栉孔扇贝裙边糖胺聚糖对增殖的血管平滑肌细胞 c-myc和TNF-αmRNA水平的影响

目的 观察栉孔扇贝(Chlamys farreri)裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)内原癌基因c-myc mRNA、肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA水平的影响,以探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机理.方法建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的平滑肌细胞增殖模型,采用非同位素原位杂交方法测定SS-GAG对增殖的VSMC内c-mycmRNA、TNFαmRNA水平的影响.结果低、高剂量SS-GAG组c-myc、TNF-αmRNA水平明显低于模型组(P<0.01).结论 SS-GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc,TNF-α基因的表达均有抑制作用,且随着SS-GAG浓度的升高押制作用增强.     

扇贝裙边糖胺聚糖对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响(英文)

目的　研究扇贝 (Placopectamagellanicus)裙边中提取的糖胺聚糖 (SS GAG)是否如肝素一样抑制血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖。方法　采用胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)所诱导的大鼠胸、腹主动脉VSMC增殖模型 ,通过细胞计数、结晶紫染色及MTT比色法观察SS GAG对VSMC增殖的影响 ,并运用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测SS GAG对VSMC的增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板衍化生长因子 (PDGF)表达的影响。结果　SS GAG 5 0 ,10 0和 2 0 0mg·L- 1对 2 0 %胎牛血清和 5 0 μg·L- 1bFGF所诱导的VSMC增殖均有明显抑制作用 ,并能抑制VSMC增殖时PCNA和PDGF的表达。结论　SS GAG能抑制VSMC的增殖 ,该作用可能是通过抑制PDGF和PCNA的表达而实现的。     

扇贝裙边糖胺聚糖对OX-LDL致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的　研究扇贝裙边提取物糖胺聚糖 (SS GAG)对血管内皮细胞的保护作用 ,进而探讨其抗动脉粥样硬化 (AS)作用机制。方法　本研究采用氧化低密度脂蛋白 (OX LDL)建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株 (HUVEC ,CRL 2 4 80 )损伤模型 ,用MTT法和化学方法分别从细胞和分子水平观察SS GAG对血管内皮细胞增殖活性及细胞内一氧化氮 (NO)水平和内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)活性的影响。结果　OX LDL能明显抑制血管内皮细胞的增殖活性 (P <0 0 1) ,降低血管内皮细胞内NO水平及eNOS的活性 (P <0 0 1) ;用SS GAG(终浓度为 5 0 ,10 0 ,2 0 0mg·L-1)预处理后 ,能逆转上述效应 (P <0 0 1)。结论　OX LDL抑制血管内皮细胞的增殖 ,降低内皮型eNOS的活性 ,减少细胞内NO的生成 ;SS GAG对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤有保护作用。     

扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的内皮细胞释放血管活性物质的影响

目的:观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞产生血管活性物质的影响。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304建立H2O2诱导的内皮细胞损伤模型组、不同浓度的SS-GAG组以及正常对照组,用放射免疫法测定培养液中6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)的含量;用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)的含量。结果:与模型组比较,不同浓度的SS-GAG组均可使血管舒张因子6-keto-PGF1a、NO含量明显增加;缩血管因子TXB2、ET含量明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:SS-GAG可能通过增加舒血管因子、降低缩血管因子的分泌来减轻H2O2对内皮细胞的氧化损伤。     

扇贝裙边糖胺聚糖的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠抗氧化作用的研究

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)的体外抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠的抗氧化功能的影响。方法:用MTT法观察不同浓度的SS-GAG对体外培养的宫颈癌HeLa、人大肠癌LOVO、肺癌A549、神经胶质瘤U251等肿瘤细胞株增殖活性的影响;观察SS-GAG对小鼠接种S180后30d内的存活时间;通过黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸显色法等多种生化方法观察SS-GAG对荷瘤小鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,并与对照比较。结果:与对照比较,SS-GAG可明显抑制HeLa、U251细胞生长,对LOVO、A549细胞生长也有一定的抑制作用;SS-GAG能显著延长S180腹水瘤小鼠的生存时间,提高荷瘤小鼠的T-AOC、SOD水平,降低MDA含量(P<0.01或P<0.05)。结论:SS-GAG可抑制肿瘤生长,并有一定的抗氧化作用。     

扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中抗氧化酶、NO和细胞内Ca~(2+)的影响

目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)抗动脉粥样硬化作用机制。方法:将培养的U937细胞分为正常组、模型组和SS-GAG不同浓度组,除正常组外,其余组加入氧化低密度脂蛋白造模后给予相应浓度药物进行处理,分别采用不同方法测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和一氧化氮(NO)含量及Ca2+水平。结果:各组中SOD含量无显著性差别;SS-GAG组中GSH-Px活性和NO含量与模型组比较明显升高,而细胞内Ca2+水平则明显降低。结论:SS-GAG可能通过增强GSH-Px活性和NO释放,同时降低细胞内Ca2+水平而发挥抗动脉粥样硬化作用。     

扇贝裙边提取物抗动脉粥样硬化作用及其机理研究

目的 探讨扇贝裙边提取物（ESS）抗动脉粥样硬化（AS）作用,并研究其对血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响。方法 1.通过喂饲高脂饲料建立鹌鹑AS模型,观察ESS对血脂水平、组织中脂质含量及动脉粥样硬化斑块形成的影响。2.采用20％胎牛血清（FBS）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）所诱导的大鼠VSMCs增殖模型,通过细胞计数、结晶紫染色及MTT比色法研究ESS抑制VSMCs增殖作用,并运用免疫组织化学技术（LSAB法）观察ESS对增殖VSMCs的增殖细胞核抗原（PCNA）和血小板衍化生长因子（PDGF）表达的影响。结果 1.与模型组比较,ESS组动物主动脉、冠状动脉内膜AS斑块形成程度明显减轻（P<0.05、P<0.01）,血清总胆固醇（TC）、甘油三酯TC、TG含量均显著降低（P<0.05、P<0.01）。2.ESS各剂量组VSMCs数目及吸光度均明显少于模型组（P<0.05、P<0.01）,并能逆转VSMCs增殖时PCNA、PDGF的表达增强（P<0.01）。结论 ESS具有明显调血脂、抗AS作用,并能显著抑制VSMCs增殖。提示ESS的抗AS作用可能与其调血脂、抑制VSMCs增殖有关。     

扇贝裙边糖胺聚糖抗肿瘤作用和对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：研究扇贝裙边糖胺聚糖（SS-GAG）的抗癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：建立小鼠移植性S180实体瘤模型，观察SS-GAG的抑瘤率以及对荷瘤小鼠的体质量、肝质量、白细胞计数、脾指数、胸腺指数的影响，同时观察SS-GAG对荷瘤小鼠细胞免疫活性的影响。结果：SS-GAG可明显抑制S180实体瘤的生长，SS-GAG与环磷酰胺联用可使化疗药物的抗癌作用增强并能有效提升减少的白细胞；能显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和杀伤活性，增强荷瘤小鼠脾淋巴细胞的转化增殖和NK细胞活性。结论：SS-GAG可显著抑制肿瘤生长，与环磷酰胺联用时有减毒增效作用；并能增强荷瘤小鼠的免疫功能。     

氨氯地平抑制人血管平滑肌细胞增殖机制的研究

目的　观察氨氯地平对人血管平滑肌细胞（VSMC）丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）活性的影响。方法　取人乳腺下动脉培养VSMC,用bFGF刺激细胞增殖,观察氨氯地平对bFGF激活的MAPK活性的影响,用p42/p44磷酸化抗体蛋白免疫印迹法测定MAPK活性。 结果　bFGF对MAPK有显著激活作用,激活峰值出现在5～15 min,维持至3 h; 此活化作用被MAPK激酶的特异抑制剂PD98059抑制; 无论瞬时或持久的bFGF激活的MAPK活性均被氨氯地平抑制。 结论　氨氯地平通过MAPK信号转导途径抑制bFGF所致的细胞增殖。     

肿瘤坏死因子-α对大鼠肺成纤维细胞表达结缔组织生长因子的影响

目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠肺成纤维细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法一次性气管内滴注博莱霉素-A5制作肺纤维化模型,采用组织块法体外培养肺成纤维细胞;分为4组:对照组、TNF-α5,10,20μg/L组,采用免疫细胞化学技术和流式细胞术检测不同浓度TNF-α对大鼠肺成纤维细胞表达CT-GF的影响。结果与对照组比较,不同浓度的TNF-α均能够促进大鼠肺成纤维细胞表达CTGF(P<0.05),20μg/LTNF-α的促表达能力最强。结论 TNF-α可促进体外培养的大鼠肺成纤维细胞表达CTGF。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖及凝血酶受体mRNA表达的影响

目的通过建立凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对凝血酶诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对凝血酶受体(TR)mRNA的表达有何作用,旨在认识葛根素的作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。凝血酶及葛根素等各处理因素作用24h后,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TRmRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24h末达峰,且凝血酶浓度在0.1U/L～1.0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成;高浓度(1.5×10^-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TRmRNA上调。结论葛根素抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖及凝血酶受体mRNA表达的影响

目的通过建立凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对凝血酶诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对凝血酶受体(TR)mRNA的表达有何作用,旨在认识葛根素的作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。凝血酶及葛根素等各处理因素作用24h后,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TRmRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24h末达峰,且凝血酶浓度在0.1U/L~1.0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成;高浓度(1.5×10-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TRmRNA上调。结论葛根素抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响.方法:常规培养人脐静脉VSMCs,将培养的VSMCs分为0、50、100、200、500及1000 μmol/L Hcy,其中0 μmol/L Hcy组为对照组.当VSM-Cs细胞长满80%瓶底时,各组加入不同浓度的Hcy,继续培养细胞6h、12h、24h、36h、48h、72h后,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态,采用MTT法检测细胞的增殖活力.结果:当Hcy刺激VSMCs 12～48h时,VSMCs的细胞数逐渐增加,细胞的活力也持续增加(P<0.05);当Hcy的刺激时间达72h时,高浓度(1000 μmol/L Hcy)组的VSMCs活力的升高趋势有所减缓,细胞有损害表现.结论:高浓度Hcy可直接诱导VSMCs增殖;但随着刺激时间的增加,过高浓度的Hey对VSMCs表现出抑制和损害效应.     

低分子肝素纳米粒子抑制兔血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨低分子肝素(LMWH)纳米粒子抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用及可能的作用机制.方法 建立32只兔颈内静脉-颈动脉移植模型,并随机分为生理盐水灌注组(A)、LMWH灌注组(B)、生理盐水灌注+术后皮下注射LMWH组(C)、LMWH纳米粒子灌注组(D),每组8只.术后4周末截取移植静脉,行免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;并行RT-PCR检测移植血管单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板源性牛长因子(PDGF)基因mRNA的表达.结果 与A、B、C三组相比,D组的PCNA阳性细胞指数明显降低(P<0.05),其MCP-1、bFGF、PDGF基因mRNA的表达水平也低于另外三组(P<0.05).结论 LMWH纳米粒子通过抑制平滑肌细胞的增殖与迁移而抑制了血管移植后内膜增生.其作用机制可能是通过降低MCP-1、bFGF、PDGF基因mRNA的表达而实现的.     

葛根素对血管平滑肌细胞增殖及对c-fos蛋白和凝血酶受体mRNA表达的影响

目的:通过建立凝血酶(T)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对T诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对c- fos蛋白以及凝血酶受体(TR)mRNA表达的作用,旨在认识葛根素作用的分子机制。方法:以细胞计数法和流式细胞仪测定DNA含量,细胞周期分析观察T及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。T及葛根素等各处理因素作用2 4h后,免疫印迹法(Westernblot)检测c -fos蛋白表达,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT- PCR)检测TRmRNA的表达。结果:T对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在2 4h末达到峰值,且T浓度在0 .1～1.0U·L- 1有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制T诱导的细胞增殖、DNA合成以及VSMCc fos蛋白的表达;高浓度(1.5×10 - 3mol·L- 1)的葛根素可显著抑制T诱导的TRmRNA上调。结论:葛根素能抑制T诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c- fos蛋白有关,并部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

肝细胞生长因子及α—干扰素对肝炎患者血清中TNF水平的影响

通过对２５例应用ＨＧＦ，１０例应用α－ＩＦＮ治疗的肝炎患者进行行用药前后ＴＮＦ水平的检测，了解其作用机理。结果显示：ＨＧＦ治疗后肝炎患者血浆中ＴＮＦ含量明显低于治疗前，α－ＩＦＮ治疗后患者血清中ＴＮＦ水平较用药前明显升高。     

口腔癌患者血清VEGF、TNFα的测定及临床意义

目的研究血清血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子（TNFα）与口腔癌肿瘤生物学行为之间的关系。方法43例口腔癌患者分别用ELISA法、放免法测定外周血清VEGF、TNFα含量,并结合患者临床特征进行分析。13例健康查体者的测定结果作对照组。结果口腔癌患者组中血清VEGF,TNFα均显著高于对照组（P〈0.01）。在不同分化程度的肿瘤组织之间无显著性差异。结论血清VEGF、TNFα高于正常人,提示其在肿瘤的发生过程中起着重要作用,但两者表达与肿瘤分化程度之间无明显关联。     

丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响。方法高脂饮食法复制家兔动脉粥样硬化病理模型;HE染色并光镜观察主动脉病理学改变;MTT法分析体外培养的兔血管平滑肌细胞增殖水平;全自动生化分析仪测定主动脉组织中脂质含量;酶法测定SOD、MDA含量;放射免疫分析法测定IL-1β、TNF-α的含量;免疫组织化学法检测主动脉组织中PCNA的蛋白表达。结果丹皮酚(75、150 mg.kg-1)治疗给药(ig,6 wk)能减轻模型动物主动脉内膜增厚及泡沫细胞数量;使主动脉组织中脂质、脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等方面得到显著改善;并能显著抑制主动脉组织中PCNA蛋白的表达强度;丹皮酚(100~300 mg.L-1)可明显抑制体外培养的血管平滑肌细胞增殖反应。结论丹皮酚对血管平滑肌细胞增殖有明显抑制作用,可能是其降脂、减轻脂质过氧化反应以及炎性细胞因子含量等协同作用结果,并可能通过抑制PCNA的表达而调控动脉粥样硬化病变中的血管平滑肌细胞增殖周期。     

三氧化二砷抑制血管平滑肌细胞及单核细胞肿瘤坏死因子-α启动子活性（英文）

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对血管平滑肌细胞（VSMCs）及THP-1单核细胞体外转染的TNF-α基因启动子活性的调控作用。方法利用虫荧光素酶（luciferase）报告基因系统,构建含有人类TNF-α基因启动子的质粒DNA,经阳离子脂质体转染体外培养的VSMCs及THP-1,以LPS及Ang Ⅱ刺激并经不同浓度的As2O3处理后,通过检测luciferase的活性来观察启动子活性的变化。结果本实验发现：TNF-α启动子在VSMCs及THP-1中可高效稳定地表达,分别为阳性对照（CMV启动子）的58.3%和80.9%;而经LPS及Ang Ⅱ刺激的VSMCs和THP-1中,TNF-α启动子活性呈现明显上调（P〈0.05）。VSMCs中2-8μmol·L^-1、THP-1中1-4μmol·L^-1的As2O3对未受诱导的TNF-α启动子有抑制作用,更可显著抑制经LPS及Ang Ⅱ刺激后上调表达的TNF-α启动子活性,并呈剂量依赖关系（P〈0.05）。结论以上结果提示,As2O3对TNF-α启动子转录活性的抑制,提示其对促炎细胞因子在转录水平的潜在抑制作用及心血管系统中的潜在抗炎作用。