丹参联合放疗抑制小鼠肺癌肿瘤血管生成的实验研究

目的:探讨丹参联合放疗对小鼠Lewis肺癌肿瘤组织微血管密度(MVD)的影响。方法:建立Lewis肺癌荷瘤鼠模型后,随机分为模型组、丹参低剂量组(丹低组)、丹参高剂量组(丹高组)、放疗组、丹参低剂量+放疗组(联合1组)、丹参高剂量+放疗组(联合2组),每组各10只小鼠。各组于接种第2日起每天腹腔注射给药,连续12天,放疗组、联合1组、联合2组于接种第7日起给予钴-60照射肿瘤局部,放疗剂量2 Gy/d,连续5天。末次给药24h后处死动物,剥离肿瘤组织称重,计算抑瘤率;免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度(MVD)。结果:联合1组微血管密度较放疗组和丹低组明显降低(P<0.05)。结论丹参联合放疗对Lewis肺癌小鼠肿瘤血管生成有明显的抑制作用。     

双氢青蒿素对人结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制研究

目的 研究双氢青蒿素( Dihydroartemisinine,DHA)对人结直肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及可能机制.方法将人结直肠癌LoVo细胞接种于Balb/c裸鼠皮下,建立结直肠癌模型.将造模成功裸鼠随机分为5组,即模型对照组,阳性对照组(5-Fu 20 mg/kg),DHA高、中、低剂量组(120,60,30 mg/kg).观察各组动物肿瘤的重量及抑瘤率;采用免疫组化SABC法测定各组裸鼠肿瘤组织B-cell lymphoma-leukemia-2 gene(Bcl-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果5-Fu组及DHA高、中剂量组的抑瘤率显著高于模型组(P＜ 0.01或P＜0.05);5-Fu组和DHA高剂量组Bcl-2的阳性表达率显著低于模型对照组(P＜ 0.01或P＜0.05);5-Fu组VEGF的阳性表达率显著低于模型对照组(P＜0.05).结论双氢青蒿素具有较强的抗结直肠癌活性,其作用机制可能是抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,从而刺激结直肠癌细胞凋亡.     

黄药子醇提物对人胃癌裸鼠移植瘤的生长和血清IL-8及sICAM-1表达的影响

目的:观察黄药子醇提物对人胃癌细胞系裸鼠移植瘤的抑瘤作用及白细胞介素-8(IL-8)和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)表达水平的影响.方法:建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,造模成功后随机分为模型对照组,5-Fu治疗组,黄药子醇提物低、高剂量组,每组10只,分别采用皮下注射生理盐水、腹腔注射5-Fu(30mg/kg)、腹腔注射黄药子醇提物(50mg/kg和100mg/kg)进行治疗.治疗3周后处死动物,眼眶取血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-8和sICAM-1含量;剥取肿瘤,测量计算肿瘤体积并称取体质量,计算抑瘤率.结果:黄药子高剂量组瘤体积和体质量明显小于模型对照组(P＜0.05),黄药子低、高剂量组之间瘤体积和体质量比较差异无统计学意义(P＞0.05),5-Fu组和黄药子低、高剂量组三者对瘤体积的抑制率分别为25.00％、17.86％和39.29％,对瘤体质量的抑制率分别为37.50％、25.00％和43.75％.5-Fu组和黄药子低、高剂量组裸鼠血清IL-8和sICAM-1水平显著低于模型对照组(P＜0.05);黄药子高剂量组血清IL-8和sI-CAM-1水平明显低于低剂量组(P＜0.05);黄药子高剂量组血清sICAM-1水平明显低于5-Fu组(P＜0.05).结论:黄药子醇提物对裸鼠胃癌移植瘤模型有明显的抑瘤作用,其作用机制可能与下调细胞因子IL-8和sICAM-1的表达有关.     

复方桂术胶囊对小鼠Lewis肺癌的抑制及TNF-α和IFN-γ的影响

目的 研究复方桂术胶囊对肺癌荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及细胞因子的影响.方法 以小鼠Lewis肺癌瘤株建立肺癌荷瘤动物模型,按分组给药10 d后解剖瘤体称瘤质量,采用ELISA双抗体夹心法,观察复方桂术胶囊灌胃肺癌荷瘤小鼠后血清中TNF-α及IFN-γ变化.结果 复方桂术胶囊高、中剂量组均有显著的抑瘤作用(P＜0.05),而低剂量组抑瘤作用则不显著(P＞0.05).中药高、中剂量组小鼠血清TNF-α均显著高于荷瘤模型组(P＜0.05),中药低剂量组血清TNF-α升高不显著(P＞0.05).而中药高、中、低剂量组血清INF-γ均显著低于正常动物组(P＜0.05),中药高剂量组小鼠血清IFN-γ极显著高于荷瘤模型组(P＜0.001),中药中剂量和低剂量组升高不显著(P＞0.05).结论 复方桂术胶囊对荷瘤肺癌小鼠具有抑瘤作用,并能提高其血清TNF-α和IFN-γ细胞因子的水平,从而提高荷瘤小鼠的免疫功能.     

白龙灵沙汤对小鼠Lewis肺癌的生长抑制作用研究

目的研究白龙灵沙汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用。方法将40只荷Lewis肺癌C57BL/6雄性小鼠随机分为模型组及白龙灵沙汤高、中、低剂量组,每组10只。取传代好的带瘤小鼠的实体瘤块,研磨后右腋下皮下接种。接种后次日,白龙灵沙汤高、中、低剂量组分别给予33. 33 g/(kg·d)、16. 67 g/(kg·d)、8. 33 g/(kg·d)白龙灵沙汤灌胃,模型组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,连续28 d。期间观察各组小鼠的一般状况,末次给药24 h后取瘤块称质量,计算肿瘤抑制率,采用流式细胞仪检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率,采用免疫组化方法检测肿瘤组织中微血管密度。结果白龙灵沙汤高剂量组小鼠的一般状况明显好于模型组。白龙灵沙汤各剂量组小鼠瘤质量均明显低于模型组(P均0. 05),且白龙灵沙汤高、中剂量组均明显低于白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05);白龙灵沙汤高、中剂量组抑瘤率均明显高于白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05);白龙灵沙汤高、中剂量组G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均明显高于模型组和白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05),S期细胞比例明显低于模型组和白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05);白龙灵沙汤各剂量组小鼠肿瘤组织中微血管密度均明显低于模型组(P均0. 05),且白龙灵沙汤高、中剂量组均明显低于白龙灵沙汤低剂量组(P均0. 05)。结论白龙灵沙汤能通过抑制细胞周期促进细胞凋亡,从而降低小鼠Lewis肺癌组织中微血管密度,具有明显抑瘤作用。     

益气除痰方对小鼠lewis肺癌细胞凋亡的影响

目的 探讨益气除痰方对小鼠Lewis肺癌生长的抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法 复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,将96只接种Lewis肺癌的小鼠随机分为6组:益气除痰方高、低剂量组,顺铂对照组,顺铂联合中药高、低剂量组,模型组,每组16只。给药1周后停药观察1周,其中一半动物处死观察细胞凋亡相关指标,另一半动物用于观察生存期。结果 与模型组比较,益气除痰方高、低剂量组均能明显降低瘤质量指数,差异有统计学意义(P < 0.05,P < 0.01)。益气除痰方低剂量组肺转移抑制率为 28 %、高剂量组为 52 %,顺铂对照组为 50 %,顺铂联合低剂量组为40 %、高剂量组为50 %,与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0.05)。与模型组比较,益气除痰方组高、低剂量组和顺铂对照组、联合用药组均能明显提高肿瘤细胞凋亡率,差异均有统计学意义(P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001)。与模型组比较,益气除痰方低剂量组及顺铂对照组能有效延长模型小鼠的生存期,差异均有统计学意义(P < 0.01)。结论 益气除痰方有抑制肿瘤生长、延长肿瘤动物生存期及促进Lewis肺癌细胞凋亡的作用。     

定量PCR和Western blot结合检测回药爱康方对肺癌细胞EGFR、NF-κB的表达影响

目的:探讨定量PCR和Western blot结合检测对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞表皮生长因子受体(EGFR)、NF-κB表达影响,观察该方对调节癌细胞信号转导作用机制。方法:小鼠自接种瘤株细胞24 h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为:1回药高剂量组(AKH);2荷瘤模型组(对照组);3回药中剂量组(AKM);4单纯化疗药组(CTX组);5回药中剂量组加化疗组(AKM+CTX);6回药低剂量加化疗药组(AKL+CTX);7回药低剂量组(AKL);8回药高剂量加化疗药组(AKH+CTX)。采用RT-PCR和western blot方法检测小鼠组织样本中EGFR、NF-κBm RNA转录水平和蛋白质表达的变化情况。结果:实时荧光定量PCR结果显示:与模型组小鼠比较,给予回药爱康方,高、中、低剂量干预后,小鼠瘤细胞中EGFR m RNA表达水平显著下调(P0.01),而低剂量对NF-κBm RNA的表达水平无统计学差异(P0.05),给予回药爱康方,高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX后,小鼠瘤细胞中EGFR表达水平显著下调(P0.01),小鼠瘤细胞中NF-κBm RNA表达水平显著上调(P0.01);与模型组比较,给予回药爱康方高、中、低剂量干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR、NF-κB蛋白表达水平无统计学差异性(P0.05),给予回药爱康方高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR蛋白表达水平显著下调、NF-κB蛋白表达水平显著上调(P0.01或P0.05)。结论:回药爱康方高、中、低与回药开康方高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX均对EGFRm RNA的表达水平有影响,仅低剂量对NF-κBm RNA的表达水平无影响,同时回药爱康方高、中、低剂量均对EGFR、NF-κB蛋白表达无影响。     

苏木对C57BL/6小鼠Lewis肺癌不同时间生长和转移的影响

目的动态观察苏木对Lewis肺癌生长和转移的影响并研究其部分作用机制。方法建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠肿瘤模型,随机分为模型组,苏木低、高剂量组,化疗组,化疗加苏木低、高剂量组共6组,连续灌胃给药21天。于第7、14、21天分3批处死小鼠,动态观察各组抑瘤率、抑转移率,流式细胞仪检测小鼠移植瘤细胞CD44的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清P-选择素浓度。结果除苏木低剂量组外,其余各给药组在3个时间点瘤重均低于模型组(P0.05,P0.01);且化疗加苏木高剂量组低于同期化疗组(P0.05,P0.01)。瘤细胞CD44~+表达:第7天,苏木高剂量组、化疗组均显著低于模型组(P0.01);第14天,化疗加苏木低、高剂量组低于模型组(P0.01,P0.05);第21天,化疗加苏木低、高剂量组显著低于模型组(P0.01)。P-选择素浓度:第7天,各给药组低于模型组(P0.05,P0.01);第14天,用药各组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);第21天,化疗加苏木高剂量组低于模型组(P0.05)。结论苏木及苏木联合化疗可以抑制Lewis肺癌的生长,并可以抑制小鼠瘤细胞CD44、血清P-选择素等黏附因子的表达。其抑制转移的机制可能与降低CD44、P-选择素的表达有关。     

金福安汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用及其分子机制的研究

目的 观察金福安汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用及其相关的分子机制。方法 将50只Lewis肺癌荷瘤小鼠分为金福安汤高、中、低剂量组,环磷酰胺(CTX)组,模型组;给药结束后计算各组小鼠平均瘤体质量、抑瘤率、肺表面转移灶及抗转移率;采用免疫组化法检测各组Lewis肺癌小鼠的p120ctn表达以及RhoA、Cdc42表达。结果 与模型组比较,金福安汤中剂量组及CTX组的瘤体质量明显减轻(P ＜ 0.05);金福安汤中、高剂量组及CTX组小鼠的肺转移灶数明显减少(P ＜ 0.01,P ＜ 0.05);金福安汤中剂量组及CTX组的p120ctn异常表达细胞数明显减少(P ＜ 0.01,P ＜ 0.05);金福安汤中剂量组和CTX组的RhoA、Cdc42的异常表达细胞数均明显减少(P ＜ 0.01)。结论 金福安汤具有抑制小鼠Lewis肺癌生长及转移的作用,其机理可能与抑制p120ctn的异常表达,进而抑制RhoA和Cdc42的异常表达相关。     

培元固本方抑制肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长并延长生存期的实验研究

目的:观察培元固本方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及H1299肺癌小鼠生存期的影响。方法:将100只C57BL/6纯系小鼠随机分10组,每组10只。分别是正常组、Lewis肺癌对照组、Lewis肺癌+顺铂组、Lewis肺癌+高剂量组、Lewis肺癌+中剂量组、Lewis肺癌+低剂量组、H1299肺癌对照组、H1299肺癌+高剂量组、H1299肺癌+中剂量组和H1299肺癌+低剂量组。正常组、对照组和顺铂组给予0. 2 m L/(只·d)生理盐水,观察组分别给予0. 2 m L/(只·d)高、中、低剂量(4. 496 g/m L、2. 248 g/m L和1. 124 g/m L)的培元固本方,连续灌胃15 d。实验结束后,测量Lewis肺癌皮下移植瘤模型小鼠的免疫器官重量、肝肾功能、瘤重和皮下瘤体积并计算抑瘤率,计算H1299肺癌腹水种植瘤模型小鼠生存率,绘制生存曲线图。结果:高、中剂量组的胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组比较变化不明显(P 0. 05),且低剂量组的胸腺指数明显升高(P 0. 05),顺铂组的胸腺指数(P 0. 01)和脾脏指数(P 0. 05)均明显下降;培元固本方组的肝肾功能均正常,顺铂组肝肾功能均不正常,2组患者比较,差异有统计学意义(P 0. 01);高、中剂量组的抑瘤率分别为50%和42%,与荷瘤对照组比较瘤重减轻(P 0. 05),皮下瘤体积缩小(P 0. 05),顺铂组的抑瘤率为73%,与荷瘤对照组和培元固本方组比较,差异有统计学意义(P 0. 05);高、中、低剂量组的生命延长率分别为:47%、55. 3%和45%,生存期与荷瘤对照组比较明显延长。结论:培元固本方安全无肝肾毒性,且高、中剂量的培元固本方还具有抑制肿瘤生长、提高免疫能力和延长生存期的作用。     

HE法观察回药爱康方对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的:观察回药爱康方对小鼠Lewis肺癌的抑制作用。方法:将55只C57荷瘤小鼠随机分为荷瘤模型组为对照组,环磷酰胺(CTX)单纯化疗组,回药爱康方低剂量组、回药爱康方低剂量加化疗组、回药爱康方高剂量加化疗组均为实验组。治疗后观察各组小鼠生活状态,抑瘤率、免疫器官指数、HE染色法观察各组小鼠瘤细胞的病理学改变。结果:①与对照组比较,除CTX组外,其余各实验组小鼠体重差异均有统计学意义(P<0.05);各实验组小鼠瘤重与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);②病理切片观察:实验组均有细胞形态改变,以回药爱康方高剂量加CTX最明显,有大片肿瘤细胞坏死和凋亡。结论:回药爱康方对小鼠Lewis肺癌细胞生长有抑制作用,并呈现量效关系。     

蝎毒提取物抑制Lewis肺癌化疗期间再增殖实验研究

目的观察转移性Lewis肺癌在5-Fu化疗期间再增殖加速现象及蝎毒提取物(PESV)对再增殖的抑制作用。方法 C57BL/6小鼠尾iv Lewis肺癌细胞,从第7天开始,每隔7天ip 5-Fu 1次,建立Lewis肺癌化疗期间再增殖模型,以PESV干预,每隔7天处死6只动物,统计肺转移灶数目和肺质量,并以免疫组织化学方法检测Lewis肺癌增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平和微血管密度(microvessel dentity,MVD)。结果模型组从第21天到第28天,大肿瘤转移灶数目平均增加2.5个,而从第14～21天仅平均增加0.8个;模型组肺质量增加在第21～28天显著大于第14～21天;模型组PCNA表达在第21天表达最低,在第28天最高,但第28天与第14天差异无显著性,PESV高、低剂量组在第28天表达水平皆低于模型组,以PESV高剂量组作用显著。模型组VEGF表达在第28天显著上调(与模型组第21天相比,P<0.01)。与模型组相比,PESV高剂量组在第21、28天肿瘤组织VEGF表达下调,尤其是在第28天表达显著下调(P<0.01),而PESV低剂量组仅在第28天与模型组差异存在显著性(P<0.05)。MVD计数显示,模型组在第21天最低,在第28天最高,但在第28天和第14天差异无显著性。而在PESV高剂量组,第14天高于第21天,第21天高于第28天,差异均有显著性。在PESV低剂量组,第14天高于第21天,但第21天与第28天差异无显著性。结论在5-Fu对Lewis肺癌化疗期间存在再增殖加速现象,PESV可有效抑制此Lewis肺癌再增殖,作用机制之一是通过抑制肿瘤新生血管生成来抑制肿瘤细胞再增殖。     

四逆汤联合环磷酰胺对C57BL/6小鼠Lewis肺癌Caspase-3表达的影响

目的:探讨不同剂量四逆汤联合环磷酰胺(CTX)对C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制作用机制。方法:通过建立C57BL/6小鼠肺癌模型,随机分为6组:空白对照组,CTX组,四逆汤组,CTX+四逆汤低、中、高剂量组,每组16只,连续灌胃给药21d,随机抽取各组10只于第21天处死小鼠。采用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹技术检测小鼠肿瘤组织中Caspase-3的表达。结果:CTX组、CTX+四逆汤中剂量组小鼠21d时肿瘤组织Caspase-3mRNA和蛋白表达均较空白组显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论:中剂量四逆汤联合CTX可上调C57BL/6小鼠Lewis肺癌Caspase-3表达促进肿瘤细胞凋亡。应用中剂量四逆汤联合CTX对治疗Lewis肺癌可能有较好的辅助作用。     

新加良附方联合5-Fu对荷人胃癌裸鼠血清VEGF、bFGF水平的影响

目的:观察新加良附方联合5-Fu对荷人胃癌移植瘤裸鼠血清血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、碱性成纤维生长因子(Basic Fibroblast Growth Factor,b FGF)水平的影响。方法:建立移植性人胃癌细胞(SGC-7901)裸鼠移植瘤模型,并将模型动物随机分为空白组、5-Fu组及新加良附方高、中、低剂量组、联合给药组(新加良附中剂量+5-Fu组)6组。新加良附方高、中、低剂量组给药剂量分别为10 g·d-1·kg-1、5 g·d-1·kg-1、2.5 g·d-1·kg-1;5-Fu组给药剂量为17mg·d-1·kg-1;空白组给予等量无菌生理盐水,新加良附方联合5-Fu组剂量为新加良附方中剂量(5 g·d-1·kg-1)联合应用5-Fu(17 mg·d-1·kg-1)。给药结束后,采用免疫学方法(ELISA)检测裸鼠血清中VEGF、b FGF的含量。结果:VEGF含量显示:联合给药组,5-Fu组,新加良附大、中、小剂量组裸鼠血清中含量较空白对照组均明显降低(P0.01),新加良附各剂量组对VEGF含量减低作用具有一定的剂量依赖性,联合用药组VEGF含量低于5-Fu组、新加良附中剂量组,但无统计学意义(P0.05)。b FGF含量显示:联合给药组,5-Fu组,新加良附大、中、小剂量组裸鼠血清中含量较空白对照组均明显降低(P0.01)。结论:新加良附方可以下调人胃癌裸鼠的血清中VEGF、b FGF表达水平,提示新加良附方具有一定抗胃癌新生血管生成作用。     

茯苓多糖对B16黑色素瘤人工肺转移模型的影响

[目的]探讨茯苓多糖对B16黑色素瘤小鼠人工肺转移的影响,并对其作用机制进行初步研究。[方法]C57BL/6小鼠接种B16黑色素瘤,分为茯苓多糖高、低剂量组、顺铂组、模型组,茯苓多糖高、低剂量组分别给予每只小鼠茯苓多糖0.5 mg、0.33 mg,顺铂组给予顺铂0.04 mg,模型组给予生理盐水,接种瘤细胞后第2天开始尾静脉注射给药,隔天给药1次。观察小鼠一般状态,造模后21 d取肺,计数肺表面转移灶个数、HE染色检测肺微小转移灶个数,并检测外周血白细胞数量及脾质量、脾指数。[结果]顺铂能够抑制肺转移,同时降低小鼠体质量、外周血白细胞数量、脾质量和脾指数。而茯苓多糖高、低剂量组对B16荷瘤鼠的体质量无明显影响,茯苓多糖高剂量可明显降低肺表面转移灶个数,茯苓多糖高、低剂量可减少肺微小转移灶个数,高剂量组外周血白细胞数量明显降低,低剂量组与模型组无统计学差异,低剂量可增加B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数,高剂量对B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数无明显影响。茯苓多糖高、低剂量组脾质量和脾指数均高于顺铂组。[结论]茯苓多糖能够抑制尾静脉注射B16荷瘤小鼠肺转移,增加其脾质量和脾指数,无明显增加其外周血白细胞数量的作用,推测活化外周血白细胞,增强免疫功能可能参与茯苓多糖抑制肿瘤转移的机制。     

加味二陈汤诱导肺癌A549移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究加味二陈汤对肺腺癌A549移植瘤生长抑制作用并初步探讨其对内质网应激反应的作用机制。方法：18只BALB/C裸鼠接种A549肺癌细胞后，随机分为对照组、加味二陈汤高剂量组（简称中药高剂量组）、加味二陈汤低剂量组（简称中药低剂量组），每组6只，分别灌胃给予生理盐水，26、13g/（kg·d）加味二陈汤水煎液，连续给药21 d。观测并分析各组肿瘤体积、瘤体生长曲线、瘤重、抑瘤率、凋亡率，并分析ATF4、CHOP蛋白表达水平。结果：与对照组比较，中药低剂量组和高剂量组裸鼠在肿瘤生长减慢、肿瘤体积缩小、瘤重降低，差异有统计学意义（P <0.05）；中药低剂量组和高剂量组抑瘤率分别为21.4%、37%，与对照组比较均有统计学意义（P <0.05）；对照组、中药低剂量组、中药高剂量组瘤体凋亡率分别为0.23%、0.29%、0.35%，中药高剂量组与对照组差异具有统计学意义（P <0.05）；中药高剂量组和低剂量组ATF4、CHOP蛋白表达水平均较对照组上调，差异均具有统计学意义（P <0.05）。结论：加味二陈汤能诱导肺腺癌A549细胞凋亡，其机制与调控内质网蛋白ATF4、CHOP的表达水平有关。     

调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织与肺组织Foxp3、IL-10、TGF-β表达的影响

目的研究调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠血清白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)水平及瘤组织、肺脏组织中Foxp3、IL-10、TGF-β表达的影响,探讨调衡方对荷瘤体免疫抑制细胞的调节机制。方法将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、荷瘤组、贞芪组及调衡方高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余组均将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于小鼠右腋皮下建立肺癌模型。接种24 h后,贞芪组给予贞芪扶正胶囊41.5 g/kg灌胃,调衡方低、中、高剂量组分别给予调衡方流浸膏12.5 g/kg、25 g/kg、50 g/kg灌胃,荷瘤组给予等容量生理盐水灌胃,均1次/d,连续8 d。灌胃结束后,HE染色观察瘤组织及肺组织细胞形态,ELISA法检测血清IL-10、TGF-β水平,免疫组化法检测瘤组织及肺组织中Foxp3、IL-10、TGF-β表达情况。结果HE染色显示:荷瘤组小鼠瘤组织中瘤细胞坏死面积很小,有少量的凋亡瘤细胞;肺组织可见细胞排列混乱的肿瘤转移灶,病理性的核分裂较多,肿瘤实、间质间边缘不清。调衡方各组瘤组织中多处瘤细胞核固缩,瘤细胞胞膜皱缩不完整,瘤细胞残留坏死物随处可见,尤其是调衡方高、中剂量组明显;调衡方低剂量组肺组织可见肿瘤细胞,调衡方中、高剂量组未见明显的肿瘤细胞聚集,且调衡方高剂量组细胞排列与正常肺组织形态接近。荷瘤组血清IL-10、TGF-β水平均明显高于正常组(P均<0.05);贞芪组和调衡方各组血清IL-10、TGF-β水平均明显低于荷瘤组(P均<0.05),调衡方高剂量组均明显低于调衡方低、中剂量组(P均<0.05);调衡方各组血清IL-10水平与贞芪组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),调衡方高剂量组血清TGF-β水平明显低于贞芪组(P<0.05)。贞芪组和调衡方各组瘤组织及肺组织中Foxp3、IL-10、TGF-β蛋白表达阳性率均明显低于荷瘤组(P均<0.05),调衡方高剂量组均明显低于调衡方低剂量组(P均<0.05)。结论调衡方可能通过下调Lewis肺癌荷瘤小鼠Foxp3、IL-10、TGF-β表达,改善肿瘤微环境中免疫抑制状况而发挥抑瘤作用。     

Inhibitory effect of Sumu(Lignum Sappan) plus Fuzi(Radix Aconiti Lateralis Praeparata) on a lung carcinoma model

OBJECTIVE: To investigate the inhibitory effect of Sumu(Lignum Sappan) plus Fuzi(Radix Aconiti Lateralis Praeparata)(SF) on the growth and metastasis of Lewis lung carcinoma.METHODS: A lung carcinoma model was established by subcutaneously inoculating Lewis lung carcinoma cells into C57 BL/6 mice. The mice were randomly divided into four groups of 13 mice(control, low-dose, moderate-dose, and high-dose), and gavaged once-daily for 21 consecutive days. The rates of tumor inhibition, metastasis, and metastasis inhibition were observed. The differential expressions of s P-selectin and vascular endothelial growth factor C(VEGFC) were compared between the treatment groups and the control group.RESULTS: The tumor weights differed significantly between the treatment groups and the control group(P 0.05). Administration of SF in the moderate-dosage and low-dose groups significantly inhibited the expression of s P-selectin and VEGFC(both P 0.05), suggesting anti-tumor activity.CONCLUSION: SF can inhibit the growth and metastasis of Lewis lung carcinoma.     

中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织血管生成的影响

目的：观察中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织血管生成的影响。方法：取C57BL/6小鼠50只,接种Lewis肺癌瘤株后,随机分阴性对照组（0.9%生理盐水）,中肺合剂低、中、高剂量组（12.7、25.4、50.8g.kg-1）,阳性对照组（CTX组,30mg.kg-1）,每组10只。观察12天停药。无菌条件下取肿瘤组织,采用EnVision法检测肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）和CD34蛋白的表达情况,并计数微血管密度（MVD）。结果：中肺合剂能降低肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）,VEGF表达和MVD之间呈正相关（P〈0.01）。其中以中、高给药剂量组抑制作用显著,与生理盐水组相比有显著差异（P〈0.01）。低剂量组与生理盐水组相比无显著差异（P〉0.05）。结论：中肺合剂能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤组织新生血管的形成,降低Lewis肺癌小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）,以中、高剂量组最明显。