF-κB的上调,并且.NO、PGE2、iNOS、COX-2和NF-κB蛋白的表达呈剂量依赖性.结论 枫叶黄酮可抑制LPS诱导的破骨前体细胞Raw264.7细胞iNOS、COX-2和NF-κB/P65蛋白表达和炎性因子释放从而抑制破骨细胞的激活.     

大黄酸对过氧化氢致心肌细胞线粒体损伤的保护作用机制

目的 探讨大黄酸是否通过调节线粒体功能保护过氧化氢(H₂O₂)诱导的心肌细胞损伤。方法 应用H₂O₂建立心肌细胞损伤模型,实验分为3组：对照组(不用H₂O₂处理)、H₂O₂组(以H₂O₂诱导心肌细胞H9c2损伤)、大黄酸组(H₂O₂刺激心肌细胞H9c2造模,1μg/mL大黄酸干预)。采用噻唑蓝法检测细胞活力,电镜检测线粒体超微结构,JC-1检测线粒体膜电位,Western blot检测蛋白p-Drp1、Drp1、OPA1、Bax、Bcl-2及Caspase 3表达水平。结果 与对照组相比,H₂O₂组能明显抑制细胞活力(P<0.05),大黄酸组中3个浓度均能显著增加细胞活力,大黄酸浓度为1μg/mL细胞活力最显著(P<0.01)。对照组线粒体轮廓完整,棱嵴清晰;H_...     

姜黄素对大鼠慢性细菌性前列腺炎的干预作用及其机制研究

目的：评价姜黄素对大鼠慢性细菌性前列腺炎（chronic bacterial prostatitis，CBP）炎性状态的影响及探讨其可能相关机制。方法：随机将40只SD大鼠分为姜黄素200 mg组、姜黄素100 mg组、氧氟沙星组、模型组及假手术组。采用大肠杆菌混悬液前列腺内注射的方法建立大鼠CBP模型，1个月后各治疗组给予药物治疗，持续12 d，电镜观察各组前列腺组织病理改变，real-time PCR测其环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）与诱导性一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS） mRNA的表达，ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及Western blot测定核转录因子-?资B（nuclear factor κB，NF-κB）蛋白的表达水平。结果：①COX-2、iNOS mRNA及TNF-α在模型组中表达与假手术组比较都有升高（P=0.000，P=0.000，P=0.000），而各治疗组相对模型组而言其表达都有不同程度的降低（P<0.01），其中姜黄素200 mg组相对姜黄素100 mg组与氧氟沙星组表达量降低更为明显（COX-2：P=0.015，P=0.000；iNOS：P=0.000，P=0.000）。②采取姜黄素治疗的2组能够抑制NF-κB的表达，随着剂量提高作用越明显，且与COX-2、iNOS、TNF-α的表达呈正相关（rs=0.959，P=0.000；rs=0.945，P=0.000；rs=0.910，P=0.000），氧氟沙星组对NF-κB无明显影响。结论：姜黄素对大鼠CBP炎性状态有抑制作用，随剂量增加效果增强，其作用可能与抑制NF-κB的表达有密切关系。     

谷氨酰胺抑制过氧化氢诱导的A549细胞凋亡

目的观察谷氨酰胺诱导A549细胞表达HSP70及在抗过氧化氢（H2O2）诱导的细胞凋亡中的作用。方法体外培养A549细胞,随机分为4组：①空白对照组（C组）即生理盐水组;②谷氨酰胺组（Gln组）：以含谷氨酰胺8mmol/L的培养液预处理细胞;③过氧化氢组（H₂O₂组）：以浓度为400μmol/L过氧化氢处理细胞;④谷氨酰胺预处理后过氧化氢刺激组（Gln+H₂O₂组）：以含谷氨酰胺8mmol/L预处理细胞后,再加入400μmol/L过氧化氢处理细胞. 用免疫印记（Western blotting）法检测HSP70蛋白的表达,记录平均灰度值;用流式细胞仪Annexin-V法检测细胞凋亡,计算细胞总凋亡率。结果① 与C组HSP70表达（1.87±0.55） 相比,Gln组（8.42±1.38）、H₂O₂组（9.35±1.57）和Gln+H₂O₂组（13.12±1.85）的HSP70表达分别增高约4.5倍、5倍和7倍（P＜0.01）;与H₂O₂组HSP70表达相比,Gln+H2O2组进一步增高（P＜0.01）;②与C组相比,Gln组细胞总凋亡率无明显变化;H₂O₂组和Gln+H₂O₂组细胞总凋亡率分别为7.48%和6.06%,均明显高于C组（P＜0.01）;与H₂O₂组相比,Gln+H₂O₂组细胞总凋亡率明显降低（P＜0.01）。结论谷氨酰胺诱导A549细胞表达HSP70并可明显地抑制H2O2所致的细胞凋亡作用。     

miR-26a-5p对H2O2诱导的EA.hy926血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨miR-26a-5p对过氧化氢(H₂O₂)诱导的EA.hy926内皮细胞焦亡和血栓因子(TF)的影响及其机制。方法 MTT法检测不同浓度H₂O₂(0,100,300,400,450,500,700μmol/L)刺激EA.hy926内皮细胞后的存活率。为了研究H₂O₂对EA.hy926内皮细胞的影响，分为control组(0μmol/L H₂O₂)和450μmol/L H₂O₂组；为了研究miR-26a-5p对过氧化氢(H₂O₂)诱导的EA.hy926内皮细胞损伤的影响及其与PI3K/Akt信号通路的关系，分为miR-26a-5p mimic+H₂O₂组，mimic NC+H₂O₂组，miR-26a-5p inhibitor+H     

幽门螺杆菌感染及其相关疾病中COX-2、iNOS、NF-κB表达及其相互关系

目的:研究幽门螺杆菌感染及其相关疾病中COX-2、iNOS、NF-κB表达及其相互关系。方法:采用免疫组化法检测294例胃粘膜标本中COX-2、iNOS的表达和NF-κB的活化。结果:1各实验组和对照组胃粘膜炎症细胞和腺细胞中的COX-2阳性积分有显著差异,其中以IM+DYS组最高;且CSG和IM+DYS组HP阳性炎症细胞中COX-2表达明显高于HP阴性;2各实验组和对照组炎症细胞中iNOS的阳性积分有显著差异,其中以CSG组最高,IM+DYS组次之;在CSG和IM+DYS组HP阳性炎症细胞中iNOS表达明显高于HP阴性;3中、重度CSG炎症细胞中iNOS表达高于轻度CSG组;4各实验组HP阳性者NF-κB活化率均低于HP阴性,其中CSG组有显著差异;5各实验组胃粘膜中COX-2和iNOS的表达呈显著正相关;iNOS的表达和NF-κB的活化呈显著负相关;COX-2的表达和NF-κB的活化无显著相关性。结论:1HP感染可能通过诱导COX-2、iNOS的过度表达参与HP的致病过程及胃癌发生的早期进程。2HP感染者NF-κB活化程度降低可能与HP感染上调COX-2和iNOS的表达,进而反馈抑制NF-κB活化有关。3COX-2、iNOS的表达和NF-κB的活化,在HP的致病过程中相互作用,相互影响,相互制约。     

NALP3及NF-κB信号通路在氧化应激反应中的作用及阿魏酸钠的干预效应

目的 检测氧化应激时人肺上皮细胞（A549）炎性复合体NALP3、核转录因子-kappa B （NF-κB）基因和蛋白的表达,探讨阿魏酸钠对其的干预作用及可能的作用机制。方法 培养A549细胞,分为对照组、 H2O2（100 μmol/L）应激组、NF-κB阻断剂组（PDTC + H2O2组）、阿魏酸钠干预组（阿魏酸钠+H2O2组）,其中PDTC(100 μmol/L)和阿魏酸钠（400 μg/mL）预处理30 min后加入H2O2（100 μmol/L）,培养2 h后,采用实时荧光定量-PCR （qRT-PCR）检测NALP3、NF-κB（P65） mRNA的表达; Western blot检测NALP3、IκBα蛋白的表达;酶联免疫吸附（ELISA）测定细胞上清中白介素-1β（IL-1β）的表达。结果 与对照组比较,H2O2 可使A549细胞NALP3 mRNA、NALP3蛋白水平表达增强,NF-κB（P65） mRNA表达上调、IκBα降解增强,IL-1β分泌增加（P均<0.05）;而阿魏酸钠及NF-κB阻断剂PDTC可抵抗H2O2对A549细胞的作用,与H2O2应激组比较,下调NALP3 mRNA、NALP3蛋白、NALP3、NF-κB（P65） mRNA表达,IκBα降解减少,IL-1β分泌下降（P均<0.05）,并且阿魏酸钠与NF-κB阻断剂PDTC上述作用差异无统计学意义。结论 阿魏酸钠可能通过抑制NF-κB的活化,减少NALP3及IL-1β的表达,从而减轻氧化应激导致的炎症反应。     

N-乙酰半胱氨酸对肺微血管内皮细胞核因子κB活性影响的体外研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对人肺微血管内皮细胞（HPMEC）核岗子κB（NF—κB）结合活性和环氧合酶-2（COX-2）表达的影响机制。方法体外培养HPMEC细胞株,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测NAC对HPMEC增殖活化的抑制作用,分别采用NAC（1mmol／L）处理1h,肿瘤坏死因子α（TNF-α）（100ng／mL）处理1h。NAC＋TNF-α联合处理。凝胶电泳移动抑制实验检测HPMECNF—κB的结合活性;免疫蛋白质印迹检测相应的HPMEC胞质内NF—κB抑制蛋白（IKB—α）的表达;免疫细胞化学观察HPMECNF—κB表达的核内转移;激光共聚焦检测NAC对HPMEC中COX-2表达的影响。结果NAC对HPMEC的增殖活化有明显抑制作用,NAC＋TNF-α联合处理组吸光度值明显低于TNF-α处理组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。TNF—α刺激后具有诱导HPMECNF—κB结合活性．且IKB-α表达明显减弱,NAC处理组IKB-α表达高于TNF—α处理组,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。TNF—α处理1h后．HPMECNF—κB的主要表达从细胞质转移至细胞核内;NAC预处理后联合TNF—α刺激,HPMECNF—κB表达主要位于细胞质．出现核内转移极少。HPMEC经TNF-α处理后细胞内COX-2表达明显高于NAC＋TNF—α联合处理组以及正常对照组．差异均有统计学意义（均P〈0．05）;而NAC＋TNF-α联合处理组与正常对照组比较。差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NAC可抑制HPMEC增殖活化;NAC可抑制HPMECNF—κB结合活性、减少核内转移发生和COX-2的表达。     

抑制炎症反应治疗急性肺损伤的实验研究

目的通过观察急性肺损伤（ALI）大鼠血液和肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒ等炎性细胞因子的变化,探讨抑制炎症反应在治疗急性肺损伤中的作用。方法应用气管内滴入内毒素（LPS）复制大鼠急性肺损伤模型。将48只大鼠随机分成4组：对照组（N组）、LPS组、N-乙酰半胱氨酸（NAC）治疗组（NAC组）、NAC联合地塞米松（Dex）治疗组（NAC＋Dex组）,采用免疫印迹法（Western Blotting）检测NF-κΒ的含量,采用RT-PCR检测肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒmRNA的表达,并采用放免检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的IL-6、TNF-α的含量。结果LPS组大鼠肺病理可见明显的肺损伤表现,NAC组及NAC＋Dex组肺组织病理改变明显减轻;NAC组及NAC＋Dex组肺NF-κB,肺IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κΒmRNA表达水平及血清和BALF中的IL-6、TNF-α含量明显高于N组（P〈0.01）,而明显低于LPS组（P〈0.05）。结论NAC、Dex等可以抑制炎症反应,减少炎性介质的释放从而减轻肺损伤的程度,达到防治急性肺损伤的目的。     

通心络胶囊对自发性糖尿病模型大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用

目的：观察通心络胶囊对自发性糖尿病模型大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用。方法：4月龄GK大鼠30只,随机分为GK对照组、通心络高低剂量组。另取4月龄Wister大鼠10只,作为正常对照组。各组分别灌胃12周,取心肌切片作HE染色、NF—κB免疫组化染色。取心肌匀浆,酶联免疫方法测定心肌NF-κB、细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、白介素-1（IL-1）含量,放免法测定肿瘤坏死因子（TNF-α）、内皮素-1（ET-1）、血管紧张素-Ⅱ（AT_II）含量。结果：①与正常大鼠比较,GK大鼠心肌NF—κB阳性表达增高（P〈0．01）,通心络组表达降低（P〈0.01）,匀浆NF—κB、sICAM-1、TNF-α、ET-1含量均有不同程度增高（P〈0.01-0．05）,通心络组降低（P〈0．01～0．05）,在降低TNF-α、ET-1方面,高低剂量通心络有显著性差异（P〈0．01-0．05）。②IL-1、AT—Ⅱ、NO含量,GK大鼠与正常大鼠无差异（P〉0．05）,通心络组却能够升高IL-1AT-Ⅱ含量（P〈0．01）。结论：通心络胶囊能抑制心肌组织NF—κB阳性表达,降低心肌匀浆NF—κB、sICAM-1、TNF-α等炎症因子含量,降低ET-1含量,减轻心肌病变。对IL-1、AT-Ⅱ、NO无明显影响。对微血管痉挛有一定的防治作用。     

塞来昔布在2型糖尿病中的作用及其机制

目的：探讨新型非甾体抗炎药塞来昔布在2型糖尿病中作用及其机制。方法：80例患者随机分为拜唐平＋二甲双胍治疗方案组（A组）、塞来昔布联合拜唐平＋二甲双胍治疗方案组（B组）及20例健康对照组。比较各组治疗前、后血糖、C-反应蛋白（C—Reaction protein,CRP）、核转录因子-κB mRNA水平,肿瘤坏死因子（TNF—α）、白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）含量水平的差异;比较各治疗组治疗前与治疗后上述各指标含量的差异。结果：治疗前各治疗组与健康对照组相比较血糖、CRP、血中NF—κB mRNA水平,TNF—α、IL-2、IL-6含量水平的差异均有显著性（P〈0．05）;各治疗组治疗前、后之间CRP、血中NF—κB mRNA水平,TNF—α、IL-2、IL-6含量水平的差异均有显著性（P〈0．05）;治疗后,治疗组1与治疗组2相比较,血糖差异无显著性（P〈0．05）。结论：在2型糖尿病患者中存在明显的炎症反应过程,塞来昔布作为新型非甾体抗炎药,其不仅具有明显的抗炎症反应,且可降低患者的血糖水平。     

肺岩宁方在人肺癌细胞系对肿瘤坏死因子α诱导的iNOS和COX-2表达的影响

目的：探讨中药肺岩宁方含药血清对肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）诱导的人肺癌细胞系A549诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）和环氧合酶2（cyclooxygenase-2, COX-2）表达的影响。 方法：制备肺岩宁方含药血清,以肺癌细胞系A549为靶细胞,实时聚合酶链反应法及蛋白质免疫印迹法检测肺岩宁方含药血清对TNF-α诱导的iNOS及COX-2表达的影响;二氨基乙酰乙酸荧光素检测NO产物;人iNOS重组质粒用脂质体转染法导入A549细胞24 h后,肺岩宁方含药血清治疗24 h,采用双荧光素酶报告基因系统测定肺岩宁方含药血清对TNF-α诱导的细胞核iNOS转录活性的影响。 结果：与对照血清比较,TNF-α明显提高iNOS和COX-2的表达,与肺岩宁方含药血清共同作用后,显著抑制二者的表达（P＜0.01, P〈0.01）;肺岩宁方含药血清显著降低了A549细胞经iNOS重组质粒转染后的转录活性（P＜0.01, P〈0.01）及NO产物的产生。 结论：肺岩宁方含药血清抑制肺癌细胞的部分机制可能是抑制iNOS和COX-2基因的活性。     

核因子-κB在红霉素抗炎机制的表达

目的：从分子水平上探讨红霉素（EM）的抗炎作用机制,为临床防治慢性阻塞性肺疾病提供新的思路。方法：体外培养人支气管上皮细胞（16HBE）,将细胞随机分为8组,先加入EM干预,后加入肿瘤坏死因子（TNF-α）刺激。分组：①空白对照组;②TNF-α（20μg／L,16h）;③EM（0．3mg／L,24h）＋TNF-α（20μg／L,16h）;④EM（3mg／L,24h）＋TNF-α（20μg／L,16h）;⑤EM（30mg／L,24h）＋TNF-α（20μg／L,16h）;⑥EM（0．3mg／L,48h）＋TNF-α（20μg／L,16h）。然后收集各组细胞分别提取核蛋白,应用电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测核因子-κB（NF-κB）的活性。结果：EMSA结果显示,TNF-α刺激人支气管上皮细胞（16HBE）后,细胞内NF-κB表达增高。先加入不同浓度及作用时间的EM,后加入前炎因子TNF-α刺激16HBE,EMSA结果显示各组细胞NF—κB表达均降低,且提示有随着EM浓度增加,作用时间延长,NF-κB表达受抑制愈明显的趋势,但随着EM浓度增加及作用时间延长到一定的范围,NF-κB表达受抑制差别不明显。结论：TNF-α能激活16HBENF-κB,促进炎症的发生发展,在炎症进程中发挥着重要作用。EM能抑制人16HBENF-κB的激活水平,这可能是EM的抗炎作用机制之一。     

Mitochondrial proteomic analysis of isopsoralen protection against oxidative damage in human lens epithelial cells

Objective:To investigate the protective effects of the natural medicinal monomer isopsoralen（ISR） with estrogenic activity against oxidative damage in human lens epithelial cells B3（HLE-B3） caused by hydrogen peroxide（H₂O₂） and to pursue the possible mitochondrial proteomic regularity of the protective effects.Methods: HLE-B3 cells were treated with H₂O₂（300μmol/L）,β-estradiol(E₂:10^-8 mol/L) and H₂O₂,ISR(10^-5 mol/L) and H₂O₂,or left untreated.Altered expressions of all mitochondrial proteins were analyzed by protein array and surfaceenhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry（SELDI-TOF-MS）.The mass/charge（m/z） ratios of each peak were tested by the Kruskal-Wallis rank sum test,and the protein peak value of the m/z ratio for each treatment by pair comparison was analyzed with the Nemenyi test.Results:H₂O₂ up-regulated the expressions of two protein spots（with m/z of 6532 and 6809）.E₂ mitigated the oxidative damage,and the expression of one protein spot（m/z 6532） was down-regulated.In contrast,ISR down-regulated both of protein spots（m/z 6532 and 6809）.Conclusions:ISR could effectively inhibit H₂O₂-induced oxidative damage in HLE-B3 cells.The protein spot at m/z of 6532 might be the target spot of ISR against oxidative damage induced by H₂O₂.     

七叶亭预处理对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨七叶亭(Esculetin)预处理对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham 组)、缺血再灌注损伤组(MIRI)、七叶亭预处理组(esculetin组)、缺血预处理组(IPC组).测定血清肌酸激酶(CK)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-10水平...     

大鼠缺血再灌注心肌TLR4，TNF-α，NF-κB表达及其关系

目的：研究缺血再灌注大鼠心肌TLR-4,TNF-α仪和NF-κB的表达及相互关系．方法：建立大鼠缺血再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注30min组、再灌注60min组、再灌注90min组．以RT—PCR法检测心肌中TLR4及TNF—α mRNA的表达．结果：各种心肌中均检测到TLR4的表达,缺血及再灌注后TLR-4 mRNA含量显著增加,随着再灌注时间延长,TLR-4 mRNA含量增加更为显著．缺血组与假手术组TNF—α mRNA表达无统计学差异,而再灌注后表达显著增加,随再灌注时间延长,TNF-α mRNA含量继续增加更为明显．缺血及再灌注后心肌NF—κB mRNA表达增加,随再灌注时间延长,NF—κB mRNA含量继续增加,具有统计学意义．TLR-4表达增加时TNF—α和NF-κB表达也增加,三者有一定相关性．结论：心肌缺血再灌注损伤使TLR-4,TNF—α表达增高,阻断TLR-4可能有助于减轻缺血再灌注所致心肌损伤,并抑制急性炎症反应的发生．