人参皂甙Rg3诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的研究人参皂甙Rg3抑制人肝癌细胞生长及诱导凋亡作用机制。方法体外培养人癌细胞(SMMC-721),观察人参皂甙Rg3高剂量组(80μg/ml)、中剂量组(40μg/ml)、低剂量组(20μg/ml)、阳性顺铂对照组(DDP,80μg/ml)和空白对照组(PBS)于12 h、24 h4、8 h、72 h培养后,肝癌细胞的形态学和生长情况。采用MTT法,分析人参皂甙Rg3对细胞生长抑制率的影响。通过电镜观察细胞凋亡的形态学特征。结果应用人参皂甙Rg3后,普通光镜下发现细胞数随Rg3浓度增加而减少,呈剂量依赖性,人参皂甙Rg3高、中、低剂量组细胞生长的抑制率分别为34.6%、19.1%和6.1%,与未处理空白对照组的细胞生长抑制率(5.7%)相比,以人参皂甙Rg3高剂量组于作用72 h后对细胞生长的抑制作用最明显(P<0.001),中剂量组次之(P<0.05),低剂量组及Rg3 2 h,24 h,48 h组未见明显差别。阳性对照顺铂组的细胞生长抑制为22.2%。人参皂甙Rg3作用72 h后的电镜分析显示,细胞出现典型的凋亡形态学改变。结论人参皂甙Rg3具有抑制人肝癌细胞生长作用,与促进细胞凋亡机制有关。     

人参皂甙Rg3对小鼠肝癌H22腹水瘤抗血管生成作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3治疗小鼠恶性腹腔积液的抗血管生成作用.方法 50只雌、雄各半昆明种小鼠随机分为5组:Ⅰ组生理盐水组(0.9%NS);Ⅱ组顺铂组(DDP 0.5 mg/kg);Ⅲ组低剂量人参皂甙Rg3组(LPD 0.3 mg/kg);Ⅳ组中剂量人参皂甙RS3组(MPD 1.0 mg/ks);Ⅴ组高剂量人参皂甙Rg3组(HPD 3.0ms/ks).所有小鼠肝癌H22腹水瘤模型建立后24 h开始分别腹腔注射0.2 ml/只治疗,1次/d,共14 d.治疗结束后24 h,处死各组小鼠,应用酶联免疫吸附法检测腹水及血清中血管内皮生长因子(VEGF),免疫组织化学法计数腹膜瘤结节微血管密度(MVD),电镜观察人参皂甙Rg3中刺量组与生理盐水组腹腔内肿瘤细胞及腹膜瘤结节新生血管的形态学变化.结果 人参皂甙Rg3各剂量组随着用药剂量的加大,小鼠腹水及血清中VEGF值、腹膜瘤结节MVD下降(P＜0.05),且均较生理盐水组、DDP组下降(P＜0.05).电镜观察人参皂甙Rg3中剂量组较生理盐水组腹水中凋亡和坏死瘤细胞居多;腹膜瘤结节微血管基底膜平滑完整.结论 人参皂甙Rg3通过下调荷瘤小鼠体内VEGF,降低微血管的通透性和抑制腹膜微血管形成,从而抑制恶性腹腔积液的形成.这为临床应用提供了实验依据.     

人参皂甙Rg3诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3抑制人肝癌细胞生长及诱导凋亡作用机制。方法 体外培养人癌细胞（SMMC-721），观察人参皂甙Rg3高剂量组（80μg／m1）、中剂量组（40μg／m1）、低剂量组（20μg／m1）、阳性顺铂对照组（DDP，80μg／m1）和空白对照组（P13S）于12h、24h、48h、72h培养后，肝癌细胞的形态学和生长情况。采用MTT法，分析人参皂甙Rg3对细胞生长抑制率的影响。通过电镜观察细胞凋亡的形态学特征。结果 应用人参皂甙Rg3后，普通光镜下发现细胞数随Rg3浓度增加而减少，呈剂量依赖性，人参皂甙R西高、中、低剂量组细胞生长的抑制率分别为34．6％、19．1％和6．1％，与未处理空白对照组的细胞生长抑制率（5．7％）相比，以人参皂甙Rg3高剂量组于作用72h后对细胞生长的抑制作用最明显（P〈0．001），中剂量组次之（P〈0．05），低剂量组及Rg32h，24h，48h组未见明显差别。阳性对照顺铂组的细胞生长抑制为22．2％。人参皂甙Rg3作用72h后的电镜分析显示，细胞出现典型的凋亡形态学改变。结论 人参皂甙Rg3具有抑制人肝癌细胞生长作用，与促进细胞凋亡机制有关。     

JNK通路介导帕金森病小鼠黑质神经元丢失及人参皂甙Rg1的保护作用

[目的]研究c-Jun氨基端激酶(e-Jun N-terminal protein kinase, JNK)在1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(Parkinson's disease, PD)模型中对PD黑质多巴胺(Dopamine, DA)能神经元丢失的可能机制以及人参皂甙Rg1的神经保护作用.[方法]采用神经毒素MPTP制备PD小鼠模型.免疫组织化学法与蛋白印迹法观察各组小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)和磷酸化c-Jun (p-c-jun)表达变化;原位末端标记法(TUNEL)观察黑质细胞凋亡数量变化.[结果]与对照组相比,模型组小鼠黑质致密带TH阳性神经元显著减少约55%(P<0.01),p-c-jun表达水平亦明显升高,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量增高;人参皂甙Rg1干预组黑质TH阳性神经元细胞丢失明显减轻31%(P<0.01),p-e-jun表达水平明显下降,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量显著减少.[结论]JNK通路可能通过凋亡途径参与模型小鼠黑质多巴胺能神经元丢失过程;人参皂甙Rg1可在一定程度上阻抑黑质区JNK信号通路,减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质DA能神经元凋亡;人参皂甙Rg1对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用.     

人参皂苷Rg3对宫颈癌荷瘤小鼠治疗作用的实验研究

目的探讨人参皂苷Rg3对宫颈癌荷瘤小鼠的治疗作用。方法使用雄性5周龄Balb/c小鼠65只,随机取10只作为正常对照组,其它55只均在右前上肢腋窝皮下接种U14小鼠宫颈癌细胞作为实验组;从接种之日起每日称量体重和观察测量肿瘤体积,5 d后瘤体积达100~120 mm3时随机分为4组,即肿瘤对照组10只、人参皂苷Rg3高剂量(10 mg/kg)组15只、人参皂苷Rg3低剂量(5 mg/kg)组15只、阳性药(环磷酰胺50 mg/kg)组15只,然后开始治疗,每天灌胃给药治疗1次,共治疗14次;于治疗结束后第3天处死小鼠取肿瘤组织。采用酶联免疫法和免疫组织化学方法检测各组癌基因ras和抑癌基因PTEN的蛋白含量及蛋白阳性表达强度。结果与正常对照组比较,肿瘤对照组的癌基因ras的表达水平明显增高、抑癌基因PTEN的表达水平明显降低,两者差异均有统计学意义(P0.01)。人参皂苷Rg3组随剂量增加癌基因ras的表达水平显著降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.01);抑癌基因PTEN的表达水平明显升高,但与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);阳性药组与人参皂苷Rg3高剂量组差异无统计学意义(P0.05)。结论人参皂苷Rg3高、低剂量组均对U14宫颈癌细胞有明显抑瘤作用,其作用机制可能是人参皂苷Rg3参与了癌基因和抑癌基因的调控。     

人参皂甙Re Rg1标准对照品的高效液相色谱制备研究

目的 研究制备分离纯化高纯度人参皂甙Re,Rg1(Ginsenoside Re,Rg1)标准对照品的高效液相色谱（HPLC）方法,为人参类保健食品及中草药中人参皂甙Re,Rg1的标准化定量分析方法提供标准对照品。方法 人参总皂甙制成甲醇溶液;干法上柱,低压硅胶柱层析;步分离;真空浓缩;HPLC分离制备,真空浓缩结晶;纯度检测;产品。结果 该法所得产品纯度大于99％（HPLC）,制备收得率大于80％。结论 方法简便,生产周期短,产品质量高,产品完全可应用作为分析方法的标准对照品。     

UPLC法测定保健食品中人参皂甙Rg1和Re的研究

目的:采用WATERS超高效液相色谱法测定保健食品中人参皂甙Rg1和Re的含量。方法:样品用甲醇超声波提取法提取,采用ODS-C18(2.1 mm*100 mm,1.7μm)色谱柱,20%乙腈水溶液为流动相,0.3 ml/min流速对人参皂甙Rg1和Re洗脱,用DAD检测器在203 nm提取定量分析。结果:测定两种人参皂甙的相对标准偏差为0.9%~4.4%,最低检出浓度0.005 mg/kg,回收率91.0%~108.9%。结论:方法快速、节约,适用于保健食品中人参皂甙Rg1和Re含量的测定。     

维、汉族乳腺癌中BRCA1、P53及Ki-67蛋白的表达

[目的]研究维吾尔族及汉族乳腺癌患者中BRCA1、P53及Ki-67蛋白的表达及其意义.[方法]选取100例维吾尔族和25例汉族乳腺癌根治标本,对照组为126例维汉族乳腺良性病变(纤维腺病及纤维腺瘤)及乳腺癌旁非癌组织;运用免疫组化Evision二步法检测BRCA1、P53及Ki-67蛋白的表达.[结果](1)在乳腺良性病变及乳腺癌旁非癌组织中,BRCA1蛋白均定位于细胞核内.在乳腺癌组织中,93例完全表达为细胞浆阳性,阳性率为74.4%,32例表达缺失.(2)BRCA1蛋白的表达与组织学分级、患者的年龄、淋巴结转移及民族有明显相关性(P ＜0.05).(3)乳腺癌中P53蛋白和Ki-67的表达呈正相关(P＜0.01);BRCA1蛋白与P53及Ki-67的表达呈负相关(P＜0.01).(4)乳腺癌中P53及Ki-67蛋白的阳性表达率(53.6%;28.92±16.90)明显高于乳腺良性病变(1.59%,5.38±3.43)(P＜0.01).[结论]BRCA1蛋白、P53和Ki-67蛋白阳性表达可能在乳腺良性病变恶性转化及乳腺癌的发生中具有重要作用,有可能成为临床预测预后的重要指标之一.     

高效液相色谱法用于保健食品中人参原料鉴定

目的 采用高效液相色谱法(HPLC)同时分析人参类保健食品中的人参二醇及人参三醇皂甙，并根据分析所得的皂甙谱判别产品中的人参原料种类?方法 以乙腈-水体系在反相C18柱上进行梯度淋洗，于203nm监测，对六种主要的人参二醇及人参三醇皂甙进行分离分析，根据所得皂甙分析谱图判断产品中人参原料种类。结果 红参与白参的六种皂甙谱较为相似，但两者最大的差异在于Re与Rg1之间的比例变化，白参Re含量明显高于Rg1，但红参则相反；西洋参及茎叶皂甙则皂甙谱与人参有明显差异，特别是在人参二醇型皂甙部分(Rb1，Rb2，Re，Rd)，在白参及红参中均存在Rf，而西洋参则无此成分。结论 应用本法可有效控制产品质量，防止生产厂家在原料上以次充好。     

胰岛素样生长因子-1对高胆红素血症SD大鼠幼崽脑组织Caspase-3表达的影响

目的通过观察SD大鼠幼崽罹患高胆红素血症时在胰岛素样生长因子-1(IGF-1)干预的情况下脑组织中Caspase-3的表达情况,探究IGF-1在胆红素脑病防治中可能发挥的作用。方法选取7日龄的SD大鼠幼崽120只,采用随机的方法分成3个组,即对照组(A组)、高胆红素血症组(B组)、IGF-1干预组(C组),再根据处死时间点的不同(6 h、12h、24 h、48 h和72 h)将其划分成5个子组,每个子组8只。观察各组SD大鼠幼崽的异常神经行为;再依据时间点取各组SD大鼠幼崽脑组织,用HE染色法观察各组SD大鼠幼崽脑组织的病理改变,测定脑组织细胞的凋亡率选用TUNEL检测法,测定Caspase-3的表达情况选用免疫组织化学法。结果 (1)与对照组相比,高胆红素血症组SD大鼠幼崽海马区神经细胞凋亡增加,Caspase-3表达明显升高(P0.05);与高胆红素血症组比较,IGF-1干预组SD大鼠幼崽海马区神经细胞Caspase-3蛋白表达明显降低(P0.05),凋亡减少(P0.05),但其表达和凋亡率仍较对照组偏高(P0.05)。结论 SD大鼠幼崽在罹患高胆红素血症时Caspase-3可能参与了神经细胞的凋亡;IGF-1可能通过下调Caspase-3表达来抑制神经细胞凋亡,从而发挥其对脑组织的保护作用。