胰岛素防治大鼠一氧化碳中毒迟发性脑病的实验研究

目的观察胰岛素对一氧化碳(carbon monoxide,CO)中毒后迟发性脑病(delayed neuropsychologic sequelae,DNS)大鼠认知功能及脑神经元凋亡的影响,为临床防治一氧化碳中毒后迟发性脑病提供新的思路。方法采用大鼠腹腔注射CO气体法制备模型。将中毒后存活的大鼠采用抽签法随机分为CO中毒模型组,CO中毒模型+胰岛素组。胰岛素组给予1.2 mL胰岛素葡萄糖溶液(2 U/Kg胰岛素、2 g/kg葡萄糖)快速腹腔注入,连续给药7d;模型组、对照组腹腔注射等剂量的0.9%氯化钠注射液,连续7 d。采用Morris水迷宫检测各组大鼠1～5周逃避潜伏期,TUNEL法检测各组大鼠5周神经元凋亡情况。结果腹腔注入CO后,模型组大鼠出现认知功能下降,脑神经细胞凋亡明显;胰岛素组大鼠认知功能改善,脑组织病理损害减轻,细胞凋亡减轻。结论胰岛素能够改善大鼠认知功能,抑制神经元凋亡,改善存活神经元的细胞形态,对大鼠CO中毒后迟发性脑病具有一定的神经保护作用。     

一氧化碳中毒所致迟发性脑病大鼠模型的建立

目的　建立一氧化碳 (CO)中毒迟发性脑病大鼠模型。方法　将 40只Wistar大鼠随机分为 4组 ,每组 10只。分别将大鼠放入内置式 +室中毒箱的中毒室内 ,A、B、C 3组分别通入体积分数为 10 0× 10 -4 、15 0× 10 -4 、16 5× 10 -4 的CO混合气体 ,D组通入空气 ,前 5h气体流量为 80 0L/h ,中间 4h为 10 0 0L/h ,最后 3h为 12 0 0L/h ,共通气 12h。中毒前后进行迷宫试验。中毒后 3～ 2 8d内出现昏迷或迷宫实验正确入臂数少于 3次者定为迟发性脑病大鼠。采用TUNEL法、流式细胞仪和透射电镜技术检测大脑皮质、海马部位细胞凋亡情况。结果　B、C 2组均有 4只大鼠出现迟发性脑病行为改变 ,A、D 2组则无改变。迟发性脑病大鼠凋亡细胞数TUNEL法检测 ,B组为 45 0 %～ 6 5 0 % ,C组为 5 5 0 %～ 80 0 % ,凋亡细胞主要为神经元 ;流式细胞仪检测 ,B组为 5 0 5 %± 4 2 % ,C组为 5 5 9%±7 8% ;电镜检测有典型凋亡改变的神经元 ,B组为 5 0 %～ 15 0 % ,C组为 10 0 %～ 2 0 0 %。A组凋亡细胞数均少于 5 0 % ,D组均少于 1 6 %。结论　以CO体积分数 15 0× 10 -4 ～ 16 5× 10 -4 、中毒时间12h建立的CO中毒迟发性脑病大鼠模型是成功的 ,其组织病理学改变为大脑皮质和海马的大量神经元凋亡。     

高压氧对急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl-2蛋白表达的影响

目的 :研究高压氧 (HBO)治疗对急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl 2蛋白表达和迟发性损伤的影响 .方法 :4 5只雄性SD大鼠随机分成 3个组 :正常对照组、CO中毒组、HBO治疗组 (0 .2 5MPaHBO) .各组大鼠分别行常规HE染色、免疫组化染色和TUNEL染色 ,观察CO染毒后 1 ,3,5和 7d大鼠海马神经元损伤和Bcl 2蛋白表达变化的特点 .结果 :CO中毒组大鼠海马发生迟发性神经元凋亡 ,Bcl 2蛋白表达无明显变化 ;HBO治疗组凋亡神经元明显减少 ,Bcl 2蛋白表达增多 ,尤以染毒后 3和 5d明显 (P <0 .0 5 ) .结论 :HBO治疗可以促进急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl 2蛋白表达 ,抑制神经元凋亡 ,具有保护神经元的作用     

依达拉奉联合高压氧对急性CO中毒迟发性脑病小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨依达拉奉联合高压氧对急性CO中毒迟发性脑病小鼠学习记忆能力的影响。方法通过腹腔注射CO建立急性CO中毒迟发性脑病小鼠模型。小鼠随机分成6组,从染毒后第3周开始各组使用不同方法连续治疗14 d,治疗结束后使用Morris水迷宫检测学习记忆能力,以平均潜伏期及空间探索次数来比较各组学习记忆的差异。结果 DEACMP组小鼠平均潜伏期高于对照组(P<0.05),空间探索成绩低于对照组(P<0.05);染毒后小鼠除生理盐水组其余各组平均潜伏期均低于DEACMP组(P<0.05),空间探索成绩均高于DEACMP组(P<0.05);联合治疗组平均潜伏期低于高压氧组及依达拉奉组(P<0.05),空间探索成绩高于高压氧组及依达拉奉组(P<0.05)。结论依达拉奉联合高压氧可以有效改善急性CO中毒迟发性脑病小鼠空间学习记忆能力,效果优于单纯高压氧治疗。     

枸杞多糖对一氧化碳中毒致迟发性脑病小鼠模型学习记忆损伤的保护作用

目的:研究枸杞多糖(LBP)对一氧化碳中毒致迟发性脑病(DEACMP)小鼠模型的治疗作用。方法:利用腹腔注射CO建立DEACMP小鼠模型,通过Y迷宫和Morris水迷宫实验对LBP的治疗作用进行评价。结果:LBP中、高剂量组可显著增加小鼠在Y迷宫中的自发交替反应率,同时在水迷宫实验中LBP各剂量组均可使小鼠逃避潜伏期明显缩短。结论:枸杞多糖对DEACMP小鼠模型学习记忆损伤具有明显的保护作用。     

醒脑静对急性重度CO中毒大鼠神经元Bcl-2基因表达的影响

目的研究醒脑静注射液（xingnaoj inginjection,XNJI）对急性重度CO中毒大鼠海马神经元Bcl-2基因表达和迟发性损伤的影响。方法45只雄性SD大鼠随机分成3组：正常对照组、CO中毒组、XNJI治疗组。各组大鼠在治疗完毕后取脑组织分别行常规HE染色、免疫组化染色和TUNEL染色,观察CO染毒后1、3、5和7d大鼠海马神经元损伤和Bcl-2基因表达变化的特点。结果CO中毒组大鼠海马发生迟发性神经元凋亡,Bcl-2表达无明显变化;XNJI治疗组凋亡神经元明显减少,Bcl-2蛋白表达增多,尤以染毒后3d和5d明显（P〈0．05）。结论XNJI可以促进急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl-2表达,抑制神经元凋亡,具有保护神经元的作用。     

急性甲醇中毒大鼠空间学习记忆功能改变的研究

目的 探讨大鼠急性高剂量和低剂量甲醇中毒后空间学习记忆功能的改变.方法 复制急性高剂量和低剂量甲醇中毒大鼠各10只,并设生理盐水对照组(n=10),给予各组大鼠灌胃相应剂量甲醇溶液或生理盐水,并吸入等比(1∶1)混合气体(N20/02);应用Morris水迷宫评价急性甲醇中毒大鼠的空间学习记忆功能.结果 Morris水迷宫结果显示:与生理盐水对照组(60.43±7.13)s相比,低剂量组(89.55±7.98)s和高剂量组(98.77±5.64)s在Morris水迷宫水下隐匿平台实验第1天的逃避潜伏期显著延长(P＜0.05);第2～5天高剂量组逃避潜伏期较低剂量组和生理盐水对照组明显延长(P＜0.05);3组在第6～7天的水上可见平台实验中的逃避潜伏期时间和无平台探测实验中第Ⅲ象限的停留时间均无显著性差异(P＞0.05).结论 急性甲醇中毒大鼠有空间学习记忆功能障碍,程度与甲醇中毒剂量有关.     

改良式腹腔注射CO法建立急性CO中毒迟发脑病大鼠模型

目的探索建立急性CO中毒迟发脑病(DEACMP)大鼠模型的有效方法,为其进一步研究提供基础。方法 72只SD大鼠分为空气组、CO I组、CO Ⅱ组,分别给予腹腔注射空气、纯品CO气体追加注射(CO I组首次注射99.99%CO纯品气体120mL.kg-1后,连续3次按首次剂量的1/2追加注射,间隔为4h;CO Ⅱ组追加注射剂量改为首次剂量的2/3,其余同CO I组)并动态监测动脉血HbCO,3周后用Morris水迷宫逃避潜伏期成绩筛选具有认知功能障碍的大鼠,即为DEACMP大鼠模型。抽取DEACMP组和空气组大鼠制备脑组织病理切片,观察脑组织结构及神经细胞变化。结果 CO Ⅱ组大鼠急性期动脉血HbCO维持在50.07%～60.77%;CO Ⅱ组逃避潜伏期高于CO I组及空气组,DEACMP发生率也高于其它两组;DEACMP组大鼠脑组织病理改变主要为神经元变性坏死,大脑白质广泛脱髓鞘。结论首次注射CO纯品气体(99.99%)120mL.kg-1,追加剂量上调为首剂2/3量的腹腔注射方法更适合制作DEACMP大鼠模型。     

Zileuton对脑缺血后空间学习记忆障碍的改善作用

目的观察5-脂氧酶选择性抑制剂Zileuton对全脑缺血后空间学习记忆能力的改善作用。方法以两侧颈总动脉阻断合并低血压法诱导大鼠全脑缺血模型,Zileuton 30 mg/kg灌胃给药,共7天。应用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,海马切片观察CA1神经元病理变化。结果 Morris水迷宫实验表明,全脑缺血后大鼠活动总路径和逃避潜伏期明显延长,空间学习记忆能力下降（P〈0.05或P〈0.01）;Zileuton 30 mg/kg提高全脑缺血大鼠Morris水迷宫实验学习记忆成绩（P〈0.05）。海马病理切片观察显示,全脑缺血后海马CA1神经元损伤（P〈0.01）,Zileuton减轻脑缺血后神经元损伤（P〈0.05）。结论 5-脂氧酶抑制剂Zileuton能改善大鼠全脑缺血后空间学习记忆障碍,其机制与药物对海马CA1神经元的神经保护作用有关。     

音乐对大鼠学习和记忆以及海马NMDA受体表达的影响

目的: 研究音乐对大鼠空间学习和记忆及海马内NMDA受体表达的影响.方法: 用Morris水迷宫行为检测法,检测音乐刺激后大鼠学习和记忆能力的变化;免疫组化和PCR技术,检测海马NMDA受体及编码NMDA受体mRNA的表达.结果: 音乐刺激后,大鼠信息游泳和选择游泳的逃避潜伏期缩短,选择游泳选择正确率提高,其变化以持续音乐刺激组最明显,生后音乐组次之,对照组最小;音乐刺激后海马神经元NMDA受体及其mRNA表达增加.结论: 音乐刺激能提高大鼠空间记忆能力,增强海马神经元NMDA受体及编码NMDA受体的mRNA表达.     

ADC值的变化对急性CO中毒迟发性脑病的预测价值

目的利用MR扩散加权成像监测CO中毒家兔模型急性期脑组织ADC值的变化并与病理对照，探讨MR扩散加权成像对CO中毒急性期诊断的价值并尝试寻找一种能预测CO中毒迟发性脑病的指标。方法通过静吸法建立家兔CO中毒模型15只，成功13只。行磁共振功能成像（本文主要探讨MR扩散加权成像）动态观察家兔中毒后1h、第3天、第5天、第7天的脑部损伤情况，动态测量兔脑皮层的ADC值，并结合病理结果分别与中毒前ADC值相对照。与此同时，连续观察染毒家兔临床表现60d，并根据临床表现不同分为两组，即出现迟发性脑病组和未出现迟发性脑病组。结果所有染毒成功家兔在染毒后1h兔脑皮层均出现ADC值不同程度下降，平均ADC值与染毒前对照差别有显著性（P〈0．05），部分出现了异常信号；未出现迟发性脑病的家兔组各时间点脑皮层ADC值与染毒前对照差异均无显著性意义（P〉0．05）；出现迟发性脑病的家兔组染毒后1h脑皮层ADC值与染毒前对照差异有显著性（P〈O．05）。病理表现与影像学表现一致。结论ADC值对评价急性CO中毒的程度具有重要价值，并且可以初步预测CO中毒迟发性脑病发生的可能性。     

Early Biomarkers in 1H Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of Striatal Pathological Mechanisms after Acute Carbon Monoxide Poisoning in Rats

Objective In vivo Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (1H-MRS) can be used to evaluate the levels of specific neurochemical biomarkers of pathological mechanisms in the brain.
Methods We conducted T2-Weighted Magnetic Resonance Imaging (MRI) and 1H-MRS with a 3.0-Tesla animal MRI system to investigate the early microstructural and metabolic profiles in vivo in the striatum of rats following carbon monoxide (CO) poisoning.
Results Compared to baseline, we found significant cortical surface deformation, cerebral edema changes, which were indicated by the unclear gray/white matter border, and lateral ventricular volume changes in the brain. A significant reduction in the metabolite to total creatine (Cr) ratios of N-acetylaspartate (NAA) was observed as early as 1 h after the last CO administration, while the lactate (Lac) levels increased marginally. Both the Lac/Cr and NAA/Cr ratios leveled off at 6 h and showed no subsequent significant changes. In addition, compared to the control, the choline (Cho)/Cr ratio was slightly reduced in the early stages and significantly increased after 6 h. In addition, a pathological examination revealed mild cerebral edema on cessation of the insult and more severe cerebral injury after additional CO poisoning.
Conclusion The present study demonstrated that 1H-MRS of the brain identified early metabolic changes after CO poisoning. Notably, the relationship between the increased Cho/Cr ratio in the striatum and delayed neuropsychologic sequelae requires further research.     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠行为学及大脑皮层和海马Na+-K+ATP酶活性的影响

目的研究银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠行为学及大脑皮层和海马Na+-K+ATP酶活性的影响.方法腹腔注射佐链霉素55mg/kg建立糖尿病模型,以旷场分析法和Morris水迷宫法考察各组大鼠学习记忆能力,检测大脑皮层和海马的Na+-K+ATP酶活性.结果大鼠糖尿病6个月后,旷场分析示中央格停留时间延长、探洞次数较少,Morris水迷宫实验示逃避潜伏时间延长、搜寻平台策略成绩降低,大脑皮层和海马的Na+-K+ATP酶活性明显下降.EGb可明显升高Na+-K+ATP酶活性(P＜0.05或P＜0.01),缩短中央格停留时间、水迷宫实验逃避潜伏期时间(P＜0.05或P＜0.01),提高探洞次数和搜寻平台策略成绩(P＜0.05或P＜0.01).结论EGb可提高糖尿病大鼠大脑皮层和海马的Na+-K+ATP酶活性,改善学习记忆能力.     

高迁移率族蛋白-1与家兔急性一氧化碳中毒迟发性脑病的关系

目的:通过动态观测急性一氧化碳(CO)中毒后血浆高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)含量的变化,探讨HMGB-1与迟发性脑病发生的相关性及可能作用机制。方法:普通级健康家兔24只,随机分为对照组、急性CO中毒迟发性脑病组(模型组)和正丁酸钠预处理组(干预组),每组各8只。家兔腹腔连续间隔注射高纯CO气体制备急性CO中毒迟发性脑病模型,造模结束后1、3、6、12、24 h及3、7、14、21天各时间点分别耳缘静脉采血检测HMGB-1含量。结果:血浆HMGB-1含量,在造模结束3 h,模型组与对照组比较,差异有统计学意义(P < 0.05),6 h至21天,模型组较对照组差异均有统计学意义(P < 0.01),而干预组较对照组差异无统计学意义(P > 0.05);在造模结束6 h至21天,染毒家兔(模型组与干预组)最终形成迟发性脑病组较未形成组差异也均有统计学意义(P < 0.01)。结论:早期血浆HMGB-1含量与迟发性脑病的发生呈高度相关,且HMGB-1在迟发性脑病的形成过程中发挥至关重要的作用。     

急性一氧化碳中毒对大鼠脑红蛋白的影响

目的探讨急性一氧化碳中毒对大鼠脑红蛋白的影响,为一氧化碳中毒的防治提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠20只随机分为对照组和一氧化碳染毒组,每组10只。染毒组按60ml/kg体重腹腔注射一氧化碳,每周一次,注射4周。对照组注射等量的空气。染毒结束后进行神经行为学测试包括旷场试验、甩尾试验和后肢撑力试验,同时检测大鼠海马、皮质、小脑中脑红蛋白的变化。结果一氧化碳中毒后大鼠在中央格停留时间明显增加,修饰次数、直立次数和大小便次数也较对照组明显增加,穿格次数明显减少;甩尾时间比对照组明显延长、后肢展开距离增加明显,差异有统计学意义。此外CO染毒大鼠皮质和小脑中的NGB含量增加,而海马中的NGB呈下降的趋势。结论一氧化碳中毒致脑组织脑红蛋白含量变化,这可能参与了CO中毒致神经损伤的机制。     

急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠海马神经细胞凋亡及Erk1/2,Bad蛋白的表达

目的：研究急性一氧化碳（CO）中毒迟发性脑病（DEACMP）模型大鼠海马神经细胞凋亡及细胞外信号调节蛋白激酶1/2（Erk1/2）、Bcl-2/Bcl-xl相关凋亡蛋白（Bad）的表达,探讨DEACMP可能的发病机制.方法：体质量240～280g雄性SD大鼠48只,随机均衡分为对照组、染毒后1,3,7,14,21d组.分次腹腔注射CO纯品气体制备DEACMP模型,观察大鼠染毒后表现,并动态监测大鼠尾血碳氧血红蛋白（COHB）浓度.取各组大鼠海马组织制备石蜡病理切片,分别采用苏木精-伊红（HE）染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷酸缺口末端标记（TUNEL）法、免疫组织化学法观察海马神经元形态学变化、凋亡细胞数量,及Erk1/2,Bad蛋白的表达.结果：染毒后大鼠昏迷时间较长,COHB长时间（〉16h）维持在高水平（〉50%）; 染毒后7～14d海马神经细胞出现明显变性坏死; 凋亡细胞数在第7～14d达到高峰（P〈0.05）; Erk1/2于染毒后1～21d表达水平随时间延长逐渐减低（P〈0.05）; Bad表达于染毒后1d升高,3d达峰值后逐渐降低,但至21d时表达仍高于正常对照组（P〈0.05）.结论：CO中毒后Erk1/2表达下调、Bad早期表达上调后又回落,提示Erk1/2、Bad蛋白介导了海马区神经元的凋亡,参与了DEACMP的发生.     

一氧化碳对大鼠心肌LDH及其同工酶谱影响的研究

对ＣＯ急性染毒大鼠７５０ｐｐｍ（８５８．９ｍｇ／ｍ~３）、１５００ｐｐｍ（１７１７．８ｍｇ／ｍ~３）心肌ＬＤＨ活性及其同工酶谱进行研究。结果表明，接触高剂量ＣＯ可使心肌ＬＤＨ活性增高（与对照组相比，Ｐ＜０．０５），同工酶谱分析显示ＬＤＨ＿２降低、ＬＤＨ＿５增高（与对照组相比，Ｐ均＜０．０５），同工酶谱朝增加Ｍ亚基方向迁移。提示ＣＯ改变心肌能量代谢途径，增强无氧糖酵解以代偿ＣＯ所致的心肌缺氧。