颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅰ.Northern斑点杂交研究

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高。颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ＜０．０５）。１１例有转移颊癌患者中有９例（８１．８％）为ｎｍ２３－Ｈ１低表达；而１９例无转移颊癌，有１５例（７８．９％）为高表达（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达在有无转移组患者中无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，在颊癌的转移过程中，ｎｍ２３－Ｈ１比ｎｍ２３－Ｈ２起着更重要的作用。ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达可作为预测有无颊癌淋巴结转移的一个有价值的指标。     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ３２－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高，颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ〈０．０５），ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ经无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２     

口腔鳞癌组织中nm23—H1基因的mRNA表达及临床意义

目的 研究口腔鳞癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况及其与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。方法 采用斑点杂交的方法检测８例口腔鳞癌，２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况。结果 ２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达水平均较高；４例手术时无颈淋巴结转移的口腔鳞癌组织中３例ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ呈相对高表达，１例表达水平较低；而伴有颈淋巴结转移的４例口腔鳞癌组织中ｎｍ２３     

肿瘤抑制基因nm23—H1在口腔鳞癌组织中的蛋白表达及 …

目的 研究ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在口腔鳞癌中的表达情况，并探讨它与口腔鳞癌患者预后的关系。方法 采用免疫组化ＳＡＢＣ法检测７５例口腔鳞癌、１９例癌旁粘膜、８例正常口腔粘膜及９例颈淋巴结转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１蛋白染色，利用Ｘ＾２检验及单因素、多因素Ｃｏｘ比较风险模型进行统计分析。结果 Ｘ＾２检验发现，ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达水平在生存期小于３年组和大于７年组间差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。单因素Ｃｏｘ模型     

表皮生长因子受体在颊粘膜鳞状细胞癌中的表达及其临床病？…

表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）是一单跨膜糖蛋白，与细胞的增殖、转化有关。本文采用免疫组化ＡＢＣ检测８例正常颊粘膜上皮及４０例颊粘膜鳞癌中ＥＧＦＲ的表达状况，结果显示：ＥＧＦＲ在颊癌组织中呈异质性表达，其阳性率明显高于正常颊粘膜组织（Ｐ〈０．０５）；ＥＧＦＲ表达状况与颈淋巴结转移及预后间存在相关关系（Ｐ〈０．０５）。ＥＧＦＲ（＋）表达者多数伴有颈淋巴结转移，预后差。以上结果说明，ＥＧＦＲ在颊癌组织中的     

nm23基因在涎腺腺样囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｋｉ－ｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达。结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中有较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，有肺转移者阳性率为１２．５％（１／８），无肺转移者阳性率为８８．２％（１５／１７），差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；ＮＤＰＫ表达与临床分期有关，分期越高，阳性率越低，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与病理分型差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ２３基因在人ＡＣＣ肺转移过程中起到抑制转移的作用，可作为临床颈侧ＡＣＣ患者转移和预后的指标。     

肿瘤转移抑制基因nm23研究现状

ｎｍ２３是引人注目的肿瘤转移抑制基因，分为ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２两个亚型，编码具有ＮＤＰＫ活性的蛋白。ｎｍ２３基因的ｍＲＮＡ、蛋白质表达下降，等位基因缺失或基因突变与恶性肿瘤的高转移潜力有关。     

肿瘤转移抑制基因nm23-H1和nm23-H2特异性片段的体外扩增、克隆和鉴定

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），从人基因组ＤＮＡ中扩增出ｎｍ２３－Ｈ１（１８５ｂｐ）和ｎｍ２３－Ｈ２（１４５ｂｐ）特异性ＤＮＡ片段，与载体ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）平端连接，重组质粒分别转化宿主菌ＪＭ１０９，在含Ｘ－ｇａｌ和ＩＰＴＧ的平板上直接筛选阳性克隆，限制性内切酶谱分析及ＰＣＲ扩增鉴定，确定ｐＧＥＭ－Ｈ１和ｐＧＥＭ－Ｈ２重组体。为ｎｍ２３基因与肿瘤转移研究打下基础。     

地鼠颊粘膜癌变过程中增殖细胞核抗原及核仁组成区表达变化实验研究

目的：探讨癌变过程中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、核仁组成区（ＮＯＲ）的表达变化。方法：利用地鼠颊粘膜癌模型采用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＰＣＮＡ,阳性对照为人类炎性增生淋巴结标本,阴性对照为ＰＢＳ代替单抗。采用硝酸银染色法检测ＮＯＲ。结果：①正常粘膜ＡｇＮＯＲ颗粒主要见于基底层细胞,以单一型为主。重度异常增生以聚集型为主。浸润癌以混合型为主。②随恶变进展,ＰＣＮＡ表达逐渐增强,重度异常增生阳性细胞见于上皮全层。结论：ＰＣＮＡ与ＡｇＮＯＲ表达有相关性（ｒ＝０．６３５,Ｐ〈０．００１）,但ＰＣＮＡ更为直观、清晰,实用价值更大。     

颌骨骨肉瘤中E2F-1表达及意义

目的：分析Ｅ２Ｆ－１在颌骨骨肉瘤中的表达及意义。方法：利用免疫组化ＡＢＣ法检测Ｅ２Ｆ－１在２０例颌骨骨肉瘤和８例骨软骨瘤中的表达。结果：骨肉瘤中Ｅ２Ｆ－１的阳性表达率为７０％（１４／２０）,Ｅ２Ｆ－１表达在各病理分型间无显著性差异（Ｐ〉０．０５）,转移与未转移病例Ｅ２Ｆ－１的表达无显著性差异（Ｐ〉０．０５）;而骨软骨瘤中无Ｅ２Ｆ－１的表达（０／８）,与骨肉瘤相比有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。结论：     

口腔鳞癌增殖细胞核抗原表达及其临床意义

目的：检测口腔鳞状细胞癌中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，探讨与鳞癌预后相关的因素。方法：采用免疫组化的方法，利用ＰＣＮＡ的单克隆抗体检测４４例口腔鳞癌组织中ＰＣＮＡ的表达。结果：低分化鳞癌较高分化鳞癌ＰＣＮＡ的表达明显增强（Ｐ＜０．０５）；晚期鳞癌中ＰＣＮＡ阳性细胞百分率比早期鳞癌显著增高（Ｐ＜０．０５）；ＰＣ－ＮＡ高表达者的淋巴结转移倾向大于ＰＣＮＡ低表达者。结论：ＰＣＮＡ标记可以作为判断鳞癌预后的参考指标。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在RAU发生中的作用探讨

本研究采用ＰＣＲ技术分别对４２例ＲＡＵ患者、２８例ＯＬＰ患者和３０例正常人口腔脱落细胞中ＨＳＶ－１ ＤＮＡ进行检测,结果显示：ＲＡＵ组ＨＳＶ－１ ＤＮＡ阳性率４２．８６％,与ＯＬＰ病例对照组７．１４％及正常对照组６．６７％比较,均有显著性差异（Ｐ〈０．００５）;不同性别、年龄、型别的ＲＡＵ患者口腔脱落细胞ＨＳＶ－１ ＤＮＡ的阳性率无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。提示ＨＳＶ－１在ＲＡＵ发生中具有重要作     

1,25(OH)2维生素D3诱导小鼠混合培养细胞白细胞介素1α mRNA的表达

目的本研究旨在探讨破骨细胞形成过程中１，２５（ＯＨ）２维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］和白细胞介素１α（ＩＬ１α）两种生物因子间的相互作用关系，以期进一步了解正畸牙齿移动过程中牙周组织改建的生物学机理。方法ＲＴＰＣＲ将ＩＬ１αｍＲＮＡ表达信号放大后，采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ法检测混合培养细胞在１，２５（ＯＨ）２Ｄ３作用下，ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达。结果发现ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达强度与１，２５（ＯＨ）２Ｄ３浓度呈正相关关系，在时间顺序上ＩＬαｍＲＮＡ在第２天表达最强，第４天、第６天相对减弱。结论证明ＩＬ１参与１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对破骨细胞生成的诱导作用。推测前４天促进破骨细胞前体增殖，后２天促进其分化。     

增殖细胞核抗原及P53在舌癌中的表达

目的：研究ＰＣＮＡ、Ｐ５３在舌癌中表达的相关性及与肿瘤病理分级、淋巴结转移、预后的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法，观察４６例病理确诊的舌癌石蜡标本中ＰＣＮＡ指数及Ｐ５３阳性率的表达。结果：ＰＣＮＡ在所有病例均有不同程度表达，４６例中２８例呈Ｐ５３阳性表达（６０．９％）。Ｐ５３阳性组中ＰＣＮＡ指数明显高于Ｐ５３阴性组（Ｐ＜０．００１）。ＰＣＮＡ指数随舌癌病理分级的升高而增加（Ｐ＜０．０２５）。Ｐ５３阳性率在Ⅱ、Ⅲ级舌癌明显高于Ⅰ级舌癌（Ｐ＜０．０５）。在有淋巴结转移及术后生存小于３年组中ＰＣＮＡ指数及Ｐ５３阳性率均明显高于无淋巴结转移及术后生存３年以上组（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０５）。结论：联合检测ＰＣＮＡ及Ｐ５３对判断舌癌恶性度，预测淋巴结转移趋势和预后及指导临床治疗有重要价值。     

大鼠舌癌变过程中核维甲酸受体β mRNA的表达变化

目的 探讨口腔癌变过程中核维甲酸受体β（ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒβ,ＲＡＲβ）ｍＲＮＡ表达与上皮细胞分化异常的相关性。方法 原位杂交检测６９例４－硝基喹啉－１－氧化物（４ＮＱＯ）口服诱发大鼠舌癌变各期组织ＲＡＲβｍＲＮＡ表达。结果 正常粘膜、单纯性增生、轻中度异常增生、重度异常增生、原位癌、鳞癌的ＲＡＲβｍＲＮＡ阳性率分别为１００．０％、８７．５％、７５．０％、７２．２％、４５     

影响涎腺腺样囊性癌预后因素的探讨

目的：研究５０例涎腺腺样囊性癌（ｓａｌｉｖａｒｙａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＳＡＣＣ）患者的肿瘤部位、临床分期、组织学分型及肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３、组织蛋白酶Ｄ（Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ－Ｄ，Ｃａｔｈ－Ｄ）、金属硫因蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）、增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）、肿瘤抑制基因ｐ５３的关系。方法：用免疫组织化学反应进行多因素分析，探讨它们与局部复发、远处转移和生存率的关系。结果：影响ＳＡＣＣ局部复发的因素太多，以上各指标均不能独立判断ＳＡＣＣ的局部复发情况；ｎｍ２３和Ｃａｔｈ－Ｄ与ＳＡＣＣ远处转移有明显相关性（Ｐ＜０．０５），表明ｎｍ２３和Ｃａｔｈ－Ｄ在ＳＡＣＣ远处转移中具有重要作用，是预测ＳＡＣＣ远处转移的两项独立指标；临床分期与ＳＡＣＣ患者的生存率有明显相关性（Ｐ＜０．０５）。结论：临床分期可作为一项独立作用的指标来评价ＳＡＣＣ患者的预后。     

口腔白斑和鳞癌中P53基因突变的PCR—SSCP分析

本实验应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析技术对５例正常口腔粘膜、２２例白斑和３０例鳞癌中Ｐ５３基因突变情况进行检测。结果表明，轻，中，重度异常增生白斑，无和有淋巴结转移鳞癌Ｐ５３突变率为１２．５％、３７．５％，５０．０％，６４．３％和７５．０％，正常粘膜无一例阳性，白斑和鳞癌间Ｐ５３变化有显著性差异（Ｐ〈０．０５），Ｐ５３突变与鳞癌有否淋巴结转移无关。     

颊粘膜鳞状细胞癌中嗜酸粒细胞浸润与临床预后的关系

对４０例颊粘膜鳞状细胞癌组织中的嗜酸粒细胞（ＴＡＴＥ）的浸润程度进行了观察。发现：４０例颊癌组织内均见到多少不等的嗜酸粒细胞浸润。其浸润程度与颈淋巴结转移及预后间存在相关关系（Ｐ〈０．０５），高ＴＡＴＥ者其颈淋巴结转移较少出现，预后好。以上结果提示颊癌肿瘤组织内嗜酸粒细胞的浸润程度可作为评估颊癌颈淋巴结转移情况及颊癌患者预后的一项指标。     

nm23基因在涎腺恶性肿瘤中表达的意义

为了探讨ｎｍ２３基因在涎腺恶性肿瘤中表达的意义，作者应用免疫组织化学方法检测了４０例涎腺恶性肿瘤ｎｍ２３基因表达情况，并分析了ｎｍ２３基因表达变化与涎腺恶性肿瘤的临床病理及其转移的关系。结果发现，ｎｍ２３低表达者其肿瘤转移率为８１８％，而ｎｍ２３高表达者其肿瘤转移率只有３４％，两者差异有高度显著性（Ｐ＜０．００５）；ｎｍ２３低表达与肿瘤大小、部位、病理类型无显著相关性（Ｐ＞０．０５）。结果表明ｎｍ２３基因在抑制涎腺恶性肿瘤转移方面起重要作用。     

实验性口腔癌发生过程中增殖细胞核抗原表达的研究

目的：利用金黄地鼠颊癌模型，探讨口腔癌发生过程中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达变化及其规律。方法：０．５％二甲基苯并蒽（ＤＭＢＡ）丙酮液处理地鼠颊粘膜，每周３次，３、６、９和１２周分批处死动物；对照组不处理。利用抗ＰＣＮＡ单克隆抗体，免疫组化方法（ＬＳＡＢ）检测ＰＣＮＡ的表达情况。结果：正常地鼠颊粘膜ＰＣＮＡ表达主要位于基底层和少数棘层细胞，３周单纯增生类似正常，６￣９周上皮呈不同程度异常增生，Ｐ