筛选xy1E-ICR转基因小鼠纯合子和建系的初步研究

目的：我们已成功地建立了以邻苯二酚氧化酶ｘｙ１Ｅ为靶基因,ｐＥＳｎｘ穿梭质粒为载体的ｘｙ１Ｅ－ＩＣＲ转基因小鼠致突变检测模型,为使该模型最终能成为商品并推广应用,必须繁育并筛选出ｘｙ１Ｅ－ＩＣＲ转基因小鼠的纯合子,从而建立纯系转基因小鼠。为此本研究对ｘｙ１Ｅ－ＩＣＲ转基因小鼠的首建鼠（ｆｏｕｎｄｅｒｍｏｕｓｅ）３１＃转基因小鼠进行繁殖传代,通过传统育种方式与分子生物学检测相结合的方法筛选出纯合子转基因小鼠,并在此基础上建立了转基因小鼠纯系。方法及结果：１转基因小鼠的繁殖传代：将３１＃转基因小鼠…     

ENU诱发xy1E,C57BL/6J转基因小鼠体内基因突变及微核效应的实验研究

目的：用诱变剂乙基亚硝基脲（ Ｅ Ｎ Ｕ） 验证基于ｐ Ｕ Ｃ１１８ Ｎ Ｘ 质粒载体的转基因小鼠用于研究体内基因突变的可行性。方法：用酶切、环化方式从经和未经 Ｅ Ｎ Ｕ 诱变处理的ｘｙ１ Ｅ， Ｃ５７ Ｂ Ｌ／６ Ｊ转基因小鼠脾脏组织 Ｄ Ｎ Ａ 中分离ｐ Ｕ Ｃ１１８ Ｎ Ｘ 质粒载体，使其转化 Ｄ Ｈ１０ Ｂ 宿主菌并铺 Ａｍｐｒ 平板培养后喷洒邻苯二酚溶液，通过菌落黄白颜色不同筛选突变体，并对突变靶基因ｘｙ１ Ｅ 测序分析以确定突变类型和位点。同时取该转基因小鼠外周血及骨髓细胞，观察 Ｅ Ｎ Ｕ 对转基因小鼠微核形成率的影响。结果：（１） 转基因小鼠脾脏组织ｘｙ１ Ｅ 基因自发突变率小于４ ．７９ ×１０ － ５ ，经 Ｅ Ｎ Ｕ（５０ｍ ｇ／ｋｇ ×５） 处理后，脾组织诱发基因突变率为１９ ．８３ ×１０ － ５ ，两者相差显著；（２） Ｅ Ｎ Ｕ 诱发小鼠脾组织基因突变的类型包括颠换（５０ ％ ） 、单／ 双碱基插入（３７ ．５ ％ ）和转换（１２ ．５ ％ ） ；（３） 经 Ｅ Ｎ Ｕ（５０ ｍｇ／ｋｇ ×５） 处理后，转基因小鼠外周血和骨髓细胞的微核率均明显增加，分别为７ ．６ ‰和８ ．８ ‰，与溶剂对照组相比有显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，表明 Ｅ Ｎ Ｕ 可明显诱发     

xylE-ICR转基因小鼠模型体内致突变试验的规范化研究

本文通过ＭＮＮＧ作用于ｘｙｌＥＩＣＲ转基因小鼠,按１／１０ＬＤ５０给药,每天１次,连续５ｄ,最后一次给药后２１ｄ,测小鼠肝组织突变率为２１．４６×１０－５,与对照组（＜４．３８×１０－５）比相差极其显著（Ｐ＜０．０１）,表明该检测方法可作为规范化程序,对诱变物进行致突变研究的系统分析。     

xy1E—ICR转基因小鼠模型体内致致突变试验的规范化研究

本文通过ＭＮＮＧ作用于ｘｙＩＥ－ＩＣＲ转基因小鼠，按１／１０ＬＤ５０给药，每天１次，连续５ｄ，最后一次给药后２１ｄ，测小鼠肝组织突变率为２１．４６＊１０^-5，与 对照组（〈４．３８＊１０^-5）比相差极其显著（Ｐ〈０．０１），表明该检测方法可作为规范化程序，对诱变物进行致突变研究的系统分析。     

B7-1基因转染后对小鼠体内的免疫增强作用

目的 研究转染Ｂ７－１基因后的小鼠宫颈癌Ｕ１４细胞在体内的免疫原性变化。方法 （１）分别用病毒感染法和电穿孔法将ＬＮＳｍＢ７和ｐＣＥＰｍＢ７导入Ｕ１４细胞,用流式细胞仪检测阳性混合克隆细胞Ｕ１４／ＬＮＳｍＢ７和Ｕ１４／ｐＣＥＰＭＢ７的Ｂ７－１分子表达率;（２）取不同数量的Ｕ１４,Ｕ１４／ＬＮＳｍＢ７和Ｕ１４／ｐＣＥＰｍＢ７细胞分别下皮接种昆明种小鼠,４周后观察各组小鼠肿瘤大小和病理结果;（３）取１     

THE EFFECT OF ACTIVE COMPONENTS OF LYCIUM BARBARUM AND GARLIC（LB－GO）ON THE SYNTHESIS OF DNA AND ULTRASTRUCTURE OF U_（14） CERV

ＴＨＥＥＦＦＥＣＴＯＦＡＣＴＩＶＥＣＯＭＰＯＮＥＮＴＳＯＦＬＹＣＩＵＭＢＡＲＢＡＲＵＭＡＮＤＧＡＲＬＩＣ（ＬＢ－ＧＯ）ＯＮＴＨＥＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦＤＮＡＡＮＤＵＬＴＲＡＳＴＲＵＣＴＵＲＥＯＦＵ_（１４）ＣＥＲＶＩＸＣＡＮＣＥＲＣＥＬＬＳＩＮＭＩＣ?..     

半乳糖基修饰的反义硫代寡核苷酸对肝癌多药耐药细胞株MDR_1基因过度表达的抑制作用

设计合成三种互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ），分别互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ序列起始区、含ＡＵＧ起始密码子区及针对Ｌｏｏｐ形成位点区的序列，作用于阿霉素（ＤＯＸ）诱导的肝癌多药耐药细胞株ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ。经流式细胞分析及ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测，发现三种ＡＳＯＤＮ均能不同程度地降低ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞膜表面Ｐ－ＧＰ含量；同时ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的表达也有轻度降低，其中尤以互补ＭＤＲ１ｍＲ－ＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ抑制作用最强。以导向配体Ｇａｌ１０－ＰＬＬ修饰此ＡＳＯＤＮ后，作用于ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞，发现与相同剂量未修饰ＡＳＯＤＮ比较，Ｐ－ＧＰ含量由７６．８％降至１９．８％；对ＡＤＭ的ＩＣ５０由１．２８μｇ／ｍｌ降至０．４２μｇ／ｍｌ。实验说明，半乳糖基修饰的互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ能够明显降低肝癌多药耐药细胞膜表面Ｐ－ＧＰ的含量，并较大程度地逆转多药耐药细胞ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ对化疗药物的耐受性。     

ADYNAMIC STUDY OF THE CYTOTOXICEFFECTS OF HYPERTHERMIA COMBINED WITH CIS－DIAMINE DICHLOROLPLATINUM（DDP） ON HUMAN GASTRIC CANC

ＡＤＹＮＡＭＩＣＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＣＹＴＯＴＯＸＩＣＥＦＦＥＣＴＳＯＦＨＹＰＥＲＴＨＥＲＭＩＡＣＯＭＢＩＮＥＤＷＩＴＨＣＩＳ－ＤＩＡＭＩＮＥＤＩＣＨＬＯＲＯＬＰＬＡＴＩＮＵＭ（ＤＤＰ）ＯＮＨＵＭＡＮＧＡＳＴＲＩＣＣＡＮＣＥＲＣＥＬＬＬＩＮＥＳＭＫＮ...     

THE CLINICAL SIGNIFICANCE OF MULTIDRUG RESISTANCE GENE(mdr1) EXPRESSION IN ACUTE LEUKEMIA

ＴＨＥＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＭＵＬＴＩＤＲＵＧＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＧＥＮＥ（ｍｄｒ１）ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＩＮＡＣＵＴＥＬＥＵＫＥＭＩＡＤｏｎｇＺｕｏｒｅｎ董作仁ＬｕｏＪｉａｎｍｉｎ罗建民ＸｕＷｅｎｘｉｎ徐文新ＷａｎｇＦｕｘｕ...     

CHARACTERIZATION OF A HUMAN HERPES VIRUS－6（HHV－6） AND EPSTEIN－BARR VIRUS（EBV） ASSOCIATED LEUKEMIC CELL LINE，J6－1

ＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮＯＦＡＨＵＭＡＮＨＥＲＰＥＳＶＩＲＵＳ－６（ＨＨＶ－６）ＡＮＤＥＰＳＴＥＩＮ－ＢＡＲＲＶＩＲＵＳ（ＥＢＶ）ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＬＥＵＫＥＭＩＣＣＥＬＬＬＩＮＥ，Ｊ６－１ＷｕＫｅｆｕ吴克复；ＪａｎｏｓＬｕｋａ；Ｓｈａｎｔ...     

氧化苦参碱对肿瘤诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 探讨氧化苦参碱（Ｏｘｙ）对肺癌和胃癌细胞诱导血管内皮细胞（ＶＥＣ）增殖的抑制作用。方法 用ＭＴＴ法检测不同浓度Ｏｘｙ对ＶＥＣ、人肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－１细胞、人低分化胃癌ＭＫＮ－４５细胞增殖及ＳＰＣ－Ａ－１和ＭＫＮ－４５细胞诱导ＶＥＣ增殖的抑制。结果 Ｏｘｙ浓度为２．５～１０ｍｇ／ｍｌ时,对ＶＥＣ增殖的抑制率为４．６％～３６．４％;Ｏｘｙ浓度为０．１５６～１０ｍｇ／ｍｌ时,对肺癌ＳＰＣ－Ａ－１和     

SEARCH FOR HERPES SIMPLEX VIRUS TYPE2（HSV－2）AND HUMAN PAPILLOMAVIRUS（HPV）IN THE NORMAL AND ABNORMAL CERVICAL SAMPLES

ＳＥＡＲＣＨＦＯＲＨＥＲＰＥＳＳＩＭＰＬＥＸＶＩＲＵＳＴＹＰＥ２（ＨＳＶ－２）ＡＮＤＨＵＭＡＮＰＡＰＩＬＬＯＭＡＶＩＲＵＳ（ＨＰＶ）ＩＮＴＨＥＮＯＲＭＡＬＡＮＤＡＢＮＯＲＭＡＬＣＥＲＶＩＣＡＬＳＡＭＰＬＥＳＺｈａｎｇＷｅｉ;张伟;ＪｉｎＳｈｕｎｑｉａ...     

透明质酸酶增强５-ＦＵ对结肠癌抗癌作用的动物实验研究

目的：观察透明质酸酶（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ,Ｈｙａｓｅ）在氟尿嘧啶（５-ＦＵ）对裸小鼠结肠癌移植瘤生长影响中的作用,并探讨其作用的可能机制。方法：１８只雄性裸小鼠左侧腹壁皮下移植三维培养人结肠癌ＨＴ-２９细胞,随机分为６组,每组３只：Ⅰ组（对照组）、Ⅱ组［Ｈｙａｓｅ２００Ｕ／（ｋｇ·ｄ）］、Ⅲ组［５-ＦＵ３０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］、Ⅳ组［Ｈｙａｓｅ５０Ｕ／（ｋｇ·ｄ）＋５-ＦＵ３０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］、Ⅴ组［Ｈｙａｓｅ１００Ｕ／（ｋｇ·ｄ）＋５-ＦＵ３０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］和Ⅵ组［Ｈｙａｓｅ２００Ｕ／（ｋｇ·ｄ）＋５-ＦＵ３０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］,Ｈｙａｓｅ于肿瘤细胞移植处第１、５天皮下注射,５-ＦＵ于第１～５天右侧腹腔注射。每周以游标卡尺测定瘤体最长径和最短径,计算肿瘤体积和抑瘤率,第６周杀鼠称瘤重,取瘤组织行ＨＥ染色,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测瘤组织中Ｅ-钙黏素（Ｅ-ｃａｄｈｅｒｉｎ）、细胞间黏附分子-１（ＩＣＡＭ-１）和ＮＦ-κＢｐ６５蛋白的表达并对蛋白条带的光密度（ＯＤ）进行半定量分析。结果：裸小鼠均成功移植皮下肿瘤,与对照组（Ⅰ组）比较,单纯Ｈｙａｓｅ治疗组（Ⅱ组）肿瘤体积减小不明显（Ｐ＞０.０５）,单纯５-ＦＵ治疗组（Ⅲ组）自第３周开始肿瘤体积明显减小（Ｐ＜０.０５）,而不同剂量Ｈｙａｓｅ联合５-ＦＵ治疗组（Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组）瘤体积减小更明显（Ｐ＜０.０５）;与单纯５-ＦＵ治疗组（Ⅲ组）比较,第３周开始联合治疗组（Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组）瘤体积明显减小（Ｐ＜０.０５）;第６周Ⅱ ～Ⅵ组抑瘤率分别为６.８％、１７.５％、３４.１％、４６.３％和５６.６％;Ⅲ ～Ⅵ组瘤重均低于Ⅰ组（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１）;Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组瘤组织内Ｅ-ｃａｄｈｅｒｉｎ和ＩＣＡＭ-１蛋白条带ＯＤ值均较Ⅰ组有不同程度减低,而ＮＦ-κＢｐ６５蛋白条带ＯＤ值在各组间无明显变化（Ｐ＞０.０５）。结论：透明质酸酶可能通过抗细胞黏附在结肠癌化疗中具有增敏作用。     

半乳糖基修饰的反义硫代寡核苷酸对肝癌多药耐药细胞株MD1基因过？…

设计合成三种互补ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ），分别互补ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ序列起始区，含ＡＵＧ起始密码子区及钱对Ｌｏｏｐ形成位点区的序列，作用于阿霉素（ＤＯＸ）地的肝癌多药耐药细胞株ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ。经流式细胞分析及ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测，发现三种ＡＳＯＤＮ均能不同程度地降低ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＳ细胞膜表面Ｐ－ＧＰ含量；同时ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ的表达也有轻度降低，其中尤     

AN IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY OF NEUROENDOCRINE CELLS IN COLONIC CARCINOMA

ＡＮＩＭＭＵＮＯＨＩＳＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＳＴＵＤＹＯＦＮＥＵＲＯＥＮＤＯＣＲＩＮＥＣＥＬＬＳＩＮＣＯＬＯＮＩＣＣＡＲＣＩＮＯＭＡＹｕＪｉｙａｏ；虞积耀Ｌｉｙａｎｄｏｎｇ；李燕东ＷａｎｇＪｉａｌｉｎｇ；王嘉玲（１ＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｈ...     

IN VITRO AND IN VIVO CHEMOTACTIC EFFECT OF MIP-1a GENE TRANSFECTED TUMOR VACCINE ON IMMUNE EFFECTOR CELLS

ＩＮＶＩＴＲＯＡＮＤＩＮＶＩＶＯＣＨＥＭＯＴＡＣＴＩＣＥＦＦＥＣＴＯＦＭＩＰ－１ａＧＥＮＥＴＲＡＮＳＦＥＣＴＥＤＴＵＭＯＲＶＡＣＣＩＮＥＯＮＩＭＭＵＮＥＥＦＦＥＣＴＯＲＣＥＬＬＳ１ＣｈｅｎＧｕｏｙｏｕ陈国友ＣａｏＸｕｅｔａｏ２曹雪涛ＬｅｉＨｏｎｇ雷虹...     

PRELIMINARY STUDY OF RETROVIRAL MEDIATED TRANSFER OF THE HUMAN mdr-1 GENE INTO MURINE AND HUMAN HEMATOPOIETIC STEM/PROGENITOR CELLS

ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＦＲＥＴＲＯＶＩＲＡＬＭＥＤＩＡＴＥＤＴＲＡＮＳＦＥＲＯＦＴＨＥＨＵＭＡＮｍｄｒ１ＧＥＮＥＩＮＴＯＭＵＲＩＮＥＡＮＤＨＵＭＡＮＨＥＭＡＴＯＰＯＩＥＴＩＣＳＴＥＭ／ＰＲＯＧＥＮＩＴＯＲＣＥＬＬＳＦｅｎｇＫａｉ冯凯Ｐｅ...     

阿蒂莫耶番荔枝内酯诱导MCF—7／ADR细胞凋亡的研究

目的：探讨阿蒂莫耶番荔枝内酯对有多药抗药性的阿霉素的人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７／ＡＤＲ凋亡的诱导作用，揭示其抗癌机制。方法；用ＭＴＴ法观察药物对细胞的生长抑制作用，ＴＵＮＥＬ法，流式细胞仪及光镜，电镜等技术研究癌细胞凋亡。结果；药物对癌细胞有明显生长抑制作用，ＩＣ５０Ｏ １０．５ｍｇ／Ｌ；光１镜，电镜可见染色质浓缩，聚集核膜下，核碎裂等改变；流式细胞仪检测到凋亡峰；１０ｍｇ／Ｌ药物作用４８小时，ＴＵＮ     

环磷酰胺治疗小鼠S180肉瘤的体内31P磁共振波谱研究

目的 观察环磷酰治疗小鼠Ｓ１８０肉瘤的＾３１ＰＭＲＳ参数变化,以及这些参数的变化是否早于常规观察的瘤体积变化。方法 利用表面线圈＾３１ＰＮＭＲ方法,并研究了小鼠皮下接种Ｓ１８０肉瘤的体积。结果：对照组的ＰＣｒ／Ｐｉ和＋β－ＮＴＰ／Ｐｉ比值降低,而环磷酰胺给药组升高,且给药后２４,４８,７２ｈ时显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）,对照组的ＰＭＥ／β－ＮＴＰ比值继续升高,而给药组ＰＭＥ／β－ＮＴＰ比值在给     

外源MDR-1基因对小鼠肺腺癌细胞耐药性产生的影响及机理研究

目的 了解ＭＤＲ－１基因表达中细胞药性的关系。方法 用ＦＵＧＥＮ＾ＴＭ６转染试剂将ＭＤＲ－１基因导入小鼠Ｌｅｗｉｓ肺腺癌细胞株（３ＬＬ）,建立池耐药细胞株（３ＬＬ－ＭＤＲ－１）．用ＭＴＴ方法测定和划搏定对药的逆转效应,ＭＤＲ－１基因表达产物ｐ－ｇｐ采用免疫组化方法观察,应用流式细胞仪分析其对示踪剂罗丹明１２３的摄取与排泄。结果 建立了一株能稳定表达ｐ－ｇｐ和对长春生物碱类、鬼白纱类具有显著耐药性的