射干麻黄汤加味对哮喘小鼠TGF-β1的影响

目的：探讨射干麻黄汤加味对慢性哮喘小鼠TGF-β1的影响。方法：健康清洁级雌性BALB/c小鼠50只,每组10只,随机分为A组：正常对照组;B组：哮喘模型组;C组：地塞米松组;D组：射干麻黄汤组;E组：射干麻黄汤加味组。建立慢性哮喘小鼠模型后,分别予以相应药物干预,取材后分别采用ELISA法、免疫组化、实时定量PCR技术等方法检测BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1及TGF-β1mRNA表达强度的变化情况。结果：与正常对照组相比哮喘小鼠的BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1及TGF-β1mRNA表达强度均明显增加（P〈0.05）;经给予地塞米松、中药处理后上述指标均明显降低,哮喘发作程度减轻（P〈0.05）,其中射干麻黄汤加味组优于射干麻黄汤组（P〈0.05）。结论：射干麻黄汤加味可抑制BALB/c哮喘小鼠哮喘的发生,其机制有可能是通过降低TGF-β1的表达而实现的。     

糖皮质激素对支气管哮喘小鼠Th17细胞的调节作用

目的 探讨地塞米松对支气管哮喘小鼠辅助性T细胞(Th)17表达的影响.方法 36只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组,每组12只.建立哮喘小鼠模型;采用肺功能仪测定气道呼气阻力(Re);HE染色观察肺组织炎症改变;收集BALF进行细胞计数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺匀浆中IL-17和IL-23水平;流式细胞术检测脾脏单个核细胞中Th17细胞比例.结果 地塞米松组Re及气道炎症较哮喘组明显减轻;哮喘组IL-17和IL-23水平明显高于对照组,地塞米松组明显低于哮喘组;哮喘组Th17细胞显著高于对照组,地塞米松组则明显低于哮喘组.结论 地塞米松可下调哮喘小鼠中Th17细胞数量及相关细胞因子IL-17和IL-23水平,减轻哮喘小鼠的气道炎症.     

氨茶碱对哮喘小鼠气道树突状细胞作用的研究

目的 研究氨茶碱对哮喘小鼠气道树突状细胞(DC)的密度和分布的影响。方法50只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘对照组、低浓度氨茶碱组、中浓度氨茶碱组和高浓度氨茶碱组,每组10只。以卵蛋白腹腔注射与雾化吸入诱发BALB/c小鼠哮喘发作,末次激发24h后,采用免疫组织化学染色技术(DC标记物为NLDC-145)及计算机图像分析方法,观察哮喘小鼠在腹腔注射不同剂量氨茶碱1周后气道树突状细胞的分布和密度的改变。结果 正常小鼠NLDC-145~+树突状细胞主要分布于气管、支气管、肺泡、脏层胸膜及气管周围相关淋巴组织、血管周围,形成防御性DC网络。哮喘对照组小鼠气道NLDC-145~+DC密度为(1720±130)个/mm~2,显著高于正常对照组(600±200)个/mm~2(P<0.02);经氨茶碱治疗后,低浓度组气道DC密度为(824±35)个/mm~2,较哮喘对照组明显下降(P<0.01);中浓度组为(1582±150)个/mm~2,高浓度组为(1684±167)个/mm~2,与哮喘对照组比较无显著差异(P>0.05);哮喘对照组及低浓度氨茶碱组气道DC的分布与正常对照组相比无明显变化。结论 树突状细胞在哮喘小鼠气道中明显增多,低浓度氨茶碱可减少气道DC密度,但不影响其分布。     

耐受性树突状细胞对哮喘小鼠气道变应性炎症反应的抑制作用

目的: 用卵白蛋白(OVA)刺激的未成熟树突状细胞(immature dendritic cell, imDC)免疫小鼠,观察其对小鼠OVA激发的气道过敏性炎症反应的抑制作用,探讨耐受性树突状细胞疫苗诱导免疫耐受的可能机制,为临床防治哮喘提供新的思路.方法: 制备BALB/c小鼠髓性imDC.其余BALB/c小鼠分4组,10只/组:其中两组于第-7天分别注射无菌PBS(PBS组)、OVA刺激的imDC(imDC组),第三组于第13～20天注射地塞米松(地塞米松组),第四组不作任何处理(健康对照组);除健康对照组外,其余各组诱导哮喘反应:第0天和第9天分别注射OVA致敏,14～20天每日予OVA气雾攻击.第21天每组处理5只小鼠,检测肺部炎症细胞浸润及嗜酸性粒细胞比例、气道黏液分泌、脾细胞Th1/Th2型细胞因子表达及脾细胞中CD4 CD25 细胞比例;第49天,处理剩余动物,观察哮喘预后.结果: mDC注射组肺部炎症浸润较轻,脾细胞表达白细胞介素(IL)-13、4降低而γ-干扰素(IFN-γ)无显著影响,脾细胞中CD4 CD25 细胞比例较高,气道黏液分泌则少于PBS组,且预后良好. 结论: 过敏原特异性imDC疫苗注射可在一定程度上缓解哮喘小鼠气道的变应性炎症反应.     

骨髓间充质干细胞移植对慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞（BMSC）移植对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、BMSC对照组、哮喘模型组和BMSC治疗组。从雄性BALB/c小鼠分离BMSC。用卵白蛋白（OVA）制备慢性哮喘模型。观察BMSC移植对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响,并采用流式细胞术检测BMSC对脾组织CD4＋CD25＋调节性T细胞比例的影响。结果哮喘模型组支气管上皮黏膜脱落,上皮黏膜有杯状细胞增生,部分管腔内有黏液栓塞,气道、血管旁有大量炎性浸润,以及气道平滑肌细胞增生和肥大。正常对照组及BMSC对照组无气道炎症及气道重塑的表现,而BMSC治疗组气道炎症及气道重塑明显减轻。与BMSC对照组及正常对照组比较,哮喘模型组CD4＋CD25＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例显著降低（P〈0.05）;与哮喘模型组比较,BMSC治疗组CD4＋CD25＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例明显提高（P〈0.05）;BMSC治疗组与正常对照组及BMSC对照组无显著差异。结论 BMSC移植能明显减轻慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑程度,并能上调外周CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例。     

无气道高反应性的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立

目的应用不同大小的变应原颗粒雾化小鼠,尝试建立具有明显的嗜酸粒细胞（EOS）气道炎症、但无气道高反应性的BALB／c小鼠模型。方法BALB／c雌性小鼠,分为3组,每组6—8只：大颗粒变应原雾化激发组（实验组）、小颗粒变应原雾化激发组（哮喘组）、生理盐水对照组（对照组）。予卵蛋白（OVA）致敏后,实验组和哮喘组第28、29、30天分别用PARI TIA喷雾器和PARI LC STAR喷雾器雾化l％ OVA 15 min激发;xff照组致敏、激发采用生理盐水。测定动物的气道反应性,观察气道炎症程度。结果哮喘组的气道反应性高于实验组和对照组,实验组与对照组的气道反应性比较差异无统计学意义（P＞0．05）。实验组肺泡灌洗液中EOS百分率高于对照组,但低于哮喘组。实验组出现支气管周围EOS等炎症细胞浸润,程度轻于哮喘组。结论采用大颗粒变应原进行雾化激发初步成功建立了具有明显的EOS气道炎症、但无气道高反应性的BALB／c小鼠模型,为进一步研究气道高反应性的发生机制奠定了基础。     

平喘方对支气管哮喘模型小鼠气道重建的影响

目的：通过研究平喘方对支气管哮喘模型小鼠外周血和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）巨噬细胞炎性蛋白-1α（macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α）和免疫球蛋白E（immunoglobulinE,IgE）含量及CD86分子表达的影响,探索平喘方对小鼠支气管哮喘模型气道重建的作用机制。方法：采用卵清白蛋白腹腔注射和雾化吸入致敏,建立BALB／c小鼠支气管哮喘模型。50只雄性BALB／c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘方小剂量、常规剂量组,每组10只。造模后4周,予相应药物灌胃治疗8周。用亲和素-生物素复合物酶联免疫吸附测定法检测外周血和BALF中MIP-1α水平;用酶联免疫吸附测定法检测血清和BALF中IgE水平;直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率;利用普通光学显微镜观察支气管哮喘模型小鼠肺组织病理学改变。结果：模型组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量及CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率均明显高于空白对照组（P〈0．01）;治疗8周后,各治疗组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量和CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0．01）;各治疗组之间两两比较,外周血和BALF中MIP-1α和IgE含量差异无统计学意义（P〉0．05）,平喘方小剂量组外周血中CD3-CD86＋细胞百分率高于地塞米松组（P〈0．05）。肺组织病理显示,各治疗组细支气管壁上胶原纤维较模型组明显减少。结论：平喘方能降低支气管哮喘模型小鼠MIP-1α和IgE水平,下调CD86分子表达,这可能是平喘方减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,改善支气管哮喘气道炎症的作用机制之一。     

射干麻黄汤加味治疗支气管哮喘急性发作期48例疗效观察

目的:观察射干麻黄汤加味治疗支气管哮喘急性发作期的临床疗效。方法:48例急性支气管哮喘患者在西医常规治疗的同时配合射干麻黄汤加味治疗。结果:48例患者中,显效36例,有效9例,无效3例,总有效率93.75%。结论:在西医常规治疗的基础上加用射干麻黄汤治疗急性支气管哮喘疗效显著,值得在临床上推广应用。     

白三烯受体拮抗剂对哮喘小鼠气道重塑及细胞周期蛋白D1的表达影响

目的：研究应用白三烯受体拈抗剂（孟鲁司特钠）对哮喘小鼠肺组织中细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达影响及对支气管哮喘气道重塑的作用，探讨白三烯受体拮抗剂在哮喘治疗中的作用。方法：将30只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、孟鲁司特钠组3组，每组10只；卵蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠模型；HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况；免疫组化观察肺组织中Cyclin D1的表达及定位；RT-PCR及Western-blot测定各组小鼠肺组织中Cyclin D1的mRNA和蛋白表达变化。结果：HE染色提示哮喘组与对照组相比出现嗜酸性粒细胞浸润增多、纤毛脱失、平滑肌细胞层增厚等改变．而治疗组上述改变较哮喘组为轻；免疫组化显示Cyclin D1在哮喘小鼠气道平滑肌细胞、内皮细胞、成纤维细胞中皆有表达而在对照组中表达减弱（P〈0．05），而治疗组表达量较哮喘组低（P〈0．05）；RT-PCR及Western blot检测发现Cyclin D1在哮喘组表达较对照组为高（P〈0．01），而治疗组表达量低于哮喘组（P〈0．01）。结论：哮喘小鼠肺组织中Cyclin D1表达量较正常组为高；白三烯受体拮抗剂能够抑制Cyclin D1表达，减轻气道炎症反应、延缓气道重塑进程。     

地塞米松对哮喘小鼠气道炎症反应和STAT6表达的影响

目的：研究地塞米松对支气管哮喘小鼠急性气道炎症反应的作用及对信号转导子和转录激活子6（STAT6）表达的影响。方法：用免疫组织化学法检测给予地塞米松后哮喘小鼠肺组织中STAT6的表达。结果：哮喘组小鼠肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、嗜酸粒细胞（EOS）绝对值显著高于对照组（P〈0.01）,上述炎症细胞计数地塞米松组比哮喘组明显减少（P〈0.01）。HE染色示地塞米松组小鼠气道炎症反应程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增加,地塞米松组STAT6表达与哮喘组比较明显减少,较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关。结论：地塞米松可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症反应,作用机制可能是通过下调肺脏组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症反应。     

麻杏石甘汤对哮喘大鼠气道上皮STAT6和黏蛋白表达的调控

目的研究麻杏石甘汤对哮喘大鼠气道上皮STAT6及黏蛋白表达的影响,探讨其在哮喘中的作用及可能机制。方法将55只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组：对照组（A组）、哮喘组（B组）以及高、中、低剂量麻杏石甘汤＋哮喘组（C组、D组、E组）。留取支气管肺泡灌洗液（BALF）,运用ELISA法检测其中IL-12、IL～13浓度;留取肺组织标本行HE染色观察气道炎症,免疫组化法检测STAT6表达,AB—PAS染色法分析气道黏蛋白表达。结果（1）麻杏石甘汤能降低哮喘组BALF中IL-13浓度,升高IL-12含量且高、中剂量组与哮喘组相比均有统计学意义（P〈0．05）。（2）麻杏石甘汤剂量依赖性减少哮喘组气道平滑肌及血管肌层增生,减少周围炎性细胞（嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞）浸润。（3）STAT6蛋白在哮喘大鼠各级气道上皮均有表达,麻杏石甘汤组STAT6含量高于对照组,且高、中剂量组STAT6表达较哮喘组显著降低（P〈0．05）。（4）哮喘组存在气道黏液高分泌,麻杏石甘汤组较对照组黏蛋白表达增多,但较哮喘组明显减少。结论麻杏石甘汤可能通过IL-13／STAT6／黏蛋白途径减轻哮喘大鼠炎症反应、气道黏液高分泌,为哮喘的临床治疗提供新的思路。     

射干麻黄汤治疗咳嗽变异性哮喘研究进展

从射干麻黄汤的药理作用,咳嗽变异性哮喘的病因病机,射干麻黄汤在咳嗽变异性哮喘治疗中的临床疗效及其作用机理等方面归纳总结射干麻黄汤治疗咳嗽变异性哮喘的近期研究概况,并指出目前的研究失衡之处及今后的发展方向,为射干麻黄汤更广泛、更安全地应用于咳嗽变异性哮喘的治疗提供理论依据。     

射干麻黄汤加减治疗小儿咳嗽变异性哮喘对炎症因子与T淋巴细胞的影响

目的 探讨射干麻黄汤加减治疗小儿咳嗽变异性哮喘(CVA)对炎症因子与T淋巴细胞的影响。方法 选取西安市中医医院2017年1月至2019年7月收诊的82例小儿CVA患者,随机分为研究组(41例,射干麻黄汤加减疗法+孟鲁司特钠)与对照组(41例,孟鲁司特钠),比较两组患者的IL-13IL-4水平、Treg、CD8⁺与CD4⁺水平及不良反应发生率。结果 治疗后研究组IL-13、IL-4、与CD8⁺水平及其不良反应发生率均较对照组低(P＜0.05);其Treg与CD4⁺水平均较对照组高(P＜0.05)。结论 射干麻黄汤加减疗法有助于改善小儿CVA患者的免疫功能,减少其不良反应与炎症反应。     

定喘汤及其拆方治疗哮喘药理作用实验研究

目的：证实定喘汤及其分别去掉麻黄、后果后化痰、平喘、抗炎等治疗哮喘的药理作用。方法：分别采用气管段酚红法、喷雾致喘法、炎性肿胀及TXB2、6－K－PGF1a定量的方法。结果：定喘汤具有化痰、平喘、抗炎作用，能增强酚红在小白鼠支气管的排泄，对组织胺所致豚鼠哮喘具有平喘作用，与氨茶碱对照组相比，作用强度不如后者，但作用时间较长。分别去掉麻黄、白果其作用均有不同程度下降。结论：定喘汤确为治疗哮喘的有效良方，麻黄、白果共为君药是合理的。     

清气化痰汤对哮喘小鼠肺部炎症的影响

目的 观察清气化痰汤对哮喘小鼠气道炎症和肺组织炎性反应的干预作用.方法 将45只BALB/c小鼠分为正常对照组(CON组)、哮喘模型组(MOD组)、地塞米松组(TRE组)、清气化痰汤组(X1组)、清气化痰汤联合地塞米松组(X2组).通过卵清清蛋白和氢氧化铝凝胶进行致敏和雾化建立哮喘小鼠模型.取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数、嗜酸性粒细胞计数及观察肺组织病理变化.结果 与CON组比较,MOD组BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞计数明显增多,TRE组、X1组、X2组BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞计数均明显减少,TRE组和X2组治疗后第15天与第5天比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);各治疗组均能减轻小鼠肺组织病理炎性浸润,减少肺大泡产生、气道上皮增厚,X2组炎症损伤轻.结论 清气化痰汤能减轻气道炎症,改善模型小鼠的肺组织炎性反应.     

小青龙汤对哮喘模型小鼠气道上皮细胞表达TSLP的影响研究

目的 探讨小青龙汤对哮喘模型小鼠气道上皮细胞表达胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的影响.方法 将30只健康雌性BALB/C小鼠分为空白对照组、哮喘模型组、小青龙汤组,每组10只.各组采取相应干预措施后取支气管、肺组织,免疫荧光检测支气管TSLP的表达水平,qRT-PCR和Western blot分别检测肺组织TSLP mRNA和蛋白表达水平.结果 小鼠支气管上皮细胞膜上TSLP荧光染色在哮喘模型组呈强阳性,小青龙汤组呈弱阳性,空白对照组呈阴性.小青龙汤组与空白对照组小鼠肺组织 TSLP mRNA表达水平较哮喘模型组降低(P<0.05),小青龙汤组略高于空白对照组,但组间差异无统计学意义(P>0.05).小青龙汤组与空白对照组小鼠肺组织TSLP蛋白表达水平均低于哮喘模型组(P<0.05),小青龙汤组较空白对照组略高,但组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 小青龙汤对哮喘模型小鼠气道上皮细胞表达TSLP有明显抑制作用.     

RSV诱导哮喘小鼠树突细胞自噬机制及五虎汤的干预作用

目的 研究PI3K/Akt/mTOR信号通路对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)诱导哮喘小鼠树突细胞(den-dritic cells,DC)自噬的调控机制及五虎汤的干预作用.方法 用RSV滴鼻联合雾化鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)激发的方法制备哮喘小鼠模型,造模...     

佛手乙酸乙酯提取液对哮喘模型小鼠的抗炎作用

目的探讨佛手乙酸乙酯提取液（ethyl acetate extract from bergamo）对哮喘模型小鼠的抗炎作用。方法采用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠哮喘模型,用佛手乙酸乙酯提取液（10g／kg）对哮喘小鼠进行干预,并以地塞米松作为阳性对照。比较观察各组小鼠外周血白细胞总数及分类计数,同时观察肺组织的病理改变。结果佛手乙酸乙酯提取液组和地塞米松组的外周血白细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞均显著低于哮喘模型组（P〈0．05或P〈0．01）,而地塞米松组、佛手乙酸乙酯提取液组间上述指标无显著性差异（P〉0．05）。病理改变：哮喘模型组小鼠肺组织可见支气管及伴行血管周围有大量炎性细胞（嗜酸性粒细胞、浆细胞、淋巴细胞等）浸润,肺间质及肺泡腔也可见炎性细胞浸润,气道上皮可见粘液分泌;而佛手乙酸乙酯提取液组和地塞米松组肺组织中炎性细胞浸润明显减少,气道上皮未见粘液分泌。结论佛手乙酸乙酯提取液能抑制哮喘模型小鼠嗜酸性粒细胞性炎症反应。     

定喘汤及其拆方治疗哮喘药理作用实验研究

[目的]证实定喘汤及其分别去掉麻黄、白果后化痰、平喘、抗炎等治疗哮喘的药理作用.[方法]分别采用气管段酚红法、喷雾致喘法、炎性肿胀及TXB2、6-K-PGF~定量的方法.[结果]定喘汤具有化痰、平喘、抗炎作用,能增强酚红在小白鼠支气管的排泄,对组织胺所致豚鼠哮喘具有平喘作用,与氨茶碱对照组相比,作用强度不如后者,但作用时间较长.分别去掉麻黄、白果其作用均有不同程度下降.[结论]定喘汤确为治疗哮喘的有效良方,麻黄、白果共为君药是合理的.