强直性脊柱炎患者HLA-B27及基因亚型检测分析

目的通过对强直性脊柱炎患者(AS)HLA-B27阳性的标本进行基因亚型检测,了解各亚型的分布情况。方法应用流式细胞术检测HLA-B27抗原表达,荧光定量PCR检测基因亚型。结果正常人群中HLA-B27阳性率为7.1%(9/126),强直性脊柱炎患者HLA-B27阳性率为91.4%(53/58)。正常人群中基因亚型4种,分别为HLA-B2703、2704、2705、2706。强直性脊柱炎患者基因亚型3种,分别为HLA-B2702、2704、2705。结论 HLA-B27与强直性脊柱炎高度相关,基因亚型以B2704和B2705为主。     

江西地区强直性脊柱炎患者HLA-B27基因PCR-SBT分型研究

目的探讨江西地区人群HLA-B27亚型分布情况,分析HLA-B27亚型与强直性脊柱炎(AS)的相关性。方法采用PCR-SBT(测序法)高分辨率基因分型技术,对HLA-B27 PCR-SSP(序列特异性引物-聚合酶链法)低分辨基因检测阳性的97例AS确诊患者标本和2013年1-12月本实验室检测的1001名江西省造血干细胞志愿捐献者中22名HLA-B27携带者进行HLA-B27基因高分辨率分型。结果 97例HLA-B27阳性的AS确诊患者标本中,进一步采用PCR-SBT高分辨率分型检测,其中81例为B27*04亚型,占83.51%,其余16例为B27*05亚型,占16.49%;造血干细胞志愿捐献者检出22例HLA-B27携带者,HLA-B27亚型分布为:1例B27*02亚型,1例B27*03亚型,15例B27*04亚型,1例B27*06亚型,4例B27*07亚型,未发现B27*05亚型。结论江西地区的AS患者HLA-B27基因亚型以B27*04为主,其次为B27*05。健康人群B27基因携带者与AS患者在主导亚型分布上没有明显的差异,但在亚型种类上存在差异。     

HLA-B~*27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性研究

目的比较强直性脊柱炎患者与中华骨髓库福建人群中HLA-B*27基因携带者HLA-B*27基因亚型的分布差异;探讨HLA-B*27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。方法中华骨髓库中HLA-B*27基因携带者(阳性对照组)采用PCR-SSO方法检出,强直性脊柱炎患者(AS组)HLA-B*27基因采用低分辨PCR-SSP方法检出;2组HLA-B*27基因亚型均采用高分辨PCR-SSP方法检测。结果阳性对照组130名HLA-B*27基因携带者中,共检出B*2703、B*2704、B*2705、B*2706、B*2707、B*2711、B*27207种基因亚型;在强直性脊柱炎患者中共检出B*2704、B*2705、B*2707、B*2711、B*27155种基因亚型。两组HLA-B*27基因亚型的频率的差异无显著性意义(P>0.05)。结论HLA-B*27基因健康携带者与强直性脊柱炎患者HLA-B*27基因亚型的总体分布未见显著性差异。     

应用流式芯片技术检测强直性脊柱炎患者HLA—B27亚型

强直性脊柱炎（AS）多发予青年男性，中国人群患病率约为0．3％，病因和发病机理尚不完全清楚，随着HLA基因分型性技术的成熟和发展，从亚型水平探讨AS的发病机制已成为可能，迄今已检出25个HLA-B27等位基因（亚型）。可编码23种虽白质（B2701-B2723）。目前的研究显示，不同亚型可表现出对AS的正相关和负相关，所以在亚型水平上对疑为AS的患者作HLA-B27检测，对AS的诊断和鉴别诊断具有价值。     

青岛市HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎相关性研究

目的探讨HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。方法采用酵素免疫法检测HLA-B27,并进一步采用聚合酶链反应一序列特异性引物法进行HLA-B27基因亚型分型。结果强直性脊柱炎HLA-B27检出率为94%,显著高于正常对照组,基因分型B*2705分布最广(57.5%),其次是B*2704(40.4%)。结论HLA-B27与AS具有明显的相关性,检测B*2705和B*2704,亚型对于AS的辅助诊断具有重要意义。     

PCR-SSP法检测29种HLA-B27基因亚型

目的 采用聚合酶链反应—序列特异性引物( PCR-SSP)高分辨技术检测29种HLA-B27基因亚型. 方法 设计并合成HLA-B27亚型特异性引物35条（配对组成上下游引物组合29对）以及一对内对照引物,建立PCR-SSP方法,用于B27亚型分型.检测标本为117例HLA-B27阳性研究对象（男79名,女38名...     

HLA-B27基因亚型分型检测

目的对HLA-B27阳性的样本进行分型检测,探讨HLA-B27亚型分布情况。方法采用HLA-B27SSP（序列特异引物聚合酶链反应）亚型分型试剂盒,对流式细胞仪及B27基因筛查为阳性的样本进行分型检测。结果 91个流式细胞仪及PCR-SSP筛查均为阳性样本中,88例为B2704/25,占96.70%;1例为B2705,占1.10%;2例表现为HLA-B27阳性,但型别未确定,占2.20%。结论本实验检测的HLA-B27阳性样本型别以B2704/25为主。     

强直性脊柱炎与HLA-B27基因亚型的相关性研究

目的探讨不同人类白细胞抗原B27(HLA-B27)基因亚型与强直性脊柱炎(AS)的相关性。方法采集骨科、针灸风湿科门诊及住院患者静脉全血,应用基因分析法定性检测HLA-B27,其中HLA-B27阳性的AS确诊患者380例,并选取HLAB27阳性健康对照组50例,同时通过序列特异性引物PCR(PCR-SSP)技术检测AS患者和健康对照组的HLA-B27基因亚型。结果 380例AS患者中,检出HLA-B2704亚型217例(57.1%),HLA-B2705亚型143例(37.6%),HLA-B2707亚型11例(2.9%),HLA-B2711亚型9例(2.4%);50例HLA-B27阳性健康对照组中,检出HLA-B2706亚型23例(46.0%),HLA-B2709亚型21例(42.0%),HLA-B2704亚型4例(8.0%),HLA-B2705亚型2例(4.0%),两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。结论宝鸡地区AS患者HLA-B27基因亚型以B2704和B2705为主,与宝鸡地区汉族人群AS的发病呈强相关;B2706及B2709为该地区保护亚型。     

汉族人强直性脊柱炎致病基因多态性的研究

目的:①探讨汉族人HLA-B27亚型基因结构特点。②合成HLA-B27基因检测试剂。方法:采用聚合酶链式反应、顺序特异性引物法和核苷酸探针杂交技术。对120例健康人和46例强直性脊柱炎患者的HLA-B27基因进行了分析。结果:采用本项目合成的HLA-B27DNA检测试剂,在120例正常人中进行了检测,有6例出现HLA-B27扩增带,HLA-B27基因携带者占5%;而65例疑为AS患者中有46例出现HLA-B27扩增带,占70.3%,(RR=46,P<0.01);制备的HLA-B27基因检测试剂,具有快速简便、准确性高和特异性强等优点。结论:①在中国汉族人中至少存在2种HLA-B27亚型基因,分别是B2704和B2705,同时B2704和B2705也是汉族人HLA-B27主要的亚型;HLA-B27的B2704和B2705是强直性脊柱炎的主要致病基因。②DNA分型检测HLA-B27基因完全可以取代目前的血清学方法,具有很大的应用价值。     

重庆造血干细胞资料分库汉族人群HLA-B27亚型分布调查

HLA-B27是由多种亚型构成[1],亚型之间核苷酸序列存在着个别位点上的差异,而且不同地区、不同种族的人群HLA-B27亚型基因分布频率不同[2,3]。笔者采用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP),对中国造血干细胞资料库重庆分库(以下简称重庆分库)汉族人进行HLA-B27检测,报告如下。1材料与方法1.1研究对象2002年8月~2005年2月,重庆分库3957名汉族自愿捐献者,根据捐献者的健康征询表调查,均符合健康人群的标准。用PCR-SSP方法对HLA-B位点进行基因分型:检测出126人HLA-B27基因阳性,男性68人,女性58人,年龄18~45岁。1.2试剂与仪器Ge…     

南通地区HLA—B27基因亚型分布及其与AS相关性分析

目的 通过检测南通地区强直性脊柱炎( AS )患者HLA-B27基因的亚型,来了解各亚型的分布及其与AS的相关性.方法 用流式细胞术检测HLA-B27抗原,其基因亚型检测采用序列特异性引物聚合酶链式反应( PCR-SSR)技术.结果 AS患者中HLA-B27阳性者占92.3%(48/52),正常人群中HLA-B27阳性为8.3%(30/360).AS患者中发现四种亚型,分别是B2705占47.9%(23/48),B2704占43.8%(21/48),B2702占6.3%(3/48)和B2707占2.1%(1/48),正常人群中发现三种亚型,分别是B2705占50.0%(15/30),B2704占43.3%(13/30)和B2702占6.7%(2/30).结论 南通地区人群AS患者与HLA-27基因高度相关,其亚型有B2702,B2704,B2705和B2707,以B2705和B2704亚型为主,但各亚型分布在正常人群和AS患者中并没有明显差异.     

荧光定量PCR染料法检测强直性脊柱炎患者HLA-B27基因及分型

目的探讨荧光定量PCR染料法检测强直性脊柱炎(AS)患者人类白细胞抗原B27(HLA-B27)基因及亚型的临床应用价值。方法收集2014年1月至2015年3月深圳市福田区风湿病专科医院已确诊的强直性脊柱炎患者血液标本43例和体检健康者血液标本56例,采用流式细胞法检测HLA-B27基因,同时采用荧光定量PCR染料法检测HLA-B27基因及分型。结果流式细胞法检测43例AS患者中40例阳性(93.02%),荧光定量PCR染料法检测39例阳性(90.70%),两者符合率为97.50%。39例HLA-B27者中B2704亚型者有32例(82.05%),B2705亚型者有7例(17.95%)。结论荧光定量PCR染料法检测HLAB27基因准确率高,与流式细胞法有高度一致性,同时还能检测HLA-B27基因亚型,具有很好的临床推广价值和应用前景。     

湖南地区汉族健康人群HLA-B*27基因多态性调查

目的 调查湖南地区汉族健康人群中HLA-B* 27基因多态性.方法 对3488名湖南汉族健康造血干细胞志愿捐献者进行HLA -B基因测序分型,对HLA-B* 27健康携带者亚型分布情况进行分析.结果 3488名湖南汉族志愿捐献者中,共检出HLA-B*27基因健康携带者99名,在人群中的分布比例为2.84％,男女比例无明显差异.99名健康携带者中,共检出HLA-B*27基因亚型6种,其中以HLA -B*27∶04为主(68/100),其次是HLA-B* 27∶05(18/100),HLA -B*27∶06(7/100),HLA-B* 27∶ 07(3/100),HLA-B* 27∶ 02 (2/100),HLA-B*27:24(2/100).结论 湖南地区汉族健康人群HLA-B* 27基因亚型以B*27∶04、B*27∶05为主.     

中国广东地区汉族人群HLA-B基因多态性与IgA肾病易感性关联研究

目的研究人类白细胞相关抗原(HLA)Ⅰ类B亚型基因多态性与我国广东地区汉族人群IgA肾病易感性的相关性。方法使用基因克隆及聚合酶链反应-测序分型方法(PCR-SBT)对中国广东地区145例IgA肾病患者(IgA肾病组)和137例健康人(对照组)进行HLA-B基因多态性研究,并比较两组的基因型和等位基因的频率,分析HLA-B基因多态性与IgA肾病的相关性。结果 (1)IgA肾病组和健康对照组共检测到103种HLA-B等位基因,其中以HLA-B*400101、HLA-B*4601、HLA-B*1502、HLA-B*1301、HLA-B*5801等位基因频率较高,符合中国广州地区汉族HLA-B等位基因分布特征。(2)HLA-B*5601在IgA肾病组的基因频率明显高于健康对照组(P<0.05),可能与IgA肾病发病相关。结论 HLA-B基因多态性可能与我国南方汉族人群IgA肾病的发病相关,HLA-B*5601可能是IgA肾病的易感基因。     

HLA-B27基因表达量及亚型分析在AS疾病评估中的意义

目的 探讨人类白细胞抗原(human leukocyto antigens,HLA)B27(HLA-B27)基因表达量及其亚型在强直性脊柱炎疾病诊疗中的意义。方法收集120例疑似强直性脊柱炎患者和50例健康体检者的临床资料,对所收集患者的全血采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HLA-B27基因相对表达量,在此基础上通过基因测序确认HLA-B27基因亚型。采用SPSS17.0软件对数据进行分析,P<0.05被认为差异有统计学意义。结果 120例疑似强直性脊柱炎患者中,确诊55例,其中HLA-B27阳性53例(96.36%),BASDAI评分与HLA-B27基因表达量具有相关性(r=0.845,P=0.000)。基因亚型分别为HLA-B27:04型29例(54.72%),HLA-B27:05型20例(37.74%),HLA-B27:02型2例(3.77%),HLA-B27:03型1例(1.89%),HLA-B27:07型1例(1.89%)。50例健康对照组中筛查HLA-B27阳性2例(4%),均为B27:04亚型。对HLA-B27:04和HLA-B27:05两种亚型患者年龄(t=0.711,P=0.480)、性别(χ²=0.880,P=0.348)、家族史(χ²=0.011,P=0.916)和治疗史(χ²=0.113,P=0.736)比较差异无统计学意义。结论 HLA-B27阳性AS患者以HLA-B27:04和HLA-B27:05为主。HLA-B27基因表达量与其疾病活动指数相关。     

云南地区肾移植受者BK 病毒感染与HLA 等位基因相关性分析

目的　研究云南地区肾移植受者BK 病毒（BK virus，BKV）感染与人类白细胞抗原（human leukocyteantigen，HLA）等位基因HLA-B,HLA-DR 抗原分布频率，探讨肾移植受者BKV 感染与HLA-B，HLA-DR 抗原之间的相关性。方法　选取昆明市第一人民医院自2017 年6 月～ 2020 年12 月肾移植受者399 例为研究对象，按照BKV感染与否分为BKV 感染组(n=126) 和BKV 未感染组(n=273)。应用聚合酶链反应序列特异性引物技术（polymerasechain reaction sequence specific primer，PCR-SSP）检测HLA-B 和HLA-DR 等位基因，用SPSS 软件分析肾移植受者BKV 感染尿液阳性HLA-B 和HLA-DR 抗原分布频率，比较HLA-B 和HLA-DR 抗原与BKV 感染不同结局的关系。结果　BKV 未感染组检出的HLA-B 等位基因有33 种，占比大于10% 的基因型有7 种，分别为 HLA-B*13（16.85%），HLA-B*46（19.41%），HLA-B*51（10.62%），HLA-B*55（10.62%），HLA-B*60（17.58%），HLA-B*62（24.91%）和HLA-B*75（16.48%）；BKV 感染组中检出的 HLA-B 等位基因有25 种，其中占比大于10% 的基因型有5 种，分别为HLA-B*46（24.60%），HLA-B*55（10.32%），HLA-B*60（24.60%），HLA-B*62（22.22%）和HLA-B*75（15.87%）。BKV 未感染组检出的HLA-DR 等位基因有14 种，其中占比大于10% 的基因型有7 种，分别为 HLA-DR*4（30.40%），HLA-DR*8（15.75%），HLA-DR*9（20.15%）， HLA-DR*11（12.45%），HLA-DR*12（42.12%）, HLA-DR*14（20.15%）和HLA-DR*15（25.27%）；BKV 感染组中检出的 HLA-DR 等位基因有14 种，其中占比大于5% 的基因型有8 种，分别为 HLA-DR*4（27.78%）， HLA-DR*8（18.25%）， HLA-DR*9（16.67%）， HLA-DR*11（11.11%），HLA-DR*12（42.86%），HLA-DR*13（11.90%），HLA-DR*14（23.81%）和HLA-DR*15（19.84%）。HLA-B*13 等位基因在BKV 未感染组检出率高于BKV感染组（χ2=4.642，P=0.031）；HLA-DR*17 等位基因在BKV感染组的检出率高于BKV未感染组（χ2=4.791，P=0.029）。结论　云南地区肾移植受者 HLA-B*13 等位基因可能是抗BKV 的保护因子；而HLA-DR*17 等位基因可能与BKV 感染的机会呈正相关。     

强直性脊柱炎患者HLA-B~* 27基因亚型及序列研究

目的研究已确诊的强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B*27亚型的43个等位基因分布情况,为本地区临床诊断AS提供理论和实践基础。方法经HLA-B*27低分辨基因检测阳性的AS确诊患者标本70份应用PCR-SSP检测;在判读结果为B位点杂合子的27份中随机抽取17份,加上因HLA-B位点多态性及试剂盒局限性而无法判定确切结果的3份标本应用PCR-SBT检测。结果 50名患者表达HLA-B*2704阳性(包括纯合子31名,杂合子19名)2,1名患者表达HLA-B*2705阳性(包括:纯合子10名,杂合子11名),其中1名患者同时表达HLA-B*2704/2705杂合。HLA-B*2704合计阳性率为71.42%,占总标本数的70.41%;HLA-B*2705合计阳性率为30.01%,占总标本数的29.59%。通过直接计算法得出B*2704等位基因频率为0.578 6,B*2705等位基因频率为0.285 7。结论上海地区AS就诊患者HLA-B*27基因亚型为HLA-B*2704和HLA-B*2705此2种,以HLA-B*2704为主。配合应用PCR-SSP与PCR-SBT此2种分型方法具有互补意义,可以获得较为准确的分型结果。     

汉族人强直性脊柱炎致病基因多态性的研究

目的：①探讨汉族人HLA-B27亚型基因结构特点。②合成HLA-B27基因检测试剂。方法：采用聚合酶链式反应、顺序特异性引物法和核苷酸探针杂交技术。对120例健康人和46例强直性脊柱炎患者的HLA—B27基因进行了分析。结果：采用本项目合成的HLA—B27DNA检测试剂，在120例正常人中进行了检测，有6例出现HLA—B27扩增带，HLA—B27基因携带者占5％；而65例疑为AS患者中有46例出现HLA-B27扩增带，占70．3％，(RR=46，P&;lt;0．01)；制备的HLA—B27基因检测试剂，具有快速简便、准确性高和特异性强等优点。结论：①在中国汉族人中至少存在2种HLA—B27亚型基因，分别是B*2704和B*2705，同时B*2704和B*2705也是汉族人HLA—B27主要的亚型；HLA—B27的B*2704和B*2705是强直性脊柱炎的主要致病基因。②DNA分型检测HLA—B27基因完全可以取代目前的血清学方法，具有很大的应用价值。     

盐城地区人乳头瘤病毒基因型分析

目的了解盐城地区女性人乳头瘤病毒（HPV）感染率及基因型分布特征,为临床早期防治宫颈癌、预防性疫苗接种及研发提供依据。方法采用核酸分子杂交技术对l400例宫颈脱落细胞进行23种HPV基因型的检测,计算HPV感染率,分析HPV基因型的分布特征。结果1400例标本中共检出37l例阳性,HPV感染率为26．5％,未检出HPV-44,73和83,检出的20种亚型中,高危亚型组阳性率高于低危亚型组及高低危亚型混合组,差异具有统计学意义（P〈0．05）;高危亚型阳性率从高到低,分别为HPV-16（19．4％）,52（10．80％）,58（9．16％）,39（8．63％）,18（7．82％）和33（7．30％）,低危亚型感染主要以HPv-11（3．23％）,42（2．96％）和6（2．70％）型为主;371例HPV感染者中,单一高危亚型感染者277例（74．66％）,单一低危亚型感染者18例（4．85％）,二重感染者62例（16．71％）,多重感染者14例（3．77％）;≤30岁年龄组阳性检出率最高,其次为51～60岁年龄组,阳性率分别为38．40％和36．57％。结论高危型HPV-16,52,58,39,18及低危型HPV-6,ll,42是盐城地区女性HPV感染的主要型别,感染以单一高危亚型为主,HPV感染的高峰年龄是≤30岁和51～60岁年龄组。HPV基因分型检测对宫颈癌防治和预防性疫苗接种及研制有指导意义。     

荧光定量PCR染料法在HLA-B27检测中的应用

目的探讨荧光定量PCR染料法检测HLA-B27基因对于诊断强直性脊柱炎的临床应用价值。方法应用流式细胞术和荧光定量PCR技术对强直性脊柱炎疑似患者170例进行HLA-B27基因及其亚型检测,对结果不一致样本,进一步应用PCR-直接测序法进行B27测序分析。结果两种方法检测符合率为92.9%,差异无统计学意义(P0.05);5例结果不一致样本为流式细胞分析阳性,而荧光定量PCR法和PCR-直接测序分析为B*40亚型或B*40与B*58的杂合型;在158例AS相关患者中,共检出3种HLA-B27等位基因:B*2704为主要亚型,占96.8%,其次为B*2705,占1.9%,另有2例为B*2706,占1.3%,结论荧光定量PCR染料法可有效提高HLAB27检测的准确性,并能够实现HLA-B27亚型分析,可为深入探讨HLA-B27在AS中发病中的作用提供依据。