CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用机制的研究

目的：探讨CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用的机制。方法：将卵巢癌细胞株（A2780)分成两组,实验组采用CD3AK＋A2780,对照组采用LAK＋A2780,分别共育24h并于作用前和作用后每4h收集一次上清液以检测TNF－α和IFN－γ分泌水平。结果：实验组和对照组共育前,后上清液中均有TNF－α和IFN－γ分泌,但共育后TNF－α和IFN－γ分泌水平显著高于共育前（P＜0．01）,且同一效靶比的实验组TNF－α和IFN－γ分泌水平明显高于对照组（P＜0．05）。结论：CD3AK细胞可通过分泌细胞因子TNF－α和IFN－γ杀伤肿瘤细胞。     

小鼠CD3AK细胞抗肿瘤作用初步观察

目的：通过小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外对靶细胞的杀伤活性及其体内抗肿瘤作用的观察，了解ＣＤ３ＡＫ细胞的体内外抗肿瘤效应。方法：采用ＭＴＴ法检测小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外抗肿瘤细胞毒活性，并通过实体瘤的大小、瘤组织病理切片形态观察等分析小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞的体内抗肿瘤作用。结果：小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞不仅体外具有较强的细胞毒作用，且能有小鼠体内抑制Ｓ１８０肿瘤的细胞的生长和扩散，并诱导Ｓ１８０细胞坏死，与生理盐水对     

小鼠CD_3AK细胞抗肿瘤作用初步观察

目的：通过小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外对靶细胞的杀伤活性及其体内抗肿瘤作用的观察，了解ＣＤ３ＡＫ细胞的体内外抗肿瘤效应。方法：采用ＭＴＴ法检测小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外抗肿瘤细胞毒活性，并通过实体瘤的大小、瘤组织病理切片形态观察等分析小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞的体内抗肿瘤作用。结果：小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞不仅体外具有较强的细胞毒作用，且能在小鼠体内抑制Ｓ１８０肿瘤细胞的生长和扩散，并诱导Ｓ１８０细胞坏死，与生理盐水对照组比较有显著差异。结论：ＣＤ３ＡＫ细胞具有较强的体内外抗肿瘤作用     

CD3AK细胞的生物学特性及其抗肿瘤作用

用人的外周血单核（ＰＢＭＣ）与抗ＣＤ３单克隆抗体和基因重组的人ＩＬ－２共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｉｖｅｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ），并系统地研究ＣＤ３ＡＫ细胞的生物学特性及其体外抗肿瘤作用。结果表明，ＣＤ３ＡＫ细胞是异质细胞群，前体细胞来源丰富，主要是Ｔ细胞；经期内大量扩增，体外可长期存活，广谱杀瘤活性较低的ＩＬ－２依赖性。ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖机制与其表面高表达Ｉ     

CD3AK小鼠体内外抗肿瘤作用的实验研究

ＣＤ３ＡＫ细胞是一种增殖快、扩增倍数多、细胞毒活性高和低ｒＩＬ－２剂量依赖的新型免疫活性细胞。本实验应用ＣＤ３ＡＫ细胞治疗小鼠Ｂ１６黑色素瘤原发和肺转移肿瘤，结果显示：ＣＤ３ＡＫ细胞仅需小剂量的ｒＩＬ－２即可激活，且体外抑癌效应增强，实验动物的瘤体大小和肺转移结节数明显下降，生存期显著延长。     

CD3AK细胞抗肿瘤作用与MHC限制性关系

目的 研究抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞(anti-CD3McAb activated killer cells,CD3AK细胞)杀伤肿瘤细胞作用与MHC限制性的关系。方法 采用微量淋巴细胞毒实验方法测定CD3AK细胞及肿瘤细胞MHC表型，用MTT法测定CD3AK细胞杀伤活性。结果 (1)不同人来源的CD3AK细胞，其MHC表型不同，但对同种肿瘤传代细胞都有很强的杀伤作用，且不同人来源的CD3AK细胞间杀伤作用差异无显著性(P＞0．05)；(2)同一来源CD3AK细胞对不同肿瘤传代细胞株(MHC表型不同)的杀伤作用差异无显著性(P＞0．05)；(3)人外周血诱导的CD3AK细胞对鼠肿瘤细胞株(Yac—1)与对人肿瘤传代细胞株(K—562，Raji)一样具有很强的杀伤作用。结论 CD3AK细胞杀伤肿瘤的作用是非MHC限制的，在临床应用中可用正常人外周血诱导得到的CD3AK细胞体外培养增殖后输给肿瘤病人进行治疗。该效应细胞来源方便，可用于肿瘤术后清除残留肿瘤细胞，具有重要应用价值。     

CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤活性研究

为研究ＣＤ３ＡＫ细胞冻融提取液的抗肿瘤作用,作者采集正常人外周血分离单个核细胞（ＰＢＭＣ）,先用抗ＣＤ３的单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）的ｒＩＬ－２诱导和激活,使之成为ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）,再制备ＣＤ３ＡＫ的冻融提取液,然后进行体内,外抗肿瘤实验。结果;低剂量的ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒＩＬ－２能明显诱导ＰＢＭＣ的活化和增殖;激活后的ＣＤ３ＡＫ细胞冻融提取液可抑制小鼠肝癌实体瘤细胞Ｈ２     

CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤活性研究

为研究CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤作用,作者采集正常人外周血分离单个核细胞(PBMC),先用抗CD3的单克隆抗体(CD3McAb)和rIL-2诱导和激活,使之成为CD3McAb激活的杀伤细胞(CD3AK),再制备CD3AK的冻融提取液,然后进行体内、外抗肿瘤实验.结果:低剂量的CD3McAb和rIL-2能明显诱导PBMC的活化和增殖;激活后的CD3AK细胞冻融提取液可抑制小鼠肝癌实体瘤细胞H22在小鼠体内生长,其抑瘤率达68.20%(肿瘤局部注射)和60.38%(腹腔注射);在体外实验中,该提取液能有效杀伤K562和Raji瘤细胞,其杀瘤活性分别为83.32%和66.83%.以上研究说明CD3AK细胞冻融提取液有可能成为肿瘤生物治疗的一种新型制剂.     

细胞因子诱导的杀伤细胞的生物学特性及抗肿瘤作用研究

目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）的生物学特性及抗肿瘤作用。方法 用淋巴细胞分离液分离健康献血者血中单个核细胞,用IFN-γ、IL-1β、IL-2、CD3单抗诱导CIK细胞。以CD3AK细胞作为对照。流式细胞仪检测细胞表型;乳酸脱氢酶（LDH）释放法分析细胞毒活性。结果 CIK细胞和CD3AK相比,在前期细胞增殖能力无明显差异,但至第10～21天时CIK细胞的增殖能力显著高于CD3AK细胞（P〈0．05）。诱导14d时,CD3^＋细胞和CD3^＋CD56^＋阳性细胞显著增多（分别约占84．75％和33．45％）。不同效靶比例的CIK细胞对K562细胞、BeL-7402细胞和Hela3细胞的溶瘤率均显著高于CD3AK细胞（P〈0．01）,在40：1的效靶比时,其杀瘤活性最强。但CIK细胞对不同肿瘤细胞的杀伤率比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 CIK细胞是CD3^＋CD56^＋双阳性细胞群,其增殖能力及杀瘤活性明显优于CD3AK细胞。CIK细胞可作为一种新的广谱、高效的免疫效应细胞应用于临床。     

肿瘤患者外周血单个核细胞诱导的CD3AK细胞体外抗肿瘤作用的初 …

采用抗ＣＤ３单抗体（１０μｇ／ｍ）联合ＩＬ－２（５０Ｕ／ｍｌ）诱导肿瘤病人外周血单个核细胞成为ＣＤ３ＡＫ细胞，并观察其体外增殖及抗肿瘤作用，结果显示：肿瘤病人的ＮＫ活性显著低于正常人，但其ＣＤ３ＡＫ细胞体外杀伤Ｋ５６２细胞的细胞毒活性与正常人比较无明显差异（Ｐ〉０．０５）。本研究初步表明：由肿瘤病人外周血单个核细胞诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞，可作为过继免疫治疗的效应细胞进行自身淋巴细胞治疗。     

受体介导甲胎蛋白对NIH3T3细胞增殖的促进作用

目的:探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促新生细胞增殖作用的分子机理。方法:从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的NIH3T3细胞;用3H-TdR参入法观察AFP对细胞DNA合成的影响以及放射受体分析法分析NIH3T3细胞膜表面AFP受体分布;观察在AFP作用下细胞内的第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)浓度及依赖cAMP激活的蛋白激酶A(PKA)活性的改变;Westernblot分析AFP对增殖相关的P21ras表达的影响。结果:10～80mg/L的AFP对NIH3T3细胞的DNA合成有明显的促进作用,与对照组比较最大增幅为121.9%;在NIH3T3细胞膜表面存在2种不同解离平衡常数(KD)的AFP受体,KD1=2.722nmol/L(12810位点/细胞);KD2=89.305nmol/L(119700位点/细胞);AFP能显著提高NIH3T3细胞内的cAMP浓度及PKA活性;对P21ras的表达也有明显的促进作用。结论:AFP促NIH3T3细胞增殖是通过细胞膜表面受体介导,经跨膜cAMP-PKA信号转导途径,影响基因表达来实现的。     

CD_(137)在人外周血T细胞的表达及其介导信号对T细胞增殖的影响

为研究ＣＤ１３７在正常人静止状态和活化Ｔ细胞上的表达特点及ＣＤ１３７单抗协同ＰＨＡ 刺激Ｔ细胞增殖作用。利用流式细胞术测定ＣＤ１３７的表达,利用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定Ｔ细胞增殖。结果显示：静止Ｔ细胞上ＣＤ１３７表达率为（０．６５±０．０５）％ ,经ＰＨＡ 刺激后２４、４８、７２ｈ,Ｔ 细胞上ＣＤ１３７表达率分别为（８．１６±１．２８）％ 、（１２．３９±２．１５）％ 、（２１．６±４．３６）％ 。ＣＤ＋４ Ｔ细胞和ＣＤ＋８ Ｔ细胞均可表达ＣＤ１３７,且ＣＤ＋４ Ｔ细胞的表达率高于ＣＤ＋８ Ｔ细胞。单独用ＣＤ１３７单抗对Ｔ细胞的刺激指数（ＳＩ）为１．０４,单独用ＰＨＡ 刺激指数为２．３１,不同浓度ＣＤ１３７单抗（１、５、１０）ｍ ｇ／Ｌ和ＰＨＡ 共同作用刺激指数分别为２．８３、４．２５、５．７４。ＣＤ１３７ＭｃＡｂ（１０ｍ ｇ／Ｌ）＋ ＰＨＡ 组刺激指数比其他各组均明显增高（Ｐ＜ ０．０５）,并随ＣＤ１３７ＭｃＡｂ 浓度增高对Ｔ 细胞的增殖逐渐增高。表明静止Ｔ细胞上不表达ＣＤ１３７,Ｔ细胞活化后,ＣＤ１３７表达量逐渐增加。ＣＤ１３７单抗可显著增加ＰＨＡ对Ｔ细胞的增殖作用,而在无ＰＨＡ 时,ＣＤ１３７单抗对Ｔ细胞无增殖作用     

抗CD_3单克隆抗体激活的杀伤细胞的细胞化学研究

采用抗ＣＤ_３单克隆抗体和重组白细胞介素２共刺激外周血单个核细胞并经重组白细胞介素２扩增制备抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）。细胞化学研究表明５６．５％的ＣＤ３ＡＫ为酸性非特异性酯酶阳性淋巴细胞，糖原过碘酸雪夫反应阳性细胞和酸性磷酸酶阳性细胞较对照增多。     

STUDY ON THE ANTI—TUMOR EFFICACY INDUCED BY HEAT SHOCK PROTEIN 70—PEPTIDE COMPLEXES DERIVED FROM TUMOR CELLS

Heatshockprotein７０（HSP７０）derivedfromtumocellscouldelicitstronganti－tumorimmunity（１，２）．IcarriesmultipletumorantigenicpeptidescalledHSP７０－peptidecomplexes（HSP７０－PC）．HSP７０chaper－oningtumorantigenicpeptideisexpressedontumorcellmembran     

CD_3AK细胞系的超微结构观察

目的观察CD_3AK细胞系的超微结构及其与杀伤功能相关的特征。方法用透射电镜观察有代表性的细胞的超薄切片。结果胞膜较完整,有少量突起,外形不规则,周围未见支原体污染。胞质中有膜泡分泌颗粒;大量游离核糖体,少量脂滴和线粒体;未见溶酶体。有的细胞胞质和细胞器较少。核形状不规则,常有凹陷,核染色质聚集成大块状。结论所建CD_3AK细胞系透射电镜下的超微结构具正常T淋巴细胞的特征,胞质中有与杀伤靶细胞相关的颗粒结构。     

PHA胸导管来源诱生的LAK细胞的作用

利用胸导管引流治疗哮喘病的机会,研究了PHA在rIL-2诱导胸导管淋巴细胞成为LAK细胞中的作用。结果表明:PHA和rIL-2共同诱导TDL2周,细胞数量扩增约34倍。同时明显促进了DL的~3H-TdR和~3H-Leucine的参入,较对照组有明显差异(P<0.01)。其中rIL-2 100～1000U/ml和PHA组作用最佳,但PHA和rIL-2的协同作用持续时间短,第6d即开始下降,而且PHA参与诱导的TDL-LAK细胞的杀伤活性有所下降。     

CD3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤疗效观察

目的：探讨抗CD3单克隆抗激活的杀伤细胞（CD3AK细胞）对晚期恶性肿瘤的疗效和对患者免疫功能的影响。方法：采用CD3AK细胞对58例晚期恶性肿瘤患者进行治疗,并对患者治疗前后的T细胞亚群和血清可溶性白介素2受体（sIL-2R)水平进行测定。结果：①治疗有效率（CD＋PR＋MR）为39．65％;②免疫功能变化：治疗后T细胞亚群中CD8^ 下降（P＜0．05）,CD3^ 、CD4^ 、CD4^ /CD8^ .比值均升高（P＜0．01）,sIL-2R水平显著下降（P＜0．01）。结论：CD3AK细胞能有效地治疗晚期恶性肿瘤。     

山珍王口服液抗肿瘤实验研究

观察山珍王口服液对小鼠移植艾氏腹水癌、肝癌、肉瘤的抑制作用、结果表明：单用山珍王口服液对移植性肝癌有一定抑制作用，若与环磷酰胺合用，对移植性肝癌、及肉瘤有一定抑制作用，并刺激脾脏增重，明显提高脾／体比，升高白细胞，有利于免疫功能的参与和化疗方案的继续进行。