蛇床子素对机械性脑损伤小鼠的抗炎抗凋亡作用研究

目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对小鼠机械性脑损伤后细胞凋亡及炎症细胞浸润的影响。方法建立针刺伤小鼠机械性脑损伤模型,随机分为假手术组、模型组、蛇床子素10、20、30 mg·kg-1治疗组。主要检测各组小鼠脑组织含水量;RT-PCR法检测皮层损伤灶凋亡因子Bax,Bcl-2,活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(Caspase-3)mRNA的表达变化;免疫组织化学染色法检测损伤灶周围中性粒细胞(MPO)及小胶质细胞(Iba-1)浸润情况以及Caspase-3阳性细胞表达情况。结果蛇床子素20,30 mg·kg-1治疗组能够明显降低脑组织含水量;提高Bax/Bcl-2比值,降低凋亡因子Caspase-3 mRNA表达;蛇床子素30 mg·kg-1治疗组能够明显减少大脑皮层损伤灶周围中性粒细胞及小胶质细胞的浸润,并且明显减少凋亡细胞数量。结论蛇床子素对开放性脑损伤的小鼠具有一定的治疗作用,可能是通过减少炎症细胞浸润,并且减少细胞凋亡发挥治疗作用。     

手性丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血后炎症的抑制作用(英文)

目的:观察脑缺血后中性粒细胞浸润与脑损伤的关系,并研究了消旋和光活丁基苯酞对脑缺血后炎症损伤的影响。方法:利用组织化学及髓过氧化物酶定量测定法,观察了中性粒细胞浸润程度。同时,通过免疫组织化学方法及Western blot,观察了脑缺血再灌后,缺血区细胞间粘附分子-1的表达;并用原位杂交技术研究了缺血区肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA表达的变化。结果:dl-,d-和l-NBP均能明显降低缺血再灌注时脑损伤区的中性粒细胞数目及MPO酶的活性,并可以抑制缺血区ICAM-1及TNF-α表达的升高。结论:中性粒细胞浸润是局灶性脑缺血后损伤的重要原因之一,NBP可以通过抑制脑缺血后炎症的发生而产生脑保护作用。     

亚低温对急性胰腺炎大鼠全身炎性反应的影响

有报道显示,亚低温能够抑制炎性反应时组织的中性粒细胞浸润和氧自由基释放,抑制诸多细胞因子基因表达和释放.然而,亚低温在急性胰腺炎治疗中的作用研究较少.     

内毒素所致急性肺损伤发病机制的研究进展

急性肺损伤是临床常见的危重症。内毒素是导致急性肺损伤最常见的原因。近年来关于内毒素所致的急性肺损伤发病机制的研究发现:核转录因子κB、IL-8和中性粒细胞在促炎/抗炎反应的失衡中发挥重要作用,组织因子和肺泡上皮细胞在调节促凝/抗凝反应的失衡中发挥重要作用,而氧化应激和炎症反应之间可以相互促进。而且肺泡上皮细胞和PMN凋亡功能的紊乱、肺泡上皮细胞上Na+通道的下调、PMN释放的中性粒细胞弹性蛋白酶等在LPS导致的ALI发展过程中都发挥重要作用。     

生长激素加重内毒素腹腔感染大鼠肺毛细血管损伤：循环中性粒细胞核因子—κB活性增加

目的:探讨生长激素对大鼠内毒素腹腔感染时循环中性粒细胞核因子-κB(NF-κB)活性及肺损伤的影响.方法:凝胶迁移率实验(EMSA)检测循环中性粒细胞NF-κB的活性;免疫印迹(Western blot)检测循环中性粒细胞I-κB水平;髓过氧化物酶(MPO)水平和伊文氏蓝(Evan’Blue)方法测定肺组织中性粒细胞浸润及肺毛细血管通透性.结果:大鼠内毒素腹腔感染时循环中性粒细胞中I-κB水平降低,NF-κB活性增加.应用生长激素可进一步降低I-κB水平并增加 NF-κB活性.感染时肺组织中性粒细胞浸润增多,肺毛细血管通透性增加,合并应用生长激素则明显增加肺组织中性粒细胞浸润和肺毛细血管损伤.结论:感染时应用生长激素可加重肺组织的损伤,其可能机制是感染时应用生长激素提高循环中性粒细胞中NF-κB活性和促进肺组织中性粒细胞浸润.     

青藤碱对补体激活的中性粒细胞形态学改变和脱颗粒的抑制作用

补体激活引起的中性粒细胞(PMN)聚集在微血管内形成栓子阻滞血流,井释放溶酶体酶损伤组织,是发生体克和多器官衰竭的一个重要原因。我们用青藤碱预处理大鼠PMN,发现可抑制酵母多糖活化血浆(ZAP)引起的PMN激活时的形态学改变和溶酶体酶释放。细胞仍呈球形,皱折不增多,无伪足形成、聚集较少。PMN上清液内弹性蛋白酶和N—乙酰—β—D葡萄糖苷酶(NAG)含量增加较少。提示青藤碱在体克和器官损害中可能有保护作用。     

中性粒细胞丝氨酸蛋白酶及其抑制剂与炎症

中性粒细胞是首先摹集到炎症部位的细胞,中性粒细胞在炎症部位释放的丝氨酸蛋白酶能参与调节炎症反应,与多种疾病的发生发展密切相关,可能成为有效的药物防治靶点。该文综述了中性粒细胞丝氨酸蛋白酶及其抑制剂对炎症的调控作用,以期为炎症性疾病的防治提供新的思路。     

人中性粒细胞弹性蛋白酶及其抑制剂的研究

综述人中性粒细胞弹性蛋白酶的生理和病理作用、结构特征及其体外表达研究,探讨高通量筛选抑制剂的行之有效的方法和途径,介绍若干内源性和外源性人中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂的特性和开发状况。人中性粒细胞弹性蛋白酶在各种炎症疾病中起重要作用,其内源性抑制剂的缺乏会导致体内人中性粒细胞弹性蛋白酶的平衡失调,进而产生病理反应。     

人中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂的研究进展

人中性粒细胞弹性蛋白酶(human neutrophil elastase, hNE)是一种丝氨酸蛋白水解酶,主要分布于中性粒细胞中。当体内抗hNE蛋白与hNE的平衡被打破,过量释放的hNE会导致相关疾病的发生,因此抑制hNE是一种很有前途的疾病治疗策略。本文简要介绍了hNE的结构、作用机制、生理功能及hNE抑制剂的研发现状,以期能为相关研究提供参考。     

新型弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠临床前药理及机制研究

西维来司钠是新近研制成功的弹性蛋白酶抑制剂,大量临床前研究资料表明其能选择性地抑制中性粒细胞释放弹性蛋白酶,抑制酶活性,保护肺微血管和上皮细胞,从而保护肺组织,改善呼吸功能,在临床上治疗全身性炎症反应综合征及特发性纤维化等引起的急性肺损伤中显示了良好的应用前景.     

灯盏花素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑水肿和中性粒细胞浸润的影响(英文)

目的　研究灯盏花素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑水肿和中性粒细胞浸润的影响 ,探讨其抑制脑缺血再灌注损伤后炎症反应的作用机制。方法大鼠大脑中动脉短暂阻塞制成局灶性脑缺血 2h ,再灌注 2 4h模型。再灌注后 1h分别ip灯盏花素 5 0或 75mg·kg- 1,再灌注后 2 2h重复给药 1次。再灌注 2 4h后干湿重法测定脑水肿 ,分光光度法测定缺血区大脑皮质和尾壳核髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,免疫组织化学染色测定大脑皮质和尾壳核细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的表达。结果　缺血再灌注后 ,脑组织含水量明显增加 ,缺血区大脑皮质及尾壳核MPO活性和ICAM 1表示显著增加 ,灯盏花素 5 0和75mg·kg- 1治疗用药能减轻脑水肿 ,降低MPO活性和抑制ICAM 1表达。结论　灯盏花素可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑水肿和中性粒细胞浸润     

姜黄素对大鼠缺血性脑损伤炎症反应和血脑屏障通透性的影响

目的研究姜黄素对大鼠脑缺血/再灌注损伤炎症反应和血脑屏障通透性的作用,并进一步探讨其潜在的机制。方法利用线栓法制备大鼠脑缺血/再灌注损伤模型,随机分为对照组、模型组和姜黄素治疗组。检测大鼠神经功能损伤评分和脑梗死体积;通过检测脑组织髓过氧物酶的含量说明中性粒细胞浸润和炎症反应的程度;检测脑组织伊文思蓝的含量说明血脑屏障的破坏程度;ELISA检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫印记法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化。结果姜黄素治疗组减轻神经功能损伤、脑梗死体积,并减轻中性粒细胞在脑组织的浸润程度、改善血脑屏障完整性。同时姜黄素还可以降低脑组织TNF-α的含量以及MMP-9的表达水平。结论姜黄素通过减轻炎症反应和血脑屏障破坏对大鼠脑缺血/再灌注损伤起脑保护作用。姜黄素的脑保护作用可能与其降低TNF-α含量和MMP-9的表达有关。     

人参皂苷Rg_1对大鼠脑缺血再灌注损伤及内皮细胞粘附作用的影响(英文)

目的研究抑制白细胞浸润和粘附分子表达是否为人参皂苷Rg1改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机理之一。方法大鼠给予人参皂苷Rg125,50和100 mg·kg-1ig,7 d。末次给药1 h后采用右侧大脑中动脉阻断制备缺血再灌注模型。缺血2 h,再灌注22 h后,分别用Longa等的计分法和TTC染色法测定大鼠神经功能及脑梗死面积;用伊文思蓝法测定脑缺血2 h再灌注4 h后对血脑屏障的损伤程度。缺血2 h再灌注22 h后测定髓过氧化物酶(MPO)活性,并用蛋白质印迹法测定大脑缺血区粘附分子细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和E-选择素的表达。结果缺血再灌注前给予人参皂苷Rg1(50和100 mg·kg-1)可明显改善神经功能症状,减少脑梗死面积,减轻血脑屏障的损伤,降低缺血再灌注所致脑组织内MPO活性及ICAM-1和E-选择素的表达增高。结论人参皂苷Rg1可通过抑制白细胞浸润和粘附分子表达的途径改善大鼠脑缺血再灌注损伤。     

Inhibitory effects of chiral 3-n-butylphthalide on inflammation following focal ischemic brain injury in rats

AIM: To evaluate the degree of neutrophil infiltration into ischemic tissue after transient focal cerebral ischemia, and to examine the effects of chiral 3-n-butylphthalide (NBP) on this inflammatory process. METHODS: After a 24-h reperfusion following transient cerebral ischemia, two different techniques, histologic analysis and modified myeloperoxidase (MPO)-quantification method, were utilized to identify the infiltration of neutrophils into cerebral tissue following ischemia. The expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and tumor necrosis factor-alpha(TNF-alpha) in the ischemic zone were observed by immunohistochemistry, Western blot, and in situ hybridization techniques. RESULTS: In cerebral cortex area perfused by middle cerebral artery (MCA), MPO activity was greatly increased after 24 h of reperfusion in the vehicle group, and it correlated well with the infiltration of neutrophils. Administration of dl-, d-, and l-NBP (20 mg.kg-1) partially inhibited both the increase in MPO activity and the appearance of neutrophils in ischemia-reperfusion sites. Up-regulation of ICAM-1 was also observed on the microvessel endothelium in the ischemic territory. In addition, chiral NBP markedly blunted ICAM-1 expression, and decreased the number of TNF-alpha blue purple-positive neurons induced by ischemia-reperfusion injury. CONCLUSION: The results indicate that the increase in neutrophils infiltration into the infarct site implicated postischemic brain injury, and NBP was effective in protecting the ischemic sites following ischemic insult.     

花椒毒酚抑制大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后中性粒细胞浸润和脑水肿

目的研究花椒毒酚对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后中性粒细胞浸润、细胞粘附分子表达及脑水肿的影响。方法线栓法短暂阻塞大鼠大脑中动脉制备局灶性脑缺血(2 h)再/灌注(24 h)损伤模型,缺血后1 h和12 h两次腹腔注射花椒毒酚2.5、5和10 mg.kg-1,再灌注24 h,检测大鼠神经功能行为缺陷评分、脑水肿和脑梗死范围,分光光度法测定缺血区脑组织中Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase和髓过氧化物酶(MPO)的活性,免疫组织化学染色测定大脑皮层细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和E选-择素(E-selectin)的表达。结果花椒毒酚能改善大鼠脑缺血/再灌注后神经功能行为缺陷评分,减轻脑水肿和降低脑梗死范围,增强Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性,降低脑组织中MPO的活性,抑制ICAM-1和E-selectin表达。结论花椒毒酚对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其机制可能与其抑制炎症反应和减轻脑水肿有关。     

黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌注和小鼠缺氧性损伤的保护作用

目的　研究黄芪提取物 (EA)对大鼠全脑缺血再灌注和小鼠缺氧性损伤的保护作用。方法　采用小鼠常压耐缺氧实验和小鼠断头实验 ,观察EA对小鼠耐缺氧能力的影响 ;采用大鼠四动脉结扎模型 ,观察EA对缺血再灌注大鼠脑水肿 ,脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛(MDA)含量 ,血浆和海马内皮素 (ET)及病理性改变的影响。结果　EA能延长常压耐缺氧实验小鼠的存活时间及快速断头后小鼠的张口喘气时间 ;EA能减轻缺血再灌注大鼠脑组织的水肿程度 ,提高SOD活性、降低MDA含量 ,降低血浆和海马ET的含量 ,减轻病理性损伤。结论　EA对脑缺血再灌注和缺氧性损伤有明显的保护作用 ,减轻全脑缺血模型大鼠的脑水肿和病理性损伤 ,其作用机制可能与EA抗氧化、降低ET含量有关     

异氟醚预处理对大鼠脑缺血/再灌注损伤细胞内游离钙的影响

目的:观察异氟醚对缺血再灌注大鼠活体脑片细胞内游离钙的影响,探讨异氟醚脑保护作用的机制。方法:采用线栓法阻闭大鼠大脑中动脉造成局灶性脑缺血,并于缺血2h后拔出栓线给予再灌注。利用细胞内钙离子荧光探针Fluo-3/AM在激光共聚焦显微镜下观察再灌注2h后大鼠脑片细胞内荧光强度。比较异氟醚预处理1h对缺血再灌注大鼠活体脑片额顶叶皮质及纹状体区域Ca2 浓度的影响。结果:缺血再灌注损伤大鼠缺血侧脑片皮层及纹状体Ca2 荧光强度明显升高。脑缺血前给予异氟醚预处理1h可抑制缺血侧大脑皮层细胞内Ca2 含量的增加,对纹状体细胞内Ca2 含量的影响无统计学差异。结论:缺血前给予异氟醚预处理可有效减轻额顶叶皮层细胞内的钙超载,对纹状体区域脑细胞内游离钙水平影响较小,提示异氟醚的脑保护作用在不同脑区存在差异。     

三乙酰莽草酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注过程中血浆血管活性物质量和脑髓过氧化物酶活性的抑制作用(英文)

目的探索血浆内血管活性物质和白细胞浸润在大鼠局灶性脑缺血再灌损伤中是否影响力不同及三乙酰莽草酸(TSA)的保护作用。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血90 min再灌注3 ~48 h模型。分别于缺血开始和缺血60 min时给予TSA 50~200 mg·kg-1ig。分别用荧光分光光度法和放射免疫法测定血浆5-羟色胺(5-HT)和血栓烷素B2(TXB2)含量,化学法测定脑皮层中髓过氧化物酶(MPO)活性。结果大鼠脑缺血再灌注3 ~24 h时血浆5-HT和TXB2含量及脑MPO活性呈时间依赖性升高,48 h后5-HT, TXB2含量降至假手术组水平,而MPO活性仍明显高于未缺血侧脑皮层。TSA(100和200 mg·kg-1)可显著抑制缺血90 min再灌注24 h时血浆5-HT和TXB2含量及脑MPO活性增高。结论大鼠局灶性脑缺血再灌注过程中血浆中血管活性物质量和脑组织中MPO活性表现出不同的时相变化,并且对脑损伤影响力不同,TSA可有效保护缺血脑组织。     

Minocycline inhibits 5-lipoxygenase activation and brain inflammation after focal cerebral ischemia in rats

Aim： To determine whether the anti-inflammatory effect of minocycline on postischemic brain injury is mediated by the inhibition of 5-1ipoxygenase （5-LOX） expression and enzymatic activation in rats. Methods： Focal cerebral ischemia was induced for 30 min with middle cerebral artery occlusion, followed by reperfusion. The ischemic injuries, endogenous IgG exudation, the accumulation of neutrophils and macrophage/microglia, and 5-LOX mRNA expression were determined 72 h after reperfusion. 5-LOX metabolites （leukotriene B4 and cysteinyl leukotrienes） were measured 3 h after reperfusion. Results： Minocycline （22.5 and 45 mg/kg, ip, for 3 d） attenuated ischemic injuries, IgG exudation, and the accumulation of neutrophils and macrophage/microglia 72 h after reperfusion. It also inhibited 5-LOX expression 72 h after reperfusion and the production of leukotrienes 3 h after reperfusion. Conclusion： Minocycline inhibited postischemic brain inflammation, which might be partly mediated by the inhibition of 5-LOX expression and enzymatic activation.     

Combination drug therapy using edaravone and Daio-Orengedoku-to after transient focal ischemia in rats

In this study, we investigated the effect of Daio-Orengedoku-to (DOT) on ischemic brain damage in a rat model of focal ischemia-reperfusion and attempted to identify synergistic effects for the combination of edaravone and DOT against ischemic insult. Ischemia was induced by intraluminal occlusion of the right middle cerebral artery for 2 h and reperfusion followed for 22 h. To determine the neuroprotective effect of DOT, it was administered orally just before reperfusion and then 2 h after reperfusion. To examine the effects of combination therapy on survival, rats were divided into groups treated with edaravone, DOT, and edaravone and DOT. Microglial activation, neutrophil infiltration and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) expression were examined in surviving animals. Infarct volume was significantly reduced by DOT (100, 200 and 400 mg/kg; P < 0.05), and edaravone plus DOT markedly improved the survival rate after transient ischemia (P = 0.0133). Microglial activation was reduced by edaravone and DOT and their combination (P < 0.05), and neutrophil infiltration was lowered in these groups (P < 0.05). BDNF-positive cells were increased in the combination edaravone and DOT group (P < 0.05). It appears that the neuroprotective mechanisms of combined therapy involve inhibition of microglial activation, reduction of invading neutrophils and enhancement of BDNF expression.