不同热缺血时间再灌注损伤对大鼠移植胰的影响

目的探讨不同热缺血时间再灌注对大鼠移植胰的损伤情况。方法6只正常SD大鼠为对照组,18只糖尿病SD大鼠随机分为WIR0组(热缺血时间0min,n=6)、WIR15(热缺血时间15min,n=6)和WIR30(热缺血时间30min,n=6)。WIR0组、WIR15组和WIR30组均行胰腺移植。观测各组再灌注前后血糖,再灌注后2h血清TNF-α和NO的含量、移植胰组织中SOD、MPO和MDA含量,组织学变化及细胞凋亡情况。结果(1)WIR0组和WIR15组较再灌注前血糖即下降,再灌注后WIR15组和WIR30组较WIR0组、WIR30组较WIR15组血糖高。(2)再灌注后WIR0组、WIR15组和WIR30组较对照组、WIR15组和WIR30较WIR0组、WIR30较WIR15组血清TNF-α含量高、NO含量低。(3)再灌注后WIR0组与WIR15组和WIR30组较对照组、WIR15组和WIR30组较WIR0组与对照组、WIR30组较WIR15组与对照组胰腺组织中SOD活性低、MDA含量高、MPO活性高。(4)再灌注后2hWIR0组与WIR15组和WIR30组较对照组、WIR15组较WIR0组凋亡指数高。(5)WIR30组供胰组织病理损伤最为严重。结论缺血再灌注损伤可导致移植胰细胞凋亡;在冷缺血180min的条件下,大鼠供胰的最大耐受热缺血时间为15min。     

大鼠无心跳供体热缺血损伤后供肝组织学与超微结构的动态变化

目的动态观察移植肝热缺血损伤后组织学与超微结构的变化特点，预测无心跳供体（NHBD）中供肝耐受热缺血的安全时限。方法实验动物按供肝热缺血时间分别为0、10、15、20、30、45、60min，随机分为7组。按各组条件分别作原位肝移植，动态观察单纯热缺血期和肝移植术后6h、24h、48h各组移植肝组织学、组织化学和超微结构变化规律。结果NHBD的供肝不仅发生热缺血阶段缺血缺氧造成的损伤，在移植肝复流后，也存在再灌注损伤，且再灌注期肝组织损伤的程度与热缺血时间长短有密切关系。热缺血30min以前，移植肝仅出现组织细胞的变性，未见明显坏死。45min组，肝组织可见小灶状的坏死，在小叶中央区首先发生。60min组，肝细胞坏死的范围扩大，呈片状或弥漫性分布；肝窦内皮细胞明显肿胀呈泡状或气球状，肝血窦阻塞，呈微循环障碍。结论大鼠供肝经受30min以内热缺血损伤，肝组织损伤处在可复性阶段。热缺血60min以后，呈现不可逆性的形态学改变。     

增加供肝的肝糖原贮备减轻心脏停搏大鼠供肝的热缺血再灌注损伤

目的探讨肝移植术前增加供肝的肝糖原贮备能否减轻心脏停搏大鼠供肝的热缺血再灌注损伤。方法雄性SD大鼠作为肝移植的供、受者被随机分为A、B、C三组。A组供者正常饮水；B组供者术前连续4d饮糖水；C组供者在B组的基础上于供肝获取前3～4h注射500g／L的葡萄糖。A、B、C三组再按供者经历的心脏停搏时间（心脏停搏60min、90min、120min和150min）各分为4个小组，行原位肝移植术并检测移植肝组织中肝糖原和ATP的含量；同时观察受者术后1周存活率以及血清丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的水平。结果B、C两组供肝的肝糖原贮备和ATP含量均明显高于A组（P〈0．01）；B-60min、B-90min、B-120min和C-90min、C-120min、C-150min组受者的1周存活率分别为80％、50％、1（）％和70％、60％、20％，部分受者可长期存活；B、C两组受者MDA水平明显低于A组，SOD水平明显高于A组（P〈0.05）。结论术前增加大鼠供肝的肝糖原贮备能明显减轻供肝的热缺血再灌注损伤，减少了术后原发性移植肝无功能的发生，提高了心脏停搏供肝移植术后的存活率。     

缺血后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨在体条件下缺血后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法采用SD大鼠原位肝移植模型,供肝冷保存时间100min,无肝期控制于18min以内,60只雄性健康SD大鼠随机分为3组,对照组12只,缺血再灌注损伤组和后处理组各24只。对照组开腹后仅游离肝周韧带;缺血再灌注损伤组受体大鼠供肝切除前仅以肝素化生理盐水经门静脉灌注;后处理组供肝植入后完全再灌注前,给予多次短暂复灌复停作为缺血后处理。缺血再灌注损伤组、后处理组受体一半（6只）于再灌注后2h留取血液及肝组织,另一半（6只）于再灌注后6h留取肝组织。对照组于关腹后相应时间留取血液及肝组织。各组分别检测肝功能,采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子Or．和中性粒细胞弹性蛋白酶。根据酶促反应原理,利用分光光度仪测定肝脏谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛、髓过氧化物酶、超氧化物歧化酶。肝组织HE染色后光镜下观察组织学变化。结果缺血再灌注损伤组和后处理组血清肝功能指标、炎性细胞因子水平及肝组织过氧化物含量均高于对照组（P〈0．05）,而后处理组较缺血再灌注损伤组则明显低（P〈0．05）;缺血再灌注损伤组和后处理组肝组织抗氧化酶活力显著低于对照组（P〈0．05）,而后处理组较缺血再灌注损伤组则明显高（P〈0．05）。结论缺血后处理对大鼠移植肝的缺血再灌注损伤有明显的保护作用。提高组织的抗氧化能力和降低炎性细胞因子水平可能是缺血后处理保护作用的机制之一。     

不同时间的缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的影响

我们通过观察不同时间的缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的影响,旨在探讨ＰＣ对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用所需要的适合的预处理时间。一、材料与方法１．动物模型：雄性ＳＤ大鼠６０只,体重１８０～２２０ｇ,参照Ｊａｅｓｃｈｋｅ和Ｍｅｔｚｇｅｒ法制备成右肝全部缺血、左肝部分缺血后再灌注大鼠模型［１］。２．预处理方案：本实验共设５组,每组１２只大鼠;假手术组（Ｓ组）：仅行假手术;缺血再灌注组（ＩＲ组）：肝脏持续缺血６０分钟,再灌注３０分钟;预处理组分为３组,在肝脏持续缺血之前分别进行５分钟缺血及５分钟的再灌…     

肝糖原贮备的变化对热缺血再灌注期大鼠肝储备功能的影响

目的探讨增加肝糖原贮备对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立大鼠肝热缺血再灌注模型。动物分组:(1)H组,于缺血前24h尾静脉注射25%葡萄糖(2mL/只,1次/6h);(2)L组,缺血前禁食24h,饮水不限;(3)缺血再灌注对照组(C组),建模前不注射葡萄糖,亦不禁食;(4)假手术对照组(N组)。H,L,C组动物于缺血45min,再灌注1/4h,1/2h和1h后取样测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)和吲哚氰绿代谢试验(ICGR15)、胰高血糖素负荷试验(GLT),同时取肝组织行光镜形态学观察。结果(1)肝储备功能(HFR):ICGR15在各个时点4组间差异有显著性,N组H组>C组>L组(P<0.01)。H,C,L组的ICGR15和GLT在组内各时点间差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。(2)肝酶学指标各时点4组间差异有显著性(P<0.05或P<0.01),N组0.05)。(3)肝脏病理组织学改变:H组明显轻于C组及L组,并接近N组,L组最严重。结论(1)预防性增加肝糖原贮备能拮抗热缺血再灌注损伤过程中肝储备功能的损害。(2)ICGR15,GLT较常规肝功能酶学指标能更早期、灵敏反映肝热缺血再灌注过程中肝储备功能的变化。     

硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的 评价硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和不同剂量硫化氢组(H2S1～3组),每组6只.S组仅暴露肝门,不夹闭动、静脉;IR组采用夹闭左、中叶肝蒂、门静脉和肝动脉支1h恢复灌注的方法制备大鼠肝缺血再灌注模型;H2S1～3组于再灌注前5min分别腹腔注射14、28、56 μmol/kg硫化氢钠.于再灌注6h时抽取下腔静脉血样并取肝组织,采用全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,采用二硫代二硝基苯甲酸法测定肝组织谷胱甘肽(GSH)含量,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与S组相比,IR组血清ALT和AST活性升高,肝组织GSH含量下降(P＜0.05);与IR组相比,H2S1～3组ALT和AST活性降低,肝组织GSH含量升高(P＜0.05);H2S1～3组肝病理学损伤较IR组明显减轻.结论 H2S可减轻大鼠肝缺血再灌注损伤.     

热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤后肾功能的影响

目的 探讨热缺血时间对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾功能的影响及与肾脏损伤分子1(KIM-1)的关系.方法 选取雄性C57BL/6小鼠36只,异氟烷吸入麻醉下阻断双侧肾蒂血管,建立双侧肾脏IRI模型.根据肾缺血时间将小鼠分为四组,即假手术组(Sham组)、阻断28 min组(28 Min组)、30 min组(30...     

亚甲蓝对兔肝缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨亚甲蓝对兔肝缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年新西兰大白兔24只,雌雄不拘,体重2.0～2.3 kg,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(I/R组)和亚甲蓝组(MB组).I/R组及MB组采用夹闭肝左外叶、中叶、右中叶及方形叶肝动脉分支40min再灌注60 min的方法制备肝缺血再灌注模型,S组仅游离相应血管.MB组于再灌注前20 min经耳缘静脉注射亚甲蓝5 mg/kg(用生理盐水稀释至5 ml),S组及I/R组给予等容量生理盐水.于缺血前即刻(T1)、缺血20 min(T2)、加min(T3)、再灌注1 min(T4)、再灌注5 min(T5)、30 min(T6)、60 min(T7)时记录MAP和HR.于T1,5-7时取股动脉血样1 ml,测定血清TNF-α及IL-6的浓度.分别于T1,6,7时取股动脉血样1.5 ml,测定血浆ALT及AST的活性.于T7时测定肝左叶组织SOD活性及MDA含量,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与S组比较,I/R组T4-7,时MAP降低,T7时HR降低,肝组织SOD活性降低,MDA含量升高,I/R组及MB组T3-5时血清TNF-α和IL-6浓度升高,T6,7时血浆ALT和AST活性升高(P<0.05或0.01);与I/R组比较,MB组T4-7时MAP升高,肝组织SOD活性升高,MDA含量降低,T3-5时血清TNF-α和IL-6浓度降低,T6,7时血浆ALT和AST活性降低(P<0.05或0.01).MB组肝组织损伤较I/R组减轻.结论 亚甲蓝可维持血液动力学稳定,减轻兔肝缺血再灌注损伤.     

乌司他丁对活体肝移植术患者心肌损伤的影响

目的 评价乌司他丁对活体肝移植术患者心肌损伤的影响.方法 择期活体肝移植术患者40例,年龄40～64岁,体重指数18 ～ 25 kg/m2,AHA心功能分级A或B级,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=20):对照组(C组)和乌司他丁组(U组).U组于麻醉诱导后30 min内静脉输注乌司他丁300 000 IU(溶于100 ml生理盐水),每4h重复静脉输注300000 IU,直至术毕.于切皮前即刻(T0)、无肝期30 min(T1)、新肝期30 min(T2)、术毕(T3)、术后4 h(T4)及24 h(T5)时,采集中心静脉血样,采用电化学发光免疫法分别测定血清氨基末端-脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)的浓度.计算T1-5时血清NT-proBNP、cTnI和CK-MB浓度的变化率,记录术中心血管活性药物使用情况及心血管事件发生情况.结果 与T0时比较,两组T2-5时血清cTnI、CK-MB和NT-proBNP的浓度升高(P＜0.05);与C组比较,U组T2-5时血清cTnI、CK-MB和NT-pro BNP的浓度降低(P＜0.05);C组cTnI、CK-MB和NT-proBNP浓度最大变化率为4.71±1.62、6.85±1.53、4.96±1.23,U组降低为3.26+ 1.51、4.56±1.62、3.67±1.02.两组心血管不良事件发生率和多巴胺使用率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 静脉输注乌司他丁可在一定程度上减轻肝移植术患者心肌损伤.     

肝移植术中应用S-腺苷-L-蛋氨酸对供肝热缺血损伤的影响

目的探讨术中S-腺苷-L-蛋氨酸（SAMe）加入UW液和血浆冲洗液对热缺血损伤供肝及其恢复的影响。方法建立10min热缺血大鼠肝移植模型，分为A组：UW液灌注＋乳酸钠林格氏液冲洗、B组：UW液灌注＋血浆冲洗、C组：SAMe加入UW液灌注＋血浆冲洗和D组：UW液灌注＋SAMe加入血浆冲洗4组，观察肝组织组织病理学变化和电子显微镜下超微结构变化，并检测血清AST和透明质酸。结果C组和D组术后24h血清AST均低于B组（P〈0．05）。A组术后3h和24h血清HA高于B组（P〈0．05），B组复流后3h及24h血清HA均高于C组和D组（P〈0．05）。组织病理学表现B组复流后3h和24h肝细胞损伤和微循环紊乱较C组和D组明显；超微结构表现，A组复流后3h线粒体肿胀，肝窦内皮细胞肿胀，细胞核不规则，可见内皮细胞凋亡，大部分区域肝窦状隙明显狭窄，内皮层结构模糊，红细胞淤积，受压变形，白细胞附壁，可见内皮层完整性破坏；复流后24h，可见线粒体嵴断裂，核融解。B组内皮细胞损伤较A组轻，C组和D组超微结构表现微循环紊乱和肝细胞损伤表现较B组轻。结论供肝切取术中UW液中加入SAMe灌注保存，血浆冲洗液中加入SAMe可改善热缺血供肝微循环，减轻缺血再灌注损伤，并减轻肝细胞热缺血损伤，有利于10min热缺血供肝功能的恢复。     

150例活体肝移植供肝的后台修整

目的 总结150例活体供肝的后台修整经验.方法 回顾性分析2007年2月至2008年5月间完成的150例活体供肝的修整资料.结果 150例供肝中,包含肝中静脉及尾状叶的左半肝3例,肝左静脉与肝中静脉成形;左外侧叶2例;带肝中静脉右半肝67例,肝右静脉与肝中静脉成形;不带肝中静脉右半肝78例.78例不带肝中静脉右半肝中23例未进行S_5、S_8静脉的重建,供肝血流恢复后S_5、S_8肝组织均有不同程度的淤血.其余55例用不同材料重建S_5、S_8静脉:新鲜尸体髂静51例,受体大隐静脉1例,受体曲张脐静脉1例,受体肝内门静脉1例,受体肝静脉1例.145例右半肝供肝中门静脉为C型的7例,均成形为一个开口.结论 HTK是活体供肝的最佳灌注、保存液,供肝流出道恰当的成形、重建不但可简化供肝植入的操作步骤,还可最大限度的保护有功能的肝组织,是受体术后顺利恢复的关键.     

热缺血期间持续通气对无心跳兔肺的保护作用

目的:研究热缺血期间持续通气对无心跳供者(NHBD)的肺的保护作用。方法:将12只日本大耳白兔作为供者，随机分为两组，在无肝素抗凝处理条件下处死动物，经历热缺血1h。对照组热缺血期间不给予通气，实验组热缺血期间给予持续通气，然后均以4℃ Euro-Collins液灌洗，冷保存2h。另取同种兔12只，建立离体兔肺灌注模型，对保存的兔肺进行再灌注。分别评价血流动力学、肺泡细胞生存能力、组织学改变、血液气体分析及湿干比。结果:实验组与对照组相比，肺血管阻力较低，肺泡细胞生存能力较高，肺血管内血栓数较少，动脉血氧分压较高，湿干比较低。病理学检查，实验组肺损伤程度较对照组轻。结论:热缺血期间的持续通气对无肝素抗凝处理的无心跳供者的肺具有明显的保护作用。     

活体右半肝供体的安全性

目的 探讨活体右半肝供体的安全性。方法 对2002年1月至2005年6月施行的13例活体右半肝移植中供体的资料进行回顾性研究。不阻断入肝血流,在肝中静脉右侧,用超声刀离断肝组织得到右半供肝。通过计算得到标准肝体积及残余左半肝的比例。结果 右半供肝切取术平均失血490ml,平均输血440ml。围手术期平均输入人血白蛋白85g。1例供体门静脉分为3支,2例供体右后与右前胆管汇入左肝管,1例左外与左内胆管先后与右肝管汇合成肝总管,术中处理恰当,门静脉左干血流及左肝管胆汁引流保持通畅。2例供肝轻度脂肪变。术后第1天肝功能均有不同程度损害,但术后1周恢复到接近正常水平。术后并发症包括1例腹腔内出血,2例切口脂肪液化和1例乳糜漏。所有供体恢复好并回到原工作岗位。结论 只要保证左半肝血管与胆管通畅,残余肝体积在30％以上及手术对残余肝无大的损伤,右半供肝切取是安全的。     

参附注射液对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的探讨参附注射液(Shenfuinjection,SF)对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法采用雄性SpragueDawley(SD)大鼠同种异体原位肝移植模型,60只SD大鼠随机平均分成对照组和SF处理组,移植肝脏再灌注3、6、24h取血及肝脏组织检测。结果SF组血清超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)水平明显高于对照组(P<0·05),丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、透明质酸(HA)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1(IL-1)、内皮素1(ET-1)水平和肝脏细胞凋亡指数明显低于对照组(P<0·05),肝脏组织形态学改变也轻于对照组。结论参附注射液对移植肝脏缺血再灌注损伤具有防治作用,可能的机制包括抑制枯否细胞激活和氧自由基产生,改善微循环,减少细胞凋亡。     

全肝血流阻断对胆道梗阻兔肝脏损伤的研究

目的　研究全肝血流阻断对胆道梗阻兔肝脏缺血 /再灌注损伤。方法　将 30只兔随机均分为 3组 :A组 (对照组 )、B组 (胆道梗阻组 )和C组 (全肝血流阻断组 )。组织气体分析仪持续测定兔肝组织氧压 (PtiO2 ) ;光镜观察肝脏病理改变 ;全自动生化仪测定血清总胆红素 (TBIL)丙氨酸氨基转氨酶 (ALT)。结果　B、C组在全肝血流阻断后 ,肝PtiO2 值均明显下降 ,再灌注 60min后 ,肝PtiO2 值仍未恢复 ,与缺血前PtiO2 值差异有显著性 (P <0 .0 5) ,且在再灌注 60min时 ,B组较C组肝PtiO2 值恢复更慢 (P <0 .0 5) ;B、C组肝缺血再灌注 2 4h的不同时相 ,ALT值均进一步升高 ,B组较C组升高更为明显。至第 7d ,B、C两组ALT值均恢复到近于正常值 ,肝细胞损伤的病理改变也恢复近似正常。结论　胆道梗阻时肝脏能耐受全肝血流阻断 (2 0min)所致的肝缺血再灌注损伤。     

灯盏花素预处理供肝减轻大鼠肝移植后早期缺血再灌注损伤

目的 研究应用灯盏花素对供肝进行预处理,减轻大鼠肝移植术后早期缺血再灌注损伤的作用.方法 以SD大鼠作为肝移植供、受者,采用随机数字表法将受鼠分为4组.A组和C组供肝未经灯盏花素预处理,B组和D组供肝经含20 mg/L灯盏花素的UW液预处理;A组和B组供肝冷缺血时间为30～40 min,C组和D组为12 h.术后检测各组受鼠的凝血功能、肝功能、血清血栓调节蛋白(TM)含量、凋亡蛋白酶-3 (Caspase-3)活性及核因子-kB(NF-kB)相对表达量,观察各组移植肝组织病理学变化和肝细胞凋亡情况.结果 术后3d,C组与D组受鼠死亡率分别为40.0％(8/20)和29.4％(5/17),差异无统计学意义(P＞0.05);术后4组间凝血功能无明显变化(P＞0.05).与C组比较,术后早期D组肝功能、肝组织病理学改变及肝细胞凋亡均明显改善(P＜0.01),血清TM含量、Caspase-3活性及NF-kB表达量均明显降低(P＜0.01).术后A组和B组的缺血再灌注损伤明显较轻,两组间上述指标的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 应用灯盏花素对供肝进行预处理,能够减轻大鼠肝移植术后由冷保存时间较长引起的缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制凋亡相关的信号通路和减轻肝脏微循环内皮细胞损伤有关.     

活体亲属部分供肝的切取技术

目的 探讨活体部分肝移植（LDLT）手术中，供者手术的安全性。方法 自1995年1月至今，对14例终末期肝病患者施行了LDLT手术。14例LDLT供者中，2例行扩大左外叶切除。10例行扩大左半肝切除（含肝中静脉），2例行右半肝切除（不含肝中静脉）。结果 仅1例供者术后拔除T管后出现胆漏，经引流后好转。对所有供者随访1个月-5年，均无不适，肝功能正常。结论 对于富有经验的医生来说，LDLT的供者手术是安全的。     

成人间活体扩大右半肝移植治疗急性肝功能衰竭

目的介绍成人间活体扩大右半肝移植治疗急性肝功能衰竭的临床经验。方法对1例42岁男性急性肝功能衰竭合并肝性脑病Ⅲ期患者行活体扩大右半肝移植治疗。其45岁姐姐为供者,CT评估供者包含肝中静脉的扩大右半肝体积为728．4cm^2（801g）,供肝／受者体重比为1．3％。供肝之肝右、中静脉整形后与受者整形后之肝右静脉行端-侧吻合;供受者门静脉、肝动脉行端．端吻合。供肝胆管整形后与受者胆总管行端-端吻合。结果供、受者手术均成功。供者术后恢复顺利,受者术后8h恢复意识,14d后丙氨酸转氨酶、总胆红素等指标首次下降至正常水平。术后16d曾出现转氨酶明显升高,给予甲泼尼龙1000mg冲击治疗后恢复正常。随访至今,供受者已健康生存8个月,均未出现胆管、肝动脉及静脉回流等并发症。结论扩大右半肝移植在技术上完全可行。能为成人患者提供足够重量的移植物,尤其对于急性肝功能衰竭患者具有重要意义,术前精确的影像学评估,熟练的肝切除和肝移植技术是确保该类手术成功的关键因素。