卡那霉素延长给药时鸡基底乳头的损伤与修复

目的　了解卡那霉素延长给药时鸡基底乳头的超微形态变化。方法　将 3天龄罗曼雏鸡连续肌注卡那霉素 (2 0 0mg·kg- 1·d- 1) 10天后随机分组 :①经典施药组 :不再注射药物 ,于药毕后 1、3、7、10、15天时行ABR检测及基底乳头扫描电镜观察。②延长施药组 :继续肌注卡那霉素 ,于连续施药 13、17、2 0、2 5、3 0天时行ABR检测和基底乳头扫描电镜观察。结果　ABR检测结果显示 ,连续施药 2 0天内 ,鸡ABR阈值损失及恢复不受卡那霉素影响 ,与施药 10天即停药者非常相似 ;施药 2 0天后 ,鸡ABR阈值则再次明显升高。扫描电镜观察 :将鸡施与卡那霉素 10天完毕时 ,鸡基底乳头近端 40 %区域毛细胞完全破坏消失 ;其后虽继续施药 ,毛细胞已开始再生修复损伤 ,连续施药 2 0天内基底乳头再生毛细胞无明显受损 ,其形态发育与施药 10天即停药者基本相似 ;连续施药 2 5天时 ,则有部分再生毛细胞出现受损 ,连续施药 3 0天时 ,大部分再生毛细胞破坏消失。结论　鸡卡那霉素耳中毒后 ,卡那霉素的持续存在明显阻止了鸡基底乳头损伤的完全修复     

卡那霉素耳中毒后鸡基底乳头毛细胞神经连接再生

目的 探讨卡那霉素耳中毒后鸡基底乳头毛细胞神经连接(nerve connection)再生及其与听功能恢复的关系。方法 将3d龄罗曼鸡按200mg.kg~(-1).d~(-1)连续肌注卡那霉素10d,分别于施药8d,药毕后1、7、10、15、21、30、60d时行ABR检查,完毕后随即处死,取颞骨,行扫描及透射电镜标本制作及观察。基底乳头近端10％～25％区域为透射电镜观察部位。结果 ABR检查显示,施药10d完毕时,ABR议最大输出120dBSPL引出,停药后,鸡ABR阈值即开始恢复,药毕10d时,恢复已基本稳定。扫描电镜观察见,施药完毕时,基底乳头近端40％以近区域内毛细胞完全破坏消失。透射电镜观察见,施药后被破坏毛细胞所在位置处及其附近区域,未观察到有神经末稍(nerve terminals)存留。药毕1d时,损伤区域已有少数毛细胞再生,形态幼稚,部分再生毛细胞不仅获传入神经支配,亦获传出神经支配,并见突触复合结构,惟此时再生毛细胞的神经支配模式极为幼稚,药毕10d时,再生毛细胞传入神经支配已与正常对照相似。药毕2月时,毛细胞的传出神经支配亦基本成熟。结论 鸡卡那霉素耳中毒后,其基底乳头毛细胞神经连接的再生及成熟与其听功能的恢复同步。     

鸡卡那霉素耳中毒后听功能恢复不全的形态基础

目的　探讨鸡卡那霉素耳中毒后听功能恢复不全的形态基础。方法　将 3天龄罗曼鸡按 2 0 0mg·kg-1·d-1连续肌注卡那霉素 10天 ,分别于施药第 8天、停药后 1、7、15、30、6 0天时处死 ,对照组动物不给予任何药物。动物处死前先用半正弦波 (40 0 0Hz)刺激行ABR检查 ,完毕后取颞骨 ,行扫描电镜标本制作及观察。结果　鸡ABR阈移于施药完毕时达到极限 ,停药后即开始恢复 ,停药后 7天时 ,ABR阈值有明显恢复 ,停药后 15天时 ,其ABR阈值已接近正常 ,但直至停药后 2个月时 ,ABR阈值仍有 15dBSPL未能完全恢复。扫描电镜所见 ,施药完毕时 ,鸡基底乳头近端 4 0 %区域内毛细胞完全破坏消失 ,并见毛细胞再生修复现象 ,停药后 7天时 ,毛细胞形态有成熟 ,其表皮板增大 ,表面静纤毛丛排列成阶梯样 ,停药后 15天时 ,基底乳头损伤区域已基本修复 ,大多数再生毛细胞已基本成熟 ,但直至停药后 2月时其静纤毛丛极向仍未完全恢复正常。结论　鸡卡那霉素耳中毒后 ,基底乳头再生毛细胞静纤毛丛的极向未完全恢复可能是其听功能恢复不全的重要形态学基础     

卡那霉素延长施与时鸡听功能的变化

目的　了解鸟类耳中毒后氨基甙类药物外环境的持续存在是否影响其听功能的恢复。方法　将罗曼小鸡于生后第 3天开始按 2 0 0mg .kg-1.d-1连续肌肉注射卡那霉素 10天。然后再随机分组。经典施药组 :不再注射任何药物 ,于药毕后 1、3、7、10、15天时接受ABR检测。延长施药组 :继续按 2 0 0mg .kg-1.d-1肌肉注射卡那霉素 ,于连续给药 13、17、2 0、2 5、30天时接受ABR检测。结果　小鸡延长施药时 ,其ABR阈移于连续施药 10天时达到极限 (约 4 3dB) ;其后虽继续施药 ,鸡听功能已开始恢复。连续施药 2 0天内 ,鸡听功能的恢复与施药 10天即停药者非常相似 ;施药 2 0天后 ,鸡听功能出现下降趋势 ,至连续施药 2 5天时 ,鸡ABR阈值已显著高于施药 10天毕后 15天时 ,差异非常显著 ;连续施药 30天时 ,鸡ABR阈值明显高于连续施药 2 0天时 ,差异亦有统计学意义。结论　卡那霉素延长施与阻碍了鸡耳中毒后听功能的恢复。     

鸡卡那霉素中毒后EphrinA2蛋白表达与耳蜗毛细胞神经连接再生及重塑的关系

目的 探讨Ephrin A2在鸡卡那霉素中毒后耳蜗毛细胞神经连接再生及重塑过程中的作用.方法 66只新生罗曼鸡为实验对象.试验组48只,于生后3 d开始连续肌注卡那霉素200 mg·kg~(-1)·d~(-1),共用10 d,设施药完毕前2 d、完毕后1、3、7,15、21、30、60 d 8组.对照组18只,设3、13、43 d龄3组.不施与任何药物.所有动物按预定时间点处死,取听神经行Western印迹分析,处死前均作ABR测试.结果 对照组动物各时间点Eph-rinA2蛋白表达量基本一致.施药完毕前2 d及施药完毕后1 d时,试验组动物听神经组织中EphrinA2蛋白表达较对照组明显降低.施药完毕15 d后,EphrinA2蛋白表达明显升高,施药完毕30 d时,EphrinA2蛋白表达已与对照组基本相同.同时,实验组用药10天后ABR阈值达116.3±4.3 dB SPL,停药后3、7、10天时分别为112.0±5.2、101.5±4.3、94.3±4.8 dB SPL,10天后无变化.结论 鸡卡那霉素耳中毒后听神经组织中EphrinA2蛋白的表达与其耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑基本同步,提示EphrinA2在鸡卡那霉素耳中毒后耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑中可能有重要作用.     

卡那霉素耳中毒后鹌鹑耳蜗毛细胞损伤与再生的观察

４０天龄鹌鹑连续１０天肌注卡那霉素造成耳中毒后，分别于停药后１天或１、２、３、４和６周进行听神经动作电位测试及扫描电镜观察。发现停药后１天动物毛细胞大量破坏，听功能严重受损，同时还出现了新生毛细胞。随着时间推移，新生毛细胞逐渐增多，听功能也随之改善，直至停药后第６周耳蜗形态基本恢复正常时，高频听阈仍明显高于对照组。本实验结果表明，鹌鹑听毛细胞受损后几乎可完全再生，而且再生毛细胞具有感音功能，但功能改善明显迟于形态恢复。     

庆大霉素和卡那霉素耳中毒后雏鸡耳蜗毛细胞的再生

给２大龄纯种罗丝鸡分别肌注庆大霉素（ＧＭ）和卡那霉素（ＫＭ）１０天，于停药当天、第１、２、３和４周处死小鸡，取出内耳基底乳头（ＢＰ）用扫描电镜和光镜观察，发现从ＢＰ的基底到中部有广泛性损害，毛细胞损失率约占４０％，在１周后受损部位表皮板上出现丛生的有微绒毛的再生毛细胞，随恢复期延长，再生毛细胞表面积增大，动纤毛和静纤毛来长出，３至４周受损部位已完全被发育成熟的再生毛细胞填补，ＢＰ形态恢复。     

雏鸡基底乳头Fas蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的 :研究耳毒性药物致雏鸡内耳损伤过程中细胞凋亡与Fas蛋白表达的关系。方法 :应用卡那霉素 10 0mg/ (kg·d)皮下注射 ,连续 10d ,建立雏鸡内耳损伤模型。在雏鸡内耳损伤后 1、3、7、14、2 1d采用免疫组化方法、TUNEL法 ,分别对基底乳头Fas蛋白免疫反应阳性细胞和凋亡细胞分布进行观察。结果 :TUNEL阳性细胞主要分布在雏鸡基底乳头腔面毛细胞层 ,较高水平标记发生在停药后第 7天 ,停药后第 14天 ,TUNEL阳性细胞开始减少。Fas蛋白表达从停药后第 1天开始增高 ,停药后第 3天表达水平达高峰 ,随后逐渐下降。结论 :Fas蛋白在雏鸡基底乳头损伤后的高水平表达与毛细胞凋亡紧密相关 ,可能参与了损伤过程中的毛细胞凋亡调控。     

鸡卡那霉素耳中毒后听神经节Ephrin A2蛋白的表达

目的 探讨鸡卡那霉素耳中毒后耳蜗听神经节Ephrin A2蛋白的表达有无变化.方法 66只新生罗曼鸡分为实验组48只,于生后3 d开始按200 mg·kg-1·d-1连续肌肉注射卡那霉素10 d.再将其设为施药完毕前2 d、完毕后1、3、7、15、21、30、60 d 8个组.对照组18只,设3、13、43 d龄3个组.不施与任何药物.所有动物按预定时间点处死,取听神经组织行免疫组化荧光染色.结果正常对照组听神经节ephrin A2阳性染色细胞数多,呈梯度分布现象,各时间点无明显差异.实验组用药完毕前2 d、完毕后1、3、7 d组听神经节ephrin A2阳性染色细胞数较正常对照组明显减少,药毕后15 d时ephrin A2阳性染色细胞数较前明显增多,药毕后30 d时ephrinA2阳性染色细胞数已接近正常对照组.结论 鸡卡那霉素耳中毒后听神经节ephrin A2蛋白的表达随着耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑而有先明显降低后逐渐恢复正常的现象.     

卡那霉素诱导雏鸡基底乳头毛细胞凋亡现象的观察

目的 :重新评价卡那霉素损伤后雏鸡毛细胞死亡方式。方法 :6只 10天龄雏鸡给予卡那霉素 10 0 mg/ kg/ d皮下注射 ,连续 10天 ,造成毛细胞的损伤 ,另 2只雏鸡皮下注射等量生理盐水作正常对照 ,电镜半薄切片、 TUNEL原位标记技术观察雏鸡毛细胞损伤死亡方式。结果 :卡那霉素损伤后雏鸡基底乳头感觉上皮层腔面 TUNEL标记阳性细胞散在分布 ;半薄切片光镜观察发现受损伤的毛细胞体从上皮层腔面网状层挤出。结论 :细胞凋亡是雏鸡毛细胞损伤的一种重要方式 ,可能与后继毛细胞再生过程有关。     

Comparative study on the morphology and the composition of the otoliths in the teleosts

Conclusion. Saccular otoliths of teleosts were mostly larger than utricular otoliths, which might relate to the three-dimensional movement. The large and heavy otolith may be better suited in saccules of the bottom and reef fishes. The quantities of iron in lagenar otoliths were found to be lower than those of birds. The function of the fish lagena remains to be elucidated by further studies. Objective. To evaluate the morphological characteristics and the chemical composition of the otoliths in fishes as related to behaviour and habitat. Materials and methods. We studied the morphology of the otoliths of 18 genera of fishes (81 samples) divided into 3 groups: saltwater fish (13 genera), freshwater fish except for the carp family (3 genera) and carp family fish (2 genera). The otoliths and the living environments were compared. The chemical composition was analysed using a synchrotron X-ray fluorescence analyser. Results. Bottom fishes generally have larger saccular otoliths, and migrating fishes have smaller saccular otoliths. In comparing the bottom/reef fishes and the migrating fishes in salt water, the former tended to have larger saccular otoliths. In saltwater bottom fishes the tendency was found that the thinner the head, the larger was the saccular otolith. We found significant quantities of iron, zinc and manganese in the lagenar otoliths.     

Comparative study on the morphology and the composition of the otoliths in the teleosts

CONCLUSION: Saccular otoliths of teleosts were mostly larger than utricular otoliths, which might relate to the three-dimensional movement. The large and heavy otolith may be better suited in saccules of the bottom and reef fishes. The quantities of iron in lagenar otoliths were found to be lower than those of birds. The function of the fish lagena remains to be elucidated by further studies. OBJECTIVE: To evaluate the morphological characteristics and the chemical composition of the otoliths in fishes as related to behaviour and habitat. MATERIALS AND METHODS: We studied the morphology of the otoliths of 18 genera of fishes (81 samples) divided into 3 groups: saltwater fish (13 genera), freshwater fish except for the carp family (3 genera) and carp family fish (2 genera). The otoliths and the living environments were compared. The chemical composition was analysed using a synchrotron X-ray fluorescence analyser. RESULTS: Bottom fishes generally have larger saccular otoliths, and migrating fishes have smaller saccular otoliths. In comparing the bottom/reef fishes and the migrating fishes in salt water, the former tended to have larger saccular otoliths. In saltwater bottom fishes the tendency was found that the thinner the head, the larger was the saccular otolith. We found significant quantities of iron, zinc and manganese in the lagenar otoliths.