健脾活血方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4 基因表达的影响

目的 探讨健脾活血方对2型糖尿病胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)大鼠葡萄糖转运蛋白-4(Glucose Transporter-4,GLUT-4)mRNA表达的的改善作用及机理.方法 取Wistar大鼠60只,采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)加高脂饮食造成2型糖尿病IR大鼠模型,设空白组、模型组、健脾活血方低剂量组、健脾活血方高剂量组和罗格列酮组,以RT-PCR法检测大鼠骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达.结果 健脾活血方高剂量组大鼠骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达与罗格列酮组相当,与模型组比较有显著性差异(P<0.01).结论 健脾活血方能够上调大鼠骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达,改善IR.     

降脂饮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌转运蛋白-4mRNA的影响

目的：观察降脂饮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌转运蛋白-4mRNA的影响,探讨降脂饮改善胰岛素抵抗及代谢综合征的作用机制。方法：1.胰岛素抵抗大鼠模型采用高脂膳食喂养配合小剂量注射链脲佐菌素的方法复制,以胰岛素敏感指数检测模型是否被成功建立;2.除正常组外,将成模大鼠随机分为4组：模型组、降脂饮高剂量组、降脂饮低剂量组、罗格列酮组,分别连续灌胃给药6周;3.检测各组大鼠胰岛素敏感指数,并以RT-PCR法检测各组大鼠骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠胰岛素敏感指数下降,差异极显著（P〈0.01）,说明胰岛素抵抗大鼠模型被成功建立。与模型组比较,降脂饮组、罗格列酮组大鼠胰岛素敏感指数明显上升（P〈0.01）;大鼠骨骼肌中GLUT-4 mRNA的表达相对增强,其中降脂饮高、低剂量组（P〈0.01）,罗格列酮组（P〈0.05）。结论：降脂饮可明显提高胰岛素抵抗大鼠的胰岛素敏感指数,且可促进骨骼肌中GLUT-4 mRNA的表达。     

玉液汤对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中葡萄糖转运子-4mRNA表达的影响

目的 观察玉液汤对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中葡萄糖转运子-4 mRNA(GLUT-4 mRNA)表达的影响.方法 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测大鼠骨骼肌中GLUT-4 mRNA的水平.结果 玉液汤高剂量组能显著增加大鼠骨骼肌中GLUT-4mRNA的表达(P<0.01). 结论玉液汤通过增强骨骼肌中GLUT-4 mRNA的表达改善胰岛素抵抗.     

益气活血通腑法对类2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达的影响

目的：研究益气活血通腑中药(加味桃核承气汤)对类2型糖尿病大鼠的作用及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响。方法：采用低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射加高热量饲料喂养导致大鼠类2型糖尿病模型，灌胃给药4周，检测糖耐量、空腹血清胰岛素及骨骼肌GLUT 4mRNA表达量的变化。结果：造模后大鼠注射葡萄糖后30、60、120min血糖显著升高，血清空腹胰岛素水平无明显变化，骨骼肌GLUT4 mRNA表达量显著降低。给药4周后，各药对空腹血清胰岛素水平和注糖后30、60min血糖无明显影响，但中药低剂量、二甲双胍、罗格列酮可使注糖后120min血糖下降；罗格列酮尚可降低空腹血糖。二甲双胍可使骨骼肌GLUT4mRNA表达量明显升高，中药高剂量可防止GLUT 4mRNA表达量的降低，但罗格列酮对GLUT4 mRNA表达量的降低无影响。结论：低剂量STZ腹腔注射加高热量饲料喂养可导致大鼠类2型糖尿病胰岛素抵抗样改变，益气活血通腑中药可改善此模型的糖耐量异常，其作用与增强其骨骼肌GLUT4基因表达，促进骨骼肌对葡萄糖的摄取和利用有关。     

西洋参活性部位对胰岛素抵抗大鼠resistin基因mRNA表达的影响

目的：观察西洋参治疗胰岛素抵抗（Insulin Resistance,IR）大鼠活性部位对Resistin基因表达的影响。方法：通过早期药效学试验证明,西洋参根部60％洗脱部分和30％洗脱部分为有效部位。本实验采用高脂饲料喂养加链脲佐菌素法复制IR大鼠（SD）的动物模型,造模成功后,将大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、西洋参60％洗脱组、西洋参30％洗脱组。给药4周后,以RT—PCR法检测附睾周围白色脂肪组织中Resistin—mRNA的表达。结果：与模型组比较,各给药组大鼠脂肪组织中Resistin基因mRNA的表达均降低,其中以西洋参60％洗脱组作用最强,与模型组比较有极显著差异（P〈0．01）,西洋参30％洗脱组和罗格列酮组与模型组比较差异显著（P〈0．05）。结论：西洋参可降低IR大鼠脂肪组织中Resistin基因的表达;西洋参60％洗脱部位降低Resistin基因表达的作用最明显。     

葡萄糖氧化酶法筛选西洋参干预胰岛素抵抗脂肪细胞模型的活性成分

目的:通过葡萄糖消耗试验测定西洋参单体成分对IR脂肪细胞模型葡萄糖消耗量的影响,筛选西洋参干预胰岛素抵抗的活性成分。方法:将西洋参的根部用70%EtOH回流,将提取物进行AB-8型大孔树脂柱色谱分析,按不同浓度洗脱,得到西洋参95%醇提组、西洋参60%醇提组、西洋参30%醇提组和水提组四个部分。本课题组的前期药效学试验已证明,西洋参60%醇提组为活性部位。将西洋参60%醇提部位用硅胶柱色谱及HPLC等现代分离技术与方法分离和纯化,通过理化常数及光谱数据确定其结构,共得12个化合物。将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞,给予高糖高胰岛素(25mmol·L-1葡萄糖,1×10-6mol·L-1胰岛素)刺激,建立胰岛素脂肪细胞模型,随机分为空白组、模型组、罗格列酮组、西洋参单体成分组。药物干预培养24h后,通过葡萄糖消耗试验测定西洋参单体成分对IR脂肪细胞模型葡萄糖消耗量的影响,筛选西洋参干预胰岛素抵抗的有效成分。结果:与模型组细胞葡萄糖消耗量比较,罗格列酮组、人参皂苷R3组、20(R)人参皂苷Rb1组、20(R)人参皂苷Rb2组、拟人参皂苷F11组细胞葡萄糖消耗量有不同程度的升高,其中人参皂苷R3组、20(R)人参皂苷Rb1组、20(R)人参皂苷Rb2组、罗格列酮组葡萄糖消耗量明显升高,差异极显著(P0.01),拟人参皂苷F11组差异显著,(P0.05)。其余化合物组与模型组比较,葡萄糖消耗量无统计学差异。结论:20(R)人参皂苷Rb1,20(R)人参皂苷Rb2,人参皂苷R3,拟人参皂苷F11可能是西洋参干预IR脂肪细胞模型的活性成分。     

西洋参活性部位对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞因子的影响

目的:通过测定胰岛素抵抗大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)、脂联素(APN)、抵抗素(Resistin)和脂肪指数的水平,探讨西洋参不同活性部位对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞因子的影响。方法:实验设模型组、西洋参30%醇洗脱组、60%醇洗脱组和罗格列酮组,分别用放射性免疫分析法肿瘤坏死因子-α(TNF-α),用酶联免疫法血清中脂联素(ANP)、抵抗素(Resistin)和脂肪指数水平。结果:西洋参30%醇洗脱组显著降低血清中TNF-α水平;60%醇洗脱组显著提高血清中APN水平;30%醇洗脱组对血清中APN水平也有提高作用;30%醇洗脱组能降低脂肪指数;30%醇洗脱组能降低抵抗素水平。结论:似可认为西洋参通过对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞因子的影响,降低胰岛素水平,调节脂代谢,从而改善胰岛素抵抗。     

解毒化浊方对胰岛素抵抗大鼠GLUT4 mRNA表达的影响

目的:探讨解毒化浊方对胰岛素抵抗大鼠葡萄糖转运4(glucose transporter 4,GLUT4)表达的影响及其治疗胰岛素抵抗的作用机理。方法:将雄性wistar大鼠48只随机选出12只设为空白组,采用生理盐水灌胃,其余大鼠采用高脂饲料喂养方法造胰岛素抵抗大鼠模型后,随机分为模型组、解毒化浊治疗组及罗格列酮治疗组,每组12只,解毒化浊组以解毒化浊方混悬液2.025g/(kg·d)灌胃,罗格列酮组以罗格列酮混悬液0.36 mg/(kg·d)灌胃,模型组与空白对照组均予等体积生理盐水灌胃。治疗10周后检测大鼠空腹血糖(FBG)、糖耐量试验(2 h血糖)[OGTT(2h PG)]、空腹胰岛素(FINS)水平,并应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠骨骼肌组织GLUT4 mRNA的水平。结果:解毒化浊方与罗格列酮均能降低大鼠FBG、2h PG及FINS水平,差异有统计学意义(P0.05),在降低体质量方面与空白组比较解毒化浊组及罗格列酮组差异有统计学意义(P0.05);解毒化浊组与罗格列酮组大鼠血清FBG、2h PG、FINS比较差异无统计学意义(P0.05);与空白组比较,模型组大鼠GLUT4表达水平呈低表达(P0.05);与模型组比较,解毒化浊组与罗格列酮组大鼠GLUT4表达水平显著增加(P0.05)。结论:解毒化浊方可降低胰岛素抵抗大鼠血清FBG、OGTT(2h PG)及FINS水平,增加骨骼肌组织中GLUT4的表达,提高胰岛素敏感性,有改善胰岛素抵抗的作用。     

化痰活血法改善2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的作用机制研究

目的:研究化痰活血法对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的影响与作用机制。方法:将健康SD大鼠,随机分为正常对照空白组和造模组,采用刘氏法建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型;模型鼠又随机分成3组,即胰苏灵组、罗格列酮组、模型组,分别于给药后测定血糖、血脂、胰岛素、胰岛素受体数目与结合力,4周后禁食处死大鼠,留取血清并剪取肌肉、肝、脂肪等组织以检测GK、PEPCK以及脂肪组织TNF-αmRNA表达、肌肉组织GLUT-4mRNA表达、肝细胞GK的mRNA表达。结果:胰苏灵在改善胰岛素敏感指数,降糖、降脂、降低FFA等指标方面与罗格列酮未见明显差异(P>0.05),且胰苏灵可减轻大鼠体质量,研究发现T2DM大鼠模型肝GK活性明显低于空白组(P<0.05),脂肪组织TNF-αmRNA的表达水平明显高于对照组(P<0.05),PEPCK的蛋白定量及GLUT4的表达水平明显低于空白组(P<0.05),提示T2DM大鼠IR与与肝葡萄糖激酶活性降低、脂肪源性TNF-αmRNA高表达、PEPCK活性减低及GLUT4的表达降低密切相关。胰苏灵可以提高T2DM大鼠模型肝葡萄糖激酶活性、脂肪源性TNF-αmRNA的表达水平、增加PEPCK的活性...     

三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌IRS-1mRNA的影响

目的:观察三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠骨骼肌IRS-1mRNA的影响。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为4组:正常对照组、模型对照组、三丫苦组、罗格列酮组,建立高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠模型。检测各组大鼠TC、TG、FBG、FINS等指标的变化,清醒状态下高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验检测葡萄糖输注率,Real-timePCR法检测骨骼肌IRS-1mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组TC、TG、FBG、FINS均升高(P<0.01),葡萄糖输注率降低(P<0.01)。给予三丫苦后,大鼠TC、TG、FBG、FINS降低(P<0.01或P<0.05),GIR水平升高(P<0.05),与罗格列酮组比较,TC和TG降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型对照组IRS-1mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,三丫苦组和罗格列酮组IRS-1mRNA表达均有不同程度的升高(P<0.01或P<0.05)。与罗格列酮比较,三丫苦组IRS-1mRNA表达升高(P<0.05)。结论:三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢和IRS-1表达有一定调节作用。     

Water-soluble ginsenosides in American ginseng]

OBJECTIVE: To have further comprehension of American Ginseng on the basis of its water-soluble components. METHOD: The water suspension of 80% methanol extract of American Ginseng was sequentially extracted with ethyl ether and n-butyl alcohol. The saccharides in the water-soluble portion were removed by macro-reticular resin column, and three compounds were obtained by silica-gel column chromatography. Their structures were confirmed on the basis of spectral analysis(IR, NMR, MALDI-MS) melting points and optical degrees. RESULT: Three compounds were identified as malonyl ginsenosides Rb1, ginsenoside Rb1 and Re respectively. Among them Rb1 and Re are known, while malonyl ginsenoside Rb1 was isolated from American Ginseng for the first time. Its structure was elucidated as (3 beta, 12 beta)-20-[(-6-O-beta-D- glucopyranosyl-beta-D-glucopyranosyl)oxy]-12-hydroxylammar-24-en-3-yl-O- [6-O-(carboxyacetyl)-beta-D-glucopyranosyl)]-beta-D-glucopyranoside. CONCLUSION: Water-soluble ginsenosides were isolated from the water-soluble extract of American Ginseng suggesting that malonyl ginsenosides exist both in American Ginseng and Ginseng.     

猪牙皂抗肿瘤有效部位的研究

目的研究猪牙皂有效部位的分离及其抗肿瘤作用。方法对猪牙皂总浸膏分别采用“乙醚沉淀法”和“不同极性溶剂萃取法”进行了有效部位的分离,前者将浸膏分为脂溶物和皂苷物两部分,后者分得了氯仿物正丁醇物及提取后的水溶物。结果抗S180实验表明,皂苷物和正丁醇提取物具有较高的抑瘤率,其最高抑瘤率分别为44.62%和41.75%,其它各样品均未见明显抑瘤效果。结论皂苷物和正丁醇物为其抗癌有效部位。     

微波场协同提取溪黄草黄色素的研究

研究了微波提取溪黄草Rabdosia serra(Maxim.)Hara黄色素的新工艺并确定了最佳工艺条件:原料为2.0000 g溪黄草干粉,提取剂为95%乙醇,提取剂用量为1:60(g:ml),微波功率为464 W,提取时间为350 s,提取次数为3次.最佳工艺条件下色素的提取率为90.6%，产率为12.7%，色价E(1%，330　nm）为53.3，产品pH值为6.0.与溶剂浸提法相比,微波法提取溪黄草色素的每次提取时间由6 h减小为350 s,提取率从90.4%增加到90.6%.     

钩藤总生物碱提取工艺研究

目的:优选钩藤总生物碱的提取工艺。方法:以钩藤总碱含量和提取液干膏率为综合评价指标,对乙醇用量、浓度、提取时间及次数四因素进行正交考察。结果:钩藤总碱的最佳提取工艺为10倍量75%乙醇提取3次,提取时间2h。结论:提取工艺可稳定可行。     

中药水蛭提取及精制工艺的研究

目的:研究中药水蛭的提取及精制工艺,为水蛭提取物入制剂工艺提供技术依据。方法:依正交试验法,逆流循环提取技术,以效价法检测抗凝血酶活性为指标,对水蛭提取工艺进行优化,并运用膜分离技术对提取液进行精制。结果:最佳工艺为以12倍量0.9%氯化钠溶液提取5 h,循环3次最好,选择相对分子质量为30×103和0.5×103的膜即可达到精制的目的。结论:该提取、精制工艺稳定、合理、可行。     

生脉注射液(新工艺)各组分致Beagle犬类过敏反应实验研究

目的:对新工艺生脉注射液各组分进行Beagle犬类过敏反应实验研究,进一步探讨新工艺生脉注射液致敏原因。方法:选用类过敏反应的敏感动物Beagle犬,随机分为7组,每组3只,分别注射5%葡萄糖注射液、红参提取液、麦冬提取液、五味子提取液、五味子蒸馏液、生脉方、0.2%聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)溶液。观察给药前至给药后24 h各犬的变化,根据反应症状轻重判定级别。给药前及停药后10 min取血,ELISA方法检测血清组胺含量,并结合反应症状级别,综合判定药物的致敏性。结果:红参提取液组1只犬出现不典型类过敏反应症状,2只犬血清组胺含量升高1倍以上,诱发Beagle犬类过敏反应为可疑;0.2%吐温-80组各犬均出现类过敏反应症状,但血清组胺含量未见明显升高,诱发Beagle犬类过敏反应为可疑;其余各组药物未诱发Beagle犬类过敏反应。结论:新工艺生脉注射液所致Beagle犬轻度类过敏反应可能与所含红参提取液及0.2%吐温-80有关。     

人参和西洋参特有挥发性成分鉴别

目的: 对比研究人参和西洋参挥发性成分,探讨用于鉴别的可能性。 方法: 人参和西洋参分别采用水蒸气蒸馏法、索氏提取法、固相微萃取法和吹扫捕集法得到挥发性成分,运用GC-MS技术分离与检测,所得总离子流图通过NIST谱库检索并结合保留指数(Kovats' RI)对具体化学成分进行分析和鉴定。 结果: 4种方法提取的人参和西洋参挥发性气味成分种类和含量存在差异,水蒸气蒸馏共鉴定人参样品萜类化合物42个(相对含量69%),西洋参28个(41%);索氏提取共鉴定人参样品萜类化合物26个(50%),西洋参15个(18%);固相微萃取共鉴定人参样品萜类化合物18个(49%),西洋参5个(46%);吹扫捕集共鉴定人参样品萜类化合物2个(4%),西洋参4个(13%)。 结论: 同一方法条件下人参和西洋参各自具有的特征性成分,可用于辅助区别人参和西洋参。     

淫羊藿总黄酮的提取工艺及含量分布

目的研究淫羊藿总黄酮的提取工艺及产地不同的淫羊藿植株总黄酮在各部位的含量分布。方法用乙醇和水回流提取淫羊藿总黄酮;选取湖北恩施及福建三明淫羊藿为原料,做单因素实验,再以淫羊藿总黄酮提取率为考察指标,作正交实验设计;采用紫外分光光度法测定淫羊藿总黄酮含量。结果以乙醇和水作为提取剂的提取率分别为70.5%、31.1%;恩施与三明所产的箭叶淫羊藿其淫羊藿总黄酮含量分别为:叶3.24%,1.02%;茎0.91%,0.14%;根2.47%,0.61%。结论湖北恩施所产的箭叶淫羊藿比福建三明所产的箭叶淫羊藿中总黄酮含量高;乙醇作提取剂的提取率明显高于水,影响淫羊藿总黄酮提取效果的主次因素为:溶剂浓度>回流时间>提取次数>液固比。淫羊藿总黄酮的优化提取工艺为:液固比为12∶1,以60%乙醇提取3次,1.5 h/次,优化工艺的总黄酮提取率达77.5%。     

加味四君子汤和人参水煎剂对力竭运动后大鼠心肌保护作用的研究

目的:观察加味四君子汤和人参水煎剂对力竭运动后大鼠心肌的保护作用.方法:以大鼠力竭运动为模型,A组不做任何训练,常规饲养,自由饮食;B组力竭运动组;C组:力竭运动后灌喂加味四君子汤组;D组力竭运动后灌喂人参水煎剂组.实验动物在训练5周后,取心肌组织,用Hu-12A型透射电镜75 KV观察A、B、C、D四组心肌结构、局部和细胞器,比较其不同.结果:力竭运动可造成大部分心肌细胞的肌丝溶解,大量线粒体肿胀,一些区域的肌膜不完整,致使心肌细胞线粒体等细胞器外溢.而灌喂加味四君子汤组、灌喂人参水煎剂组心肌纤维结构,细胞器较正常饲养组无明显变化.结论:加味四君子汤和人参水煎剂对力竭运动大鼠心肌有保护作用.