儿童下呼吸道人类偏肺病毒感染的临床流行特征

目的 了解儿童人类偏肺病毒（hMPV）呼吸道感染的流行情况及临床特征。方法 收集2004年8月-2005年1月我院452例急性下呼吸道感染儿童的呼吸道分泌物标本，采用直接免疫荧光抗体法检测呼吸道合胞病毒、流感病毒甲型和乙型、副流感病毒1～3型和腺病毒，以上病毒检测阴性的245份标本再用逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测hMPVM基因，随机挑选部分PCR扩增产物送核苷酸测序作基因分析。结果 245份标本中hMPV阳性例数为59例（241％），452例患儿中单一hMPV感染率13．1％。冬季月份中hMPV检出数高于其他呼吸道病毒。59例hMPV感染患儿，平均月龄27．7月，各年龄组hMPV检出率差异无显著性（P〉0．05）。hMPV感染者临床特征与其他呼吸道病毒感染无明显差异（P〉0．05）。23份hMPVM基因部分核苷酸片段与GenBank中hMPV M基因序列同源性为82．8％～100％，基因进化树分析提示存在2种不同的hMPV基因。不同hMPV基因型感染者的临床表现差异无显著性（P〉0．05）。结论 hMPV是2004年冬季我院儿童下呼吸道感染流行的病毒病原，临床表现无特征性，2种不同基因型感染的临床特征也相似。     

甲型H1N1流感重症患者病毒血凝素和神经氨酸酶基因特性分析

目的 通过分析2009-11-02～12-04期间北京市6例甲型H1N1流感重症患者咽拭子中病毒的血凝素、神经氨酸酶基因特性,了解其基因进化特点,以期对下一步甲型H1N1流感的防控和重症的治疗提供理论依据.方法 使用实时荧光PCR方法,检测重症患者样本为甲型H1N1流感病毒阳性样本,利用测序引物扩增血凝素、神经氨酸酶基因,测定核苷酸序列,利用生物信息软件拼接序列;分析重要基因位点,对其进行基因进化、耐药性分析.结果 6件测定样本血凝素、神经氨酸酶基因与疫苗株A/California/07/2009(H1N1)核苷酸、氨基酸的同源性分别为99.2%及99.5%,有8个血凝素基因的氨基酸发生替换,为65、100、145、185、216、220、338及391位,其中145位位于抗原决定簇A区,220位位于抗原决定簇D区,同时是受体结合位点的后壁;有5个神经氨酸酶基因的氨基酸发生了替换,为59、106、232、248及365位,其中106、232、248位位于酶活性区域;未发生神经氨酸酶基因275位H→Y的替换.结论 北京市甲型H1N1流感重症患者病毒血凝素和神经氨酸酶基因与疫苗株A/California/07/2009(H1N1)高度同源,部分血凝素基因、神经氨酸酶基因有氨基酸替换,但其作用不清.所有测定样本未发生对达菲类药物的耐药性突变.     

深圳汕头地区呼吸道感染患儿人偏肺病毒的检出及病原学初步研究

目的：了解人偏肺病毒（hMPV）在深圳汕头地区的感染情况及临床特征。方法收集2010年10月～2012年6月呼吸道感染住院患儿及健康体检儿童鼻咽抽吸物及咽拭子标本共1217例,采用 RT-PCR方法对其进行 hMPV基因筛查,随机选取5份扩增阳性产物进行核酸测序,将所得序列与 GenBank中的序列进行比较和进化树分析。同时,对阳性标本的临床资料进行分析。结果1137份感染患儿标本中检测到hMPV 51份（阳性率4.49％）,2,3,4月为发病高峰,感染患儿主要在3岁以下,占检出率的80.4％,5份阳性标本基因序列与 GenBank 中公布的多株 hMPV N 基因同源性达80.8％～98.4％。进化树分析显示分属于两个不同的基因进化族。51例阳性患儿临床症状均表现为发热、咳嗽、喘息,临床诊断主要为支气管肺炎24例,喘息型肺炎17例,毛细支气管炎9例,上呼吸道感染1例。80例健康体检儿童的呼吸道标本均未检测到 hMPV特异基因片段。结论 hMPV是引起深圳汕头地区3岁以下儿童呼吸道感染的重要病原体之一,并有一定的季节性,其感染无特异的临床表现。流行的 hMPV株存在两种不同基因型。     

浙江省甲型H1N1流感病毒抗体血浆抗体水平检测与分析

2009年3月以来,包括墨西哥、美国和加拿大在内的许多国家发生了人感染甲型H1N1流感(以下简称甲流)病毒疫情.世界卫生组织(WHO)于6月11日将流感大流行的预警级别提高至6级,宣布全球性的流感大流行已经到来.为了有效应对可能发生的甲流大流行,卫生部于2009年9月10日下达了采集甲流病毒抗体血浆工作的通知.2009年10月-12月浙江省采供血机构共采集132份抗体血浆,并随机调查的20名疫苗免疫后献血者,我们对这152份样本进行了抗体效价的检测,现分析如下.     

1例重症甲型H1N1流感合并多种并发症的护理

甲型H1N1流感是由一种新型流感病毒引起的急性呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒株,主要表现为流感样症状,轻症病人可实施居家隔离治疗,重症病人必须接受住院治疗。2009年7月始,我院积极收治甲型H1N1流感病人,控制疫情,病死率为0。2009年11月20日至29日成功救治1例重症甲型H1N1流感并脑炎、心肌炎、肺部感染的病人。现将护理报告如下。     

2010年广州市甲型H1N1流感病毒分离株NA基因变异分析

目的比较2010年从广州市分离到的甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因与2009年中国大陆甲型H1N1流感病毒NA基因的变异情况,为甲型H1N1流感的监测和防控提供参考资料。方法收集2010年广州市有发热和呼吸道症状患者的咽拭子标本,用甲型H1N1流感病毒特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)检测,扩增分离到的甲型H1N1流感病毒NA基因片段,测序后与2009年的H1N1毒株进行比对和进化分析,并用生物信息学方法对耐药位点和糖基化位点进行分析。结果共收集1 194份咽拭子标本,检测到甲型流感病毒阳性327份,其中H1N1流感病毒6株,与2009年分离的甲型H1N1流感病毒相比,有16个位点发生了有义突变,3个位点和NA活性相关,其中222位氨基酸的变异位于NA活性位点上。结论成功扩增了2010年广州市6株甲型H1N1流感病毒株NA基因并测序,未发现H275Y耐药位点的变异。3毒株在NA活性位点222位、228位和425位等氨基酸位点处发生了变异,需继续加强监测。     

甲型H1N1流感外周血检查特点分析

<正>甲型H1N1流感(简称甲流)是由甲型H1N1流感病毒引起的呼吸道传染病,临床表现为流感样症状[1]。甲流传播快,人群普遍易感。2009年6月11日世界卫生组织将流感流行的级别升至6级,甲型H1N1流感已进入全球大流行阶段。     

重症甲型H1N1流感患儿的护理管理

甲型H1N1流感又称A（H1N1）型流感,是由新型流感病毒引起的呼吸道感染[1],主要通过飞沫经呼吸道传播,早期症状与普通流感相似,主要有发热、咳嗽、喉痛、流涕、肌痛和头痛等[2].重症病例病情发展迅速,可导致严重肺炎,急性呼吸衰竭及多脏器功能损伤甚至死亡.我院为综合性儿童医院,2009年4-11月中旬共收治重症和危重症甲型H1N1流感患儿32例,现将相关护理经验介绍如下.     

实时荧光RT-PCR检测不同标本中甲型H1N1流感病毒核酸的临床意义

目的通过检测甲型H1N1流感感染患者不同标本中甲型H1N1流感病毒核酸,了解其对甲型H1N1流感的快速诊断及病程进展的关系。方法 118例甲型H1N1流感患者,采用实时荧光逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)分别检测发病48 h后和(或)恢复期咽拭子、血浆及下呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒核酸。结果 118例甲型H1N1流感患者发病48 h后咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸阳性;23例(23/40)重症患者下呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒核酸阳性;15例(15/40)重症患者血浆中检测到甲型H1N1流感病毒核酸。结论实时荧光RT-PCR方法可以快速检测甲型H1N1流感病毒感染,血浆中甲型H1N1流感病毒核酸阳性可能是重症患者的标志。     

许昌地区新型甲型H1N1流感合并细菌感染分析

目的研究新型甲型H1N1流感患者合并细菌感染情况。方法收集咽拭子标本800份,检测其甲型H1N1流感病毒RNA,同时做咽拭子的细菌培养,根据结果分析甲型H1N1流感患者合并细菌感染及致病菌的药敏情况。结果 800份样本中423例H1N1 RNA阳性;其中73例合并不同的细菌感染,占甲流患者的17%,多数细菌的耐药性较强。结论许昌地区2009年的甲流疫情中,甲流患者合并细菌感染的情况值得关注,治疗中要注意细菌培养并合理用药。     

儿童危重甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征的临床特征与救治

目的 了解儿童危重甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的临床特点,探讨救治措施.方法 前瞻性观察上海交通大学附属儿童医院收治的3例危重甲型H1N1流感的临床表现、化验检查、诊断、治疗转归.结果 实时RCT-PCR检测3例患者均为甲型H1N1流感感染.以发热、咳嗽起病,全身性炎症反应相对轻.病程4～6 d病情突然恶化,出现口唇发绀,呼吸急促.X线片显示双肺多叶渗出或弥漫性炎症阴影.入院时已发展为ARDS.采用奥司他韦,小潮气量(6 mL/kg)、适当高PEEP通气策略和相对保守液体等治疗,3例患儿中存活2例,死亡1例.结论 儿童危重甲型H1N1流感患儿,突然咳嗽加重和呼吸急促时,应高度怀疑ARDS.及时氧疗及呼吸支持,保守液体管理,预防继发感染等可能是关键治疗措施.需要积累更多病例资料来明确危重甲型H1N1流感特征和评价救治手段.     

儿童危重甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征的临床特征与救治

目的 了解儿童危重甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的临床特点,探讨救治措施.方法 前瞻性观察上海交通大学附属儿童医院收治的3例危重甲型H1N1流感的临床表现、化验检查、诊断、治疗转归.结果 实时RCT-PCR检测3例患者均为甲型H1N1流感感染.以发热、咳嗽起病,全身性炎症反应相对轻.病程4～6 d病情突然恶化,出现口唇发绀,呼吸急促.X线片显示双肺多叶渗出或弥漫性炎症阴影.入院时已发展为ARDS.采用奥司他韦,小潮气量(6 mL/kg)、适当高PEEP通气策略和相对保守液体等治疗,3例患儿中存活2例,死亡1例.结论 儿童危重甲型H1N1流感患儿,突然咳嗽加重和呼吸急促时,应高度怀疑ARDS.及时氧疗及呼吸支持,保守液体管理,预防继发感染等可能是关键治疗措施.需要积累更多病例资料来明确危重甲型H1N1流感特征和评价救治手段.     

儿童危重甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征的临床特征与救治

目的 了解儿童危重甲型H1N1流感合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的临床特点,探讨救治措施.方法 前瞻性观察上海交通大学附属儿童医院收治的3例危重甲型H1N1流感的临床表现、化验检查、诊断、治疗转归.结果 实时RCT-PCR检测3例患者均为甲型H1N1流感感染.以发热、咳嗽起病,全身性炎症反应相对轻.病程4～6 d病情突然恶化,出现口唇发绀,呼吸急促.X线片显示双肺多叶渗出或弥漫性炎症阴影.入院时已发展为ARDS.采用奥司他韦,小潮气量(6 mL/kg)、适当高PEEP通气策略和相对保守液体等治疗,3例患儿中存活2例,死亡1例.结论 儿童危重甲型H1N1流感患儿,突然咳嗽加重和呼吸急促时,应高度怀疑ARDS.及时氧疗及呼吸支持,保守液体管理,预防继发感染等可能是关键治疗措施.需要积累更多病例资料来明确危重甲型H1N1流感特征和评价救治手段.     

Evidence of viremia in 2 cases of severe pandemic influenza A H1N1/09

The recent pandemic of the 2009 pandemic influenza A (H1N1) infrequently caused severe disease. We describe 2 cases of 2009 H1N1 influenza with rapid progression resulting in respiratory failure and need for prolonged intensive care support. Real-time polymerase chain reaction amplification for influenza A (using a Centers for Disease Control and Prevention protocol) and the 2009 H1N1 influenza (using an in-house protocol) was performed on serial respiratory and serum specimens from both patients collected over 3 weeks. Both patients repeatedly demonstrated 2009 H1N1 influenza in respiratory specimens. Evidence of influenza A viremia was also detected in both cases, although it was confirmed as 2009 H1N1 influenza in only one. The presence of viremia in cases of severe 2009 H1N1 influenza has potential prognostic and therapeutic implications. Detection of viremia may be useful as a predictive marker for severe disease. Antiviral agents with low serum levels may be ineffective if administered to patients with influenza viremia.     

深圳地区儿童呼吸道感染人类偏肺病毒检出及鉴定

目的 应用呼吸道感染常见病毒快速筛查技术检测人类偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV),并对检出的hMPV进行分子生物学鉴定.方法 采用Luminex 100多功能悬浮点阵检测技术和多重PCR技术同时筛查检测呼吸道合胞病毒、流感病毒、人类偏肺病毒等7种病毒、11个亚型.人类偏肺病毒的鉴定采用hMPV核蛋白基因特异性片段PCR扩增、核酸测序,并进行进化树分析.结果 47份临床标本共筛查出病毒19株,检出率40.2%(19/47),其中呼吸道合胞病毒8份、占检出病毒的42.1%(8/19),流感病毒7份(占36.8%),副流感病毒、鼻病毒、柯萨奇病毒、人类偏肺病毒各1份(占5.3%).检出的这例人类偏肺病毒为深圳地区首例,经hMPV核蛋白基因特异性片段核酸序列分析,其与hMPV日本株、北京株、泰国株的同源性＞98%.进化树分析表明深圳株的病毒核蛋白基因与北京株、日本株、泰国株等在同一基因进化簇中.结论 人类偏肺病毒可能是儿童呼吸道感染的主要病毒之一,应引起临床的重视.多功能悬浮点阵和多重PCR技术对病毒感染件疾病的快速筛查具有实用价值,尤其在解决流行病病原学分析方面具有重要意义.     

甲型H1N1流感死亡病例三株病毒分离株血凝素基因测序分析

目的 对长沙市3株甲型H1N1流感死亡病例病毒分离株HA基因的来源和变异情况进行研究.方法 对长沙市的3例甲型H1N1流感死亡病例的鼻/咽拭子标本进行RT-PCR检测和流感病毒分离,利用WHO推荐的测序引物和CEQTM8000 Genetic Analysis System对3株甲型H1N1流感死亡病例病毒株[A/湖南开福/SWL4142/2009(H1N1),A/湖南长沙/SWL4346/2009(H1 N1),A/湖南芙蓉/SWL4224/2009(H1N1)]HA基因进行测序,测序方法为末端标记循环法(Dye Terminator Cycle sequencing),测序结果提交至GenBank,并用ClustalX和Mega4.1软件对测序结果进行氨基酸比对分析和构建进化树.结果 A/湖南开福/SWL4142/2009(H1N1),A/湖南长沙/SWL4346/2009(H1N1)和A/湖南芙蓉/SWL4224/2009(H1N1)3株病毒株HA基因序列分别与甲型H1 N1流感病毒A/NewYork/3502/2009(H1N1),A/Shanghai/71T/2009(H1N1)和A/Chita/01/2009(H1N1)分离株高度同源,同源性为99%,与国内甲型H1N1流感病毒株A/Sichuan/1/2009(H1N1)核苷酸同源性在99.5%以上;进化树分析显示包括3株病毒株在内的甲型H1N1流感病毒与A/Swine/Indiana/P12439/00亲缘关系近,但与人季节性A流感病毒(H1N1)、禽流感亲缘关系较远.与A/Swine/Indiana/P12439/00 HA基因比较发现:3株病毒株HA基因分别有28、30、27个氨基酸发生变异,但3株病毒株在21个重要抗原位点中只有一个R53K氨基酸替换;对全球364条甲型H1N1流感病毒HA基因序列进行多重比对发现有119个非保守氨基酸位点,其中5个位于重要抗原位点.结论 3株病毒株和其他甲型H1N1流感病毒HA基因可能由北美猪流感病毒变异而来;3株病毒株HA基因与国内外甲型H1N1流感病毒高度同源,同全球绝大多数甲型H1N1流感病毒一样处于稳定状态.     

2013年宜春市甲型H1N1流感病毒分离鉴定及HA基因分子进化分析

目的 对2013年江西省宜春市甲型H1N1流感病毒HA基因序列及其编码的氨基酸序列进行分子进化分析,为防控甲型H1N1流感大流行和常规监测提供科学根据。方法 随机选择11株2013年宜春市疾病预防控制中心流感监测实验室分离到的甲型H1N1流感病毒毒株,提取病毒RNA,One-step RT-PCR扩增HA基因并双向测序。以世界卫生组织疫苗推荐株A/California/07/2009(H1N1)(GenBank:CY121680)和几株国内外近几年分离的流感甲型H1N1毒株的HA基因为参考序列,采用DNAStar 7.0和Mega 5.0软件对HA基因及其编码的氨基酸序列进行比对,绘制分子进化树,进行HA变异分析。结果 2013年宜春市11株所测甲型H1N1流感病毒与疫苗推荐株亲缘性较近,进一步参考几株国内外近几年分离到的流感甲型H1N1毒株,HA没有发生较大变异;其HA基因序列二硫键、糖基化位点未发生变异;尽管有7株毒株同时在抗原决定簇区A区和受体结合位点130环或其附近发生单个位点氨基酸替换变异,但未形成流行病学变异新种。结论 目前的甲型H1N1流感疫苗仍对人群有保护作用,而抗原决定簇和受体结合位点的变异提示仍需要密切关注甲型H1N1流感的再次流行。     

2009-2010年浙江省金华市甲型H1N1流感确诊病例流行病学和临床相关特征分析

目的了解浙江省金华市2009-2010年甲型H1N1流感流行病学和临床相关特征,为甲型H1N1流感防治工作提供参考依据。方法收集金华市2009-2010年甲型H1N1流感监测资料和现场流行病学调查资料,使用描述流行病学方法分析甲型H1N1流感确诊病例的"人群、地区、时间"分布,以及重症(危重)病例既往慢病史、并发症、转归等相关临床特征。结果 2009-2010年金华市共报告甲型H1N1流感确诊病例687例,累计报告发病率为13.5/10万,其中轻症579例,重(危重)病例108例,死亡6例,分别占84.3%、15.7%和0.9%。病例多集中在经济较发达、人口流动较频繁的县(市、区),发病人群以儿童、青少年、学生为主。在不同年龄组的重症(危重)病例中,危症病情发生率不同(χ2=7.718,df=2,P0.05);既往有慢病史有31人,占28.7%,与既往无慢病史者相比,有慢病史者较易发生危症病情(χ2=6.651,P0.05);肺炎、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)等为重病(危重)病例主要并发症。结论 2009-2010年金华市甲型H1N1流感以青少年儿童、轻型感染为多见;甲型H1N1流感病例临床严重性存在年龄分布差异,有慢性疾病史是危重病例发生的危险因素,肺炎、呼吸衰竭、ARDS为甲型H1N1流感主要并发症。     

48例儿童甲型H1N1流感病例临床分析

目的探讨儿童甲型H1N1流感患者的临床特征和治疗特点。方法回顾分析广东省人民医院2009年9月19日～12月30日收治的48例住院儿童甲型H1N1流感病例的临床资料,总结其临床特征及治疗经验。结果 14例为轻症患儿,30例为重症患儿,4例为危重症患儿。48例确诊病例均为本地发病者,其中10例有明确的甲型H1N1流感患者接触史。表现为发热（100%）,咳嗽（93.8%）,气促（35.4%）,喘息（25%）,呼吸困难（4.16%）,腹泻（12.5%）;50%患儿合并肺炎,2例并发心肌炎,5例患儿合并胸腔积液,其中2例出现呼吸衰竭;75%患儿白细胞正常或减低,45.8%患儿有肌酸激酶（CK）增高。按照卫生部《甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）》给予奥司他韦抗病毒、预防感染、吸氧、营养心肌及对症支持治疗,积极治疗基础疾病,必要时给予呼吸机支持、胸腔穿刺引流,所有患儿均痊愈。结论甲型H1N1流感患儿临床表现以呼吸系统症状为主,肺炎是常见并发症,少数患儿合并胸腔积液,甚至出现呼吸衰竭;接近半数患儿伴有不同程度心肌酶损害,少数并发心肌炎;尚未发现神经系统并发症;奥司他韦治疗敏感,采取综合治疗预后良好。