瘦素受体基因Pro1019Pro变异与单纯性肥胖的关系

目的　探讨瘦素受体基因第 2 0号外显子 30 5 7位Pro10 19Pro基因变异与儿童单纯性肥胖之间的关系。方法　应用聚合酶链反应—限制性酶切片断长度多态性 (PCR -RFLP)方法测定瘦素受体基因Pro10 19Pro的基因变异频率 ,同时测血脂、身高、体重。结果　瘦素受体基因Pro10 19Pro(G→A)基因变异频率在肥胖组与正常对照组间差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。血脂水平与体重指数 (BMI)在肥胖组与正常对照组间差异有显著意义 (P <0 .0 5 ) ;肥胖组中及正常对照组中GG基因型与AA基因型间BMI值与血脂水平均差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论　瘦素受体基因第 2 0号外显子 30 5 7位Pro10 19Pro变异在儿童单纯性肥胖的发病机制中无重要作用 ,血脂水平及体重指数不受该基因变异的影响     

瘦素受体基因 Gln223Arg 位点多态性与超重肥胖的相关性研究

目的　探讨瘦素受体(LEPR)基因IGln223Arg/I多态性与超重肥胖的相关性,以及超重肥胖的相关危险因素。方法　选取177例对照组和128例体质指数 24 kg/2超重肥胖组作为研究对象作问卷调查、医学体检和血液生化检测,应用聚合酶链反应、限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术分析研究对象LEPR 基因Gln223Arg多态性,Logistic回归分析超重肥胖的危险因素。结果　超重肥胖组的GG基因型频率72.7%,G等位基因频率84.0%,均高于对照组的66.7%和80.2%,但差异无统计学意义(P0.05)。除腰围在对照组内Gln223Arg不同基因型间差异有统计学意义外(P＜0.05),年龄、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血糖(FBG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、血红蛋白(Hb)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)在超重肥胖组内和对照组内Gln223Arg不同基因型间差异均无统计学意义(P0.05)。多因素Logistic回归结果表明,超重肥胖的危险因素主要是腰围和低HDL-C。结论　LEPR基因Gln223Arg多态性可能与超重肥胖的发生无关。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1基因变异与冠心病

冠心病的发病机制涉及多因素和复杂的分子机制，而动脉粥样硬化是冠心病的病理基础。研究表明，氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，OX-LDL）的特异性受体——血凝素样ox-LDL受体1（lectin-likeoxi-dized low density lipoprotein receptor-1，LOX-1）可通过损伤血管内皮，促进炎症反应，加速细胞凋亡和泡沫细胞形成等机制促进动脉粥样硬化的发展，进而导致冠心病的发生、发展。LOX-1的基因变异可影响LOX-1的表达，而LOX-1的异常表达可影响冠心病的发生、发展。     

瘦素受体基因GIn223Arg多态性与上海地区人群肥胖的相关性

目的：瘦素的体质量调节作用是通过瘦素受体介导的，分析瘦素受体基因GIn223Arg多态性与上海地区人群肥胖的相关性。 方法：于2003-09／2004-05选择解放军第二军医大学长海医院内分泌科门诊的超重和单纯性肥胖患者130例（诊断按照WHO标准：体质量指数≥25kg／m^2为超重，体质量指数≥30kg／m^2为肥胖），为肥胖组。选择同期参加门诊体检的正常对照者102例，为对照组。所有观察对象均为上海籍、汉族、无亲缘关系，且有完整临床资料。实验经医院伦理委员会批准，受试者均知情同意。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法测定受试者瘦素受体基因GIn223Arg多态性的基因型。 结果：①肥胖组和对照组瘦素受体基因GIn223Arg基因型的频率分布差异无显著性。②在肥胖组中，瘦素受体基因GIn223Arg多态性与体质量指数相关（P=0．036），携带G等位基因的肥胖患者体质量指数较高。③Logistic回归分析显示，该多态性与体质量指数独立相关（P=0．046）。 结论：实验结果提示，瘦素受体基因GIn223Arg多态性与上海地区人群肥胖相关。     

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与上海地区人群肥胖的相关性

目的:瘦素的体质量调节作用是通过瘦素受体介导的,分析瘦素受体基因Gln223Arg多态性与上海地区人群肥胖的相关性。方法:于2003-09/2004-05选择解放军第二军医大学长海医院内分泌科门诊的超重和单纯性肥胖患者130例(诊断按照WHO标准:体质量指数≥25kg/m2为超重,体质量指数≥30kg/m2为肥胖),为肥胖组。选择同期参加门诊体检的正常对照者102例,为对照组。所有观察对象均为上海籍、汉族、无亲缘关系,且有完整临床资料。实验经医院伦理委员会批准,受试者均知情同意。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法测定受试者瘦素受体基因Gln223Arg多态性的基因型。结果:①肥胖组和对照组瘦素受体基因Gln223Arg基因型的频率分布差异无显著性。②在肥胖组中,瘦素受体基因Gln223Arg多态性与体质量指数相关(P=0.036),携带G等位基因的肥胖患者体质量指数较高。③Logistic回归分析显示,该多态性与体质量指数独立相关(P=0.046)。结论:实验结果提示,瘦素受体基因Gln223Arg多态性与上海地区人群肥胖相关。     

追赶肥胖大鼠血清瘦素水平及脂肪组织瘦素受体mRNA的表达变化

目的:通过观察大鼠追赶肥胖过程中瘦素水平及瘦素受体mRNA(OBRb-mRNA)表达变化进一步揭示追赶肥胖发生机制.方法:5周龄Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后随机分为对照组(NC)和追赶肥胖组(RN),NC组持续开放饮食,RN组给予半量饮食喂养4周(S4)后自由开放饮食8周.在造模过程中检测大鼠进食量、体重变化.分别于实验第0、4、6、8、12周采集血液并剥离内脏脂肪,测内脏脂肪(以两侧肾周及附睾脂肪为代表)重量/体重比值(以两侧肾周及附睾脂肪为代表);用ELISA法测血清瘦素水平及RT-PCR检测内脏脂肪OBRb-mRNA表达.结果:实验第4周,与NC组比较,RN组血清瘦素水平、内脏脂肪/体重比值明显降低(P＜0.05),内脏脂肪OBRb-mRNA表达增强,但无统计学意义.开放喂养后RN组血清瘦素水平、内脏脂肪/体重比值呈时间依赖性升高,于第8周时显著高于NC组(P＜0.05);而脂肪组织OBRb-mRNA表达逐渐降低,于第6周时明显低于NC组(P＜0.05).结论:在追赶生长过程中内脏脂肪组织OBRb-mRNA表达下降导致瘦素抵抗可能是造成内脏脂肪堆积的因素之一.     

一种新的早幼粒细胞白血病/维甲酸受体α融合基因S亚型变异易位

目的：逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测早幼粒细胞白血病／维甲酸受体α（PML／RARα）融合基因，筛查变异易位并对变异易位产物测序，以进一步了解变异易位的特点及临床意义。方法：取急性早幼粒细胞白血病（APL）患者骨髓，RT－PCR检测L亚型和S亚型，发现的变异易位经全自动测序仪测定其碱基序列。结果：11例PML／RARα融合基因表达的患者中，S亚型1例、L亚型8例、变异S亚型合并L亚型2例；变异S亚型产物测序得到206bp的碱基序列，检索证实是一种新的变异易位。结论：发现了一种新的S亚型变异易位，证实同一个体可有S和L二种不同亚型并存；提示PML／RARα融合基因的RT－PCR检测中，识别变异易位有重要意义。     

G蛋白偶联受体激酶4基因变异与原发性高血压的相关性

目的探讨G蛋白偶联受体激酶4基因变异与原发性高血压的关联。方法应用等位基因特异性PCR结合实时荧光分析的方法,对中国江苏南通地区102例健康人,93例原发性高血压患者的CRK 4多态位点A 486V进行基因分型,并进行关联分析。结果V等位基因频率原发性高血压组(56.9%)显著高于正常血压对照组(44.1%),差别有统计学意义(P<0.05),高血压组中V/V基因型频率(32.4%)明显高于对照组(18.3%,P<0.05)。结论在中国江苏南通地区汉族人中,GRK 4多态位点A 486V可能与原发性高血压的发病有关,V/V基因型是遗传易患因子。     

乙型肝炎病毒第1 896位点变异与基因分型同肝脏功能的相关性分析

目的分析乙型肝炎病毒前C区第1896位点变异与HBV基因型与肝功能指标之间的关系。方法对50例慢性乙肝患者采用测序和荧光定量PCR等方法检测相关指标。结果第1896位点变异患者的ALT水平与野生型患者有显著性的差异;乙型肝炎病毒前C区第1896位点变异与基因型无关。结论乙型肝炎病毒前C区第1896位点变异可能与病毒持续侵入肝细胞有关。     

针刺时脂肪组织瘦素基因与细胞凋亡的实验研究

目的:探讨针刺单纯性肥胖大鼠时脂肪组织瘦素基因与细胞凋亡的变化。方法:采用RT-PCR技术测定各组大鼠脂肪组织瘦素基因表达水平的变化,运用TUNEL法检测脂肪细胞凋亡的变化,观察二者的相关性。结果:肥胖组脂肪组织中瘦素基因表达水平显著高于正常组(P<0.01),而脂肪细胞凋亡指数明显低于正常组(P<0.01);针刺组脂肪组织中瘦素基因表达水平较肥胖组明显下降(P>0.05),而脂肪细胞凋亡指数较肥胖组却明显升高(P<0.01);且肥胖组脂肪组织瘦素基因表达与其脂肪细胞凋亡指数呈显著负相关(P<0.01)。结论:针刺可使单纯性肥胖大鼠瘦素抵抗作用被破坏和促进脂肪细胞凋亡,可能是针刺减肥的重要机制。     

瘦素及其受体在胃癌中的表达及意义

目的：探讨瘦素（leptin）、瘦素受体（leptin receptor）在胃癌发生发展中的意义及其相互关系.方法：应用免疫组织化学SP法检测19例正常胃黏膜、19例慢性萎缩性胃炎伴肠化、18例不典型增生、15例早期胃癌、45例进展期胃癌组织中leptin、leptin receptor表达情况.结果：1eptin随胃癌的发展阳性率逐渐增高（15.8%,31.6%,44.4%,53.3%,80.0%;P＜0.01）;leptin表达与组织学分级、浆膜浸润、淋巴结转移和TNM分期有关（P＜0.05）.leptin receptor阳性表达率在胃癌发展过程中差异无显著性（P＞0.05）.leptin和leptin receptor在胃癌组织中的表达无相关性（rs=-0.005,P＞0.05）.结论：leptin、leptin receptor共同参与了胃癌的发生与发展.     

健康人、单纯性肥胖和阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者血清瘦素水平研究

目的研究瘦素(leptin)在健康人、单纯性肥胖和阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者血清中平均水平,探讨血清leptin检测在OSAS中的临床意义。方法用ELISA法检测46例OSAS患者4、8例单纯性肥胖患者及77名健康对照者的血清leptin水平,并测定全部受试者身高、体重,计算其体重指数(BMI)。结果正常人群组中不同年龄之间血清leptin水平无显著性差异(P>0.05),正常人群组中leptin平均水平为(6.36±4.01)ng/ml。不同性别血清leptin水平差异有统计学意义:男性为(5.04±3.23)ng/ml,女性为(8.04±4.31)ng/ml(P<0.01)。leptin水平与BMI呈正相关(P<0.01)。正常组与单纯性肥胖组(13.68±8.54)ng/ml、OSAS组(14.46±8.73)ng/ml之间差异均有统计学意义(P<0.01)。单纯性肥胖组与OSAS组间差异无统计学意义(P>0.05)。OSAS组中肥胖(14.73±8.75)ng/ml与正常体重组间(13.20±8.33)ng/ml无显著差异(P>0.05)。结论leptin在健康人与单纯性肥胖和OSAS患者血清中的水平有显著差异,并且正常人群中leptin水平与BMI呈正相关,与性别有关,与年龄无关,而OSAS中leptin水平与体重无明显相关。     

肥胖儿童瘦素受体基因变异对脂质代谢及脂肪分布的影响

目的探讨瘦素受体（leptin receptor,LEPR）基因第20外显子变异对脂质代谢的影响。方法用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析120例单纯型肥胖儿童及120例健康儿童的LEPR基因的第20外显子基因变异频率,并测定血清中甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）,于相同条件下测身高、体重,按公式计算体重指数（BMI）、脂肪百分比（?t）。结果共检出3种第20外显子的基因型,其酶切片段分别为：A/A型：201bp,75bp;A/G型：201bp,173bp,75bp,28bp;G/G型：173bp,75bp,28bp。肥胖儿童较健康儿童LEPR基因第3057位G→A突变频率增高（P〈0.05）。纯合子A/A基因型的肥胖儿童其血清TG浓度、BMI、?t均明显高于纯合子G/G基因型者（P〈0.01）,而血清HDL水平则明显低于后者（P〈0.01）,杂合子A/G型肥胖儿童,除其血清TG浓度高于纯合子G/G基因型者外（P〈0.05）,余各项指标均与另外两种基因型无显著性差异。结论单纯型肥胖儿童瘦素受体基因第20外显子存在基因多态性的变化,且这种变化明显影响肥胖儿童的脂质代谢及体脂分布。纯合子A/A基因型个体应提早注意饮食结构,避免由此而继发的各种疾病。     

Toll样受体3基因缺陷促进四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化损伤

目的:探讨Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)基因缺陷对于四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠模型肝纤维化损伤程度的影响。方法:将20只野生型雄性小鼠和20只TLR3基因缺陷型(TLR3-/-)雄性小鼠分别分为野生型对照组、野生型造模组、TLR3-/-对照组和TLR3-/-造模组,每组各10只。对照组腹腔注射玉米油,造模组腹腔注射四氯化碳。造模8周后采集血液标本,应用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、白蛋白(albumin,ALB)水平;采用马松三色染色法对肝组织胶原沉积程度进行分析;采用α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)免疫组织化学染色法检测肝星状细胞的激活情况;应用试剂盒检测肝组织中的羟脯氨酸含量;采用实时荧光定量PCR法检测肝组织中纤维化标志物Ⅰ型胶原、炎性因子[包括肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)和单核细胞趋化因子1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)]以及促纤维化分子[包括转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP1)和血小板衍生生长因子受体(platelet-derived growth factor receptor,PDGFR)]的表达。结果:TLR3基因缺陷对于四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠血清中的ALT、AST、TBIL、ALB水平变化无影响。TLR3基因缺陷可加重四氯化碳诱导的肝组织胶原沉积和肝星状细胞激活;促进四氯化碳诱导的小鼠肝组织中羟脯氨酸的升高;使四氯化碳诱导的肝纤维化标志物Ⅰ型胶原增多,也使肝组织中炎性因子TNF-α、IL-6和MCP-1以及促纤维化分子TGF-β、TIMP1和PDGFR表达升高。结论:TLR3基因缺陷可促进四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织中的胶原沉积和肝星状细胞激活,促进肝组织炎性因子释放,使肝促纤维化分子上调。以上提示,TLR3是肝纤维化病理过程中的一个保护性基因。     

营养性肥胖大鼠TNF-α、leptin水平和胰岛素敏感指标的研究

目的：探讨饮食诱导肥胖（DIO）大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、瘦素（leptin）和胰岛素敏感指标的变化及意义。方法：采用放免法检测大鼠血清TNF-α和leptin水平。结果：实验3周末，DIO大鼠leptin水平高于对照组（P〈0．05）；实验12周末，DIO大鼠TNF-α和leptin水平均显著高于对照组和DIO—R大鼠（P〈0．01）；DIO大鼠血清TNF-α，leptin水平均和胰岛素敏感指数（ISI）呈负相关（P〈0．05）。结论：TNF-α，leptin可能在肥胖相关的胰岛素抵抗（IR）发生中起协同作用。     

Glucocorticoids Regulate the Expression of the Human Osteoblastic Endothelin A Receptor Gene

The endothelial cell–derived peptide endothelin 1 (ET1) stimulates cell proliferation and differentiated functions of human osteoblastic cells (HOC), and HOC constitutively express the endothelin A receptor (ETR_A). Therefore, ET1 may play an important role in the regulation of bone cell metabolism. As glucocorticoids (GC) exert a profound influence on bone metabolism and increase the effects of ET1 on bone cell metabolism in vitro, the effects of GC on ETR_A expression in HOC were investigated. Dexamethasone (DEX) increased ETR_A mRNA levels in a dose- and time-dependent fashion. The effects of dexamethasone, prednisolone, and deflazacort on the increase of ETR_A mRNA levels correlate positively with their binding affinity to the GC receptor. Scatchard analysis of ET1 binding data to HOC revealed that DEX increased the binding capacity for ET1 from 25,300 to 62,800 binding sites per osteoblastic cell, leading to an enhanced mitogenic effect of ET1 on HOC after preincubation with DEX. Transiently transfected primary HOC with a reporter gene construct, containing the 5′-flanking region of the ETR_A gene fused to luciferase gene, showed a promoter-dependent expression of the reporter gene and the induction of reporter gene expression by DEX treatment. Total RNA extracts of femoral head biopsies with osteonecrotic lesions from GC-treated patients showed threefold higher ETR_A mRNA levels compared with extracts of bone biopsies from patients with traumatically induced osteonecrosis and coxarthrosis. Furthermore, GC treatment increased plasma ET1 levels by 50% compared with pretreatment values. These findings suggest that GC induced upregulation of ETR_A, and ET1 plasma levels enhance ET1''s anabolic action on bone cell metabolism. Increased ET1 concentrations may also impair bone perfusion by vasoconstriction in a metabolically activated skeletal region.     

Leptin expression in Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMCs) is related with blood pressure variability

BACKGROUND: Leptin is an adipokine initially considered as a molecule related exclusively to obesity but advances in research revealed its multiple roles in other physio-pathological mechanisms and particularly in the inflammatory ones. The aim of the present study was to demonstrate the presence of leptin in human Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMCs) and to quantify its mRNA in this type of tissue, closely related to inflammation. METHODS: Leptin mRNA was present in PBMCs of healthy individuals. Its expression was further studied in 83 individuals in relation to constitutional factors, anthropometric variables, blood pressure, lipid profile, glucose and markers of inflammation (C-reactive protein, lymphocyte count). RESULTS: Expression levels were significantly associated with systolic blood pressure (SBP) (p = 0.03) and diastolic blood pressure (DBP) (p = 0.003). Using a multiple regression analysis model, we showed that leptin mRNA levels explained 11% of the variation of SBP (p = 0.007) and of DBP (p = 0.003). These percentages remained at the same magnitude for SBP (9%) and for DBP (10%), after introducing BMI in the model. CONCLUSION: We report here for the first time, leptin expression in human PBMCs of healthy individuals. The associations found with blood pressure suggest a possible role of leptin in blood pressure regulation via PBMCs.     

Leptin及其受体在急性髓系白血病中的研究

Leptin是一种由肥胖基因编码的分泌型蛋白质,与其受体结合后具有广泛的生物学效应。leptin的基本功能是调节能量代谢和摄食,主要由脂肪细胞产生,而脂肪细胞大量存在于骨髓,是造血微环境的基质细胞成分。Leptin及其受体不仅促进正常造血干细胞的增殖和分化,而且能够促进白血病细胞的增殖和活性。Leptin受体(leptin receptor,LEPR,又称OB-R)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)、急性淋巴细胞白血病和慢性髓系白血病的细胞上均有表达。此外,leptin在体内能够通过促进微血管的形成而促进白血病细胞的增殖。所有这些研究发现提示leptin及其受体在白血病的发生发展中起了一定的作用,阻断leptin与leptin受体的作用可能成为某些白血病治疗的靶点。本文就leptin及其受体的生物学特性、leptin及其受体与正常造血、leptin及其受体与AML的研究进展做一综述。