bcl—2和ＰＣＮＡ在肾癌中的表达及临床意义

肾细胞癌（ＰＣＣ）占成人恶性肿瘤的３％，是人类是常见的恶性肿瘤之一，其生物行为及预后较难估计，我们应用免疫组织化学方法对监癌 bcl-2蛋白，增殖组织核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及意义进行了初步研究，以探讨其阳性表达与肿瘤生物学行为的关系。     

凋亡相关基因产物Fas／APO—1和bcl—2蛋白在肾癌组织中的表达及 …

目的 研究凋亡相关基因Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和ｂｃｌ－２在肾癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学法对３５例肾癌组织和２６例远离肾癌的正常肾组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果 肾癌组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１蛋白表达率５７．１４％,明显低于正常肾组织中的表达率（８４．６２％,Ｐ〈０．０５）,且表达强度也明显低下;而ｂｃｌ－２蛋白表达率为８０．０％,明显高于正常肾组织中的表达率（５     

抗凋亡基因bcl—2在膀胱肿瘤中的表达及意义

应用链菌素亲和素－过氧化物酶（ＬＳＡＢ）免疫组织化学技术对４９例膀胱肿瘤石蜡切片ｂｃｌ－２原癌基因蛋白的表达进行研究，结果显示，在各级（期）膀胱肿瘤中均为ｂｃｌ－２基因表达，随着肿瘤分级，分别的增加，ｂｃｌ－２基因表达增多，但无显著性差异（Ｐ〉０．０５），在〉５０岁以上患者中ｂｃｌ－２基因表达率明显高于≤５０岁者（Ｐ〈０．０５）。虽然在复发肿瘤和多发肿瘤及男性患者ｂｃｌ－２基因表达有增加趋势，但其     

前列腺癌中抗调零基因bcl—2表达产物的分布及意义

采用免疫组化方法观察６０例前列腺良、恶性病变中ｂｃｌ－２基因产物的表达与分布。正常前列腺组织和前列腺增生症阳性率分别为２０．０％和５０．０％；３０例前列腺癌中，ｂｃｌ－２阳性病例达８６．６７％。结果提示，ｂｃｌ－２在前列腺襄的表达与细胞的分化程度有关，ｂｃｌ－２的过量表达可能参与了前列腺癌的发生过程。     

凋亡抑制基因bcl—2产物在肾细胞癌中的表达及其意义

凋亡抑制基因ｂｃｌ２产物在肾细胞癌中的表达及其意义王思齐刘同才张铭铮王立忠李振华李芳李书章孔垂泽李泽良应用免疫组织化学方法和微波炉抗原修复法观察ｂｃｌ２基因产物在肾癌中的表达及其与肾癌临床分期、组织病理分型、分级和疾病预后的关系。材料与方法收集我...     

Ki-67及bcl-2基因产物在肾癌组织中的表达及其意义

目的探讨基因Ｋｉ６７和ｂｃｌ２产物在肾癌组织中表达的意义及相关关系,了解肿瘤增殖与凋亡的特点。方法采用免疫组化ＳＡＢＣ法,对４３例肾癌与１０例正常肾组织的石蜡包埋标本切片对照,进行与产物表达的统计研究。结果ｂｃｌ２在肾癌组织中阳性表达率为８０％,与正常肾组织（４２％）相比,差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。但其表达与肿瘤分级,分期无关（Ｐ＞０．０５）。Ｋｉ６７的表达与肿瘤分级,分期及预后密切相关（Ｐ＜０．０５）,随恶性程度增加,其表达强度也增加。Ｋｉ６７与ｂｃｌ２的表达无显著相关性（ｒ＝０．２４１）。结论检测肾癌组织中Ｋｉ６７产物表达可以作为预后的评价指标;ｂｃｌ２可能参与了肾组织由良性向恶性转化的过程,但与癌细胞恶性分化程度无关。     

肾癌原癌基因C—erbB—2蛋白产物的表达及意义

为探讨肾癌原癌基因Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物的表达及意义，采用免疫组化Ｓ－Ｐ（过氧化物酶－链霉卵白素）法对５５例肾癌组织中ＣｅｒｂＢ－２蛋白进行检测。显示Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白呈局限性弱染色，表达率为２１．８％，与肿瘤直径相关（Ｐ〈０．０１），Ｒｏｂｓｏｎ分期Ⅰ，Ⅱ期肿瘤阳性表在明显高于Ⅲ，Ⅳ期肿瘤（Ｐ〈０．０５），随肿瘤分级增高阳性表达率呈递减趋势，颗粒细胞癌阳性表达率明显高于透明细胞癌（Ｐ〈０．０     

c—myc基因在肾癌组织中的表达

目的：探讨c-myc基因表达与肾癌发生发展和预后的关系。方法：应用SABC免疫组织化学法及原位杂交技术对42例肾癌组织中的P62蛋白合成和其中30例肾癌标本中的c-myc mRNA转录水平进行检测。结果：66．7％的肾癌组织中P62蛋白阳性,53．3％的肾癌标本中c-myc mRNA转录增强;不仅如此,基因转录与蛋白合成水平还与肿瘤细胞的分化程度及患者预后负相关。结论：c-myc基因可能参与了肾癌的发生,基因表达水平可作为判定肾癌细胞恶性程度和评估患者预后的指标。     

β-环连蛋白基因在肾癌中的表达及其突变分析

目的 探讨β－环连蛋白（β－ｃａｔｅｎｉｎ）基因在肾癌中表达，分散其突变情况。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ，ＳＳＣＰ及酶切的方法对２６例肾癌标本进行了研究。结果 ２６例肿瘤标本中β－ｃａｔｅｎｉｎ在ｍＲＮＡ水平并无过表达，而且未见突变发生。结论β－ｃａｔｅｎｉｎ基因在肾癌细胞内的高表达不是由于其生成增多，而是降解减少。     

T细胞因子4在肾癌中的表达及其意义

目的　研究Wnt/Frizzled信号通路在核内的转导及其主要信号分子T细胞因子 4(TCF4)在肾癌发生发展中的作用。　方法　采用RT PCR及NorthernBlot的方法检测了TCF4基因在肾癌组织及正常肾组织 ,肾癌细胞系GRC I和正常肾小管上皮细胞系HK 2中的表达。　结果　TCF4在肾癌组织及细胞系中强表达 ,且存在剪接性突变 ,形成了 30 0bp左右的突变基因。　结论　TCF4作为Wnt/Frizzled信号通路的核内信号分子 ,在肾癌发生和发展中具有重要作用 ,其致病机理与TCF4的剪接性突变有一定关系。     

人表皮生长因子4在肾癌组织中的表达及与肾癌生物学行为的关系

目的 探讨肾癌组织中人表皮生长因子受体4(HER4)表达与肾癌临床生物学行为的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测75例肾癌组织标本中HER4的表达.患者男46例,女29例;年龄43～72岁,中位年龄49岁.75例均经手术病理证实,其中透明细胞癌51例、颗粒细胞癌15例、乳头状腺癌9例.MCC临床分期I～Ⅱ期38例,Ⅲ～Ⅳ期37例.20例癌旁正常肾组织作为对照.分析HER4过表达与肾癌患者年龄、性别、肿瘤大小及临床生物学行为的关系.结果 75例肾癌组织标本中HER4阳性表达9例、中等阳性表达18例、强阳性表达41例、阴性表达7例,过表达率78.7%.正常对照肾组织HER4表达均为阴性.统计学分析结果显示,肾癌组织HER4过表达与患者年龄、性别、肿瘤细胞分化程度及病理类型均无相关(P>0.05),而与淋巴结转移、临床分期呈正相关(P<0.05).结论 HER4蛋白在维持肾癌细胞生长上起重要作用,人为干预HER4蛋白过表达可能有助于肾癌的治疗.     

肾细胞癌VHL基因改变与VEGF表达的关系及意义

目的：探讨肾细胞癌VHL基因异常与血管内皮生长因子（VEGF）表达的关系及意义。方法：应用聚合酶链反应（PCR）加单链构象多态性分析（SSCP）、多聚合酶链反应（Multiplex-PCR)及免疫组织化学方法检测42例肾细胞癌、18例远离肿瘤的正常肾脏及10例正常肾脏组织中VHL基因突变、异常甲基化及VEGF的表达。结果：肾癌组织中VHL基因改变（61．9％）与正常肾脏组织（3．6％）比较差别有显著性意义（P＜0．005）,VHL基因失活与肾癌组织类型及临床分期相关,与病理分级无关。VEGF在肾癌组织（64．3％）与正常肾组织（21．4％）中的表达差别有显著性意义（P＜0．005）,肾癌组织中VEGF表达与组织类型无关,与病理分级及临床分期相关,随病理分级及临床分期的升高而增高。VHL基因改变与VEGF表达间存在显著的相关性（P＜0．05）。结论：VHL基因在肾细胞癌中具有高频突变率,可负向调节VEGF的表达。     

人肾癌组织EGFR-mRNA原位杂交分析及其意义

目的 探讨人肾癌组织ＥＧＦＲ－ｍＲＮＡ的轨示水平、细胞定位及与肾癌生长和发展的关系。方法 采用Ｄｉｇｏｘｉｎ标记原位杂交法,检测２５例石蜡包埋存档的肾癌组织和２０例相应正常是肾胞定位。结果 肾癌组织和正常肾组织的ＥＧＦＲ－ｍＲＮＡ转录阳性率分别为：石蜡包埋组４４％（１１／２５）和１５％（３／２０）,冰冻不保存组５０％（（８／１６）和１３％（２／１６）。两组肾癌组织ＥＧＦＲ－ｍＲＮＡ转录阳性率均较正     

肾母细胞瘤过表达基因和WT1基因在肾癌组织中转录水平的定量研究

目的 研究肾癌组织中肾母细胞瘤过表达基因（NOV）及WT1基因mRNA定量表达水平及意义。方法 肾癌组织标本57例。男40例，女17例，平均年龄65岁。T139例、T213例、T3a5例；G114例、G223例、G320例。应用实时RT—PCR方法定量检测癌组织及36例癌旁正常肾组织中NOV和WT1的mRNA表达，并对2种基因表达水平进行相关性分析。结果 肾癌组织NOVmRNA表达水平中位值（1．17）显著低于癌旁正常组织（4．32，P〈0．05），乳头状肾癌组织表达量（2．67）显著高于透明细胞癌（1．06，P〈0．05），G．肿瘤表达量（4．61）显著高于G2～G3肿瘤（1．11，P〈0．05）。NOV表达与肿瘤分期、大小等无显著相关。WT1mRNA在肾癌组织中的表达水平中位值（0．13）显著低于癌旁正常组织（1．93，P〈0．05），WT1表达与肿瘤分期、分级、组织类型等均无关。NOVmRNA与WT1mRNA表达水平无明显相关。结论 NOV基因与肾癌的发生和分化相关。WT1在肾癌组织中表现为低表达。NOV表达是否受WT1的调节尚需进一步研究。     

CD44基因在肾细胞癌中的表达

为探讨ＣＤ４４基因在肾细胞癌中的表达形式，应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等方法，检测ＣＤ４４基因在１５例肾癌及对应癌旁组织中的表达。结果：肾癌组织均表达标准型ＣＤ４４（ＣＤ４４ｓ），并有１１例（７３％）表达了变异体，其中５例（３３％）表达约１４００ｂｐ带型，６例（４０％）表达约７００ｂｐ带型。癌旁正常组织也表达ＣＤ４４ｓ，但未表达变异体ＣＤ４４（ＣＤ４４ｖ）。结果提示，大部分肾癌组织中存在变异体ＣＤ４４，主要表现形式为７００ｂｐ（Ｖ１０）和１４００ｂｐ。     

肾癌预后与浸润肥大细胞、淋巴细胞和P53表达的关系

对４３例肾癌中长期存活（＞５年）组２１例和短期转移组２２例分别进行了癌间质中肥大细胞数量、淋巴细胞反应程度以及Ｐ５３蛋白表达研究。结果证明长存组肾癌交界区及中心区肥大细胞计数明显高于转移组（Ｐ＜００１），且交界区计数高于中心区。长存组癌间质淋巴细胞反应强于转移组（Ｐ＜００１），其反应程度与肥大细胞计数有明显正相关性。Ｐ５３蛋白表达在两组间无显著性差异（Ｐ＞００５）。前两者反应强时，患者生存期延长、预后亦好。提示癌间质肥大细胞数量，淋巴细胞反应可作为临床判断肾癌恶性程度及预后的简易的客观量化标准     

c-myc反义RNA对肾癌细胞GRC-1的体外生物学影响

目的探讨ｃｍｙｃ反义ＲＮＡ对肾癌细胞系ＧＲＣ１的体外生物学影响。方法利用重组基因技术构建含ｃｍｙｃ反义ＲＮＡ的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３／ｍｙｃＡＳ,再通过脂质体介导完成重组体的细胞转染。结果与对照组相比,转染反义ＲＮＡ后的细胞体外生长速度减慢,软琼脂集落形成能力降低,部分细胞恢复生长接触性抑制;流式细胞仪显示肿瘤细胞Ｓ期百分率下降,细胞阻滞于Ｇ０／Ｇ１期;细胞ＤＮＡ合成减慢,３ＨＴｄＲ掺入率降低;原位杂交检测证实,转染后细胞内源性ｃｍｙｃ基因转录水平降低;被转染细胞在超微结构上也有相应改变。结论ｃｍｙｃ反义ＲＮＡ确能在体外实验中抑制肾癌细胞生长和逆转肿瘤恶性表型。     

人B7逆转录病毒基因转移体系的建立及在肾癌细胞中的表达

将人Ｂ７基因亚克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ中，构建了人Ｂ７逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮＢ７，经Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导转染包装细胞，并通过Ｇ４１８筛选获得较高病毒滴度的细胞株ＰＡ３１７／ｐＬＸＳＮＢ７（３×１０５～１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）。用此逆转录病毒基因转移体系将Ｂ７基因转移到肾癌ＧＲＣ１细胞中，经ＲＴＰＣＲ、间接免疫荧光及ＬＳＡＢ细胞免疫组化等检测方法检测到转基因细胞中Ｂ７ｍＲＮＡ及Ｂ７分子的表达。介导人Ｂ７基因的逆转录病毒基因转移体系的建立，为人肾癌转基因瘤苗的应用研究提供了实验基础。     

肉瘤样肾细胞癌组织中P53基因突变

为了明确Ｐ５３基因突变与肾癌发生发展的关系，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法和免疫组织化学方法对３７例肾癌新鲜标本进行Ｐ５３基因检测。结果显示：７例Ｐ５３ｍＲＮＡ表达明显高于正常对照，９例（２４．３％）Ｐ５３蛋白过表达；３７例肾癌组织中３例为肉瘤样肾细胞癌或组织中含肉瘤样癌细胞成分，此３例（１００．０％）均有Ｐ５３ｍＲＮＡ和Ｐ５３蛋白过表达，都有肾门或腹膜后淋巴结转移；３４例透明细胞和颗粒细胞癌中４例（１１．８％）Ｐ５３ｍＲＮＡ高表达，６例（１７．６％）Ｐ５３蛋白过表达，其中１例有肾静脉癌栓，１例有肾门淋巴结转移，另１例取自切口转移癌组织。结果表明：肉瘤样肾细胞癌中有频繁的Ｐ５３基因突变，可能是肾癌细胞向肉瘤样癌细胞转化的关键因素之一。