人β防御素3体内抑制耐甲氧西林葡萄球菌内植物生物膜感染的机制研究

目的明确耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)注入大鼠胫骨的骨髓腔后,应用人β防御素3(HBD-3)抑制耐药菌植入物表面生物膜感染的机制。方法将MRSA注入SD大鼠左胫骨骨髓腔中构建耐药植入物细菌生物膜感染的模型:各实验组(包括空白对照组,HBD-3组和万古霉素组,每组20只)髓腔感染24小时后腹膜内注射药物,对照组注射2 mL生理盐水,HBD-3组注射2 m L 8 g/mL(1 MIC)HBD-3,万古霉素组注射2 mL0.5 g/mL(1 MIC)万古霉素,每组分别在腹腔注射后第1,7,14和21天处死5只;激光共聚焦显微镜观察植入物表面上的生物膜和活菌的数量,免疫组化评估NF-κB和TLR-4的表达,ELISA法检测IL-10及TNF-。结果对照组白细胞数和中性粒细胞的百分比,以及生物膜形态和对照组的存活细菌的数目随时间逐渐增加,而HBD-3组和万古霉素组随时间下降(0.05)。HBD-3组NF-κB和TLR-4表达量在第1天增加,在第7天达到峰值,在第14天开始下降,每个时间点的相对差异均有统计学差异(0.05)。NF-B和TLR-4表达量各时间点在HBD-3组中较对照组和万古霉素组中均有统计学差异。IL-10及TNF-4的表达在对照组中均显著高于其它两组(0.05)。结论β防御素3可以通过调节炎症反应和免疫应答,抑制大鼠胫骨骨髓MRSA引起的耐药菌植入物生物膜感染。     

人β-防御素的研究进展

β-防御素是一类富含精氨酸,而且具有特殊结构的小分子阳离子多肽,是过去几十年里寻找新型抗生素的重要发现之一.对人类基因组序列的分析表明,人染色编码体的基因含有多达一百多种的β-防御素,它们是连接固有免疫和适应性免疫的重要因子.β-防御素不但对多种细菌、真菌、病毒等具有直接的杀伤作用,而且还与肿瘤发生、组织修复以及生殖成熟等生理过程密切相关.     

急性胆囊炎患者血浆β-防御素-3的检测及临床意义

目的:揭示急性胆囊炎患者血浆β-防御素-3浓度的变化,探讨其与急性胆囊炎患病危险性的相关性。方法:收集急性胆囊炎患者作为胆囊炎组,共82例,其中坏疽性胆囊炎15例,非坏疽性胆囊炎67例。收集同期健康体检者作为对照组,共50例。ELISA检测血浆β-防御素-3浓度。统计分析其与急性胆囊炎患病危险性的相关性。结果:t检验显示,胆囊炎组患者血浆β-防御素-3浓度(81.4±36.9)pg/ml显著低于对照组血浆β-防御素-3浓度(154.2±28.3)pg/ml(P<0.001),坏疽性胆囊炎患者血浆β-防御素-3浓度(64.2±24.1)pg/m1显著低于非坏疽性胆囊炎患者血浆β-防御素-3浓度(94.3±29.9)pg/ml(P<0.001)。Logistic回归分析显示,血浆β-防御素-3浓度是罹患急性胆囊炎(OR=0.483,95%CI=0.298～0.709,P<0.01)和坏疽性胆囊炎(OR=0.426,95%CI=0.239～0.648 P<0.01)的独立危险因素。ROC曲线分析显示,血浆β-防御素-3浓度预测罹患急性胆囊炎(曲线下面积=0.824,95%CI=0.712～0.896,P<0.001)和坏疽性胆囊炎(曲线下面积=0.836,95%CI=0.723～0.904,P<0.001)有显著预测价值。结论:急性胆囊炎患者血浆β-防御素-3水平降低,可能是急性胆囊炎的危险因素。     

急性阑尾炎患者血浆β-防御素-3的检测及临床意义

目的:揭示急性阑尾炎患者血浆β-防御素-3浓度的变化,探讨其与急性阑尾炎患病危险性的相关性。方法:收集急性阑尾炎患者作为阑尾炎组,共100例。收集同期健康体检者作为对照组,共100例。ELISA检测血浆β-防御素-3浓度。统计分析其与急性阑尾炎患病危险性的相关性。结果:阑尾炎组血浆β-防御素-3浓度(80.1±32.4)pg/ml显著低于对照组(151.3±27.0)pg/ml(P<0.01)。Logistic回归分析显示,血浆β-防御素-3浓度(OR=0.492,95%CI=0.211～0.843,P<0.01)是罹患急性阑尾炎的独立危险因素。ROC曲线分析显示,血浆β-防御素-3浓度预测罹患急性阑尾炎有显著预测价值(曲线下面积=0.824,95%CI=0.769～0.874,P<0.01),且判定血浆β-防御素-3浓度<121.4 pg/mL,对预测罹患急性阑尾炎有83.0%的灵敏度和78.0%特异度。结论:急性阑尾炎患者血浆β-防御素-3水平降低,可能是急性阑尾炎发病的危险因素。     

慢性牙周炎患者血浆β-防御素-3的检测及其临床意义

目的:揭示慢性牙周炎患者血浆β-防御素-3浓度的变化,探讨其与慢性牙周炎患病危险性的相关性.方法:收集慢性牙周炎患者作为牙周炎组,共78例.收集同期牙周健康者作为对照组,共40例.ELISA检测血浆β-防御素-3浓度.统计分析其与慢性牙周炎患病危险性的相关性.结果:协方差分析显示,牙周炎组血浆β-防御素-3浓度(87....     

人工关节假体周围感染与无菌性松动界膜组织中人β-防御素3的表达差异分析

目的探讨股骨颈骨折的滑膜组织、人工关节无菌性松动和假体周围感染的界膜组织中人β-防御素-3(HBD-3)的表达差异。方法 30例患者,其中因假体周围感染进行髋关节翻修的患者、因无菌性松动接受髋关节翻修的患者以及因股骨颈骨折接受髋关节置换的患者各10例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量聚合酶链反应(Realtime PCR)、免疫组化染色分析及免疫印迹分析(Western blot)进行假体周围界膜组织或滑膜组织中HBD-3表达水平的检测并进行统计学分析。结果 Realtime PCR发现,假体周围感染后界膜组织中HBD-3 m RNA的表达,明显高于无菌性松动界膜组织和股骨颈骨折滑膜组织中HBD-3的表达。与创伤性滑膜组织相比,细菌感染刺激引起界膜组织中HBD-3的释放增加约5倍以上;与非感染性的无菌性松动界膜组织相比,HBD-3的释放增加约2倍以上。免疫组化染色显示局部细菌炎症刺激条件下,与无菌性松动界膜组织相比,感染导致界膜组织中的成纤维细胞和成骨细胞分泌HBD-3增加。Westenblot显示,与非炎症组相比,葡萄球菌在局部定植引起组织中HBD-3蛋白水平显著提高。结论 HBD-3在感染性界膜组织和无菌性松动界膜组织之间表达差异显著。未来,HBD-3一个可行的临床应用可以通过术中界膜组织的病理活检,来区别人工关节假体周围感染和无菌性松动。     

大蒜素上调节β防御素3的表达

目的:探索大蒜素与β防御素3(HBD3)的关系及其在人体抗感染的免疫机制。方法:采用含大蒜素培养液(5 mg/L)培养肺癌A549细胞,通过RT-PCR、Western blot及免疫荧光染色等方法检测HBD3在不同培养时间后表达量的差别。结果:大蒜素作用第4小时HBD3的mRNA表达量增加,第12小时HBD3的蛋白表达量增加。结论:通过本研究可以推断,大蒜素除本身的杀菌作用外,对人体自身主动免疫防御能力的影响调节也是其发挥抗菌作用的重要机制。     

超声靶向微泡破坏技术及其在乳腺癌治疗方面的应用

超声靶向微泡破坏(UTMD)技术利用超声造影剂微泡(UCAs)作为载体,联合基因或药物治疗多种疾病,目前已表现出强大潜力。在乳腺癌治疗方面,低频超声辐照下微泡破裂产生的声孔效应及空化效应有效增加靶细胞内基因或药物浓度,增强对癌细胞杀伤力,具多重优点。但是,UTMD技术在实际应用中仍然面临许多问题。     

人β-防御素2联合乙肝疫苗对小鼠免疫效应的研究

目的:探讨人β-防御素2加强乙肝疫苗对小鼠免疫应答的作用。方法:采用乙肝疫苗2μg/次/只联合HBD2基因真核表达质粒pEGF-C1/HBD2 100μg/次/只,按间隔2周、共免疫3次的左后肢股四头肌肌肉接种方案免疫BALB/c小鼠,同时设立相应的对照。免疫后用双抗原夹心ELISA法测小鼠血清HBsAb水平。采用流式细胞仪检测脾脏CD4+T和CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值。应用CCK8试剂盒检测脾淋巴细胞在不同抗原刺激下的增殖反应。结果:pEGF-C1/HBD2质粒联合乙肝疫苗免疫小鼠抗体水平明显升高,CD4+T细胞百分率比其他免疫组都高,脾淋巴细胞体外增殖实验明显。与其他各免疫组相比,pEGF-C1空质粒联合乙肝疫苗免疫组抗体水平和淋巴细胞体外增殖情况及CD4+T细胞百分率都较低。结论:人β-防御素-2对乙肝疫苗在小鼠中的免疫功能有一定增强作用。     

卡介苗吸入对LPS致肺炎大鼠肺β-防御素mRNA的影响

目的探讨卡介苗（BCG）雾化吸入是否能增强肺炎大鼠活体内肺组织β-防御素-1、β-防御素-2的mRNA表达。方法采用RT-PCR方法研究肺炎时大鼠活体内β-防御素-1（RBD-1）、β-防御素-2（RBD-2）mRNA的表达，卡介苗雾化吸入时脂多糖所致肺炎大鼠活体内的肺组织RBD-1、RBD-2mRNA的表达。结果脂多糖（LPS）、卡介苗不能增强下呼吸道RBD-1mRNA的表达，但可增强RBD-2mRNA表达。结论通过卡介苗雾化吸入能增强机体表达内源性β-防御素-2，协助治疗呼吸道感染，其在诱导β-防御素方面的作用是一个值得进一步探索的研究领域。     

慢性牙周炎患者血浆β-防御素-2浓度的变化

目的:观察慢性牙周炎患者血浆β-防御素-2浓度的变化,揭示其与慢性牙周炎发病的相关性。方法:收集慢性牙周炎患者和同期牙周健康者各80例。ELISA检测血浆β-防御素-2浓度。统计分析其与慢性牙周炎发病的相关性。结果:经t检验,慢性牙周炎患者血浆β-防御素-2浓度(405.2±133.9)pg/ml显著低于牙周健康者(641.6±128.3)pg/ml(t=6.492,P<0.01)。经Spearman相关分析,慢性牙周炎患者血浆β-防御素-2浓度与牙周探诊深度(r=-0.482,P<0.01)、附着丧失(r=-0.498,P<0.01)和出血指数(r=-0.501,P<0.01)均呈显著负相关。Logistic回归分析显示,血浆β-防御素-2浓度(OR=0.415,95%CI=0.297～0.862,P<0.01)是罹患慢性牙周炎的独立危险因素。ROC曲线分析显示,血浆β-防御素-2浓度预测罹患慢性牙周炎有显著预测价值(曲线下面积=0.843,95%CI=0.774～0.894,P<0.01),且判定血浆β-防御素-2浓度<621.5 pg/ml,对预测罹患慢性牙周炎有81.3%的灵敏度和75.0%的特异度。结论:慢性牙周炎患者血浆β-防御素-2水平降低,血浆β-防御素-2水平降低可能是慢性牙周炎的危险因素。     

急性阑尾炎患者血浆β-防御素-2的检测及临床意义

目的:探索急性阑尾炎患者血浆β-防御素-2浓度的变化,探讨其与急性阑尾炎患病危险性的相关性。方法:收集急性阑尾炎患者作为阑尾炎组,共208例。收集同期健康体检者作为对照组,共104例。ELISA检测血浆β-防御素-2浓度。统计分析其与急性阑尾炎患病危险性的相关性。结果:t检验显示,阑尾炎组血浆β-防御素-2浓度(398.6±128.0)pg/ml显著低于对照组(629.1±47.2)pg/ml(t=6.470,P<0.05)。Logistic回归分析显示,血浆β-防御素-2浓度(OR=0.429,95%CI=0.251～0.795,P<0.05)是罹患急性阑尾炎的独立危险因素。ROC曲线分析显示,血浆β-防御素-2浓度预测罹患急性阑尾炎有显著预测价值(曲线下面积=0.817,95%CI=0.778～0.865,P<0.001),且判定血浆β-防御素-2浓度<612.4 pg/ml,对预测罹患急性阑尾炎有75.0%的灵敏度和72.1%特异度。结论:急性阑尾炎患者血浆β-防御素-2水平降低,血浆β-防御素-2水平降低可能是急性阑尾炎发病的危险因素。     

骨折手术部位感染患者血浆β-防御素-3的检测及其临床评价

目的:揭示骨折手术部位感染患者血浆β-防御素-3浓度的变化,探讨其与骨折手术部位感染危险性的相关性.方法:收集骨折手术部位感染患者18例和非感染患者103例.ELISA检测血浆β-防御素-3浓度.统计分析其与骨折手术部位感染危险性的相关性.结果:协方差分析显示,骨折手术部位感染患者血浆β-防御素-3浓度(64.1±26...     

血栓靶向性超声微泡治疗犬急性冠脉血栓

目的探讨自制血栓靶向超声微泡造影剂对犬急性冠脉血栓的溶栓作用。方法建立犬心脏左前降支急性血栓模型,经下肢股静脉恒速注射自制脂质血栓靶向微泡(TMB)或白蛋白微泡(AMB),同时予1 MHz、2.0 W/cm2超声(US)照射,记录前降支血流量变化;分别用图像分析及硝基四氮唑蓝染色的方法检测管腔残存血栓面积和心肌梗死范围。结果TMB US组血管再通时间及相应的残余血栓和梗死面积均显著小于AMB US(P<0.05);但仍然稍大于尿激酶(UK)组;而TMB UK US组上述指标则明显优于单纯UK组。结论在1 MHz超声作用下,自制血栓靶向性微泡对急性冠脉血栓的溶解作用显著优于人血白蛋白微泡。     

β-防御素-2与呼吸系统的免疫调节及呼吸道过敏性疾病

人类β-防御素(HBD)有6种,其中人体内HBD-2主要来源于呼吸系统,与呼吸道疾病的发生发展密切相关.本文综述了HBD-2在呼吸道免疫调节方面的作用,并简述其与呼吸道过敏性疾病的关系.     

侵袭性牙周炎患者血浆β-防御素-2的检测及临床意义

目的:揭示侵袭性牙周炎患者血浆β-防御素-2浓度的变化,探讨其与侵袭性牙周炎患病危险性的相关性.方法:收集侵袭性牙周炎患者作为牙周炎组,共56例.收集同期牙周健康者作为对照组,共35例.ELISA检测血浆β-防御素-2浓度.统计分析其与侵袭性牙周炎患病危险性的相关性.结果:协方差分析显示,牙周炎组血浆β-防御素-2浓度...     

靶向微泡在超声分子成像与治疗方面的研究进展

微泡（MB）是一种用于增强组织间对比度的超声造影剂,当特定的生物标志物附着在MB上时,就成了具有靶向成像及靶向治疗的功能化靶向微泡（tMB）。文章将逐一阐述tMB的分类与制备、在超声分子成像领域及疾病治疗领域的最新研究进展及对未来tMB发展方向进行展望。tMB在超声分子成像和治疗中有不同用途和潜力。tMB还需进一步阐明tMB复杂的生物学机制及肿瘤细胞-药物相互作用的机制,以达到最大程度地发挥tMB治疗的目的。tMB上配体的多样性使其进入临床的途径变得复杂,为了促进tMB的广泛使用,还需要就生产规范和临床使用标准达成共识。     

人体β-防御素hBD-3的cDNA克隆与鉴定

防御素是一类具有广谱抗微生物活性的小分子多肽,具有抗菌、抗病毒及杀伤肿瘤细胞的多功能效应,其效能强大,且至今尚未发现病菌株对它产生耐药性,有关防御素的基础和临床前应用研究已成为生物医学研究领域的热点之一,深受医学界、药学界瞩目,尤其引人注目的是新近发现的β-防御素.已发现3种人体β-防御素,hBD-1是Bensch等[1]于1995年从肾衰患者血透析液中分离获得的;hBD-2是Harder等[2] 于1997年从银屑病患者病损上皮中分离获得的; 2001年,Harder等[3]又从人体鳞癣皮肤中分离获得hBD-3.有关hBD-1 和hBD-2基因的克隆、表达及其调控已有许多研究报道[4],为开发新一类抗菌药物奠定了一定基础.hBD-3的发现为人体防御素的基础和应用研究注入了新的活力,进一步深入研究人体β-防御素hBD-3基因的表达及其调控机制,建立高效表达具有广谱抗菌活性的人体防御素的生物工程新方法、新技术具有极其重要的意义.本研究利用RT-PCR技术,成功克隆了hBD-3的cDNA片段.     

超声对金黄色葡萄球菌生物膜的体外破坏作用

BACKGROUND: Studies have shown that the ultrasound enhances the on bactericidal activity of antibiotics in an intensity-dependent manner, that is, the higher the ultrasound intensity, the greater its effectiveness.OBJECTIVE: To study the destructive effect of different intensities of ultrasound on Staphylococcus aureus and its biofilm.METHODS: Staphylococcus aureus biofilms were cultured in vitro using guide sheet culture method and divided into three groups for intervention. The biofilm in the control group received no treatment. The biofilm in the low-intensity ultrasound group was intervened by pulsed ultrasound with an intensity of 500 mW/cm and frequency of 200 kHz for 10 minutes. The biofilm in the high-intensity ultrasound group was intervened by continuous ultalsound with an intensity of 40 W and frequency of 1 MHz for 10 minutes. Bacterial colonies were counted using ultrasonic oscillation-live bacteria counting method. DNA and polysaccharide of the bacteria were respectively marked using propidium iodide and FITC-ConA. The molding of the bilfilm was determined using laser scanning confocal microscope.RESULTS AND CONCLUSION: The number of bacterial colonies in the high-intensity ultrasound group were lower than that in the control and low-intensity ultrasound groups (P < 0.05), and there were no significant differences between control and low-intensity ultrasound groups. There were no significant differences in the number and intensity of red fluorescence and green fluorescence between low-intensity ultrasound and control groups; however, the number and intensity of red fluorescence and green fluorescence in the high-intensity ultrasound group were significantly decreased compared with the low-intensity ultrasound and control groups. These results demonstrate that the low-intensity ultrasound cannot kill the bacteria and it has a tiny destructive effect on the biofilm of bacteria; however, the high-intensity ultrasound can effectively kill the bacteria and has a strong destructive effect on the bilfilm of bacteria.  中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

慢性牙周炎患者血浆β-防御素-3和血清CD、TNF-α检测的临床意义

目的:探讨慢性牙周炎患者血浆β-防御素-3和血清胞苷脱氨酶(CD)、TNF-α水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析、酶联法和生化法对40例慢性牙周炎患者血清β-防御素-3和血清CD、TNF-α的检测,并与35名正常健康人作比较。结果:慢性牙周炎患者血浆β-防御素-3水平非常显著地低于正常人组(P<0.01),而血清CD、TNF-α水平呈显著负相关(r=-0.3782、-0.4012,P<0.01)。结论:慢性牙周炎患者血浆β-防御素-3水平的降低和血清CD、TNF-α水平的增高可能是侵袭性牙周炎的危害因素。