虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨虎眼万年青总皂苷(Ornithogalum caudatum AIT saponins)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡的机制,为开发应用于治疗乳腺癌的药物提供实验依据。方法用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡;Western Blotting法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与Bad表达的变化。结果虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;能诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞发生凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性;能下调Bcl-2蛋白的表达,升高Bax/Bcl-2的比值,其高剂量组具有显著统计学差异(P<0.01),能上调Bad蛋白的表达,其低、中、高剂量组具有显著统计学差异(P<0.01)。结论虎眼万年青总皂苷可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与升高Bax/Bcl-2的比值,上调Bad蛋白的表达相关。     

七叶皂苷对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用

目的 研究七叶皂苷(aescine)对肺腺癌细胞A549的增殖抑制作用,及对细胞周期分布和细胞凋亡的影响.方法 采用MTT方法观察药物对A549的增殖抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期的变化;Annexin-FITC/PI双标记检测细胞凋亡.结果 七叶皂苷能明显抑制A549的生长,且呈时间剂量依赖性;流式细胞仪结果表明,七叶皂苷能明显的将细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡.结论 七叶皂苷对A549细胞增殖有明显的抑制作用,并可诱导A549细胞凋亡.     

虎眼万年青总皂苷诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制研究

目的:探讨虎眼万年青总皂苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:MTT法检测虎眼万年青总皂苷对HepG-2细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪测定细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位和Cyt-C蛋白表达水平;透射电镜观察细胞超微结构的改变;酶标仪检测细胞内Caspase-3活性。结果:虎眼万年青总皂苷对HepG-2细胞增殖有抑制作用,IC_(50)为(79.80±0.18)μg/m L;虎眼万年青总皂苷作用细胞后,倒置显微镜下可见细胞变圆,折光性减弱,悬浮细胞增多;透射电镜下可见细胞出现典型的凋亡特征;随着虎眼万年青总皂苷浓度的增加,细胞凋亡率、细胞内Cyt-C表达水平及Caspase-3的活性均显著升高,细胞线粒体膜电位显著降低(P0.05或P0.01)。结论:虎眼万年青总皂苷可显著抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,并可通过启动线粒体途径诱导HepG-2细胞发生凋亡。     

冬凌草甲素通过激活caspase途径诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡

目的 研究冬凌草甲素诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的作用原理及caspase途径在凋亡过程中的作用.方法 噻唑蓝(MTT)法,形态学观察,RT-PCR及流式细胞法.结果 冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞生长抑制作用呈时间剂量依赖性.形态学观察可见MDA-MB-231的增殖受明显抑制.冬凌草甲素可诱导细胞内抑制凋亡基因Bc1-xl表达量时间依赖性减少,促凋亡基因Bid表达量增加,caspase-3 的表达增加.40 μmol/L药物处理48 h后,流式法检测细胞凋亡率为75%.结论 冬凌草甲素诱导MDA-MB-231细胞凋亡,这种作用可能是通过改变Bc1-xl/Bid的表达比率、激活caspase-3 而实现的.     

薯蓣皂苷对乳腺癌细胞周期影响研究

目的:观察薯蓣皂苷对乳腺癌细胞周期影响,以初步探讨该药作用机制.方法:采用细胞体外培养技术,以流式细胞仪观察细胞周期与凋亡细胞变化.结果:薯蓣皂苷能下调G0/G1期与S期细胞数值,上调G2/M期细胞与凋亡细胞数值.结论:薯蓣皂苷抑制乳腺癌细胞增殖与其影响细胞周期及诱导细胞凋亡有关.     

阳和汤对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡Egr1/p21信号通路的影响

目的:以早期生长反应基因1(Egr1)/细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)信号通路为基础,探讨古方阳和汤含药血清对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响。方法:制备阳和汤大鼠含药血清,体外培养三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23. 4,11. 7,5. 85 g·kg~(-1)),分别干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,细胞增殖检测(CCK-8)法检测各组细胞增殖情况。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23. 4,11. 7,5. 85 g·kg~(-1)),干预MDA-MB-231细胞48 h,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况以及细胞周期分布情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组细胞Egr1,p21 mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Egr1,p21蛋白的表达情况。结果:阳和汤干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组能显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P 0. 01)。阳和汤干预MDA-MB-231细胞48 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组细胞的凋亡率明显增加(P 0. 05,P 0. 01);阳和汤高、中剂量组细胞周期G_0/G_1期所占比例降低,G_2/M期所占比例升高(P 0. 05,P 0. 01);阳和汤高、中剂量组细胞Egr1,p21mRNA和蛋白表达均增加(P 0. 05,P 0. 01)。结论:阳和汤可激活MDA-MB-231细胞中Egr1/p21信号通路,增加Egr1,p21的表达,引起G_2/M细胞周期阻滞,从而诱导MDA-MB-231细胞凋亡。     

山慈菇水煎剂对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响

目的探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、细胞周期、凋亡和迁移的影响。方法运用MTT法观察药物处理对MDA-MB-231细胞生长增殖情况的影响;应用流式细胞术检测山慈菇水煎剂对MDA-MB-231细胞增殖周期的影响;应用荧光显微镜观察山慈菇水煎剂作用前后对MDA-MB-231凋亡情况的影响;划痕实验检测不同质量浓度的山慈菇水煎剂对MDA-MB-231细胞迁移的影响。结果不同质量浓度(100、200、400、800 mg/m L)的山慈菇水煎剂作用MDA-MB-231细胞48 h后,对细胞增殖的抑制率分别为13.34%、22.19%、37.14%、79.76%;流式细胞术结果显示,山慈菇水煎可以使MDA-MB-231细胞的细胞周期各个时相发生改变,G1期细胞百分数下降,G2期细胞百分数明显增加;300 mg/m L和550 mg/m L的山慈菇水煎剂作用48 h后,荧光显微镜下可见MDA-MB-231细胞核染色质凝集,分布在细胞核的外周,为早期细胞凋亡的改变;划痕实验结果显示,300 mg/m L和550 mg/m L山慈菇水煎剂作用24 h和48 h,乳腺癌MDA-MB-231细胞的划痕距离未见明显愈合。结论山慈菇水煎剂可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,并可将细胞周期阻滞在G2期,同时可以促进细胞凋亡,并有效抑制其迁移。     

芦荟大黄素联用顺铂对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素(AE)单用或联用顺铂(CP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。方法:以MDA-MB-231细胞为研究对象,用5,10,20,30,40,50μmol·L-1AE,2,4,8,12,24,36μmol·L-1CP,或不同浓度AE联用CP处理乳腺癌MDA-MB-231细胞48 h,另设空白组,MTT法检测细胞增殖;Annexin V FITC/PI双染和流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期;Western blot分析Bcl-2相关X蛋白(Bax),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-x L蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,AE单用显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,半数抑制浓度(IC50)为22.21μmol·L-1,与CP联用时IC50为9.51μmol·L-1。联用指数CI501,表明两药物有协同作用;AE单用使细胞周期阻滞在G1期,并诱导细胞凋亡,联用CP则增强阻滞,凋亡率明显增加;两药联用显著抑制Bcl-2和Bcl-x L的表达,并上调Bax的表达,与空白组比较均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:芦荟大黄素抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并通过上调促凋亡蛋白和下调抗凋亡蛋白,诱导凋亡。与顺铂联用能增强其促凋亡作用,两药存在协同作用。     

告达庭衍生物抑制人乳腺癌细胞增殖及其作用机制研究

目的:研究告达庭-3-O-β-D-加拿大麻糖苷(Ca-G)对人乳腺癌细胞的作用及其作用机制。方法:采用MTT法研究Ca-G对人乳腺癌细胞株细胞增殖的影响;通过流式细胞术研究Ca-G对人乳腺癌细胞株细胞周期和细胞凋亡的作用;采用western blotting研究Ca-G对细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果:Ca-G能够明显抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的增殖,并阻滞细胞周期G1期,其机制可能是通过调控G1期关键蛋白cyclin D1发挥作用; Ca-G能通过caspase3/7途径诱导乳腺癌细胞株产生细胞凋亡。结论:Ca-G可有效抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的增殖。这为告达庭及其衍生物抗肿瘤作用的进一步研究提供了一定的实验基础,也为综合开发C21甾体苷类化合物的临床应用提供一种思路。     

小檗碱对人乳腺癌MDA-MB-231生长抑制作用不经PPARγ介导(英文)

目的:探讨小檗碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生长的影响及其与PPAR-y受体的关系.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测小檗碱对MDA-MB-231细胞的生长抑制效应;TUNEL法检测细胞凋亡;联合PPAR-γ拮抗剂GW9662,分析小檗碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响与PPARγ受体的关系.结果:小檗碱呈量-效和时-效关系抑制MDA-MB-231细胞生长,24 h的半数抑制浓度(IC50)为0.21μmol/L;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡作用随药物浓度的增加而增强;PPARγ受体拮抗剂不能逆转小檗碱对细胞增殖的抑制作用.结论:小檗碱可明显抑制MDA-MB-231细胞生长并诱导其凋亡,但其作用不通过PPAR受体介导.     

虎眼万年青多糖含量的研究

目的：研究虎眼万年青多糖含量测定方法。方法：采用比色法,用紫外分光光度计测定虎眼万年青多糖的含量。结果：虎眼万年青多糖的线性范围是0．4083～0．8166mg,重复性含量为8．5％,RSD=0．7％（n=6）;平均回收率为97．4％,RSD=1．1％（n=6）;精密度RSD=0．1％（n=6）;45min内样品吸光度较稳定,在24h样品稳定。结论：通过对虎眼万年青多糖含量的研究,确定了虎眼万年青多糖含量的测定方法。     

小檗碱抑制人乳腺癌MDA-MB-23细胞增殖及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ的关系

目的 探讨小檗碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生长的影响及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)的关系,以评价其在乳腺癌治疗中的应用潜力.方法 采用MTT法检测小檗碱对MDA-MB-231细胞的生长抑制效应;TUNEL法检测细胞凋亡;联合PPARγ拮抗剂GW9662,分析小檗碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响与PPARγ受体的关系;实验同时采用罗格列酮作为阳性药进行平行比较分析.结果 小檗碱呈量-效和时-效关系抑制MDA-MB-231细胞生长,24 h的半数抑制浓度(IC_(50))为0.21μmol/L;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡作用随药物浓度的增加而增强;PPARγ受体拮抗剂不能逆转小檗碱对细胞增殖的抑制作用.结论 小檗碱可明显抑制MDA-MP-231细胞生长,但与罗格列酮不同,其作用不通过PPARγ受体介导;小檗碱诱导MDA-MB-231细胞凋亡的效应较罗格列酮更为显著;小檗碱可望成为治疗乳腺癌的有效药物.     

苦参碱对人结肠癌HT29细胞生长抑制作用的实验研究

目的研究苦参碱（matrine,MA）对人结肠癌HT29细胞系抑制和诱导凋亡的作用。方法分别采用MTT法检测细胞的生长抑制率,流式细胞仪、透射电镜观察MA处理HT29细胞后细胞周期阻滞和细胞凋亡的发生。结果2～32mg／mLMA均能抑制HT29细胞增殖（P〈0．05）,其抑制率与作用时间及浓度相关。4、8、16mg／mLMA处理HT29细胞后,G。／G,细胞明显高于阴性对照组（P〈0．05）,提示细胞周期停滞于G0／G1期。透射电镜可见,HT29细胞出现凋亡形态学改变。结论MA对HT29细胞有抑制作用,机制可能与阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡有关。     

草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞体外增殖与凋亡的影响

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响.方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Annexin V与碘化丙啶(PI)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察药物作用后细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率的变化.结果:①MTT实验表明草苁蓉乙醇提取物能抑制HSC-伪细胞增殖,并显出量效和时效关系.0.75 g·L-1草苁蓉刺激12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的抑制率分别为(44.58 ±1.42)％,(51.56±1.34)％,(63.83±0.99)％,(74.77±3.40)％(P＜0.05).②荧光显微镜及透射电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC -T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等.③草苁蓉处理后HSC-T6被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,且表现出明显量效关系.0.75 g·L-1草苁蓉乙醇提取物改变HSC-T6周期分布,使G0/G1期细胞由(50.33±0.80)％增至(61.46±1.07)％,表现出G0/G1期阻滞;同时诱导HSC-T6凋亡,凋亡率由(1.44±0.43)％增至(14.20±0.98)％(P＜0.05).结论:草苁蓉乙醇提取物可明显抑制HSC-T6细胞增殖,其作用可能与诱导细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

佛手挥发油对MDA-MB-435人乳腺癌细胞体外增殖的影响

 目的 探讨佛手挥发油对MDA-MB-435人乳腺癌细胞增殖的影响。方法 采用MTT法测定细胞活力;倒置显微镜、荧光显微镜和扫描电镜观察细胞的凋亡与坏死的形态学变化;彗星电泳检测细胞DNA的损伤程度;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果 佛手挥发油对MDA-MB-435癌细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。不同浓度的佛手挥发油处理MDA-MB-435细胞6 h后,低、中浓度实验组(31.25,62.5和125 μg·mL-1)细胞体积缩小、核固缩,染色质凝集或片段化,呈现典型的凋亡特征;而高浓度实验组(250 μg·mL-1)细胞膜裂解,但核形态完整, 呈明显的坏死特征。此外,彗星电泳结果显示,低、中浓度实验组彗星头小而彗尾窄长,表明细胞发生了凋亡;高浓度实验组彗星头大而彗尾长且宽,表明细胞已坏死。进一步的流式细胞结果显示,佛手挥发油能将MDA-MB-435癌细胞周期阻滞在S期和G2/M期。结论 佛手挥发油具有抑制MDA-MB-435癌细胞增殖的作用,低、中浓度的佛手挥发油诱导细胞凋亡且将细胞周期阻滞在S期和G2/M期,而高浓度的佛手挥发油引起细胞坏死。     

芦荟大黄素对人膀胱癌细胞T24增殖及凋亡的影响

目的：探讨芦荟大黄素（AE）对人膀胱癌细胞株T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法测定AE对体外培养的T24细胞的抑制率,并用作图法计算半数有效抑制浓度（IC5）0;光学显微镜下观察AE作用前后细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测mRNA表达。结果：MTT法测定显示,在5～160μg/mL浓度范围内,AE对膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并呈量-效关系,IC50为31.55μg/mL;光学显微镜下药物IC50剂量（32μg/mL）作用T24细胞后呈现明显的死亡形态变化;流式细胞仪检测显示AE可阻滞T24细胞进入G2/M期;Annexin V-FITC/PI双染法显示早期凋亡细胞数明显增加;R T-PCR法显示myc基因表达下降。结论：AE能抑制人膀胱癌T24细胞生长,并阻断细胞周期和诱导细胞凋亡。其机制可能与myc基因表达下调有关。     

鸦胆子苦醇对三阴性乳腺癌细胞凋亡的影响

目的: 研究鸦胆子苦醇(BRU)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡影响。方法:用BRU 处理 MDA-MB-231 细胞。采用 CCK-8 法检测MDA-MB-231细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和周期。结果:BRU对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞生长抑制率测定结果显示,不同浓度的BRU对MDA-MB-231细胞生长抑制率与对照组相比存在明显差异,均具有统计学意义(均P<0.05),且呈时间与浓度依赖性,凋亡结果显示,经5、10、20、40 μmol/L BRU作用细胞48 h后,随着浓度增高细胞的凋亡率也相应提高,与空白对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。周期结果提示经5、10、20、40 μmol/L BRU作用细胞48 h后,随药物浓度增加,处于G₀/G₁期的细胞比例逐渐增加,S/G₂/M期的细胞比例下降,与空白对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:中药鸦胆子苦醇在体外能抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长,并能诱导该细胞凋亡。     

参芪扶正注射液对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究参芪扶正注射液对基底细胞样(basal-like型)乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞增殖和凋亡的影响,探讨参芪扶正注射液对三阴性乳腺癌的治疗作用机制。方法:体外培养人乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞,将其分为参芪扶正注射液组和空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法分别于24,48,72 h检测参芪扶正注射液对人乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞增殖的影响。采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期分布和凋亡情况。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫印迹(Western blot)检测参芪扶正注射液对MDA-MB~(-2)31细胞p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)表达的影响。结果:参芪扶正注射液可抑制MDA-MB~(-2)31细胞增殖,高浓度者抑制作用强,即呈现浓度依赖性,体外培养48 h时抑制作用最显著。参芪扶正注射液将MDA-MB~(-2)31细胞阻滞于细胞周期的S期,进而诱导MDA-MB~(-2)31细胞凋亡。Real-time PCR和Western blot发现参芪扶正注射液可上调MDA-MB~(-2)31细胞PUMA蛋白和基因表达。结论:参芪扶正注射液可显著抑制人乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞增殖,导致细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调PUMA基因有关。     

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??OBJECTIVE To study the apoptosis of human gastric cancer cell line BGC-823 induced by liposome of total glucosides from paeonia(TGP liposome ). METHODS The inhibition of cell proliferation was determined by Cell Counting Kit-8 assay.The morphological changes of the apoptosis cells were observed by HE staining,Hoechst 33258 fluorescent staining, transmission electron microscope. Changes of apoptosis related factor Bcl-2 and Bax protein expression were detected by Western blot. RESULTS TGP liposome significantly inhibited proliferation of BGC-823 cells in a dose-dependent manner(P<0.05). GC-823 cells induced by TGP liposome for 48 h was observed on morphological changes such as karyopyknosis and karyorrhexis and apoptotic bodies. Bcl-2 expression was reduced, but Bax expression was increased,so the ratio of Bcl-2 /Bax decreased. CONCLUSION TGP liposome can induce the apoptosis of BGC-823 cells and inhibit its proliferation, its mechanism may be related to down-regulating protein expression of Bcl-2, up-regulating protein expression of Bax, reducing Bcl-2/Bax value.