中医药对胃肠疾病水分子通道蛋白3、4作用研究进展

水通道蛋白是一类具有同源性的内在膜蛋白家族。目前在哺乳动物中发现了13种亚型,广泛分布于动植物的组织中,各自介导着不同细胞膜的跨膜水转运,与很多疾病的发生发展有重要关系。AQP3、AQP4在消化系统中分布广泛,在胃肠道正常生理功能以及病理功能中起着重要作用。AQP3、AQP4与很多胃肠道疾病如慢性胃炎、腹泻、便秘、胃癌、结肠癌等密切相关。通过查阅大量文献发现很多学者对AQP3、AQP4与胃肠疾病之间的关系,以及中医药治疗胃肠疾病前后AQP3、AQP4是否有变化进行了深入的研究。本文将近几年的研究成果进行综述,希望能对中医药治疗胃肠疾病提供新思路。     

从水通道蛋白3介导的结肠水液代谢思考治疗慢性便秘的药物研究

慢性便秘以药物治疗为主,但现有的通便药特异性较低,长期疗效和安全性不尽如人意,原因与慢性便秘复杂的病因及病理机制有关,而研发特异性高的新型通便药一直是国内外研究焦点。水通道蛋白是一类选择性快速运输水分子的跨膜蛋白,在人体多种细胞、组织和器官中分布,并参与许多生理或病理过程。近期,越来越多的研究提示水通道蛋白3在肠道水运输中的枢纽作用,本文回顾了水通道蛋白3与结肠水液代谢之间的相关性研究,从结肠生理、通便机制等方面,思考水通道蛋白3作为潜在靶点治疗慢性便秘的依据以及前景,以期为通便药的发展提供思路。     

电针不同穴组对功能性便秘大鼠结肠黏膜超微结构及AQP3、AQP8表达的影响

目的 探讨电针不同穴组治疗功能性便秘（FC）大鼠的作用机理。方法 FC动物模型采用0 ℃ 0.9%氯化钠溶液对SD大鼠灌胃复制,随机分为模型组、电针1组（EAⅠ组）、电针2组（EAⅡ组）和电针3组（EAⅢ组）,正常组采用SD大鼠。EAⅠ组取天枢、大肠俞（双侧）、EAⅡ组取曲池、上巨虚（双侧）、EAⅢ组取天枢、大肠俞、曲池、上巨虚（单侧）进行电针治疗。观测粪便性状和肠道炭末推进率评定大鼠肠动力,透射电镜检测大鼠结肠黏膜超微结构,Western blot检测大鼠结肠AQP3、AQP8蛋白表达,qPCR检测大鼠结肠AQP3、AQP8 mRNA表达。结果 EAⅡ组大鼠24 h粪便粒数、24 h粪便含水量和肠道炭末推进率均显著增加,首次黑便时间显著减少（P<0.05）,结肠黏膜超微结构经EAⅡ干预后显著改善,模型组大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8 mRNA表达显著高于正常组（P<0.05）,经EAⅡ干预后表达显著降低,具有统计学意义（P<0.05）。结论 电针刺激曲池、上巨虚可能通过降低FC大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8 mRNA表达,减少结肠水分重吸收,增加结肠粪便含水量,调节水分转运,改善结肠黏膜超微结构,增强肠动力,起到改善便秘症状的作用。      

地塞米松通过PKA信号通路调控水通道蛋白2的分子机制

目的：研究地塞米松（Dex）对水通道蛋白2(AQP2)的体外直接调控效应,明确该作用是否依赖于PKA信号通路。方法：制备AQP2野生型及突变型质粒,突变型质粒通过突变AQP2 C末端4个PKA磷酸化位点（S256、S261、S264和S269）阻断PKA信号通路。AQP2野生型及突变型质粒分别转染HEK293细胞和显微注射爪蟾卵母细胞,再予共转染PKA质粒或Dex 0.1μmol/L干预,采用蛋白质印迹（Western blot）法检测AQP2总蛋白表达,通过细胞表面生物素化评估AQP2膜蛋白表达,比较各组爪蟾卵母细胞的水渗透性差别。结果：Dex及PKA均显著上调HEK293细胞的AQP2膜蛋白及总蛋白表达（均P<0.01）;与野生型相比,PKA磷酸化位点的突变显著抑制了体外PKA直接诱导的AQP2磷酸化;突变后AQP2的膜蛋白及总蛋白表达均显著下调（均P<0.01）;PKA磷酸化位点突变后,Dex及PKA对AQP2膜蛋白及总蛋白表达的上调效应均被显著抑制（均P<0.01）;Dex及PKA均显著增加爪蟾卵母细胞水通透活性,PKA磷酸化位点突变后,该效应被显著抑制（均P...     

三仁汤对慢传输型便秘大鼠治疗作用及对MAPK/NF-κB信号通路影响

目的 探究三仁汤对慢传输型便秘（STC）大鼠的治疗作用及对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、莫沙必利组（2.5 mg/kg）、三仁汤低剂量组（8.2 g/kg）、三仁汤高剂量组（16.4 g/kg）、三仁汤+MAPK通路抑制剂（U0126）组（16.4 g/kg三仁汤+0.1 mg/kg的U0126）,每组16只。除正常组外,其余5组建立STC大鼠模型,各组给予相应药物处理2周。给药结束后,活性炭混悬液灌胃,记录大鼠首次排出黑便的时间,测量肠道长度与碳墨推进距离,计算肠道传输率;酶联免疫吸附法检测血清中炎性因子水平;观察结肠黏膜组织病理学变化,检测结肠黏膜组织中水通道蛋白（AQP）4、AQP3以及结肠组织MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织结构被破坏,腺体数量减少,细胞排列紊乱,出现明显充血、水肿,首次排出黑便的时间明显延长（P<0.05）,血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,结肠黏膜组织中AQP4、AQP3表达,结肠组织中磷...     

苓桂术甘汤对脾阳虚泄泻大鼠水通道蛋白3表达的影响

目的 观察苓桂术甘汤对脾阳虚泄泻大鼠水通道蛋白3(AQP3)表达的影响.方法 用苓桂术甘汤水煎液高、中、低剂量治疗脾阳虚泄泻大鼠,并对治疗后大鼠胃体、胃窦、回肠、结肠组织中的AQP3表达进行分析.结果 治疗组与模型组比较,高、中、低剂量组胃体、胃窦、回肠、结肠组织中AQP3表达有不同程度的增强.结论 苓桂术甘汤对增强脾阳虚型大鼠胃肠道AQP3的表达有一定作用.     

七叶皂苷钠对大鼠脑出血后脑组织核转录因子和水通道蛋白的作用及相关分析

目的探讨七叶皂苷钠对急性脑出血（intracerebral hemorrage,ICH）后核转录因子（NF-κB）和水通道蛋白（AQP）动态表达的影响。方法选取健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组、模型组、七叶皂苷钠组（简称治疗组）3组。每组又分为1、2、3和7 d 4个时间点,每个时间点5只大鼠,采用大鼠尾状核注入自体不凝血制备脑出血模型,大鼠分别在不同时间点断头取脑,采用Western-blot免疫印迹技术观察NF-κB蛋白表达,免疫组化染色观察AQP-4的变化。结果治疗组大鼠脑内NF-κB[（0.293±0.067）,（0.441±0.064）,（0.263±0.068）,（0.258±0.061）]、AQP-4蛋白[（11.57±1.98）,（14.27±2.16）,（16.83±2.34）,（9.82±1.64）]表达在不同时间点,与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析两者呈正相关（r=0.82,P〈0.05）。结论七叶皂苷钠可以抑制脑出血后NF-κB和AQP-4的表达,减轻脑损伤的程度。     

干扰水通道蛋白3对胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探究水通道蛋白3(AQP3)对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法:通过RT-PCR、Western-blot实验检测胃癌细胞株中的AQP3表达水平;小干扰RNA构建AQP3低表达细胞系;CCK-8增殖实验和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡水平;Western-blot检测细胞自噬水平,透射电镜观察自噬小体数目。结果:胃癌细胞AQP3表达水平较高;与干扰前相比,AQP3低表达细胞系中胃癌细胞增殖水平降低(P<0.05),凋亡水平提高(P<0.001),自噬标记蛋白LC3Ⅱ水平降低(P<0.001),P62表达水平上升(P<0.001)。结论:AQP3在胃癌细胞中高表达,干扰AQP3可通过降低自噬水平促进细胞凋亡,进而抑制胃癌细胞增殖,提示AQP3具有成为胃癌治疗分子靶点的潜能。     

脐疗配合耳穴贴压治疗便秘26例

目的 探讨济疗配合耳穴疗法对便秘的疗效。方法 将50例便秘患随机分成两组，治疗组用济部药物贴敷配合耳穴贴压治疗；对照组单纯用于穴贴压治疗，所获数据采用t检验。结果 治疗组有效率96．15％，对照组有效率83．33％，经统计学处理，P＜0．01，有显性差异。结论 济疗联合耳穴贴压治疗便秘疗效较单纯耳穴贴压效果好，且简单方便，无副作用。     

针药联合生物反馈治疗功能性便秘疗效回顾性分析

目的:分析针药联合生物反馈治疗功能性便秘(FC)的近远期疗效及其相关因素。方法:通过电话随访方式,对2015年6月至2017年11月在南京中医药大学附属医院南京中医院行针药联合生物反馈治疗的FC患者进行回顾性分析,完成便秘症状积分评估,评价患者治疗后(近期)及随访结束时(远期)的有效率(疗效指数≥30%)及满意率。共计72例患者纳入研究,随访时间4～34(中位数14)个月。结果:治疗后及随访期间患者便秘症状积分较治疗前降低(P<0.05),随访期间患者便秘症状积分较治疗后有所上升(P> 0.05)但优于治疗前。治疗后有效率和满意率处于较高水平,随访期间有所降低,其中满意率降低更多。62例治疗有效的患者,治疗后到随访期间疗效下降≤5%及≤30%的人数分别占总人数的51.61%和66.12%,各中医证型治疗后及随访期间有效率差异无统计学意义(P> 0.05)。年龄、病程、治疗次数与疗效指数之间不存在线性关系。结论:针药联合生物反馈治疗FC,近远期疗效较稳定,患者满意度尚可。年龄大小及病程长短不影响疗效估计。患者满意度的高低取决于疗效及护理方式。     

NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721增殖的影响

目的研究NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721生长增殖的影响。方法常规培养SMMC7721细胞,采用SN50（36μmol/L）阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内p65蛋白水平,MTT比色法检测细胞生长增殖,计算肿瘤细胞生长抑制率,PI染色、流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,观察NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721细胞周期及凋亡的影响。结果肝细胞癌SMMC7721细胞核内存在较高水平的p65蛋白。经SN50阻断后,MTT测定显示细胞的增殖受到明显抑制,并随时间的延长而愈渐明显,24、48、72h后细胞增殖抑制率分别为22.77%、33.33%和38.89%,与阻断前相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪检测发现实验组G1期细胞比例高于对照组差异有统计学意义（69.5% vs 56.5%,P〈0.05）,S期细胞比例明显降低,与阻断前相比差异有统计学意义（11.1% vs 28.6%,P〈0.05）,而细胞凋亡率在实验组为38.3%,对照组仅为23.2%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论NF-κB信号通路阻断诱导细胞周期于G1期停滞和细胞凋亡,从而抑制了SMMC7721细胞生长与增殖,提示NF-κB信号通路组成性激活参与了肝细胞癌的生长增殖与发展,以NF-κB信号通路作为治疗的靶点可能给肝细胞癌带来新的治疗选择。     

消食口服液对功能性消化不良大鼠胃肠动力、NO和P物质的影响

目的:本研究旨在通过观察消食口服液对功能性消化不良大鼠胃肠动力及一氧化氮(NO)、P物质的影响,探讨其对功能性消化不良的作用机制。方法:采用夹尾刺激法制作动物模型的研究方法,观察消食口服液对功能性消化不良大鼠胃排空率、小肠推进比的变化,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清NO、血浆P物质含量变化。结果:与模型组比较,不同剂量消食口服液均能明显降低NO含量、提高P物质含量,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:消食口服液能通过降低血清中NO水平、提高血浆SP水平,促进FD大鼠的胃肠动力。     

增液汤对慢传输型便秘模型小鼠结肠VIP及AQP3表达的影响

目的研究增液汤对慢传输型便秘模型小鼠结肠血管活性肠肽(VIP)及水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,并探索VIP与AQP3表达之间是否存在相关性。方法 ICR小鼠60只,随机分成4组,即正常组,模型组,莫沙必利组,增液汤组。各组给予复方地芬诺酯灌胃建立小鼠慢传输型便秘模型,再给予相应的药物治疗。采用免疫组化法检测AQP3和VIP在各组结肠的分布和表达情况,测定平均光密度值。Pearson相关系数分析AQP3和VIP的表达相关性。结果与空白组相比,模型组小鼠结肠VIP及AQP3的平均光密度值均明显降低(P0.05);与模型组相比,莫沙比利组和增液汤组VIP及AQP3的值均显著增高(P0.05);增液汤组VIP及AQP3的表达与莫沙必利组无明显差异(P0.05)。各组VIP与AQP3的值呈正相关(P0.05)。结论增液汤可通过上调小鼠结肠VIP及AQP3的表达来治疗慢传输型便秘。小鼠结肠组织VIP与AQP3表达存在相关性,VIP与AQP3可能存在同一信号通路中。     

银杏叶提取物防治慢性阻塞性肺疾病的机制研究：基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控肺泡巨噬细胞自噬

背景 银杏叶提取物（GBE）能抑制慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠气道及全身炎性反应,改善气道重塑,但其具体作用机制尚不清楚。目的 探讨GBE通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路调控肺泡巨噬细胞自噬防治COPD的作用机制。方法 于2020年11月至2022年3月,选取90只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组、GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组,每组15只。正常对照组第1、14天向气管内注入0.9%氯化钠溶液,其余时间进行正常饲养。COPD模型组、GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组和Taselisib组采用香烟熏吸联合气管内注入脂多糖（LPS）的方法构建COPD大鼠模型。GBE组于实验的第15～28天腹腔注射舒血宁注射液,比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组于实验的第29～42天分别给予Akt抑制剂比卡鲁胺、mTOR抑制剂雷帕霉素、PI3K抑制剂Taselisib进行干预。HE染色观察各组大鼠肺泡病理改变及气道重塑情况;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠肺泡灌洗液（BA...     

电针天枢穴和太冲穴对便秘型肠易激综合征模型小鼠5-羟色胺信号系统的影响

目的:观察电针天枢穴和太冲穴对便秘型肠易激综合征(IBS-C)模型小鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的影响,为临床治疗提供依据。方法:36只野生型小鼠,按随机数字表法分为3组,每组12只。对照组不做处理,模型组与电针组经冰水灌胃法成功建立IBS-C模型。电针组针刺双侧天枢穴、太冲穴,日1次,每次15 min,共治疗14 d。对照组和模型组均正常喂养,不做其他特殊处理。观察各组小鼠首粒黑便排出时间、粪便颗粒数及含水量,检测各组小鼠血清中5-HT的表达以及远端结肠组织5-羟色胺4型受体(5-HT4R)蛋白及mRNA的表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠首粒黑便排出时间延长,粪便颗粒数及含水量降低,血清中5-HT的表达升高,远端结肠组织5-HT4R蛋白及mRNA的表达下调;与模型组比较,电针组小鼠首粒黑便排出时间缩短,粪便颗粒数及含水量增加,小鼠血清中5-HT的表达量下调,远端结肠组织5-HT4R蛋白及mRNA的表达上调。结论:电针天枢穴和太冲穴可以通过调节5-HT信号系统治疗IBS-C。     

Caprylic Acid Improves Lipid Metabolism,Suppresses the Inflammatory Response and Activates the ABCA1/p-JAK2/p- STAT3 Signaling Pathway in C57BL/6J Mice and RAW264.7 Cells

Objective This study aimed to investigate the effects of caprylic acid(C8:0) on lipid metabolism and inflammation, and examine the mechanisms underlying these effects in mice and cells.Methods Fifty-six 6-week-old male C57 BL/6 J mice were randomly allocated to four groups fed a highfat diet(HFD) without or with 2% C8:0, palmitic acid(C16:0) or eicosapentaenoic acid(EPA). RAW246.7 cells were randomly divided into five groups: normal, lipopolysaccharide(LPS), LPS+C8:0, LPS+EPA and LPS+cAMP. The s...