六味地黄方对高脂血症大鼠血管内皮细胞的保护作用

目的:研究六味地黄方对高脂血症大鼠血管内皮细胞的保护作用。方法:高脂饮食建立高脂血症大鼠模型,观察大鼠血脂、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及外周血循环内皮细胞(CEC)的变化。结果:高脂模型组血清TC、TG、LDLC、MDA、CEC均明显升高,HDLC、SOD、NO、NOS显著下降;六味地黄方可降低模型大鼠血清TC、TG、LDLC、MDA、CEC,升高HDLC、SOD、NO、NOS。结论:六味地黄方具有调节脂质代谢、抗脂质过氧化反应、升高NO水平,保护血管内皮细胞的作用。     

六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性的影响

目的：观察六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性的影响。方法：制备含药血清,采用多巴色素法测定不同浓度不同时间含药血清对酪氨酸酶活性的影响。结果：低浓度的含药血清（10％、20％）对酪氨酸酶的活性呈现促进作用,且随时间变化而逐步增强（P〈0．05）,其中以含药血清浓度为20％,测量时间在6min时,测试组对酪氨酸酶的激活率最高（P〈0．01）;而当高浓度（40％、80％）时酪氨酸酶激活率呈现先抑制后促进的双向调节作用（P〈0．05）;当含药血清浓度为80％,测量时间在3min时,测试组对酪氨酸酶的抑制率最高（P〈0．01）。结论：不同浓度六味地黄方含药血清对酪氨酸酶活性呈现双向调节作用。     

降脂通脉方药理血清对血管内皮细胞影响的实验研究

目的:研究降脂通脉方药理血清对高脂血清所致内皮细胞(EC)损伤的影响.方法:采用给家兔灌服降脂通脉方后取其血清加至细胞培养基中进行实验(血清药理学方法),观察EC形态及功能变化.结果:中药降脂通脉方血清组,细胞形态大致正常,降脂通脉方药物血清可减少乳酸脱氢酶(LDH)释放,使6酮-前列环素F1α(6-keto-PGF1α)含量增加,降低ET的含量.结论:降脂通脉方药理血清对高脂血清所致内皮细胞损伤具有保护作用,保护EC可能是本方抗AS的作用机制之一.     

六味地黄汤药物血清抗血管内皮细胞凋亡的作用

目的 :研究六味地黄汤及其药物血清对血管内皮细胞 (VEC)损伤模型的保护作用。方法 :本实验利用大肠杆菌内毒素 (LPS)致VEC凋亡模型 ,并通过MTT、细胞周期和凋亡细胞的检测 ,观察了药物血清对VEC的保护作用 ,并通过MDA、SOD等指标探讨其作用机理。结果 :六味地黄汤药物血清可减轻LPS对VEC的损伤 ,抑制VEC凋亡发生 ,促进VEC增殖 ;并可通过增加VEC分泌SOD ,清除MDA ,而达到其减轻LPS对内皮细胞损伤的目的。结论 :六味地黄汤具有保护VEC损伤模型的作用 ,这种作用将有助于血栓性疾病的防治。     

养阴生津方对血管内皮细胞增殖的影响

外感温邪具有热象偏重、易于化燥伤阴的特点 ,是导致温热性疾病发生的重要因素。以阴伤的甚微衡量病势的轻重 ,以阴气的存亡推断患者的生死 ,是判断疾病预后的关键。而养阴生津法在温热病的治疗中 ,具有举足轻重的地位。为明确养阴生津法在治疗热瘀证中的解毒护络作用的实质 ,我们确立从细胞水平研究其作用效果。本实验观察了临床中常用的、行之有效的养阴生津方对体外培养的内皮细胞增殖功能的影响 ,以探求养阴生律法“护络”作用的实质。1　研究材料和方法1 .1　研究材料养阴生津方组成 :生地、石斛、麦冬、玄参各 6g(药物由南京市药材公…     

六味地黄方含药血清对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的：观察六味地黄方大鼠含药血清对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）损伤血管内皮细胞（VEC）的保护作用。方法：以MTT法观察人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的活力和流式细胞仪测定内皮细胞凋亡率,并通过测定胞内丙二醛（MDA）含量及细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）含量与超氧化物歧化酶（SOD）活力,探讨六味地黄方对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。结果：六味地黄方含药血清能促进ox LDL损伤的血管内皮细胞增殖、抑制ox LDL造成的内皮细胞凋亡、降低胞内MDA含量、减少细胞LDH释放量,提高SOD活力及NO含量。结论：六味地黄方对氧化低密度脂蛋白损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用。     

养阴生津方抗血管内皮细胞凋亡的分子机制研究

目的：研究养阴生津方抗血管内皮细胞凋亡的分子机制。方法：采用血清药理学方法，以大肠杆菌内毒素(LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)调亡模型，观察含药血清对HUVEC的抗凋亡作用及对一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等活性物质的影响。结果：养阴生津方能显著减少LPS诱导的HUVEC凋亡，其机理与减少NOS产生，抑制催化NO合成有关。结论：养阴生津方具有抗HUVEC调亡作用，对治疗温病瘀热证有重要意义。     

养阴药与活血药配伍对血管内皮细胞的保护作用

目的：探讨养阴药与活血药配伍对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用。方法：采用血清药理学的方法制备药物血清，以大肠杆菌内毒素造成HUVEC的凋亡模型，观察药物血清保护HUVEC以抗凋亡的作用。结果：养阴药与活血药同用可促进HUVEC在损伤条件下的增殖，能明显降低细胞液中LDH及MDA含量、提高SOD水平，并且能显著降低HUVEC的凋亡率。结论：养阴药与活血药配伍对血管内皮细胞(EC)有明显的保护作用，这可能是该法治疗血栓性疾病的主要机理之一。     

不同浓度剂量的中药血清对血管内皮细胞活性的影响

目的探讨中药血清对血管内皮细胞活性的影响。方法:在培养血管内皮细胞(ECV-304)的培养液中分别添加50μL、100μL和150μL、200μL的不同浓度中药血清,加药后第24、48h采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,在酶标仪上测定540nm波长处的吸光度值来观测细胞生长情况。结果:与对照组比较加药后第24、48h,12组的中药血清对培养的ECV-304内皮细胞活性均有不同程度的影响(P<0·01)且呈剂量依赖性。其中100μL组及150μL组作用强于50μL组(P<0·05),而50μL组和100μL组比较作用也有差异(P<0·05)。然而5%的血清浓度在50μL中无明显差异,随着中药血清的浓度、剂量的不断增加,细胞生长活性也在逐渐增加,但当浓度、剂量达到一定饱和状态下,细胞生长活性开始回落。结论:不同浓度、剂量中药血清对ECV-304内皮细胞活性可产生不同影响。     

降脂通脉方对血管内皮细胞与单核细胞黏附功能的影响

我们应用以健脾消痰法拟定的降脂通脉方治疗高脂血症、动脉粥样硬化性疾病,在取得较好临床疗效的基础上,从内皮细胞入手,进一步探讨降脂通脉方对血管内皮细胞与单核细胞黏附功能的影响.     

补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌耐药细胞内Ca2+浓度影响的研究

为了探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内Ca2+浓度的影响,选择人肺腺癌耐药株A549/DDP为模型,采用荷瘤动物血清药理及流式细胞法,并与正常动物含药血清为对照,结果补肾化瘀解毒方荷瘤动物含药血清与正常动物药物血清均能显著降低肺癌A549/DDP耐药细胞内Ca2+浓度(P＜0.001),但荷瘤动物药物血清降低作用显著高于正常动物药物血清(P＜0.05).表明补肾化瘀解毒方药物血清有阻止肺癌耐药细胞内Ca2+的内流或释放作用,但荷瘤动物药物血清与正常动物药物血清具有差异性.     

清热解毒方对血管内皮细胞增殖的影响

目的：探讨清热解毒方药对血管内皮细胞增殖的影响。方法：用内毒素造成血管内皮细胞损伤模型。再用含药血清与内毒素共同作用，用MTT法检测活细胞的数目，从而间接地反映方药对血管内皮细胞的增殖作用。结果：清热解毒方能拮抗内毒素对血管内皮细胞的损伤。结论：清热解毒方对血管内皮细胞有保护作用。     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞细胞周期的影响

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelialcell,HUVEC)细胞周期的影响。方法体外培养HUVEC,采用二氯化钴(CoCl2)建立细胞化学缺氧模型,采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测不同浓度密蒙花方水提液(10、20、40 mg/ml)对缺氧状态下HUVEC细胞周期的影响。结果①缺氧组较正常组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,差异具有统计学意义(P<0.01);②各密蒙花方组均较缺氧组G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例减少(P<0.01),组间具有浓度依赖关系(P<0.01);③密蒙花方组在G0/G1期前还出现了指示细胞凋亡的亚G1期凋亡峰,表明密蒙花方对缺氧状态下的HUVEC具有促凋亡作用。结论密蒙花方抑制HUVEC增殖的作用与阻滞细胞由G1期进入S期,促进细胞凋亡有关。     

麦冬药血清抗血管内皮细胞损伤的机制研究

热瘀证是多种外感热病发展到一定阶段,炎热毒邪伤津耗液、灼伤血络、迫血妄行,出现热瘀交结、阴伤络损等病理状态的一个证候.近年的研究表明,外感温邪是热瘀证形成的主要因素,热瘀交炽、阴伤络损是热瘀证的病理基础,养阴生津方药对热瘀证有明显的治疗作用.深入研究养阴生津法对热瘀证的治疗作用,有助于进一步揭示热瘀证的病理实质,为探索治疗热瘀证的新途径、寻找更有效方剂开拓思路.目前对于热瘀证的研究,尚缺乏细胞水平的研究.为此,本文探讨了临床常用的养阴药物麦冬防治内毒素对血管内皮细胞(HUVEC)损伤的作用机理.现将初步结果报道如下.     

麦冬、生地药血清对血管内皮细胞增殖的影响

我们认为络病与微小血管的病变关系密切 ,血管内皮细胞 ( VEC)的损伤是络病发生的物质基础之一。养阴药物对 VEC的增殖作用 ,体现出其对络脉的保护作用。本文通过研究麦冬药血清和生地药血清对 VEC增殖的作用来证实麦冬、生地对“络脉”具有保护作用。1　材料和方法1 .1　主要试剂与仪器　 RPMI- 1 640培养基( GIBCO,USA ) ,胰蛋白酶 ( Typsin,MERCK,USA) ,四甲基氮唑盐 ( MTT) ( FLUKA,Switzerland ) ,二甲基亚砜 ( DMSO ) ( MERCK,USA) ,SOD和 MDA试剂盒 (南京建成生物工程研究所 ) ,培养箱 ( NAPCO,USA ) ,酶…     

养心颗粒含药血清对血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察养心颗粒对血管内皮细胞增殖的影响,探讨其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制。方法：将wistar大鼠35只随机分成空白对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、通心络组。采用MTT法检测养心颗粒含药血清对血管内皮细胞增殖的影响。结果：养心颗粒可促进血管内皮细胞的增殖,且养心颗粒高剂量组效果最好,与其它组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：养心颗粒可以改善血管内皮系统功能障碍,促进心肌缺血时血管内皮细胞的增殖。     

清热消积方含药血清对人胃癌细胞SGC-7901及牛血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：观察清热消积方舍药血清对人胃癌细胞SGC-7901及牛血管内皮细胞增殖和迁移的影响。方法．帮l备清热消积方含药血清，SCC-7901细胞和牛血管内皮细胞体外培养，不同浓度含药血清进行干预，采用MTr法检测含药血清对SGC-7901细胞和牛血管内皮细胞增殖的影响；琼脂糖刮除法检测含药血清对牛血管内皮细胞迁移的影响。结果：清热消积方含药血清对人胃癌细胞SGC-7901的增值有明显的抑制作用，低、中及高剂量组的增值抑制率分别是7．4％、8．6％和16．3％，与对照组比较均有非常显著差异（P〈0．01）。并能抑制牛血管内皮细胞的增殖和迁移，低、中及高荆量组对牛血管内皮细胞增殖和迁移的抑制率分别为10．8％、11．2％、20．1％和15．5％、19．7％、30．2％，与对照组比较均有非常显著差异（P〈0．01）。结论：抑制肿瘤细胞增殖、抗肿瘤血管生成可能是清热消积方抗肿瘤和转移的作用机制之一。     

过氧化氢对人血管内皮细胞表面黏附分子的影响

目的观察过氧化氢(H2O2)对人血管内皮细胞表面黏附分子(ICAM-1)表达的影响。方法采用人源血管内皮细胞株,用低、中、高浓度H2O2刺激内皮细胞24 h,TRIZOL法提取细胞总RNA,采用半定量RT-PCR技术测定各组细胞中ICAM-1的表达,用紫外线凝胶成像分析系统对电泳图像进行吸光度扫描,以待测终产物与内参照吸光度的比值表示其相对含量。结果不同浓度H2O2刺激血管内皮细胞,其ICAM-1表达较正常组明显提高,且中浓度诱导在一定范围内可能已经达到了最高值。结论H2O2能引起ICAM-1的表达增强,从而推测H2O2可能通过刺激ICAM-1的表达而引起动脉粥样硬化。     

裘氏内异方含药血清对人脐静脉内皮细胞血管新生活性的影响

目的:观察裘氏内异方含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力的影响。方法:设浓度分别为5%、10%、15%的裘氏内异方含药血清组和空白血清组,运用MTT法、Transwell实验和Tube formation实验观察细胞增殖、迁移及管腔形成能力。结果:裘氏内异方含药血清能够显著抑制内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成能力,上述作用呈剂量依赖性。结论:抗血管新生活性可能是裘氏内异方治疗子宫内膜异位症的作用机制。     

六味地黄方及其配伍对血小板聚集的影响

目的 研究六味地黄方及其配伍对血小板聚集率的影响.方法 以比浊法测定六味地黄方及其配伍对二磷酸腺苷(ADP)、血小板活化因子(PAF)、花生四烯酸(AA)诱导的家兔体外血小板聚集率的影响,运用荧光法观察血小板经ADP激活前后的[Ca2+]的变化.结果 味地黄方及其配伍对ADP、PAF、AA诱导的家兔体外血小板聚集率均具有不同程度的抑制作用,且呈明显的量效关系;在终质量浓度为生药9.26 mg/mL时,除山药/茯苓药对外,均不同程度降低ADP激活的血小板释放Ca2+的作用.结论 六味地黄方及其配伍均具有不同程度抗血小板聚集作用,其中以山茱萸/丹皮药对作用尤为显著,其抗ADP诱导血小板聚集的作用可能与抑制血小板内钙释放有关.