灵芝菌对茯苓药材的生物转化研究

目的：利用灵芝菌对中药材茯苓药材进行固态生物转化,研究转化产物中总多糖和总三萜量的变化情况。方法：采用微波法提取茯苓及转化产物中的总多糖并采用苯酚-硫酸法进行含量测定;采用超声法提取茯苓及转化产物中总三萜并用香草醛-高氯酸法进行含量测定。结果：经生物转化后产物中的总多糖含量明显高于未经转化的茯苓药材（P<0.01）,而总三萜含量明显升高（P<0.01）,说明灵芝菌的生物转化过程改变了茯苓药材的原始特性;茯苓对灵芝生长具有促进作用,表现为灵芝菌丝生长旺盛未受抑制、转化产物中总多糖及总三萜含量显著高于茯苓原药材。结论：利用灵芝菌对中药茯苓进行生物转化来提高总多糖和总三萜含量,具有方法简单、成本低等优点,在中药现代化中有较高的应用价值。     

18种不同来源灵芝的多糖含量测定

目的:比较18种不同来源灵芝的多糖含量差异。方法:采用超声法提取,以0.2%蒽酮-H2SO4显色,紫外分光光度法测定多糖含量。结果:不同来源灵芝中多糖含量具有明显差异,以东北大袋料培养的灵芝多糖含量最高为2.74%,以广东野生赤芝含量最低为1.60%。结论:不同来源的灵芝由于地理环境因素和培养条件的不同,多糖含量存在明显差异,提示不能简单的以灵芝产地和栽培条件评价其质量。本实验为灵芝内在质量评价和为扩展灵芝资源提供参考依据。     

灰毡毛忍冬花蕾中绿原酸和咖啡酸的含量测定

目的:比较18种不同来源灵芝的多糖含量差异。方法:采用超声法提取,以0.2%蒽酮-H2SO4显色,紫外分光光度法测定多糖含量。结果:不同来源灵芝中多糖含量具有明显差异,以东北大袋料培养的灵芝多糖含量最高为2.74%,以广东野生赤芝含量最低为1.60%。结论:不同来源的灵芝由于地理环境因素和培养条件的不同,多糖含量存在明显差异,提示不能简单的以灵芝产地和栽培条件评价其质量。本实验为灵芝内在质量评价和为扩展灵芝资源提供参考依据。     

2个灵芝菌株子实体和孢子粉活性成分比较研究

目的:研究分析2个灵芝菌株(A1、A2)子实体和孢子粉中活性成分含量差异,筛选出适宜北京地区栽培的优质高产灵芝菌株。方法:采用分光光度法及超高效液相色谱(UPLC)法分别对2个灵芝菌株子实体和孢子粉中多糖、总三萜和3种灵芝酸(灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C2)含量进行检测。结果:灵芝A2菌株孢子粉中多糖含量显著高于A1菌株,A1菌株子实体所含总三萜和3种灵芝酸含量均高于A2菌株。结论:综合比较分析,在北京地区以获得优质灵芝子实体为目的,栽培A1菌株更适合,以孢子粉为主要生产目的,适宜栽培A2灵芝菌株。     

HPLC测定不同产地灵芝中9种三萜酸

目的:建立HPLC测定灵芝子实体中9种三萜酸的方法.方法:采用Alltima C18色谱柱(4.6 mm × 150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04％甲酸溶液,检测波长254 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温15℃.结果:灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B、灵芝烯酸A、灵芝酸A、赤芝酸A、灵芝烯酸D、灵芝酸C1的线性范围分别为6.81～40.88,6.38 ～38.25,6.75～40.50,6.38～ 38.25,5.95 ～ 35.65,5.90 ～ 35.25,7.00 ～ 42.00,6.20 ～ 37.15,6.05 ～ 36.4 mg· L-1(r=0.999 4,0.999 2,0.999 4,0.999 2,0.999 2,0.994 5,0.999 0,0.999 2,0.998 4),加样回收率分别为102.1％,102.3％,100.6％,103.3％,104.1％,103.2％,96.42％,102.5％,101.5％,RSD为1.5％,0.96％,1.9％,1.3％,1.7％,2.5％,0.62％,2.9％,1.3％.测定了31个不同地区、不同栽培条件下灵芝样品的三萜含量.结论:该方法可行、重复性好,可定量测定灵芝中三萜酸的含量.     

18种不同来源灵芝的多糖含量测定

目的：比较18种不同来源灵芝的多糖含量差异。方法：采用超声法提取，以0．2％蒽酮-H2SO4显色，紫外分光光度法测定多糖含量。结果：不同来源灵芝中多糖含量具有明显差异，以东北大袋料培养的灵芝多糖含量最高为2．74％，以广东野生赤芝含量最低为1．60％。结论：不同来源的灵芝由于地理环境因素和培养条件的不同，多糖含量存在明显差异，提示不能简单的以灵芝产地和栽培条件评价其质量。本实验为灵芝内在质量评价和为扩展灵芝资源提供参考依据。     

灵芝孢子粉的质量研究

目的:建立灵芝孢子粉的质量标准。方法:采用显微观察法、含油率测定法、TLC法、酚-硫酸法测定多糖含量,HPLC法测定腺苷含量及薄层-分光光度法测定总三萜含量,对灵芝孢子粉的质量进行了较全面的研究。结果:采用上述方法,可以有效控制灵芝孢子粉的内在质量。结论:可以通过测定灵芝孢子粉的破壁率、含油率,TLC特征斑点及多糖含量、腺苷含量、总三萜含量等指标,有效控制灵芝孢子粉的质量。     

灵芝子实体与菌丝体及破壁菌丝主要活性成份的比较

目的:对人工栽培的灵芝子实体、茵丝体及破壁处理菌丝体的主要化学成分进行测定分析,为灵芝药材品质及检测产品质量提供依据.方法:用硫酸蒽酮法测定灵芝多糖含量;采用齐墩果酸作对照,香草醛一冰醋酸显色,分光光度计测吸光值测定三萜化合物.结果:无论多糖还是三萜化合物,菌丝体含量均高于子实体,破壁处理高于未处理.     

赤芝孢子粉和子实体主要化学成分变异规律研究

目的:揭示产地、品种、采收部位和潮次、破壁技术对赤芝孢子粉和子实体中总三萜、总多糖、总蛋白含量的影响。方法:收集龙芝1号、沪农1号、市售赤芝孢子粉和子实体,分别采用硫酸-蒽酮比色法、香草醛-冰醋酸比色法和Lowry法测定其中总多糖、总三萜、总蛋白的含量。结果:全国6个主产区的破壁孢子粉总多糖为0.40%~2.25%,总三萜为1.36%~3.15%,总蛋白为0.74%~1.91%;浙江主栽赤芝品种子实体总多糖、总三萜、总蛋白质量分数分别为0.25%~1.42%,0.44%~1.42%,1.82%~3.67%,未破壁孢子粉分别为0.41%~0.91%,0.09%~0.12%,0.78%~0.90%,破壁孢子粉分别为1.03~2.25%,1.89%~3.15%,0.96%~1.04%。结论:全国不同主产区的灵芝破壁孢子粉化学成分含量存在显著差异,浙江产区总多糖和总三萜含量较高,福建产区总蛋白含量较高;浙江主栽赤芝品种龙芝1号总三萜含量较高,沪农1号总多糖含量较高;破壁孢子粉中总三萜与总多糖含量高于子实体,子实体菌柄中总多糖含量大多高于菌盖,菌盖中总三萜含量显著高于菌柄;2潮采收的菌盖和菌柄中总多糖含量高于1潮相应的部位,但总三萜含量大多低于1潮;孢子粉破壁可显著提高总三萜和总多糖的提取和溶出率。     

不同品种灵芝主要活性成分分析

目的:对不同品种灵芝子实体中4类活性成分进行测定分析,为灵芝品种专用化育种提供依据.方法:采用紫外分光光度法测定灵芝样品总多糖、总三萜和蛋白质含量;采用反相高效液相色谱法测定灵芝样品麦角甾醇含量.结果:不同品种灵芝子实体中总多糖、总三萜、蛋白质均为含量较高的主要成分,但麦角甾醇的含量极低;4类成分在不同灵芝品种中含量差异显著,含量之间未发现有相关性.结论:灵芝多糖、三萜、蛋白质这3类各具典型功效的主要成分含量测定对灵芝子实体的质量控制均有重要的意义,并且可为制剂生产、临床应用的专用品种选育提供科学依据.     

灰毡毛忍冬花蕾中绿原酸和咖啡酸的含量测定

目的:比较18种不同来源灵芝的多糖含量差异。方法:采用超声法提取,以0.2%蒽酮-H2SO4显色,紫外分光光度法测定多糖含量。结果:不同来源灵芝中多糖含量具有明显差异,以东北大袋料培养的灵芝多糖含量最高为2.74%,以广东野生赤芝含量最低为1.60%。结论:不同来源的灵芝由于地理环境因素和培养条件的不同,多糖含量存在明显差异,提示不能简单的以灵芝产地和栽培条件评价其质量。本实验为灵芝内在质量评价和为扩展灵芝资源提供参考依据。     

不同产地灵芝中多糖含量的测定

不同产地灵芝中多糖含量的测定李晓晖何云庆李荣芷(北京医科大学药学院北京100083)崔书民(烟台市生物研究所烟台264004)灵芝Ganodermalucidum(Leysex.Fr.)Karst.为灵芝属真菌,是补益强壮,扶正固本的珍贵药材,具有多种生理活性与药理作用[1,2],灵芝多糖部分为扶正固本有效成分[3]。由于野生资源缺短,目前全国各地进行了不同培养条件的灵芝人工栽培,为了考察不同来源的灵芝质量,本文对不同产地、不同外形的同种灵芝及不同部位中的....     

反相高效液相色谱法测定赤芝中灵芝酸的含量

 目的 研究不同地区栽培赤芝及好生赤芝灵芝酸类成分的含量差异。方法 应用反相高效液相色讲法分离测定了赤芝中4种化学成分[灵芝酸A(Ⅰ),灵芝酸C(Ⅱ),灵芝酸D(Ⅲ),灵芝酸E(Ⅳ)],对不同地区2种好生赤芝和不同地区4种栽培赤芝子实体中该4种成分定量分析。色谱柱YWG-C〈sub〉18〈/sub〉(250 mm×4.6 mm,10 μm),甲醇水-乙酸(49.5:49.5:1)为流动相,流速1.0 ml·min〈sup〉-1〈/sup〉,柱温为室温,检侧波长250 nm;4种成分的线性范围分别为(0.098～3.138)μg,(0.091～2.913)μg,(0.089～2.850)μg和(0.089～2.850)μg,回收率分别为93.93%,96.83%,93.0l%,90.40%。结果 栽培赤芝和野生赤芝子实体中4种灵芝酸成分的总含1分别为0.799～3.555 mg·g〈sup〉-1〈/sup〉和1.619～2.360 mg·g〈sup〉-1〈/sup〉。结论不同地区栽培赤芝之间和不同地区野生赤芝之间灵芝酸含量差异较大;裁培赤芝中灵芝酸含1不低于野生赤芝中灵芝酸含量。本法可作为控制灵芝生药质量的一种很好方法。     

灵芝不同生长阶段三萜酸含量变化研究

目的:揭示不同生长发育阶段灵芝生长与灵芝三萜酸含量的相关性,探索灵芝的最佳采收时期。方法:对不同生长发育阶段的灵芝,采用"烘干恒重法"测定干重,HPLC测定灵芝10种三萜酸的含量。采用Alltima C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%甲酸溶液,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温15℃。结果:灵芝总三萜酸的含量在灵芝现蕾期、菌盖形成期变化不明显,弹孢前期最高,在弹孢后期显著降低。灵芝酸A是灵芝子实体内含量最高的灵芝三萜酸,7种灵芝酸的含量均在弹孢前期最高。结论:对灵芝生长和不同生长发育阶段灵芝三萜酸含量变化研究发现灵芝子实体最佳采收时期应该是灵芝弹孢前期。     

灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定

目的研究灵芝三萜的最佳提取方法,并测定其总三萜的含量。方法采用正交实验方法,用硅胶柱进行总三萜分离,通过紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。结果最佳提取方法为用5倍量95%乙醇回流提取3次,每次1.5 h;用30倍量硅胶装柱,以石油醚-乙酸乙酯(9:1和7:3)进行洗脱;经分离得到针状晶体Ⅰ和Ⅱ,测定该品种中灵芝总三萜含量为9.07%。结论本提取方法稳定可行,可作为灵芝三萜工业化生产的参考。     

灵芝破壁孢子粉中总三萜酸含量测定

灵芝孢子为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.exFr.) Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang的子实体发育后期弹射释放出的种子,是灵芝的生殖细胞.孢子内含有脂肪油、三萜酸类、多糖等;孢壁含有纤维索2.36～3.52％,几丁质52.08％～57.64％[1],矿物元素硅9.2mg/g和钙713μg/g等,使得孢壁坚硬有韧性[2],结构复杂且耐酸、碱,孢子内含物的有效成分在体内难以释放,影响临床疗效[3],故采用现代工艺技术进行破壁,称破壁孢子粉.近代药理研究证明灵芝破壁孢子粉有抗肿瘤、增强免疫、降血糖、降血脂、镇静、清除自由基、抗辐射、促进新陈代谢、延缓衰老[4-6]等作用,而灵芝三萜类化合物涵盖了绝大部分孢子粉的药理活性.因此,对破壁孢子粉中三萜酸含量进行测定有利于控制其质量.文献报道的总三萜酸测定方法有5％的香草醛-冰醋酸溶液、高氯酸溶液显色法[7-10]、硫酸无水乙醇检测法[11]等.但上述方法都忽略了脂肪油对三萜酸含量测定的干扰,从而影响了测定结果的准确性.本文采用萃取法对灵芝破壁孢子粉三萜酸提取液进行除油预处理,既消除脂肪油对三萜酸测定的干扰,义避免显色过程的不平行性对结果的影响,使测定结果更准确的反映破壁孢子粉中总三萜酸的含量.     

超临界CO_2萃取法和醇回流法提取灵芝中三萜类成分的比较

目的:比较超临界CO2流体萃取法(CO2-SFE)和醇回流提取法提取灵芝中三萜类成分的优劣。方法:通过HPLC图谱、RP-HPLC法测定的灵芝酸B含量、可见分光光度法测定的灵芝三萜含量、固形物含量等4个指标综合评价这两种提取方法。结果:超临界CO2流体萃取法和醇回流提取法这两种方法得到的三萜类成分的色谱图具有相似的峰形,灵芝三萜和灵芝酸B含量相近,固形物含量以醇回流法较高。结论:超临界CO2流体萃取法与传统的醇回流提取法提取效果相似,可以取代醇回流提取法提取灵芝子实体中三萜类成分。     

光质对灵芝生长与灵芝多糖含量的影响

目的:研究不同光质对灵芝生长发育和灵芝多糖含量的影响,为灵芝优质高产栽培提供理论依据。方法:栽培灵芝时进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化并测量多糖含量。结果:不同光质处理形态上弹孢前期灵芝菌盖厚度与菌盖表面环纹的数目与对照差异显著,灵芝多糖含量出现最高值时期不同。蓝色光质处理在现蕾期、开伞期、弹孢后期多糖含量均高于对照,且差异显著。绿色光质处理有助于生长末期多糖积累。不同光质处理对灵芝子实体产量与灵芝孢子粉产量均有影响。结论:对照处理灵芝子实体产量高,性状好;蓝色光质处理可以提高灵芝多糖含量。     

灵芝孢子油的总三萜测定研究及HPLC鉴别

目的:研究灵芝孢子油质量控制的有效方法。方法:以分光光度法测定总三萜含量。HPLC方法采用Kromasil-C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm),乙腈-异丙醇(53∶47)为流动相,流速0.5 mL/min;蒸发光散射检测器检测;柱温30℃。结果:采用分光光度法测定,灵芝孢子油及食用油中总三萜含量均高于20%;HPLC法测定灵芝孢子油中三油酸甘油酯含量大于20%,食用油中三油酸甘油酯含量小于9%。结论:分光光度法测定灵芝孢子油总三萜无专属性。HPLC方法简便、迅速、准确、专属性强,通过HPLC定性相似度比较可作为控制灵芝孢子油的有效方法。     

超临界CO2萃取灵芝子实体中的三萜类成分

目的：筛选超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分的最佳工艺条件。方法：采用RP-HPLC测定灵芝酸B的含量、可见分光光度法测定灵芝总三萜含量，设计正交试验优化超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分的工艺条件。结果：超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分的最佳工艺条件：萃取压力为25 MPa，萃取温度为45 ℃，萃取时间为1.5 h，夹带剂(95%乙醇)用量为3 mL·g^-1。结论：超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分具有萃取效率高、萃取时间短、操作简单等优点，其方法可靠，切实可行。