CD44介导的透明质酸促进巨噬细胞的吞噬功能

目的研究透明质酸（HA）对巨噬细胞吞噬功能的影响及其机制.方法用免疫细胞化学法标记CD44.在噬动轨迹实验中,用图像分析仪测量细胞吞噬后在其周围形成的无颗粒区面积,扫描电镜下观察巨噬细胞形态.在吞噬荧光微珠实验中,计数吞噬的微珠,观察细胞内F-肌动蛋白的分布.在吞噬HA包被微珠实验中,计数吞噬的微珠,在扫描电镜下观察细胞形态,用激光扫描共焦显微镜分析吞噬HA包被微珠时细胞内Ca^2＋水平.用CD44阻断抗体处理后,观察细胞吞噬功能的变化.结果巨噬细胞表达CD44.吞噬细胞较圆,板状伪足和丝状伪足较短.在吞噬颗粒和微珠时,细胞膜出现杯状凹陷.在HA组,吞噬氯化金颗粒和荧光微珠的数目增多,吞噬荧光微珠处的F-肌动蛋白丰富.在包被HA微珠组,吞噬微珠的数目增多,吞噬处的Ca^2＋水平显著升高.阻断CD44后,细胞吞噬氯化金颗粒、荧光微珠和HA包被微珠减少.结论HA促进巨噬细胞的吞噬功能,CD44介导HA对巨噬细胞吞噬功能的作用.     

透明质酸在巨噬细胞的分布以及对细胞黏附和迁移的影响

目的 研究巨噬细胞的透明质酸(HA)分布以及HA对于巨噬细胞黏附和迁移,探讨HA的作用机制。方法 用聚集蛋白聚糖标记后,在光镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察巨噬细胞内外的HA分布。结果 巨噬细胞产生HA。静止细胞的HA多位于细胞表面、细胞膜下和核周。游走细胞内的HA主要分布在伪足、尾部和核周,细胞外的HA主要分布于伪足和尾部周围。巨噬细胞表面HA和底物HA增加细胞黏附,促进细胞迁移,但游离HA降低细胞黏附。结论 HA在巨噬细胞的分布有特征性。细胞自身产生的HA和底物HA促进巨噬细胞黏附和迁移,而游离HA降低巨噬细胞的黏附。     

邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响研究

目的:近期台湾地区食品及饮料中添加邻苯二甲酸酯类(塑化剂)的安全问题受到广泛关注,已有研究证实邻苯二甲酸酯类物质能影响人类生殖系统发育,但其对人体免疫系统影响尚不清楚。本文研究邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响,以期揭示其对人类健康的危害。方法:使用不同浓度邻苯二甲酸二丁酯体外处理小鼠腹腔巨噬细胞24小时,然后进行巨噬细胞对细菌E.coli以及诱导凋亡的小鼠胸腺细胞的吞噬实验,并检测其吞噬率和吞噬指数,从而评价其对巨噬细胞吞噬能力的影响。用流式细胞仪检测邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞表面吞噬相关分子CD11b、CD54、CD36、TLR4和CD64的影响;利用siRNA技术对吞噬相关受体CD36进行表达干扰,验证其在邻苯二甲酸二丁酯抑制巨噬细胞吞噬能力中的作用。结果:经过24小时体外处理,不同浓度邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力均有抑制作用,并且具有剂量依赖性。此外,邻苯二甲酸二丁酯能显著降低巨噬细胞清道夫受体CD36的表达。结论:研究结果证实邻苯二甲酸二丁酯通过降低细胞膜表面CD36表达从而抑制巨噬细胞吞噬能力。     

透明质酸与肿瘤淋巴转移的相互关系

HA是细胞外基质的主要成分之一。组织中的大部分HA经淋巴管运输 ,并在淋巴结内被巨噬细胞和内皮细胞摄取和降解。肿瘤细胞或受肿瘤细胞刺激的细胞产生大量的HA。HA受体介导HA对肿瘤细胞的附着、增殖和迁移的作用。肿瘤细胞自淋巴管向淋巴结转移依赖于HA的存在。HA激活淋巴结内的巨噬细胞 ,从而抑制肿瘤淋巴转移。HA靶向药物和转移抑制素可抑制肿瘤生长和转移     

5种沙眼衣原体分泌蛋白对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响北大核心CSCD

目的探索5种沙眼衣原体分泌蛋白在体外对小鼠巨噬细胞和树突状细胞吞噬功能的影响。方法原核表达蛋白GST-CT311、GST-GIgA、GST-cHtrA、GST-OmcBc和GST-Pgp3中,同时表达了衣原体膜蛋白GST-IncA作为对照,经谷胱甘肽巯基转移酶（GST）磁珠纯化、PreScission蛋白酶切除GST标签后得到蛋白CT311、GIgA、cHtrA、OmcBc、Pgp3以及IncA。取C3H/HeJ小鼠骨髓细胞制备巨噬细胞和树突状细胞,分别用100μg/ml和500μg/ml的蛋白质预处理巨噬细胞和树突状细胞,4h后加入荧光珠,1h后固定细胞,直接免疫荧光法计数每100个细胞吞噬荧光珠的平均数量（吞噬量）及每100个细胞中吞噬的细胞百分比（吞噬率）。结果高、低浓度蛋白质组对巨噬细胞及树突状细胞的吞噬率均无明显影响;与无处理组相比,LPS以及低浓度（100μg/ml）的各蛋白组对巨噬细胞和树突状细胞的吞噬量无明显影响;高浓度组（500μg/ml）的Pgp3、cHtrA及CT311预处理的巨噬细胞和树突状细胞吞噬量明显升高,GIgA、OmcBc以及IncA对巨噬细胞和树突状细胞的吞噬量无明显影响。结论在体外,沙眼衣原体分泌蛋白Pgp3、cHtrA及CT311可以促进巨噬细胞和树突状细胞的吞噬功能,这可能有助于沙眼衣原体在宿主体内的播散感染。     

链球菌蛋白对RAW264.7小鼠巨噬细胞免疫学活性的调节作用

目的:探讨链球菌蛋白对RAW264.7小鼠巨噬细胞免疫活性调节及其相关作用机制.方法:不同浓度的链球菌蛋白与RAW264.7小鼠巨噬细胞共同作用后,采用MTT 法检测细胞的增殖活化;吞噬中性红试验观察巨噬细胞的吞噬功能;生物化学法检测巨噬细胞上清液中TNF-α和IL-6 的含量;RT-PCR法检测细胞中TNF-α、IL-6和Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的mRNA表达情况;流式细胞术检测细胞表面TLR2和TLR4的表达强度.结果:链球菌蛋白对巨噬细胞的生长增殖和吞噬功能有较强的刺激作用(P<0.05),促进TNF-α和IL-6的表达和分泌(P<0.05),并可上调巨噬细胞表面模式识别受体TLR2和TLR4的表达(P<0.05).结论:链球菌蛋白通过刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞的增殖,增强细胞吞噬活性以及诱导细胞因子的产生等发挥其免疫调节作用.     

系统性红斑狼疮患者巨噬细胞表型和功能初步研究

为了比较健康者与SLE患者巨噬细胞表型和吞噬功能的不同,收集性别、年龄匹配的健康对照者及SLE患者外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,磁珠分选CD14+单核细胞,巨噬细胞集落刺激因子诱导7d,分化为成熟巨噬细胞。FACS检测巨噬细胞表面CD163表达。取健康人CD4+T细胞标记CFSE,在抗CD3、CD28抗体刺激下,以5∶1比例分别与SLE和HC巨噬细胞共培养4d,FACS检测CD4+T细胞增殖比例。紫外辐照Jurkat T细胞株诱导人来源凋亡细胞,将pHrodo Green标记的凋亡细胞(5∶1)与SLE和HC巨噬细胞共培养2h,FACS检测pHrodo+CD14+巨噬细胞的百分率。结果显示,与HC相比,SLE巨噬细胞CD163表达量显著下降;SLE巨噬细胞对CD4+T细胞增殖抑制能力显著降低;SLE巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬功能显著下降。这些结果提示SLE患者巨噬细胞表型、免疫调节能力和吞噬功能存在异常,可能参与其发病。     

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白4的生物学功能及其与过敏性疾病的关系

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域家族是一个影响Th1／Th2细胞分化的基因家族。T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4（TIM4）是TIM家族的一个成员,主要表达于树突状细胞和巨噬细胞。TIM4与TIM1结合后参与对Th2细胞的激活,影响机体的免疫功能：TIM4同时是一个黏附分子,其与磷脂酰丝氨酸结合后可介导巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬。另外,TIM4与儿童过敏性鼻炎,过敏性哮喘之间存在着遗传相关性,     

活细胞标记和流式细胞术应用于体外检测巨噬细胞吞噬活性的方法建立

目的:通过活细胞标记和流式细胞术的联合应用,建立一种方法研究体外巨噬细胞的吞噬活性。方法:研究采用活细胞示踪染料CFSE标记对照组巨噬细胞,对未标记CFSE的细胞使用免疫刺激剂LPS处理,两组细胞混匀后与预先超声处理过的Alexa594标记的大肠杆菌孵育,在一个体系中完成吞噬过程,流式细胞术检测双荧光信号来评价对照组细胞和LPS处理后细胞的吞噬活性。结果:对照组和LPS处理组巨噬细胞的吞噬率分别为48.6%和62.3%,LPS处理后巨噬细胞的吞噬活性明显升高,与文献报道一致。实验表明,通过活细胞标记区分,在同一体系中完成LPS处理和未处理细胞的吞噬活性检测是非常可行的。也正因为待比较吞噬活性的两组细胞处在同一个吞噬环境中,吞噬率反映的吞噬活性更为准确。结论:本研究应用活细胞标记和流式细胞术,成功建立了一种实现体外处理的巨噬细胞吞噬活性的检测方法,简便、准确、可信度高。     

LPSp辅佐HBsAg诱导机体产生特异性抗体的机制

目的:研究革兰阴性非致病性成团泛菌脂多糖(LPSp)作为佐剂促进乙型肝炎表面抗原蛋白(HBsAg)诱导小鼠产生抗-HBs抗体的作用机制。方法:在体外用LPSp HBsAg、HBsAg、LPSp、生理盐水分别致敏小鼠腹腔巨噬细胞,观察致敏细胞回输体内后诱导HBs抗体产生水平,检测巨噬细胞培养上清中TNF-α活性和NO浓度;观察4组巨噬细胞吞噬功能变化,并检测致敏巨噬细胞诱导局部淋巴结细胞分泌IL-4和IFN-γ的能力。结果:HBsAg LPSp致敏巨噬细胞促进小鼠HBs抗体产生,LPSp致敏的巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.05),释放TNF-α和NO水平增加(P<0.05)。LPSp HBsAg致敏巨噬细胞诱导局部淋巴结细胞释放IL-4水平升高(P<0.05),诱导IFN-γ水平与单纯HBsAg致敏组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LPSp的佐剂机制为参与活化巨噬细胞,增强巨噬细胞对抗原的吞噬、消化和处理能力;同时促进HBsAg致敏的巨噬细胞诱导淋巴结内淋巴细胞释放IL-4,增强HBsAg致敏的巨噬细胞诱导Th2淋巴细胞活化,促进B细胞产生抗体。     

冬凌草甲素增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用

目的：研究具有诱导肿瘤细胞凋亡活性的冬凌草甲素，促进巨噬细胞对因凋亡的肿瘤细胞的吞噬作用。 方法： DNA凝胶电泳检测UV照射（2.4 J/cm2, 4 min）的人组织淋巴瘤U937细胞凋亡；Giemsa染色，Hoechst 33258染色，镜下检测计数吞噬作用。 结果： UV照射（2.4 J/cm2, 4 min）诱导U937细胞发生凋亡，琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带。2.7 μmol·L^-1的冬凌草甲素具有增强U937分化的巨噬细胞对UV照射诱导凋亡的U937细胞的吞噬作用，并呈时间剂量依赖性，但对非特异性荧光颗粒的吞噬效果较弱。加入抗TNFα和抗IL-1β的抗体，培养12 h, 吞噬增强作用明显受抑制。冬凌草甲素在人外周血来源的巨噬细胞吞噬凋亡的U937细胞过程中同样发挥增强吞噬的效果。 结论： 冬凌草甲素可特异地增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用，其吞噬机制是通过诱导巨噬细胞TNFα和IL-1β的释放。     

动脉粥样硬化与巨噬细胞源性泡沫细胞的相关研究进展

动脉粥样硬化(AS)是一种由基因、行为、环境等多因素引起的病理症状,可造成血管闭塞,从而引发心肌梗塞、猝死等严重的急性冠状动脉性疾病。巨噬细胞是机体防御系统的重要细胞成分之一,具有内吞脂质、释放免疫介质等能力,与AS的发生发展关系密切。抑制巨噬细胞源性泡沫细胞中脂质聚积、减轻炎症反应可能对AS相关疾病的预防、治疗具有重大意义。本文综述了巨噬细胞及其吞噬氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)转化为泡沫细胞,以及药物对泡沫细胞形成过程的干预,说明巨噬细胞源性泡沫细胞是治疗AS相关疾病的关键。     

透明质酸及其受体对细胞运动的作用

透明质酸 (HA)是细胞外基质的主要成分之一。细胞外基质中的HA通过对基质装配产生影响 ,形成多孔性疏松的基质 ,从而促进细胞运动。细胞表面的HA不仅能够介导细胞与基质的初黏附 ,而且在细胞运动时可促进细胞与基质的部分去黏附。细胞内的HA通过与细胞内HA结合蛋白以及信号转导相关的酶相结合 ,作用于细胞骨架 ,调节细胞运动。HA与其受体CD4 4 ,RHAMM或Layilin结合 ,转导信号入细胞内 ,使细胞骨架的构型发生改变 ,并调节与细胞运动有关的蛋白水解酶的合成和释放 ,由此促进细胞的黏附和运动。     

漆黄素对巨噬细胞和T淋巴细胞的免疫调节作用

目的探讨漆黄素(Fisetin,FIS)对小鼠巨噬细胞吞噬功能、NO的释放及对T淋巴细胞体外活化、增殖的影响。方法无菌制备小鼠巨噬细胞悬液及淋巴细胞悬液;荧光微球结合流式细胞术(FCM)分析FIS对巨噬细胞吞噬作用的影响;Griess试剂盒检测巨噬细胞NO的释放;双色荧光抗体染色结合FCM,检测CD3+T细胞CD69的表达水平;CFSE标记技术检测T细胞增殖的情况。结果 2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/LFIS均能明显抑制巨噬细胞的吞噬微球的能力;FIS能抑制LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞的NO的产生(P<0.05);FIS对ConA刺激的T细胞表达CD69有抑制作用,并能有效抑制ConA诱导的T细胞增殖(P<0.01),且均呈剂量依赖性。结论 FIS能显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和分泌NO的能力,并能够抑制T细胞的活化和增殖,有望发展成为一种新的免疫抑制药物。     

尘粒对巨噬细胞自噬的影响

目的： 研究巨噬细胞吞噬尘粒后的自噬变化，探讨尘粒引起巨噬细胞自噬的机理。方法: 利用从肺部手术病人切除的支气管肺淋巴结，做石蜡切片和Wilder染色，观察组织结构变化。从大鼠腹膜腔取巨噬细胞，用碳粒处理，观察碳粒对巨噬细胞自噬功能的影响。将淋巴结和吞噬碳粒后的细胞做超薄切片，观察巨噬细胞内的吞噬体、自噬体和溶酶体的结构和分布。利用透射电镜和TUNEL染色法观察淋巴结尘细胞和吞噬碳粒细胞中的凋亡细胞。结果: 在成人淋巴结，巨噬细胞内的尘粒明显沉积，胶原纤维增生，微血管密度增加。在尘细胞和吞噬碳粒细胞内，除含有吞噬体外还含有较多的自噬前体、自噬体和自噬溶酶体。在自噬体内常含有线粒体、尘粒或碳粒。在尘细胞和吞噬碳粒后的细胞中都可见到TUNEL染色阳性细胞。透射电镜下可见凋亡细胞的核固缩或凋亡小体。结论: 尘粒沉积可引起巨噬细胞的自噬功能增强，并可出现凋亡。自噬对于巨噬细胞清除尘粒和损伤的线粒体具有重要作用。     

吞噬刺激素(Tuftsin)的抗肿瘤效应

1967年Fidalgo与Najjar发现一种IgG的特异分部可结合于中性粒细胞,从而刺激其吞噬活性。继后这一物质业已鉴定为一四肽-H·苏·赖·脯·精,OH。(因为发现这一物质的学者在波士顿Tufts大学工作,乃命名为Tuftsin,笔者暂译为“吞噬刺激素”)。它由脾脏产生,对大、小吞噬细胞具有多种刺激功能,如促进其移动、吞噬、吞饮、杀菌等,并能启动巨噬细胞的免疫功能。业已报导了遗传性吞噬刺激素缺陷综合征。本文报导其抗肿瘤效应。在给DBA小鼠体内接种L1210白血病细胞10~4个,实验组同时给予吞噬刺激素0.2μg。对照组的平均生存时间为10.1天,实验组则为12.0天,P<     

假体松动与磨损微粒

<正>假体与骨之间摩擦产生的磨损微粒激活巨噬细胞后,启动了由巨噬细胞、破骨细胞、成骨细胞和成纤维细胞等参与的级联反应。这一反应导致炎性递质的释放,进一步引起骨质的吸收和重建。无机微粒不能在体内降解,最终被排泄到细胞间隙,从而引起新一轮的循环,微粒吞噬-巨噬细胞激活-微粒排泄,这一恶性循环     

巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬与免疫调节

巨噬细胞,作为机体的专职高效吞噬细胞,在凋亡细胞的清除方面起着非常重要的作用,进而对凋亡细胞诱导的免疫反应也产生了举足轻重的影响。机体产生的自身抗原由巨噬细胞吞噬后向抗原特异性T细胞的提呈在免疫应答或维持自身免疫耐受中起着至关重要的作用。相反,凋亡细胞的吞噬通路异常则有可能导致系统性或器官特异性自身免疫性疾病的发生。本文综述了巨噬细胞吞噬凋亡细胞之后对机体免疫调节的影响,特别是凋亡细胞被吞噬之后在自身免疫性疾病与免疫耐受方面的影响。     

大鼠两型肺泡巨噬细胞吞噬煤粒的图像分析和扫描电镜研究

用微分干涉差显微镜、扫描电镜和图像分析技术,对大鼠两型肺泡巨噬细胞体外吞噬煤粒能力及吞噬方式做进一步研究。结果显示,球型细胞吞噬煤粒能力较扁平型细胞强。两型细胞均可伸出细长突起,捕捉细胞周围的煤粒,煤粒逐渐陷入,被细胞以内吞方式摄入胞体。还对单位时间内巨噬细胞摄入的煤粒,进行了定量测定,为细胞吞噬无机粉尘物质提供了一种新的研究方法和测量手段,也为尘肺发病机理研究提供一些形态学依据。     

B淋巴细胞吞噬功能研究进展

以往的观点认为只有巨噬细胞、单核细胞、粒细胞和树突状细胞是专职的吞噬细胞,而B细胞作为免疫系统的抗体产生细胞,虽然能够产生特异的免疫球蛋白与抗原结合,却不具备吞噬能力。但最近的研究指出硬骨鱼类（彩虹鳟鱼）和两栖类（爪蟾）的B细胞可以吞噬颗粒抗原,首次揭示了进化上较为原始的B细胞同样具有吞噬能力。众多研究提示哺乳动物B-1 B细胞很可能具有吞噬能力。