非小细胞肺癌FHIT和Caspase-3蛋白的表达及临床意义

[目的]研究脆性组氨酸三联体(FHIT)和Caspase-3蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移和预后的关系.[方法]用免疫组化方法检测77例非小细胞肺癌组织中FHIT和Caspase-3蛋白的表达,分析其与肿瘤微血管密度(MVD)、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移、临床复发,以及手术后生存期长短的关系.[结果]非小细胞肺癌组织中FHIT和Caspase-3蛋白阳性率分别为42%和10%.FHIT蛋白表达与非小细胞肺癌组织分化程度呈负相关(P=0.035);阴性表达组淋巴结癌转移发生率明显较阳性组高(P=0.004),患者术后生存期则明显较阳性组短.Caspase-3蛋白阳性表达组非小细胞肺癌组织的微血管密度明显较阴性组大(P=0.012).[结论]FHIT蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的组织分化程度、淋巴结转移和预后密切相关,它的低表达提示非小细胞肺癌患者预后不良.Caspase-3蛋白在非小细胞肺癌中所起的作用可能不大.     

Survivin在肺癌的表达及意义

目的 研究survivin在肺癌的表达及意义,探讨其与肺癌的组织类型、病理分级及淋巴结转移关系.方法 应用兔疫组化S-P法检测survivin在104例肺癌的表达,其中鳞癌46例、腺癌33例,小细胞癌10例、其他类型癌15例.结果 survivin在104例肺癌组织中有67例呈阳性表达(64.42%),survivin的阳性表达与肺癌组织类型无相关性(P＞0.05),survivin的阳性表达与肺癌的分化程度无相关性(P＞0.05).肺癌伴淋巴结转移组的survivin阳性率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论 检测肺癌组织中survivin的表达可作为判断肺癌预后的参考指标.     

P63蛋白在宣威与非宣威地区非小细胞肺癌表达的对比研究

目的研究宣威与非宣威地区非小细胞肺癌P63蛋白的表达,探讨其与生物学行为的关系。方法免疫组织化学法。结果P63蛋白在肺鳞癌组织中高表达;非小细胞肺癌中,P63蛋白的表达与患者的TNM分期、组织分化程度及淋巴结转移情况有关,与患者性别无关;P63蛋白在非小细胞肺癌中在相同病理类型、分期、组织分化、淋巴结转移情况及相同性别的阳性表达率,宣威组与非宣威组比较,差异无统计学意义。结论P63蛋白的表达在宣威并无地区特异性,并不是宣威肺癌高发的原因。     

非小细胞肺癌中Survivin蛋白与p63蛋白的表达及其相关性

目的:探讨Survivin蛋白、p63蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其生物学意义,并探讨其相关性。方法:用免疫组化S-P法检测76例NSCLC组织,12例癌旁肺组织中Survivin和p63两种蛋白的表达情况。结果:Survivin蛋白在癌旁肺组织不表达。76例NSCLC组织中,有45例表达阳性,占59.2%。Survivin蛋白表达与NSCLC细胞分化程度、复发和生存期有密切关系(P<0.05),但与NSCLC患者的年龄、性别、吸烟、病理类型、TNM分期及淋巴结转移均无明显相关(P>0.05)。NSCLC中p63蛋白阳性表达率为55.3%(42/76),而在癌旁肺组织中无一例表达。p63蛋白的表达水平与肺癌病理类型相关(P<0.01);而与NSCLC患者的年龄、性别、吸烟、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、复发和生存期均无明显相关(P>0.05)。Survivin蛋白与p63蛋白的表达呈正相关(P<0.01)。结论:Survivin与p63两种蛋白在NSCLC组织中的异常表达,对肿瘤的发生、发展起重要作用,两者可能起协同作用,并可能会成为NSCLC基因治疗的新靶点。     

P63蛋白在宣威与非宣威地区非小细胞肺癌中表达的对比研究

目的：研究宣威与非宣威地区非小细胞肺癌P63蛋白的表达,探讨其与生物学行为的关系．方法免疫组织化学法．结果 P63在肺鳞癌组织中高表达;非小细胞肺癌中,P63的表达与患者的TNM分期、组织分化程度及淋巴结转移情况有关,与患者性别无关;P63在非小细胞肺癌中在相同病理类型、分期、组织分化、淋巴结转移情况及相同性别的阳性表达率,宣威组与非宣威组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）．结论 P63的表达在宣威并无地区特异性,并不是宣威肺癌高发的原因.     

非小细胞肺癌中p73的表达及意义

目的 探讨p73蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法 NSCLC 40例,用免疫组化二步法检测组织标本中p73蛋白的表达,按组织学分类后进行统计学处理。结果 p73蛋白在肺癌组织中的表达和肺癌淋巴结转移癌组织中的表达均明显上调,分别与肺支气管粘膜上皮不典型增生的表达比较,差异均有极显著意义(P<0.01);p73蛋白的阳性表达在肺癌的不同病理类型及分化程度中比较,差异均无显著意义(P>0.05);p73蛋白阳性表达在伴有淋巴结转移的肺癌组织中与无淋巴结转移的肺癌组织中比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论 p73蛋白表达上调可能是NSCLC发生的重要因素;p73蛋白在伴有淋巴结转移的肺癌组织和肺癌淋巴结转移癌组织中表达均上调,推测p73上调可能促进肺癌的浸润与转移,这一基因变化可作为肺癌恶化、预后不良的动态监控标志物。     

cyclin D1和p16蛋白在鼻咽低分化鳞癌表达与预后的关系

目的探讨中细胞周期素D1(cyclin D1)和p16蛋白的表达与鼻咽低分化鳞癌预后的关系.方法应用免疫组化SP法检测cyclin D1和p16在66例鼻咽低分化鳞癌和20例鼻咽部炎症黏膜组织中的表达.分析这两种蛋白与鼻咽癌颈淋巴结转移、临床分期、复发和预后的关系.结果 p16的缺失表达在有淋巴结转移组高于无转移组(P＜0.0 5),而cyclin D1的过表达与淋巴结转移无关(P＞0.05).cyclin D1的过表达在有复发组高于无复发组(P＜0.05),而p16的缺失表达与复发无关(P＞0.05) .p16的缺失表达和cyclin D1的过表达均与临床分期无关(P＞0.05).p16的缺失表达和c yclin D1的过表达小于5年生存组均明显高于大于5年生存组(P＜0.05).结论 p16的缺失表达可能与淋巴结的转移和预后有关;cyclin D1的过表达可能与复发和预后有关.p16和cyclin D1均有可能独立作为鼻咽低分化鳞癌的预后评估指标.     

p53蛋白在肺癌中的表达及其意义

应用免疫组织化学S～P法检测50例肺癌组织中p53蛋白表达情况，结果发现：50例肺癌中，p53总阳性率为46％（23／50），其中肺鳞癌为44％（11／25），肺腺癌为46．67％（9／21），未分化癌为75％（3／4），其阳性表达与患者局部淋巴结有无癌转移有显著相关性，与肺癌的组织学类型及鳞癌的分化程度无关。在肺腺癌中p53表达越高，预后越差。未分化癌中p53强阳性均伴有局部淋巴结的转移。     

Survivin mRNA和p53蛋白在肺癌组织中的表达

目的探讨survivin mRNA和p53蛋白在肺癌组织中的表达及二者的相关性。方法选取2012年1月至2013年1月黄冈市中心医院收治的肺癌患者90例,另选取同期良性肺疾病患者30例,采用聚合酶链式反应检测肺癌组织、癌旁组织及良性肺疾病组织中survivin mRNA的表达水平,采用免疫组织化学方法检测p53蛋白的表达,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系,应用Pearson相关性分析分析survivin mRNA和p53表达的相关性。结果肺癌组织、癌旁组织和良性肺疾病组织中survivin mRNA阳性表达率分别为71.1%(64/90)、15.5%(14/90)、16.7%(5/30),肺癌组织中survivin mRNA阳性表达率显著高于癌旁组织和良性肺疾病组织(χ2=13.241、12.893,P<0.05),癌旁组织和良性肺疾病组织中survivin mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义(χ2=1.141,P>0.05)。肺癌组织、癌旁组织和良性肺疾病组织中p53蛋白阳性表达率分别为58.9%(53/90)、7.8%(7/90)、6.7%(2/30),肺癌组织中p53蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织和良性肺疾病组织(χ2=16.317、16.078,P<0.05),癌旁组织和良性肺疾病组织中p53蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(χ2=0.984,P>0.05)。肺癌组织中survivin mRNA和p53表达与患者的生存期、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),但与患者的性别、病理分型、年龄无关(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,survivin mRNA与p53蛋白表达呈正相关(r=0.942,P<0.05)。结论肺癌组织中survivin mRNA和p53蛋白表达升高,survivin mRNA与患者预后有关,survivin mRNA与p53蛋白表达呈正相关。Survivin mRNA和p53可能参与了肺癌的发生和发展。     

结肠癌组织中survivin与p53表达的相关性研究

目的研究survivin在结肠癌发生、发展中的作用及其与p53表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测survivin、p53在32例正常结肠黏膜组织、96例结肠癌组织中的表达。结果survivin在结肠癌组织中的阳性表达显著高于正常结肠黏膜组织（P〈0．01），结肠癌浸润浆膜层组的survivin阳性表达明显高于浸润肌层组（P＜0．05），结肠癌伴淋巴结转移组的survivin阳性率显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05），survivin表达与结肠癌的Dukes分期密切相关（P〈0．05），p53阳性组的survivin阳性表达明显高于p53阴性组（P〈0．01）。结论survivin可作为结肠癌的诊断标记物，检测结肠癌组织中survivin的表达可作为判断结肠癌转移及预后的参考指标。在结肠癌组织中survivin的表达与p53的表达密切相关，survivin和p53在结肠癌的发生发展过程中起协调作用。     

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

目的建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05mol/L醋酸溶液。结论为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关     

Survivin、Her-2、P16和PTEN在膀胱癌中的表达及意义

目的研究Survivin、Her2、P16和PTEN蛋白在膀胱癌中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测43例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中以上4种蛋白的表达。结果4种蛋白在膀胱癌中的表达与在正常膀胱黏膜比较差异均有显著性意义(均为P<0.01)。不同临床分期间Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05);不同病理分级间Survivin、Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。Her2和Survivin蛋白表达间存在正相关(r=0.821,P<0.05)。结论Her2和Survivin的高表达是膀胱癌预后不良的指征;P16可作为早期诊断的标记物;PTEN则可作为膀胱癌预后不良的独立性指标。     

星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达及意义

目的研究人脑星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白的差异表达，探讨它们之间、它们与病理分级及复发之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测了50例星形细胞瘤中不同级别的FHIT、、PCNA蛋白的表达水平，以10例非肿瘤脑组织作对照。结果非肿瘤脑组织FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为100％、0，星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为40％、86％；尽管在星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达总体差异有显著性（P〈0．05），Ⅱ级与Ⅲ级、Ⅱ级与Ⅳ级间比较差异有显著性（P〈0．05），但Ⅲ级与Ⅳ级比较差异无显著性（P〉0．05）；经统计学分析FHIT、PCNA蛋白呈皿著负相关（P〈0．01）；8例复发病例中复发前后FHIT、PCNA蛋白表达差异有显著性（P〈0．05）。结论星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达之间的显著负相关，提示FHIT、蛋白可能对细胞增殖具有负性调控作用。FHIT、PCNA蛋白的表达水平可能与星形细胞瘤的病理分级和复发有关，推测FHIT、PCNA蛋白的表达可能与星形细胞瘤的肿瘤侵袭性相关。     

P53、Caspase-3和凋亡调节蛋白FasL在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过在人乳腺癌组织和癌旁(相对正常)乳腺组织中观察p53、Caspase-3和FasL凋亡调节蛋白的表达,探讨p53、Caspase-3及FasL在乳腺癌疾病发生、发展过程中的作用及关系,为提高生物治疗乳腺癌疾病提供一定的实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检测21例收集于手术切除患者的乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织中的p53、Caspase-3及FasL。结果:P53蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为61.9%明显高于癌旁组织(相对正常)乳腺组织的0%;而Caspase-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.0%明显低于癌旁乳腺组织的80.9%;FasL蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为57.1%明显高于癌旁乳腺组织的19.0%。结论:在乳腺癌发生、发展过程中p53、Caspase-3和FasL蛋白发挥着既独立又协同的作用。     

子宫腺肌病中PTEN和Akt的表达及其相关性研究

目的探讨子宫腺肌病病灶中10号染色体缺失张力蛋白磷酸酶(PTEN)和蛋白激酶B（PKB/Akt）的蛋白表达情况,旨在为子宫腺肌病的发生发展以及治疗提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测子宫腺肌病异位内膜(30例)、在位内膜（27例）、正常子宫内膜(20例)的腺上皮细胞和间质细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt （P Akt）蛋白的表达并进行比较。结果PTEN蛋白在腺上皮细胞中的表达,正常子宫内膜表达高于在位内膜和异位内膜（P＜0.05,P＜0.01）,子宫腺肌病在位内膜的表达高于子宫腺肌病异位内膜的表达（P＜0.01);Akt、P Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度高于在位内膜（P＜0.05）和正常子宫内膜(P＜0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度高于正常子宫内膜(P＜0.01)。PTEN蛋白在间质细胞中的表达,正常子宫内膜明显高于子宫腺肌病的在位内膜和异位内膜（P＜0.05）,但在位内膜与异位内膜之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;Akt、P Akt蛋白在间质细胞中的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜两组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PTEN与Akt、PTEN与P Akt在子宫腺肌病异位内膜、在位子宫内膜和正常子弓内膜中的表达均呈负相关（r＝-0.444;r＝-0.546）。结论PTEN蛋白表达在子宫腺肌病的在位、异位内膜中减少;Akt、P Akt蛋白表达增加。PTEN蛋白低表达不能有效的抑制Akt的激活,从而对子宫腺肌病的发生与发展起重要的作用。     

绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

目的：构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体，在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法：用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段，插入到GFP表达载体pEGFP—N2中GFP基因序列的上游，构建成GFP—mfgl2融合基因表达载体pEGFP—mfgl2，将该载体转染到CHO细胞后24—48h，通过荧光显微镜观察并摄片。结果：扩增出长约1．3kb的基因片段，经双酶切鉴定和测序鉴定无误；重组载体转染CHO细胞后，在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论：成功构建了pEGFP．mfgl2融合基因表达载体；重组载体可在CHO细胞中表达出GFP—mfgl2融合蛋白，为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。     

WWOX与c-jun在胃癌中表达及其临床意义

目的研究WWOX与c-jun在胃癌中表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测60例原发性胃癌及其癌旁组织中WWOX与c-jun蛋白的表达情况。结果胃癌组织中WWOX蛋白阳性表达率(28.3%)显著低于在癌旁组织中的表达率(81.7%)(P<0.01)。胃癌组织中c-jun蛋白阳性表达率(68.3%)显著高于其癌旁组织中的表达率(23.3%)(P<0.01)。WWOX蛋白的阳性表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),与其他临床病理参数无关。c-jun蛋白阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。两者的表达存在相关性(χ2=4.96,P<0.01)。结论WWOX蛋白和c-jun蛋白在胃癌组织和癌旁组织的表达均有明显的差异,WWOX蛋白在胃癌中低表达,而c-jun蛋白在胃癌中高表达。     

cAMP—依赖性蛋白激酶的提纯及活性测定

用ＤＥＡＥ－纤维素层析和羟基磷灰石层析方法,从牛心中提取了ｃＡＭＰ－依赖性蛋白激酶。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定分子量为３８ｋＤａ,并测定了其活性,为ｃＡＭＰ代谢途径的研究打下了基础。     

Ki67、P53蛋白在人喉组织中的表达及临床意义

目的 探讨Ki67和P53蛋白表达在人喉癌发生、发展及预后中的作用.方法 采用免疫组织化学Envision法检测182例喉不同病变组织标本(喉癌141例,喉癌前病变18例,声带息肉15例和癌周正常喉组织8例)中Ki67和P53蛋白的表达.结果 Ki67、P53在人喉癌组织中表达阳性率均显著高于喉癌前病变、声带息肉组织及癌周正常喉组织(P＜0.01);中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)、伴颈淋巴结转移及术后3年或5年死亡的喉癌组织中PD4、Ki67阳性表达率均显著高于早期(Ⅰ～Ⅱ期)、无颈淋巴结转移及3年或5年存活病例(P＜0.01或0.05);Ki67和P53蛋白在人喉癌组织中联合表达阳性率显著高于喉其他不同病变组织中联合表达阳性率(P＜0.01).结论 Ki67和P53联合表达与人喉癌的发生、发展及预后有一定的相关性.