补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症大鼠PKC信号通路的影响

目的：研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法：将50只SPF级8～10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体移植法复制EMs大鼠模型,造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方低、高剂量及孕三烯酮灌胃,假手术和模型组灌胃蒸馏水,连续21 d。HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态改变;Western blot测定在位内膜及异位灶磷酸化蛋白激酶C的α亚型(p-PKCα)、蛋白激酶C的α亚型(PKCα)蛋白的表达水平。结果：模型组在位内膜和异位灶p-PKCα蛋白水平升高;给予补肾温阳化瘀方治疗后,p-PKCα的蛋白表达水平降低(P<0.05),PKCα的蛋白表达水平无明显变化。结论：补肾温阳化瘀方通过抑制PKC信号通路来治疗EMs。     

补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症TRPV1及其致敏因子NGF的影响

目的研究补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)简称内异症,瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ(transientreceptor potential vanilloid receptor 1,TRPV1)及致敏因子神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的影响,以探讨补肾温阳化瘀方治疗EMT疼痛的作用机制。方法将近交系BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、孕三烯酮组,每组15只。观察各组扭体反应,并采用酶联免疫法(ELISA)检测血清NGF的含量,采用免疫组化SP法及Western blot法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白的表达,采用Real-time PCR方法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组血清NGF含量显著高于假手术组(P0.01),且与小鼠扭体次数呈正相关(r=0.574,P0.01);与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组血清NGF含量显著下降(P0.05);模型组子宫NGF、TRPV1蛋白及NGF、TRPV1 mRNA表达均高于假手术组(P0.01)。与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白表达均显著降低(P0.01),NGF、TRPV1 mRNA以中药高剂量组下降最为明显(P0.01)。子宫及异位灶NGF与TRPV1蛋白及mRNA表达均呈正相关(P0.01)。结论 TRPV1及致敏因子NGF共同参与了EMT疼痛的发生;补肾温阳化瘀方可通过降低NGF对TRPV1的上调作用从而发挥抑制EMT疼痛的作用。     

基于miR-221介导的细胞自噬探讨补肾温阳化瘀方治疗肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症的作用机制

目的：探讨补肾温阳化瘀方治疗大鼠肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症（EMs）的疗效及可能的作用机理。方法：将100只实验大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组,每组20只,肾阳虚血瘀组EMs造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方高、低剂量及孕三烯酮灌胃,假手术组和模型组纯净水灌胃,连续3周。Western blot检测Beclin-1、P62蛋白表达;RT-PCR检测miR-221及Beclin-1、P62 mRNA水平。结果：与假手术组比较,模型组在位内膜的Beclin-1蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,P62蛋白及mRNA水平显著下降（P<0.01,P<0.05）,miR-221水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,中药高、低剂量组在位内膜及异位灶的Beclin-1蛋白及mRNA水平显著下降（P<0.05）,P62蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,miR-221水平显著下降（P<0.01,P<0.05）。miR-221与Beclin-1 mRNA呈现正相关...     

化浊解毒补肾祛瘀方对实验性子宫内膜异位症大鼠FIH-1α的影响

目的:观察化浊解毒补肾祛瘀方治疗前后子宫内膜异位症模型大鼠子宫内膜异位灶局部病变组织中的乏氧诱导抑制因子(FIH-1α)表达的变化,从分子学角度进一步揭示浊解理论的作用机制。方法:选用动情周期正常的健康清洁级Wistar雌性大鼠80只,随机选取24只分为正常组和假手术组(每组各12只),其余56只造子宫内膜异位症模型。将造模成功的40只大鼠按随机数字表法分为中药高剂量组、中药低剂量组、模型对照组、西药组,每组10只,分别每日灌胃相应药物或生理盐水,连续4周。末次给药后,禁食8h,选择动情期的大鼠断头处死,分别进行免疫组化染色,测定组织中的FIH-1α的表达。结果:中药高剂量组、中药低剂量组大鼠FIH-1α表达均高于模型对照组;中药低剂量组FIH-1α表达高于正常组;中药高剂量组FIH-1α表达高于中药低剂量组。结论:化浊解毒补肾祛瘀方能显著提高内异症模型大鼠异位组织中FIH-1α的表达。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症肾阳虚血瘀证模型大鼠HIF-1α、PHD2、VHL表达的影响

目的观察补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)肾阳虚血瘀证模型大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)、希佩尔-林道抑癌基因(von Hippel Lindau disease,VHL)表达的影响,探讨EM发病机制及补肾温阳化瘀方治疗EM的作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只。其中正常组、假手术组常规饲养,模型组、中药组、西药组采用"延长冰箱冷冻加冰水浸泡"30天,再结合"自体移植法"创建EM肾阳虚血瘀证模型。术后中药组给予补肾温阳化瘀方(3.33 g/mL)1mL灌胃,西药组予以孕三烯酮0.5 mg/(kg·d)灌胃,模型组、正常组、假手术组灌服等体积的生理盐水,共给药4周。观察大鼠异位灶大小及形态,放免法检测血清CA125、血浆环磷酸腺苷(cAMP)、血浆环磷酸鸟苷(cGMP)的表达,HE染色光镜观察子宫在位内膜及异位组织形态学的变化,免疫组化SABC法、Western blot法检测HIF-1α、PHD2、VHL蛋白表达及含量,RT-PCR方法检测HIF-1α、PHD2、VHL mRNA表达。结果模型组大鼠异位灶生长明显,中药组、西药组治疗后,异位灶体积明显缩小。与正常组及假手术组比较,模型组CA125及cGMP水平明显升高,cAMP水平明显降低(P0.05);HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均升高(P0.05),PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均降低(P0.05)。与模型组比较,中药组及西药组CA125及cGMP水平明显降低,cAMP水平明显升高,HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均降低,PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与中药组比较,西药组PHD2蛋白含量更高(P0.05)。HIF-1α与PHD2呈负相关(r=-0.799,P=0.00),HIF-1α与VHL呈负相关(r=-0.625,P=0.003)。结论补肾温阳化瘀方可有效治疗EM,其作用机制可能与降低HIF-1α、CA125、cGMP含量,上调PHD2、VHL、cAMP表达有关。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症模型大鼠内膜组织缺氧诱导因子-1α、葡萄糖转运因子-1表达的影响

目的: 探讨补肾温阳化瘀方治疗内异症的可能作用机制。 方法: 选用SPF级雌性大鼠复制腹膜型内异症大鼠模型,将造模成功的大鼠分为4组:补肾温阳化瘀方高剂量组(16只)、低剂量组(16只)、丹那唑组(16只)、模型组(17只),并设对照组(12只)。运用免疫组化(S-P)法,检测内异症模型大鼠治疗前、后异位内膜组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运因子-1(GLUT-1)的表达,并比较治疗前后异位灶体积变化。 结果: 补肾温阳化瘀方高、低剂量组及丹那唑组治疗后子宫内膜异位灶体积较治疗前明显缩小(P<0.05),且以补肾温阳化瘀方高剂量组最显著(P<0.01);HIF-1α,GLUT-1在模型组异位内膜的表达与对照组在位内膜相比显著升高(P<0.01);补肾温阳化瘀方高、低剂量组及丹那唑组均能够显著抑制HIF-1α,GLUT-1的高表达(P<0.01),与对照组表达无明显差异,且以中药高剂量组作用效果最显著,低剂量组次之;丹那唑组与补肾温阳化瘀方高剂量组比较抑制效果有差异(P<0.05)。 结论: 补肾温阳化瘀方可能通过抑制HIF-1α与GLUT-1的表达达到治疗内异症的目的。     

活血消异方对子宫内膜异位症模型大鼠骨桥蛋白、肿瘤坏死因子-α 表达的影响

目的探讨OPN、TNF-α与子宫内膜异位症不孕的相关性以及活血消异方改善子宫内膜异位症不孕可能的作用靶点。方法采用改良同种异体移植法建立子宫内膜异位症模型大鼠,设空白组、模型组、假手术组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,连续给药3周后,RT-PCR方法检测腹腔液中OPN含量,ELISA方法检测血清和腹腔液中TNF-α含量。结果子宫内膜异位症模型大鼠腹腔液中OPN、TNF-α以及血清中TNF-α的含量明显高于空白组和假手术组(P<0.05);经活血消异方和GnRH-α干预的中药低剂量组、中药高剂量组和西药组OPN、TNF-α的含量较模型组显著降低(P<0.05);西药组、中药高剂量组OPN、TNF-α的含量明显低于中药低剂量组(P<0.05),中药高剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论子宫内膜异位症可导致大鼠OPN、TNF-α的过表达;活血消异方可有效降低子宫内膜异位症大鼠OPN、TNF-α的表达水平,且存在量效关系。     

化瘀汤对大鼠子宫内膜异位症的药效学研究

目的:研究化瘀汤(丹参、三棱、莪术等)对子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠TNFα-和E2水平的影响,及其抗炎镇痛作用。方法:采用手术法移植大鼠自体子宫内膜建立子宫内膜异位症模型,造模成功四周后随机分为5组:模型、高、中、低剂量组和丹那唑组,分别灌胃给药,三周后麻醉处死大鼠。进行病理组织学检查,用放免法测大鼠血清中TNFα-和E2水平。用小鼠扭体和耳廓肿胀法考察化瘀汤抗炎镇痛的作用。结果:化瘀汤组大鼠异位内膜呈不同程度的萎缩,腺体减少,血清中TNFα-和E2水平明显低于模型组。化瘀汤还对醋酸所致的小鼠扭体和二甲苯所致耳廓肿胀有较好的抑制作用。结论:化瘀汤能抑制异位内膜组织的增生,促进炎症包块的消退,并有很好抗炎镇痛作用,这可能与其抑制TNFα-分泌和E2水平有关。     

温肾化瘀法对肾虚血瘀型子宫内膜异位症患者血清BK及PGF2α的影响

目的探讨温肾化瘀法治疗肾虚血瘀型子宫内膜异位症的临床疗效及作用机理。方法采用温肾化瘀法治疗肾虚血瘀型子宫内膜异位症30例,进行治疗前后症状及体征评分、观察治疗前后血清中缓激肽(bradykinin,BK)、PGF2α的变化。结果观察组总有效率为70%;治疗3个月经周期后痛经VAS评分、症状及体征评分均低于治疗前(P0.01);治疗后血清BK、PGF2α水平明显降低(P0.01)。结论温肾化瘀法可明显改善患者临床症状及体征,降低患者血清中BK、PGF2α的含量,提示温肾化瘀法可通过调节致痛物质Bk及PGF2α的释放发挥治疗子宫内膜异位症的作用。     

益气活血中药对大鼠异位子宫内膜组织IL-2、IL-6的影响

目的探讨益气活血中药对大鼠异位子宫内膜组织IL-2、IL-6的影响。方法建立大鼠子宫内膜异位症模型,造模大鼠饲养3周后,随机分为模型组、中药低剂量组、中药高剂量组及西药组,每组6只,各组大鼠进行相应的药物干预。4周后取各组大鼠异位子宫内膜组织固定、切片,采用免疫组化法检测IL-2、IL-6的表达水平。结果与模型组及中药低剂量组比较,中药高剂量组及西药组IL-2的表达升高,IL-6的表达下降,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论益气活血中药可调节异位子宫内膜组织中IL-2、IL-6的含量,干扰异位内膜的生长,从而起到治疗作用。     

宁心缓痛汤对子宫内膜异位症小鼠治疗作用的实验研究

目的观察宁心缓痛汤对子宫内膜异位症小鼠模型的治疗作用。方法昆明种小鼠50只，辛性，体重18～22g，采用子宫内膜自体移植法建立小鼠子宫内膜异位症模型，造模2周后，除假手术组外，其余小鼠随机分为模型组、桂枝茯苓胶囊阳性对照组、宁心缓痛汤低剂量组、宁心缓痛汤高剂量组，连续给药4周，观察各组小鼠血清IL-1、TNF—α的变化并对异位病灶作组织病理学观察。结果宁心缓痛汤可不同程度改善子宫内膜异位症小鼠病理学改变并对其血清IL-1β和TNF—α有一定的调节作用，与模型组比较有统计学差异（P〈0．05，P〈0．01）。结论宁心缓痛汤对子宫内膜异位症小鼠有一定的治疗作用，其作用机制可能与调节炎性因子作用有关。     

化瘀散结灌肠液对子宫内膜异位症盆腔痛大鼠的影响实验研究

目的：观察化瘀散结灌肠液对子宫内膜异位症(EMT)盆腔痛模型大鼠核因子κB通路、炎症介质及氧化应激因子的影响,探讨化瘀散结灌肠液治疗EMT盆腔痛的机制。方法：40只雌性SD大鼠,按随机数字表法选取6只为假手术组,其余大鼠通过自体子宫内膜移植法联合雌激素加缩宫素注射建立EMT盆腔痛大鼠模型,选取30只造模成功的大鼠按随机数字表法分为模型组、阳性对照组及化瘀散结灌肠液低剂量灌肠组、化瘀散结灌肠液中剂量灌肠组、化瘀散结灌肠液高剂量灌肠组,每组6只。灌肠给药4周后,观察扭体反应,并进行病理观察,检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的表达及异位病灶组织核因子κB蛋白的表达水平。结果：与模型组比较,化瘀散结灌肠液低剂量灌肠组、化瘀散结灌肠液中剂量灌肠组、化瘀散结灌肠液高剂量灌肠组大鼠扭体次数显著减少(P<0.05),血清中IL-1β、TNF-α、MDA含量显著降低(P<0.05),SOD含量显著增高(P<0.05),异位病灶组织中核因子κB蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论：化瘀散结灌肠液可能...     

补肾温阳化瘀法治疗子宫内膜异位症30例

目的:通过检测补肾温阳化瘀法对子宫内膜异位症患者血清糖链抗原-125(CA125)的影响,观察补肾温阳化瘀中药对子宫内膜异位症的治疗作用,并通过检测子宫内膜异位症患者治疗前后血清细胞间黏附分子-1(sICAM-1),血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)的变化,观察细胞黏附分子在子宫内膜异位症发病中的作用.方法:采用补肾温阳化瘀法治疗内异症患者30例,分别于治疗前后于卵泡期相同时间分别抽取空腹肘静脉血,测定治疗前后血清中CA125,sICAM-1,sVCAM-1的含量变化.结果:补肾温阳化瘀法治疗本病总有效率73.33％,补肾温阳化瘀法能降低内异症患者血清中CA125的水平(P＜0.01),内异症患者血清sICAM-1,sVCAM-1含量明显升高(P ＜0.05,P＜0.01),经过中药治疗后降低(均P＜0.01),有统计学意义.结论:ICAM-1,VCAM-1在子宫内膜异位症发病中起着一定的作用,补肾温阳化瘀法通过降低sICAM-1,sVCAM-1含量从而在对子宫内膜异位症起到治疗作用.     

健脾益气中药对小鼠异位内膜黏附因子的干预作用

目的观察健脾益气中药对子宫内膜异位症模型小鼠异位内膜的影响，以初步探讨子宫内膜异位症中健脾益气中药对小鼠异位内膜黏附的作用。方法用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因和野生型C57BL/6J小鼠建立子宫内膜异位症模型，模型组给予等量的生理盐水腹腔注射，中药组给予健脾益气中药灌胃。2周后处死动物，成像并比较两组小鼠荧光表达的强弱；Westem blot和Real time PCR等技术检测异位内膜的黏附因子ICAM-1（CD54）、CD44。结果镜下可见模型小鼠肠管间、腹壁下、肝小叶下或脾周形成绿色团块状或星点状内膜异位病灶，中药组异位灶体积及荧光表达强度明显低于模型组（P〈0．01）；中药组和模型组与空白对照组异位内膜细胞的凋亡率差异均具有显著性（P〈0．01），中药组与模型组间的凋亡率无显著性差异；中药组CD44、CD54 mRNA表达显著低于模型组（P〈0．01）；以2^-△△α”计算CD44、CD54 mRNA表达量（空白对照组为1），模型组、中药组的CD44 mRNA表达量分别是空白对照组的16．34、2．06倍；CD54 mRNA表达量分别是空白对照组的1．53、1．15倍。结论健脾益气中药可抑制子宫内膜异位症模型小鼠异位内膜的黏附和病灶的产生，这种作用可能与降低黏附因子ICAM-1、CD44的表达有关。     

复方血竭贴膏治疗子宫内膜异位症的实验研究

目的评价复方血竭贴膏对子宫内膜异位症模型大鼠的疗效。方法采用手术移植方法建立子宫内膜异位症模型,用酶免法测定各组大鼠血浆PGF2α水平,并对异位病灶进行体积和重量的测量及病理组织学检查。结果模型组大鼠血浆PGF2α水平比正常组和假手术组明显升高,复方血竭贴膏组和达那唑组与模型组比较,血浆PGF2α水平有不同程度的降低;复方血竭贴膏组和达那唑组子宫内膜异位病灶体积和重量,与模型组相比均有不同程度的体积缩小和重量减轻。结论复方血竭贴膏能够抑制异位内膜生长和降低血浆PGF2α水平。     

活血消异方对子宫内膜异位症妊娠功能低下模型小鼠HOXA10基因的影响

目的:通过观察中药活血消异方对子宫内膜异位症妊娠功能低下模型小鼠着床窗口期子宫内膜HOXA10基因表达量的影响,探讨子宫内膜异位症对子宫内膜容受性的影响机制以及活血消异方对子宫内膜异位症相关不孕症子宫内膜容受性改善的作用机理。方法:建立子宫内膜异位症妊娠功能低下的小鼠模型,随机分为模型组、中药组及假手术组,采用RT-PCR法检测各组小鼠种植窗口期子宫内膜HOXA10的表达水平。结果:假手术组种植窗口期子宫内膜HOXA10mRNA表达量高于中药组及模型组,差异有统计学意义(P0.05);而中药组种植窗口期子宫内膜HOXA10mRNA表达量高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:子宫内膜异位症可导致小鼠种植窗口期HOXA10mRNA表达下调,进而降低其子宫内膜容受性。而中药活血消异方可上调小鼠子宫内膜HOXA10mRNA的表达,改善着床窗口期子宫内膜容受性。     

补肾温阳化瘀法治疗子宫内膜异位症痛经疗效观察

目的:观察补肾温阳化瘀法治疗子宫内膜异位症患者痛经的临床疗效。方法:回顾性分析56例子宫内膜异位症痛经患者的临床资料。对照组采用孕三烯酮治疗,治疗组采用补肾温阳化瘀法治疗。对比两组临床疗效。结果:治疗后,治疗组、对照组的总有效率分别为85.71%、60.71%,差异具统计学意义(P0.05);治疗后治疗组的VAS评分明显低于对照组,差异具统计学意义(P0.05)。结论:补肾温阳化瘀法治疗子宫内膜异位症痛经,临床疗效显著,值得推广应用。     

补肾活血法对子宫内膜异位症模型大鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨补肾活血法治疗子宫内膜异位症的细胞凋亡机制. 方法 将雌性8～12周龄SD大鼠分为模型组、西药组、中药组及中西药合并组,每组15只.造模成功后,分别给药4周,采用光镜、电镜、TUNEL法及免疫组化法检测药物干预前后模型大鼠异位子宫内膜的病理形态学、凋亡细胞的阳性率及凋亡调控蛋白bcl-2、bax的阳性表达. 结果 中西药合并组的异位内膜组织发生凋亡的改变最为明显,凋亡指数最高,并可明显下调bcl-2蛋白的阳性表达和提升bax蛋白阳性的表达,从而使bcl-2/bax比值下降,其次为中药组、西药组和模型组. 结论 子宫内膜异位症的发生与细胞凋亡能力的下降有关.补肾活血中药能促进异位内膜细胞发生凋亡,使异位病灶萎缩、消退细胞.     

大黄(庶虫)虫丸对实验性子宫内膜异位症大鼠免疫功能的影响

目的:观察大黄(庶虫)虫丸对EMT大鼠免疫功能的影响.方法:采用大鼠子宫内膜异位症(EMT)动物模型,造模成功后按照异位内膜体积将大鼠随机分为大黄(庶虫)虫丸中高剂量组、大黄(庶虫)虫丸中低剂量组、西药组、模型组,并以假手术组为对照,灌胃治疗4周后检测指标.结果:①大黄(庶虫)虫丸中高剂量组、大黄(庶虫)虫丸中低剂量组、西药组对异位子宫内膜有明显抑制作用,与治疗前异位内膜体积(V1)相比,异位内膜体积(V2)明显缩小(P<0.01);②大黄(庶虫)虫丸中高剂量组能明显提高EMT大鼠胸腺、脾脏重量指数(P<0.01),降低血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平(P<0.01);③病理组织学分析显示:大黄(庶虫)虫丸中高剂量组能明显增加胸腺皮质厚度、脾小节大小及淋巴细胞数,明显降低异位内膜腺体体密度、提高腺腔值、降低淋巴结生发中心体密度(P<0.01).结论:大黄(庶虫)虫丸治疗子宫内膜异位症的部分机制可能改善子宫内膜异位症大鼠免疫功能有关.     

少腹逐瘀丸对子宫内膜异位症大鼠MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响

目的 探讨少腹逐瘀丸(当归、赤芍、川芎等)对患子宫内膜异位症大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、少腹逐瘀丸高剂量组、低剂量组,另设假手术组.给药30 d后,以RT-PCR法检测大鼠在位以及异位内膜组织中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达.结果 少腹逐瘀丸能显著降低子宫内膜异位症大鼠MMP-9 mRNA的表达(P＜0.01),显著升高TIMP-1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 少腹逐瘀丸可调节MMP-9/TIMP-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一.