胆红素代谢及其调节的研究进展

 胆红素作为人体的一种重要内源性物质,是临床诊断黄疸的主要依据,也是肝功能的重要指标。本文在简述胆红素代谢过程、代谢动力学及代谢异常的基础上,重点对有机阴离子转运多肽(organic anion transport polypeptide,OATP)和多药耐药相关蛋白(multidrug associated protein,MRP)等转运体介导的胆红素转运、PXR和CAR等核受体对UGT1A1介导的胆红素代谢调控、药物对胆红素代谢的抑制和诱导,及其与胆红素相关病症关系等方面的最新进展进行归纳和总结,为进一步研究和揭示黄疸、高胆红素血症、新生儿黄疸等胆红素相关病症的发生原因和发生机制提供参考,并为其诊断、预防和治疗提供最新科学依据。     

生长激素在大鼠肝细胞胆红素代谢中的作用

目的研究胆道梗阻及再通大鼠血清GH的变化规律及在肝细胞胆红素代谢中的作用.方法对胆道梗阻及再通大鼠动物模型的72份血清样本进行放免检测GH;肝脏组织样本行原位杂交染色在肝细胞胞浆染色定位STAT5,计算机图像分析测定,半定量比较肝细胞胞浆STAT5表达情况,并与血清GH、血清胆红素作相关分析.结果在胆道梗阻时机体存在GH分泌、释放不足从正常时的(6.54±1.09)下降到14d的(1.97±0.64),再通后GH缓慢恢复;STAT5在胆道梗阻大鼠肝细胞胞浆中表达(阳性面积比)明显下降由正常(0.335±0.09)到14d(0.045±0.02),再通后恢复至正常水平,图像分析、半定量比较发现其随血清GH、胆红素的升高或降低而发生变化.结论胆道梗阻时机体存在GH分泌、释放不足,并通过STAT5信号途径影响肝细胞代谢胆红素.     

全胃肠外营养对大鼠各组织谷氨酰胺代谢的影响

为探讨全胃肠外营养大鼠各脏器组织谷氨酰胺的代谢变化。采用全胃肠外营养大鼠模型和高效液相色谱技术测定大鼠血浆及各组织中Ｇｌｎ浓度。ＴＰＮ７ｄ后大鼠血浆，肌肉，肝脏，肺脏Ｇｌｎ含量已明显减少；ＴＰＮ１４ｄ后血浆及各组织Ｇｌｎ均明显下降。     

葡醛内酯对小鼠对乙酰氨基酚代谢及其所致肝损害的影响

目的　研究葡醛内酯对昆明种小鼠对乙酰氨基酚代谢影响及对对乙酰氨基酚所致的肝损害有无保护作用 .方法　给昆明种小鼠 ip 1 50 mg· kg-1 对乙酰氨基酚及葡醛内酯观察小鼠对乙酰氨基酚代谢速率的改变 .用诱导给药及同时给药法 ip与对乙酰氨基酚等剂量的葡醛内酯观察对对乙酰氨基酚所致的肝损害的影响 .结果　葡醛内酯对昆明种小鼠对乙酰氨基酚代谢无影响 ,对对乙酰氨基酚所致的肝损害也无保护作用 .结论　葡醛内酯对小鼠对乙酰氨基酚毒性无直接解毒作用     

烟酰胺磷酸核糖转移酶在2型糖尿病大鼠糖代谢相关组织中的表达

目的：研究2型糖尿病大鼠机体主要能量代谢器官（肝脏、胰腺、肌肉和肾脏）中烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)的表达,探讨Nampt表达和分布与糖尿病发病的关系。方法：腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立SD大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分为糖尿病组和对照组。检测大鼠空腹血糖（FBG）和胰岛素分泌水平;采用免疫组织化学Envision 染色法检测大鼠肝脏、胰腺、骨骼肌和肾脏组织中Nampt蛋白表达和分布。结果：糖尿病组大鼠FBG水平明显高于对照组（P<0.01）,空腹胰岛素水平明显低于对照组（P<0.01）。糖尿病组大鼠肝脏组织Nampt表达明显增高,Nampt蛋白充满全部细胞质;骨骼肌Nampt蛋白表达使整个细胞呈浓染;肾脏细胞Nampt表达主要分布在肾小管上皮细胞内,表达蛋白主要分布于胞浆;与对照组比较,糖尿病组大鼠肝脏、骨骼肌和肾脏组织Nampt阳性表达率明显增高（P<0.05或P<0.01）;糖尿病组大鼠胰腺组织几乎未见Nampt表达,Nampt阳性表达率明显低于对照组（P<0.01）。结论：Nampt在糖尿病状态下大鼠主要能量代谢器官中的表达发生明显改变,且呈现出规律性变化,提示Nampt可能成为糖尿病发病过程中的一种特异的指示性标志物。     

胆红素与维生素E对糖尿病大鼠肝及胰组织中NO和NOS的影响

目的：探讨胆红素（bilirubin,BR)和维生素E（VitE)对糖尿病大鼠肝、胰组织中NO含量和NOS（nitric oxide synthase)活性的影响。方法：对用链脲佐霉素（streptozotocin,STZ)诱发的糖尿病大鼠持续4周给予BR、VitE或BR＋VitE后，用硝酸还原酶法测定肝、胰组织中NO含量和NOS活性。结果：在肝、胰组织中，正常对照组NO含量最低，BR组、VitE组和BR＋VitE组的NO水平显著低于糖尿病组（P＜0．05）；各组大鼠胰组织中的NO含量显著高于肝组织。结论：BR和VitE均可显著降低这两个组织中的NO水平和NOS活性，减轻糖尿病大鼠的自由基损伤。     

胆红素对抗急性肺损伤大鼠的实验研究

目的 探讨胆红素对急性肺损伤（ALI）大鼠的抗氧化指标和肺血管内皮细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法 雄性Wistar大鼠30只，随机分为对照组、ALI模型组、胆红素干预组。检测肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）含量变化；测定肺血管内皮ICAM-1 mRNA的表达。结果 ALI模型组MDA和ICAM-1 mRNA显著高于对照组（分别为P〈0．01和P〈0．001），而SOD和GSH-Px明显低于对照组（均为P〈0．01）。胆红素干预组MDA和ICAM-1 mRNA明显低于ALI模型组（均为P〈0．01），而SOD和GSH-Px显著高于ALI模型组（分别为P〈0．01和P〈0．05）。结论 胆红素通过抗氧化作用和抑制ICAM-1 mRNA的表达对抗ALI。     

复合蛋白锌对大鼠生长发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响

目的 观察复合蛋白锌(CPZ)对大鼠生长发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响。方法 缺锌饲养大鼠5周，复制缺锌性生长抑制模型后，随机分为4组，分别给予CPZ(15．0、30．0g/kg，ig)和硫酸锌(3．75、7．5mg/kg，ig)4周，并在补锌治疗的前、后检测各指标的变化。结果 两CPZ剂量组在增加大鼠血浆及器官锌含量、体重及活动性、血浆及组织核酸和蛋白质含量等方面显著优于对应剂量的硫酸锌组。结论 CPZ能促进核酸和蛋白质合成，促进大鼠的生长发育，其疗效显著优于硫酸锌。     

Infection of hepatitis B virus in extrahepatic endothelial tissues mediated by endothelial progenitor cells

Background： Hepatitis B virus（HBV） replication has been reported to be involved in many extrahepatic viral disorders; however, the mechanism by which HBV is trans-infected into extrahepatic tissues such as HBV associated myocarditis remains largely unknown. Results：In this study, we showed that human cord blood endothelial progenitor cells （EPCs）, but not human umbilical vein endothelial cells （HUVECs） could be effectively infected by uptake of HBV in vitro. Exposure of EPCs with HBV resulted in HBV DNA and viral particles were detected in EPCs at day 3 after HBV challenge, which were peaked around day 7 and declined in 3 weeks. Consistently, HBV envelope surface and core antigens were first detected in EPCs at day 3 after virus challenge and were retained to be detectable for 3 weeks.     

糖代谢异常大鼠肝组织中内质网应激相关分子CHOP和Caspase-12的表达变化

目的观察高脂饮食诱导的糖代谢异常大鼠肝脏糖原沉积与内质网应激(ERS)相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)在肝脏中的表达变化。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为糖耐量受损组(IGT,n=20),IGT对照组(n=10),2型糖尿病组(T2DM,n=20)及T2DM对照组(n=10)。采用高脂饮食饲养12周诱导IGT大鼠,高脂饮食饲养4周后腹腔注射链脲佐菌素诱导T2DM大鼠。过碘酸雪夫氏(PAS)染色观察各组大鼠肝脏糖原改变;real-time PCR技术检测肝脏组织中CHOP mRNA的表达;Western blot技术检测肝脏组织中Caspase-12蛋白的表达。结果 IGT组和T2DM组大鼠肝脏糖原含量丰富。IGT组和T2DM组肝组织CHOP mRNA的表达水平与各自对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),而Caspase-12蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组Caspase-12蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论糖代谢异常大鼠肝组织糖原含量明显增多,ERS相关分子Caspase-12表达水平增高,肝组织中存在内质网应激,肝糖原沉积可能是内质网应激的诱因之一。     

缺锌对生长期大鼠发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响

目的 研究缺锌对生长期大鼠发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响。方法 1月龄雄性大鼠随机分为自由摄食（AL）、对饲（PF）和缺锌（ZD）组，以合成饲料饲养5周，制备缺锌动物模型。结果 ZD组血浆、肝、肾、睾丸锌含量，以及体重、体重增长值、饲料效价均显著低于AL和PF组；肝、肾、睾丸重量减轻，但其内脏指数增加，脾脏重量及其指数均显著降低；血浆蛋白总量，肝及睾丸组织RNA和蛋白质含量均低于AL和PF组，但DNA水平三组间差异不显著。PF组体重、体重增长值、内脏重量及组织RNA含量低于AL组，但其它指标与AL组无显著性差异。结论 锌缺乏时通过引起食欲减退，热量营养不足所造成的间接作用，以及各组织中锌缺乏对代谢的直接影响，从而抑制大鼠的生长发育。     

复合蛋白锌对大鼠生长发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响

目的观察复合蛋白锌(CPZ)对大鼠生长发育及组织核酸和蛋白质代谢的影响.方法缺锌饲养大鼠5周,复制缺锌性生长抑制模型后,随机分为4组,分别给予CPZ(15.0、30.0g/kg,ig)和硫酸锌(3.75、7.5mg/kg,ig)4周,并在补锌治疗的前、后检测各指标的变化.结果两CPZ剂量组在增加大鼠血浆及器官锌含量、体重及活动性、血浆及组织核酸和蛋白质含量等方面显著优于对应剂量的硫酸锌组.结论 CPZ能促进核酸和蛋白质合成,促进大鼠的生长发育,其疗效显著优于硫酸锌.     

肝外胆管癌癌组织ADAM17、MMPs表达情况与患者术后预后的关系分析

目的:分析肝外胆管癌癌组织去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)、基质金属蛋白酶(MMPs)表达情况及其与患者手术预后的关系.方法:回顾性分析我院收治的80例肝外胆管癌患者的临床资料,所有患者术中均留取癌组织,采用免疫组化法测定ADAM17、MMPs表达,分析肝外胆管癌癌组织ADAM17、MMPs表达与其手术预后的相关性.结果:①肝外胆管癌患者癌组织ADAM17、MMP-3、MMP-9高表达所占比例均高于癌旁组织;②肝外胆管癌患者术后3年、5年生存率为33.75%、22.50%,单因素分析证实:胆管癌位置、肿瘤直径、分化程度、T分期、淋巴结转移、血管及神经侵犯、切缘状态、ADAM17表达、MMP-3表达、MMP-9表达均与患者预后有关;③COX多因素分析证实,组织学分级、切缘状态、淋巴结转移、ADAM17表达、MMP-3表达、MMP-9表达均为影响肝外胆管癌患者预后的独立危险因素.结论:ADAM17、MMP-3、MMP-9高表达均为影响肝外胆管癌患者预后的独立危险因素,其表达水平的变化与肿瘤侵袭、转移、炎症浸润有密切关联.     

腺苷酸活化蛋白激酶与LKB1在肥胖大鼠脂肪组织中的表达及其对糖脂代谢的影响

目的:探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)与LKB1在肥胖大鼠脂肪组织的表达及其对糖脂代谢的影响。方法:将30只6周龄雄性S-D大鼠随机分为普通饮食组(NC组)和高脂饮食组(HF组),各15只,分别予普通饲料喂养和高脂饲料喂养。喂养16周后,HF组大鼠体重高于NC组20%者为成功建立模型。所有大鼠过夜禁食后,麻醉状态下测量体重(BW),取静脉血测定血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)。处死大鼠后,采用Western blot法测定各组大鼠骨骼肌组织中AMPKα、磷酸化AMPK(P-AMPKα)和磷酸化LKB1蛋白(P-LKB1)的表达。计算AMPK活性。结果:与NC组比较,HF组大鼠BW、FFA、TG、FPG、FINS均升高(P<0.05~P<0.01),脂联素水平降低(P<0.05),骨骼肌组织中P-AMPKα和P-LKB1蛋白表达降低,AMPK活性降低(P<0.05)。结论:高脂饮食诱导大鼠营养性肥胖,降低LKB1和AMPK的活性,从而导致TG和TCH的合成增加,血糖升高,形成胰岛素抵抗。     

鼠早产和低氧浓度对胆红素神经毒性的增强作用

目的探讨早产、氧浓度异常对胆红素的神经细胞毒性的影响及其可能的发生机制。方法 7 d龄新生足月和早产大鼠各36只,完全随机分为常氧+生理盐水组、常氧+胆红素组、低氧+生理盐水组、低氧+胆红素组、高氧+生理盐水组、高氧+胆红素组。常氧+生理盐水组,经小脑延髓池注射0.02 ml生理盐水;常氧+胆红素组,经小脑延髓池注射胆红素20μg/g;低氧+生理盐水组,在氧浓度8%的密闭箱中暴露3 h,经小脑延髓池注射0.02 ml生理盐水;高氧+生理盐水组,在氧浓度95%的密闭箱中暴露3 h,经小脑延髓池注射0.02 ml生理盐水;低氧+胆红素组,氧浓度8%的密闭箱中暴露3 h后经小脑延髓池注射胆红素20μg/g;高氧+胆红素组,氧浓度95%的密闭箱中暴露3 h后经小脑延髓池注射胆红素20μg/g。各组均于24 h断头取脑。HE染色及TUNEL显示海马神经细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测iNOS和TNF-α表达。结果①注射胆红素的大鼠均出现俯伏、转圈、四肢颤动、翻滚、活动减少等异常神经行为,早产组最明显。②HE染色观察胆红素+低氧组海马神经细胞坏死、凋亡最明显。③TUNEL显示,早产胆红素组海马神经细胞凋亡数(30.17±3.76)较足月组(23.33±4.89)明显升高(P<0.05);足月和早产低氧+胆红素组的海马神经细胞凋亡率[分别为(27.67±3.01)和(34.33±3.01)]较胆红素组[分别为(23.33±4.89)和(30.17±3.76)]明显升高(P<0.05),而高氧+胆红素组海马神经细胞凋亡率与胆红素组相似。④早产胆红素组海马神经细胞TNF-α释放(0.425±0.014)较足月组(0.388±0.020)显著增多(P<0.05),两组iNOS表达水平相似;低氧+胆红素组海马神经细胞TNF-α和iNOS表达[(0.437±0.024)和(0.440±0.001)]较胆红素组[(0.253±0.010)和(0.388±0.020)]显著增加(P<0.05);高氧+胆红素组海马神经细胞TNF-α释放(0.416±0.011)显著增多(P<0.05),iNOS表达无明显升高。结论胆红素可诱导TNF-α等炎症因子释放增多;低氧、早产增加TNF-α和/或iNOS等炎症因子的释放和表达,增强胆红素的神经毒性。减少围产期窒息、早产,控制炎症因子释放,对防治胆红素脑病有重要意义。     

添加丙氨酰谷氨酰胺胃肠外营养对烫伤大鼠的作用

目的探讨添加丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）全胃肠外营养（TPN）对烫伤大鼠的空肠黏膜、蛋白质代谢及创面肉芽组织的影响。方法33只SD大鼠,随机分为非烫伤正常参照组（正常组）、传统TPN组（传统组）和添加Ala-Gln的TPN组（二肽组）,每组各11只。正常组自由饮食,另2组大鼠在颈外静脉插管后行30%体表面积Ⅲ度烫伤,并接受等热量（780 kJ.kg-1.d-1）等氮量（1.8 g氮量.kg-1.d-1）TPN 7天,留取24 h尿测每日氮平衡和累积氮平衡;7天后取血测定总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、前白蛋白（PAB）、转铁蛋白（TRF）,高效液相法检测肌肉中谷氨酰胺（Gln）的含量;取一段空肠作黏膜形态学观察;光镜下观察烫伤创面肉芽组织的情况。结果二肽组的血清PAB、TRF及肌肉中Gln含量明显高于传统组（P〈0.01）,空肠黏膜绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度、绒毛表面积明显高于传统组（P〈0.01）,创面肉芽组织中的毛细血管和成纤维细胞密度明显高于传统组（P〈0.01）。结论烫伤大鼠应用添加Ala-Gln的胃肠外营养能改善机体氮平衡,促进机体蛋白质合成,减少肌肉中Gln含量的下降,减轻空肠黏膜的萎缩,...     

胆红素主要转运子Mrp2在大鼠梗阻性黄疸肝脏中的表达及意义

目的研究梗阻性黄疸大鼠肝细胞毛细胆管面排泄胆红素的转运蛋白Mrp2的改变.方法采用RT-PCR和免疫荧光技术测得肝细胞Mrp2基因的转录和蛋白表达水平,并与血清胆红素和肿瘤坏死因子-α作相关分析.结果大鼠胆总管结扎术后,Mrp2基因的转录和蛋白表达明显降低.并与血清胆红素和TNF-α等存在线性负相关.结论梗阻性黄疸大鼠其胆红素主要转运子Mrp2在转录和蛋白表达水平明显降低,可能是由TNF-α等炎症介质的高表达引起的.Mrp2基因的转录和蛋白表达降低,肝细胞对胆红素的排泄障碍,导致或进一步加重机体的高胆红素血症.     

高迁移率族蛋白B1在糖尿病伴牙周炎患者牙周组织中的表达及与肝脏脂代谢的关系

摘要：目的 探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）与其下游的晚期糖基化终产物受体（RAGE）,肿瘤坏死因子α（TNF⁃α）在糖尿病及牙周炎大鼠牙周组织中的表达,及与免疫代谢重要器官肝脏脂代谢之间的关系。方法 建立糖尿病（DM）、牙周炎（CP）、糖尿病复合牙周炎（DM+CP）大鼠模型。免疫组化染色检测牙周组织中HMGB1、RAGE、TNF-α 的表达,光谱法检测血清中的脂代谢相关指标和肝损生化指标,并进行统计学分析。结果 DM组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE表达显著性高于对照组（P<0.05）,TNF-α表达量与对照组无差异;CP组HMGB1及TNF-α表达显著性高于对照组,RAGE表达显著性低于DM及DM+CP组,与对 照组无显著性差异;DM+CP组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE,TNF-α表达均高于对照组。与对照组相比较,DM,CP,DM+CP组可见多项肝脏脂代谢指标异常,其中肝脏损伤指标ALT表达在3组中均显著性升高（P<0.05）。结论 HMGB1,RAGE参与糖尿病大鼠的牙周组织炎症进程,糖尿病导致牙周组织中HMGB1表达升高。在高血糖、牙周炎及高血糖复合牙周炎情况下,均能导致一定程度的肝脏代谢功能紊乱,HMGB1-RAGE为解释糖尿病与牙周炎互为易感的信号通路研究提供了一定的线索。