高温对神经细胞凋亡及bcl-2和bax表达的影响

通过神经细胞原代培养并给予高温刺激 ,应用 TUNEL检测、免疫细胞化学和图像分析技术 ,研究了高温对神经细胞凋亡及凋亡相关基因 bcl- 2和 bax表达状况的影响。结果显示 ,TU NEL方法可在原位检测单个凋亡细胞 ,且较敏感 ,高温处理使细胞凋亡数明显增加 ,bcl- 2和 bax出现异常表达。表明高温可诱发原代培养神经细胞凋亡 ,bcl- 2和 bax发挥作用。     

硝普钠对海马神经元cpp32基因表达的影响

为观察NO供体硝普钠对体外培养的海马神经元cpp32基因表达的影响，采用终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的硝普钠处理海马神经元24h，用RT－PCR检测mRNA表达变化，Western blot检测蛋白表达的变化；再用终浓度分别为0、25、50、100、200μmol/L的硝普钠处理海马神经元12h，用CPP32活性检测试剂盒检测CPP32酶活性。结果表明，随着硝普钠剂量的增加，cpp32mRNA表达无改变；但CPP32酶原被裂解活化，从50μmol/L硝普钠起，酶活性显著增加，为对照组的3．02倍，100μmol/L达最大值，为对照组的3．47倍，这说明硝普钠不增加cpp32 mRNA的表达，但可诱导CPP32酶原的裂解，使CPP32活化。     

L-精氨酸对肺缺血/再灌注损伤时bcl-2、bax基因表达的影响

目的： 探讨L-精氨酸对肺缺血-再灌注损伤（PIRI）时bcl-2、bax基因表达的影响。方法： 采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔36只，随机分为假手术对照组（sham，12只）、肺缺血-再灌注组（I/R，12只）和肺缺血-再灌注加L-精氨酸组（L-Arg，12只）。分别于再灌注5 h取左肺组织，观察bcl-2、bax mRNA定位表达、凋亡指数（AI）、肺组织湿干重比（W/D）、肺损伤组织学定量评价指标（IQA）及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果： 在肺小动脉内（外）膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及细支气管上皮，L-Arg组bcl-2 mRNA的表达及bcl-2/bax mRNA的比值显著高于I/R组（均P<0.01），bax mRNA的表达明显低于I/R组（P<0.01）；AI、W/D和IQA值显著低于I/R组（P<0.01和P<0.05）；肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论： L-精氨酸可上调肺组织bcl-2 mRNA的表达、下调肺组织bax mRNA的表达、调控bcl-2/bax mRNA 之间的平衡而减轻细胞凋亡，对PIRI发挥积极的防治作用。     

海藻糖对低温保存胸骨中bcl-2和bax基因表达的影响

背景:研究已经证实海藻糖对低温保存中的胸骨具有保护作用,但作用途径尚不清楚。 目的：观察海藻糖对低温保存胸骨bcl-2和bax基因表达的影响。 方法：新鲜配置4组保存液：低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组、低钾右旋糖酐＋海藻糖组、低钾右旋糖酐＋二甲基亚砜组＋海藻糖组。切取SD大鼠胸骨后立即分别放入含上述4 种溶液的冻存管中低温保存。抽取新鲜大鼠胸骨组织和低温保存120 d的4组标本,采用RT-PCR方法检测不同保存液保存的胸骨及新鲜胸骨bcl-2和bax基因mRNA表达量。 结果与结论：低钾右旋糖酐+海藻糖组bcl-2表达量高于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组(P < 0.01),但bax表达量低于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组(P < 0.01);低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组+海藻糖组bcl-2表达量最高,bax表达量最低,基本接近新鲜骨组织(P > 0.05)。结果提示海藻糖可能通过增强bcl-2基因、抑制bax基因的表达保护低温保存中的胸骨细胞活性,其与二甲基亚砜合用保护作用更好。     

四逆汤对大鼠局灶性脑缺血后bax、bcl-2表达的影响

目的：研究四逆汤对大鼠局部脑缺血后bax、bcl-2表达的影响。 方法： 采用大鼠大脑中动脉局部阻塞（MCAO）模型，观察四逆汤对脑缺血大鼠的神经功能、丙二醛（MDA）和神经酰胺含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及bax、bcl-2表达的影响。 结果： 四逆汤组脑含水量、MDA含量、神经酰胺含量、bax基因在转录和翻译水平的表达明显低于缺血模型组（P<0.05和P<0.01），神经功能评分、SOD活性、Bcl-2蛋白的表达高于缺血模型组（P<0.05和P<0.01）。 结论： 四逆汤对局部脑缺血大鼠具有显著的保护作用，其作用机制可能与四逆汤能对抗脑缺血引起的氧化损伤，减少神经酰胺的生成量，抑制bax mRNA的转录及其蛋白的表达、增加Bcl-2蛋白的表达有关。     

大黄对大鼠脑缺血一再灌注损伤bcl-2、bax表达的影响

目的探讨大黄对大鼠脑缺血-再灌注损伤过程中的抗凋亡作用及机制。方法SD大鼠64只分假手术组、模型组、大黄组和尼莫地平组,每组16只。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,以HE染色和免疫组化的方法观察大黄0.45g/(kg·d)、尼莫地平1mg/(kg·d)对大鼠大脑海马回CA1区细胞形态以及bcl-2、bax蛋白表达的细胞数目。结果大黄组显示海马回细胞病理改变较模型组差异显著,bcl-2表达水平增高(P<0.05),bax表达水平降低(P<0.05),bcl-2/bax的表达比例增加(P<0.05),大黄组和尼莫地平组差异无显著意义(P>0.05)。结论大黄有明显减少脑梗死边缘区域凋亡水平的作用,其机制与bcl-2表达增高,bax表达降低,降低bcl-2/bax值有关。     

烫伤大鼠血淋巴细胞bcl-2、bcl-x和bax的表达及作用

目的 :研究大鼠烫伤后外周血淋巴细胞的凋亡及其bcl 2家族基因的表达 ,以探讨烫伤后bcl 2家族基因的表达对细胞凋亡的调控。方法 :复制 30 %体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型 ;分离外周血淋巴细胞 ,TUNEL荧光标记 ,流式细胞仪分析细胞凋亡 ;提取总RNA ,采用RT PCR分析bcl 2家族调控基因的表达。结果 :外周血淋巴细胞凋亡在健康大鼠比例较低 ( 3.99± 1 .72 % ) ,但伤后各组 ( 3、6、1 2、2 4、4 8h依次分别为 8.5 8± 1 .5 3%、8.38± 1 .81 %、2 0 .77± 3.94 %、2 3.90± 3.92 %和 1 1 .2 1± 1 .35 % )均明显增加 (P <0 .0 1 ) ,以伤后…     

高温对神经细胞凋亡及bcl—2及bax表达的影响

通过神经细胞原代培养并给予高温刺激,应用ＴＵＮＥＬ检测、免疫细胞化学和图像分析技术,研究了高温对神经神经调亡及凋亡相关基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ表达状况的影响。结果方法可在原位检测单个凋亡细胞,且较敏感,高温处使细胞凋亡数明显增加,ｂｃｌ－２、ｂａｘ出现异常表达。表明高温可诱发圾代培养神经细胞凋亡,ｂｃｌ－２、ｂａｘ发挥作用。     

肝胆管癌中bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的研究

目的　探索细胞凋亡及相关基因在体内肝胆管癌发生中所起的作用。　方法　用mRNA原位杂交技术和免疫组织化学方法 ,检测了肝胆管癌中bcl 2和bax基因表达 ;利用TUNEL法检测其细胞凋亡 ;　结果　肿瘤中bcl 2表达增强 ,癌旁组织中bax表达增强 ,癌旁组织中凋亡细胞增加 ;　结论　bcl 2基因激活后 ,抑制bax的作用及基因表达 ,可能使细胞的增殖加快 ,肿瘤发生 ;而bax的表达可能引起癌旁组织的细胞凋亡加剧     

不同胎龄的胎儿和少儿皮肤中bax,bcl-2和p53基因表达的变化

目的：探讨凋亡相关基因bax, bcl-2和p53在不同胎龄的胎儿皮肤和少儿皮肤组织中表达的变化特征及其可能的生物学意义。方法： 运用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺口标记技术(TUNEL)检测18例不同胎龄(13-32周)的胎儿皮肤和6例少儿皮肤组织中细胞凋亡的变化后，提取这些皮肤组织中的总RNA，分离mRNA，用RT-PCR方法检测bax, bcl-2和p53基因在不同组织中的表达变化特征。结果： 随着胎儿的生长发育，皮肤组织中的细胞凋亡率逐渐增加。在早期妊娠胎儿的皮肤中，bcl-2基因表达水平较高，随着胎龄的增加，bcl-2基因的转录本含量逐渐降低，在少儿的皮肤组织中，这种基因的表达量明显低于早期妊娠胎儿皮肤（P<0.01）。与bcl-2基因不同，在早期妊娠胎儿皮肤组织中，p53基因表达水平较低，而在晚期妊娠胎儿和少儿的皮肤内，该基因表达较强，而bax基因在不同发育时期的胎儿和少儿皮肤组织中表达差异不显著（P>0.05）。结论： 晚期妊娠胎儿和少儿皮肤组织中细胞增殖减缓，细胞趋向分化或凋亡的增加可能与p53基因表达增强，bcl-2表达降低相关；而p53表达降低，bcl-2表达升高可能是早期妊娠胎儿皮肤中细胞凋亡较少的机制之一。     

阿魏酸钠对大鼠晶状体上皮细胞凋亡相关基因BCl-2和bax的调控

目的:本研究旨在探讨阿魏酸钠 (SF)对实验性氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞 (LEC)凋亡相关基因BCl-2和bax的调控。方法:将SD大鼠双眼随机分成空白对照组、过氧化氢 (H₂O₂)组、吡诺克辛 (PS)组和SF组。无菌操作摘除眼球并在手术显微镜下分离晶状体,使晶状体孵育在 300μmol·L^-1H₂O₂ 培养液中复制LEC凋亡模型,同时加入终浓度为 5mmol·L^-1的SF,置二氧化碳培养箱共同孵育 2 4h。取晶状体前囊膜采用免疫组化法检测凋亡相关基因BCl-2和bax的蛋白表达并进行比较。结果:(1)正常SD大鼠LEC中BCl-2和Bax均有表达,BCl-2表达较Bax表达强。 (2)H₂O₂ 组BCl-2表达显著下调,Bax表达显著上调 (Ridit检验,P <0.01);BCl-2 /Bax比率下降。(3)与H₂O₂ 组比较,SF可明显上调BCl-2表达,下调Bax表达 (P <0.01),BCl-2 /Bax比率上升。 (4)PS与SF的调节作用相似,但SF的作用强于PS(P <0.05)。结论:本研究结果表明,SF调控凋亡相关基因BCl-2和bax的表达可能是SF抑制LEC凋亡的分子机制.     

Differential expression of bcl-2 and bax genes during the E.coli-induced apoptosis of human U937 cells

Theimportantroleofapoptoticcelldeathindif ferentdiseasesandphysiologicalconditionhas beendemonstratedinmanystudies,andmany factorsinvolvedinthedeathsignalingpathways havebeendefined[1],inwhichbcl2geneand othermembersofthisgenefamilywereprovedto playanimportantroleinembryogenesis,tissue remodelingandimmuneresponsesbytheiractions servingaseitherinhibitorsorpromotersofapopto sis[2].Usually,Bcl2processesanti apoptotic effectandBaxisalsoonememberoftheBcl2family[3].Previousworkshaddocumentedthe piv…     

Abnormal expression of bcl-2 and bax in rat tongue mucosa during the development of squamous cell carcinoma induced by 4-nitroquinoline 1-oxide

4-Nitroquinoline 1-oxide (4NQO)-induced rat tongue carcinogenesis is a useful model for studying oral squamous cell carcinoma. The aim of this study was to investigate the expression of bcl-2 and bax during tongue carcinogenesis induced by 4NQO. Male Wistar rats were distributed into three groups of 10 animals each and treated with 50 ppm 4NQO solution through their drinking water for 4, 12 or 20 weeks. Ten animals were used as negative control. Although no histological changes were induced in the epithelium after 4 weeks of carcinogen exposure, bcl-2 and bax were over-expressed (P < 0.01) in all layers of the 'normal' epithelium. The expression levels were the same in all layers of epithelium for both the antibodies used (bcl-2 or bax). In dysplastic lesions at 12 weeks following carcinogen administration, the levels of bcl-2 and bax expression did not increase when compared to negative control with the immunoreactivity for bcl-2 being restricted to the superficial layer of epithelium. In well-differentiated squamous cell carcinoma induced after 20 weeks of treatment with 4NQO, bcl-2 was expressed in some cells of tumour islands. On the other hand, immunostaining for bax was widely observed at the tumour nests. The labelling index for bcl-2 and bax showed an increase (P < 0.05) after only 4 weeks of 4NQO administration. In conclusion, our results suggest that abnormalities in the apoptosis pathways are associated with the development of persistent clones of mutated-epithelial cells in the oral mucosa. Bcl-2 and bax expression appears to be associated with a risk factor in the progression of oral cancer.     

Bcl-2、Bax在NHE-1抑制导致的大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用

目的:探讨Bcl-2、Bax蛋白表达在Na⁺/H⁺交换器-1(NHE-1)抑制而诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)凋亡中的作用。方法: 荧光指示剂(Fura-2/AM)测定法检测转染NHE-1特异性核酶基因的大鼠PASMC内Ca²⁺(i)变化;RT-PCR方法检测细胞内bcl-2和baxmRNA表达变化, 免疫组化法检测细胞内Bcl-2和Bax蛋白表达变化。 结果:转染NHE-1特异性核酶基因后, 大鼠PASMC内i显著升高, bcl-2mRNA及蛋白表达显著降低, baxmRNA和蛋白表达显著增加。结论: NHE-1抑制诱导的PASMC凋亡与i增加、bcl-2表达降低及bax表达增加有关。     

Bcl-2基因反义核酸增强三氧化二砷对NB4细胞凋亡效应

目的:研究和探索bcl-2基因反义核酸(bcl-2ASODN)是否能提高三氧化二砷(As₂O₃)对NB4白血病细胞的凋亡效应。方法:采用微量细胞培养的方法,观察反义核酸、砷剂单独以及反义核酸、砷剂联合培养NB4细胞的生物效应和凋亡形态变化;用免疫组化的方法,结合流式细胞技术,测定NB4细胞的DNA和Bcl-2蛋白的变化。结果:As₂O₃(0.25μmol/L)+bcl-2ASODN(10.0μmol/L)联合诱导NB4细胞凋亡作用显著强于单用As₂O₃(0.25μmol/L)或bcl-2ASODN(10.0μmol/L)(P＜0.01)。流式细胞仪检测显示,联合用药Bcl-2蛋白表达亦明显少于反义核酸、砷剂单独给药组(P＜0.01)。结论:bcl-2基因反义核酸能明显提高和显著增强As₂O₃对NB4白血病细胞的致凋亡效应。     

焦亚硫酸钠对大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响

目的：探讨SO2 及其体内衍生物（亚硫酸盐和亚硫酸氢盐）对中枢神经元钠通道的影响。 方法: 采用全细胞膜片钳技术研究了焦亚硫酸钠（SMB）对大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)相应的保护作用。 结果： ① 焦亚硫酸钠可剂量依赖性地增大全细胞钠电流，剂量为2 μmol/L和20 μmol/L时，钠电流分别增大（22.36±3.28）% 和（65.05±5.75）%（n=10）。② 10　μmol/L的焦亚硫酸钠不影响钠电流的激活过程，却非常显著地影响其失活过程，使失活曲线显著右移，作用前后的半数失活电压分别为（-82.38±0.54）mV和（-69.39±0.41）mV (n=10, P<0.01), 但失活曲线的斜率因子未见改变。③ SOD(1×106 U/L)、CAT(2×106 U/L) 及GPx (1×104 U/L) 均可使SMB（10 μmol/L）增大的钠电流部分恢复。 结论： SMB增大钠电流并抑制其失活过程，从而影响神经细胞的兴奋性，这一效应可能与硫中心或氧中心自由基的损伤作用有关。