支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立

目的 目前国内对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全反映哮喘的病理生理特征.本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪.无创法检测时小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据.本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较.方法 根据动物模型和气道反应性检测方法不同,动物分为:①无创哮喘组;②无创对照组;③有创哮喘组;④有创对照组.采用卵白蛋白致敏和激发,建立BALB/c小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气道反应性.哮喘动物雾化吸入0.2～50 g/L倍增浓度的乙酰甲胆碱(Mch),测定相应浓度下的增强呼气间歇(Penh)值或气道阻力(RL)值等指标.将小鼠吸入Mch后RL或Penh增加2倍的激发浓度以PC100来表示.所有动物都行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分类计数.结果 无创哮喘组PC100均≤6.25 g/L,对照组PC100均≥12.5 g/L.其Log2(10PC100)值(5.36±0.84)显著低于对照组(7.97±0.82)(P<0.01).无创哮喘组从Mch浓度3.12 g/L开始,其Penh值明显高于对照组.有创哮喘组RL值从Mch浓度0.39 g/L开始就明显高于相应对照组(P<0.05).无创组与有创组的气道反应性相关系数R=0.96(P<0.01).无创哮喘组和有创哮喘组的嗜酸粒细胞分别为(54.00±5.96)%,(55.93±5.92)%,显著高于各自对照组的(0.38±0.52)%,(0.63±0.74)%(P<0.01).结论 本研究表明以Penh为主要测定指标的无创方法,可以成功检测哮喘小鼠气道高反应性.     

卡介菌多糖核酸对支气管哮喘小鼠气道反应性及气道炎症的影响

目的探讨卡介菌多糖核酸对哮喘小鼠气道反应性及气道炎症的影响。方法选择Balb／c小鼠,以卵白蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型,设立卡介菌多糖核酸组、正常组、哮喘组。卡介菌多糖核酸按剂量具体分为1μg,10μg,100μg亚组,均在第一次抗原致敏前7d腹腔注射给药。末次激发后48h采用美国Buxco公司小鼠整体体积扫描记法测定气道反应性,以乙酰甲胆碱各浓度激发时增强的呼吸间歇（Enhanced Pause,Penh）表示。以PC100[气道反应性升高为生理盐水（NS）值2倍时的Mch激发浓度]及Penh／NS％max综合评价气道反应性。收集支气管肺泡灌洗液,涂片后苏木素-伊红染色计数嗜酸粒细胞比例,肺组织病理检测。结果1μg组PC100（13．2±6．9）g／L、10μg组（11．8±5．58）g／L与哮喘组（5．97±1．73）g／L相比,P〈0．01表示差异有统计学意义;1μg、10μg组Penh／NS％max分别为（623．22±252．39）％、（519．71±200．41）％,显著低于哮喘组（1306．83±540．46）％,P〈0．01。10μg组BALF嗜酸粒细胞百分比为（42．75±7．44）％显著低于哮喘组（57．25±13．2）％,P〈0．01,1μg组、100μg组BALF嗜酸粒细胞百分比与哮喘组相比,差异无统计学意义。结论卡介菌多糖核酸可以显著抑制哮喘小鼠的气道高反应性及气道炎症。     

支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立

目的目前国内对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的评价多数仅立足于气道炎性指标,不能完全反映哮喘的病理生理特征。本所率先从国外引进了小动物无创检测和有创检测肺功能仪。无创法检测时小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测多只小鼠,具有较大的优越性,但能否取代有创法尚需更多的数据。本研究旨在建立无创检测小鼠气道高反应性的检测方法,并与有创检测方法进行比较。方法根据动物模型和气道反应性检测方法不同,动物分为:①无创哮喘组;②无创对照组;③有创哮喘组;④有创对照组。采用卵白蛋白(OVA)致敏和激发,建立BALB/c小鼠哮喘模型,生理盐水作为对照,分别用无创和有创的方法测定气道反应性。哮喘动物雾化吸入0.2～50mg/ml倍增浓度的乙酰甲胆碱(Mch),测定相应浓度下的增强呼气间歇(Penh)值或气道阻力(RL)值等指标。将小鼠吸入Mch后RL或Penh增加2倍的激发浓度以PC100来表示。所有动物都行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分类计数。结果无创哮喘组PC100均≤6.25mg/ml,对照组PC100均≥12.5mg/ml。其Log2(10PC100)值(5.36±0.84)显著低于对照组(7.97±0.82)(P<0.01)。无创哮喘组从Mch浓度3.12mg/ml开始,其Penh值明显高于对照组。有创哮喘组RL值从Mch浓度0.39mg/ml开始就明显高于相应对照组(P<0.05)。无创组与有创组的气道反应性相关系数R=0.96(P<0.01)。无创哮喘组和有创哮喘组的EOS(%)分别为(54.00±5.96)%,(55.93±5.92)%,显著高于各自对照组的(0.38±0.52)%,(0.63±0.74)%(P<0.01)。结论本研究表明以Penh为主要测定指标的无创方法,可以成功检测哮喘小鼠气道高反应性。     

卡介菌多糖核酸对支气管哮喘小鼠气道反应性及气道炎症的影响

目的 探讨卡介菌多糖核酸对哮喘小鼠气道反应性及气道炎症的影响.方法 选择Balb/c小鼠,以卵白蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型,设立卡介菌多糖核酸组、正常组、哮喘组.卡介菌多糖核酸按剂量具体分为1 μg,10 μg,100 μg亚组,均在第一次抗原致敏前7 d腹腔注射给药.末次激发后48 h采用美国Buxco公司小鼠整体体积扫描记法测定气道反应性,以乙酰甲胆碱各浓度激发时增强的呼吸间歇(Enhanced Pause,Penh)表示.以PC100[气道反应性升高为生理盐水(NS)值2倍时的Mch激发浓度]及Penh/NS%max综合评价气道反应性.收集支气管肺泡灌洗液,涂片后苏木素-伊红染色计数嗜酸粒细胞比例,肺组织病理检测.结果 1μg肛组PC100(13.2±6.9)g/L、10/μg组(11.8±5.58)g/L与哮喘组(5.97±1.73)g/L相比,P<0.01表示差异有统计学意义;1 μg、10 μg组Penh/NS%max分别为(623.22±252.39)%,(519.71±200.41)%,显著低于哮喘组(1 306.83±540.46)%,P<0.01.10 μg组BALF嗜酸粒细胞百分比为(42.75±7.44)%显著低于哮喘组(57.25±13.2)%,P<0.01,1 μg组、100 μg组BALF嗜酸粒细胞百分比与哮喘组相比,差异无统计学意义.结论 卡介菌多糖核酸可以显著抑制哮喘小鼠的气道高反应性及气道炎症.     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠Th1／Th2细胞因子及转录因子GATA-3表达的影响

目的通过观察香炯烟雾暴露后支气管哮喘（简称哮喘）大鼠Th1／Th2细胞因子及转录因子GATA-3表达的变化,探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制。方法48只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、烟雾暴露组、哮喘组、哮喘＋烟雾暴露组;建立慢性哮喘大鼠模型和哮喘大鼠香炯炯雾暴露模型,普通病理观察气道壁厚度的变化,酶联免疫吸附试验检测外周血和肺组织γ干扰素（INF-γ）和白介素4（IL-4）含量;免疫印迹检测肺组织GATA-3蛋白表达水平。结果①哮喘＋烟雾暴露组气道壁厚度[（18．34±0．87）μm^2／μm]较哮喘组[（15．72±0．82）μm^2／μm]和对照组[（8．52±0．58）μm^2／μm]均明显增加,差异有统计学意义（P值均〈0．01）;②哮喘＋烟雾暴露组血浆和肺组织IL-4含量[（34．07±6．11）ng／L]、[（1．41±0．31）ng／L]较哮喘组[（22．57±4．32）ng／L]、[（0．80±0．14）ng／L]和对照组[（11．38±2．90）ng／L]、[（0．27±0．08）ng／L]均增高,差异有统计学意义（P值均〈0．05）;哮喘＋烟雾暴露组血浆INF-γ含量[（9．53±3．28）ng／L]较哮喘组[（58．83±19．57）ng／L]和对照组[（150．87±55．54）ng／L]均降低,差异有统计学意义（P值均〈0．05）,肺组织INF-γ含量[（0．48±0．10）ng／L]较哮喘组[（0．58±0．23）ng／L]差异无统计学意义;③哮喘＋烟雾暴露组GATA-3蛋白表达（1．29±0.08）较哮喘组（0．87±0．04）和对照组（0．45±0．06）均增加,差异有统计学意义（P值均〈0．01）。结论香烟烟雾暴露可以通过上调转录凶子GATA3蛋白表达,进而调控Th1／Th2偏移,在哮喘气道炎症及气道重塑的形成中扮演重要角色,为吸烟加重哮喘的免疫学机制之一。     

钙池操纵性钙通道抑制剂SKF96365对慢性哮喘小鼠气道重塑和气道高反应性的作用

目的:观察钙池操纵性钙通道抑制剂SKF96365对小鼠慢性哮喘模型气道重塑和气道高反应性的影响。方法:用鸡卵清白蛋白(OVA)致敏和激发小鼠,建立慢性哮喘模型,33只雌性BALB/c小鼠随机分为3组:对照组、哮喘组、SKF96365组,每组11只,其中SKF96365组于每次激发前30 min给予SKF96365(10mg/kg)干预。哮喘组和SKF96365组于第0、7、14 d腹腔注射(i.p)200μL致敏液(含OVA粉剂20μg、氢氧化铝凝胶2 mg);自第21天起,腹腔注射1%戊巴比妥钠(70mg戊巴比妥钠/kg小鼠体重)麻醉小鼠后,OVA(40μg)滴鼻(i.n),连续6周,每周3次,共18次。对照组则在相同时间给予相应剂量的生理盐水腹腔注射和滴鼻。最后一次激发后24 h,各组分别随机取5只小鼠用于检测组织病理学变化,另6只小鼠采用Buxco小动物肺功能仪检测气道高反应性。其中组织病理学检测计算杯状细胞(过碘酸希夫染色阳性,PAS+)、胶原细胞(Masson阳性)和平滑肌细胞(α-SMA阳性)阳染面积/支气管基底膜周长值来评估小鼠气道重塑;观察给予不同浓度乙酰甲胆碱雾化时的气道阻力(resistance index,RI)最大值,评估小鼠气道高反应性。结果:对照组未见PAS阳性染色区域,哮喘组和SKF96365组杯状细胞增生高于对照组(7.29±2.04,4.49±1.70 vs 0.00±0.00,均P0.01),且SKF96365组低于哮喘组(P0.05)。Masson染色显示哮喘组和SKF96365组上皮下胶原沉积高于对照组(9.23±1.41,7.30±1.33 vs 1.60±0.77,均P0.01),且SKF96365组低于哮喘组(P0.05)。α-SMA免疫组化显示哮喘组和SKF96365组平滑肌增生肥大高于对照组(4.54±1.05,3.15±0.57 vs 1.97±0.69,均P0.05),且SKF96365组低于哮喘组(P0.05)。当乙酰甲胆碱(Mch)≤6.25 mg/m L时,3组小鼠气道阻力无显著差异(P0.05),当25 mg/m LMch≥12.25 mg/m L时,哮喘组小鼠气道阻力明显大于对照组小鼠(P0.001),当Mch≥25 mg/m L时,哮喘组小鼠气道阻力大于SKF96365组(P0.05)。结论:采用SKF96365干预后,慢性哮喘小鼠气道重塑和气道高反应性指标均有改善,提示SKF96365可能对哮喘气道重塑和气道高反应性具有抑制作用。     

卡介菌-多糖核酸不同干预方式对哮喘小鼠气道反应性和气道炎症的影响

目的探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)不同干预方式对哮喘小鼠气道炎症和气道反应性的影响。方法选择Balb/c小鼠。以卵白蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型,设立正常组、哮喘组、BCGPSN干预组。BCG-PSN剂量为20μg/只,体积为60μl,均为末次激发后进行干预,根据干预方式分为肌肉注射组(im)和麻醉滴鼻组(in)。分别于末次激发后2、14 d采用美国Buxco公司小鼠整体体积扫描记法测定气道反应性,以乙酰甲胆碱各浓度激发时增强的呼吸间歇(Enhanced Pause,Penh)表示。以PC100[气道反应性升高为生理盐水(NS)值2倍时的Mch激发浓度]及Penh/NS%综合评价气道反应性。收集支气管肺泡灌洗液,涂片后苏木素-伊红(HE)染色计数嗜酸粒细胞比例,肺组织病理检测。结果BCG-PSN im组早期PC100为(9.48±3.06)mg/ml、与哮喘组(4.79±1.51)mg/ml相比P0.05,晚期PC100(4.96±1.88)mg/ml,哮喘组为(5.55±3.11)mg/ml,两组相比差异无统计学意义,BCG-PSN in组早期、晚期PC100分别为(12.39±4.89)mg/ml、(9.19±2.35)mg/ml,与哮喘组相比,均有统计学意义(P0.05),且晚期激发PC100 in组明显高于im组。哮喘组BALF中Eos%为(40.73±6.01)%、im组为(35.65±4.27)%,与哮喘组相比无明显差异,in组(30.98±5.45)%显著低于哮喘组(P0.05)。结论初步证实BCG-PSN对已造模成功的哮喘小鼠具有治疗作用。麻醉滴鼻相当于气道吸入BCG-PSN,对哮喘小鼠的作用效果与肌肉注射给药相当甚至更优。气道内给予BCG-PSN有望成为一种新的防治哮喘的方法。     

神经生长因子在实验性支气管哮喘小鼠发病中上调磷脂酶C-γ表达

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）小鼠下呼吸道及内脏感觉传人部位磷脂酶C-γ（PLC-γ）的表达,及神经生长因子（nervegrowthfactor,NGF）对PLC-γ在上述部位的调节作用,探讨NGF介导的信号转导通路在哮喘发病机制中的作用。方法BABL／C30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组及NGF阻断组。利用AniRes2005肺功能仪测BABL／C小鼠气道阻力,应用免疫组织化学方法和免疫印记法（Westernblotting）,观察PLC-γ在哮喘小鼠下呼吸道及内脏感觉传人部位的表达及NGF被阻断后PLC-γ表达水平的变化,Metamoph图象分析系统对结果进行分析。结果气道阻力检测结果显示,哮喘组小鼠较正常对照组气道阻力明显增高（P〈0．01）,NGF阻断组气道阻力均较哮喘组明显降低（P〈o．01）。免疫组织化学结果显示PLC在NGF阻断组小鼠肺组织（0．273±0．018）,C7～T5段脊神经节（0．158±0．012）,以及相应节段的脊髓后角内（0．168±0．022）表达明显低于哮喘组（0．423±0．023,0．351±0．018,0．368±0．014）（P〈0．01）。Westernblotting结果显示NGF阻断组肺（0．921±0．014）及C7～T5节段脊髓（0．835±0．023）PLC-γMOD值与8actinMOD值的比值明显低于哮喘组（1．476±0．017,1．251士0．019）（P〈0．01）。结论PLC-γ在哮喘小鼠肺、G～L节段脊神经节及相应的脊髓后角过表达,NGF上调哮喘上述部位PLC-γ的表达,提示NGF可通过调节肺内及内脏传入部位PLC的表达参与哮喘发病过程。     

沙美特罗／丙酸氟替卡松对支气管哮喘患者转化生长因子β1／Smad通路的影响

目的观察沙美特罗／N酸氟替卡松对中重度持续支气管哮喘（简称哮喘）患者转化生长因子p1（transforminggrowthfactor—β1,TGF-β1）／Smad通路的影响。方法中重度持续哮喘患者30例,对照组20例。哮喘组给予规律吸入沙美特罗／N酸氟替卡松50／250／xg,2次／d,持续6个月。酶联免疫吸附试验（ELISA法）定量测血清TGF-β1、Smad2表达,宝石能谱高分辨率CT（HRCT）扫描测量气道壁厚度／气道外径（T／D）、气道壁面积占气道总面积百分比（WA％）评估气道重塑程度。结果哮喘组（治疗前）血清TGF-β1（301．5±27．3）ng／L、Smad2（1182．1±50．6）ng／L与对照组TGF—β1（55．2±12．8）ng／L、Smad2（796．4±56．2）ng／L比较差异有统计学意义（t=8．52,t=5．90,P值均〈0.05）,哮喘组（治疗后）TGF-β1,（96．1±25．6）ng／L、Smad2（853．4±49．7）ng／L与哮喘组（治疗前）比较差异具有统计学意义（t=7．21,t=3．13,P值均〈O．05）,哮喘组（治疗后）血清Smad2与对照组比较差异无统计学意义（t=0．24,P〉o．05）;哮喘组（治疗前）T／D（23．66士4．06）％较对照组（19．79士3．37）％增加,差异有统计学意义（t=3．45,P〈O．05）,哮喘组（治疗前）wA％（69．24±6．03）‰值与对照组（51．67±4．55）％比较差异有统计学意义（t=3．77,P〈O．05）。规律吸入沙美特罗／丙酸氟替卡松6个月后,哮喘组（治疗后）T／D（20,43±3．00）％、WA％（58．40±3．85）％下降,与哮喘组（冶疗前）比较差异有统计学意义（t=2．96,t=3．05．P值均〈0．05）,哮喘组（治疗后）T／D与对照组比较差异无统计学意义（t=0．95,P〉0．05）,气道重塑减轻。结论哮喘患者气道重塑伴随血TGF-β1、Smad2蛋白的表达增加,规律吸入沙美特罗j丙酸氟替卡松可以通过减少血清TGF-β1、Smad2蛋白的表达,从而减轻哮喘患者气道重塑。调节TGF-β1／Smad通路可能是治疗哮喘气道重塑的新策略。     

不同激发方式对小鼠过敏性支气管哮喘模型的影响

目的探讨不同激发方式对小鼠过敏性支气管哮喘（简称哮喘）模型的影响。方法模型组用卵清蛋白致敏和激发BalB/c小鼠,第0天、第7天、第14天腹腔注射致敏,从第28天开始分别给予不同次数和方式的激发。根据激发方式的不同,随机分为5组,包括三次滴鼻激发组、二次雾化20min激发组、三次雾化20min激发组、三次雾化30min激发组、四次雾化20min激发组,每组12只。激发后48h采用整体体积描记法检测小鼠气道反应性,结果以增强的呼气间歇（enhanced pause,Penh）表示,测定肺功能后再用磷酸盐缓冲液对全肺进行支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞学分析。结果哮喘组气道反应性（Penh%）和BALF中嗜酸粒细胞比例（EOS%）与正常组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。三次滴鼻激发组EOS%和Penh%显著高于其他雾化激发组（P〈0.05）,其中BALF中EOS%三次滴鼻激发组（46.30±4.55）%,与二次雾化20min激发组（31.19±12.84）%、三次雾化20min激发组（29.00±12.33）%、四次雾化20min激发组（37.08±8.44）%相比有显著差异,与三次雾化30min激发组（41.17±8.78）%无显著差异。三次滴鼻激发组PC100[（3.75±1.79）g/L]和三次雾化30min激发组[（5.94±3.27）g/L]、四次雾化20min激发组[（5.19±1.88）g/L]有显著差异（P〈0.05）。三次滴鼻激发组激发过程中动物死亡2只,其余各组均无死亡。结论滴鼻和雾化激发均能成功建立哮喘模型,其中滴鼻激发建立的哮喘模型气道炎症及气道反应性升高更为显著。     

联合IL-5可溶性受体与IL-4突变体对支气管哮喘小鼠气道高反应性及IgE、IFN-γ水平的影响

目的通过观察IL-5可溶性受体（sIL-5Ra）及IL-4突变体（IL-4mutant,IL-4MT）对哮喘小鼠气道高反应性（airwayhyperresponsiveness,AHR）及IgE、γ干扰素（IFN-γ）水平的影响,探讨其潜在的临床应用价值。方法随机将50只BALB／c雌性小鼠分成5组,分别为正常对照组、哮喘组、IL-4MT治疗组、sIL-5Ra治疗组和IL-4MT联合sIL-5Ra治疗组（简称联合治疗组）。采用腹腔注射卵蛋白（ovalbumin,OVA）与氢氧化铝混悬液对小鼠进行致敏,卵蛋白雾化,建立小鼠哮喘模型,其中正常对照组用生理盐水替代。雾化前30rain,IL-4MT治疗组、sIL-5Ra治疗组及联合治疗组分别腹腔注射IL-4MT100μg、sIL-5Ra100μg、IL-4MT和sIL～5Ra各100μg,正常对照组与哮喘组用生理盐水替代。末次激发24h后,用不同浓度的氯化乙酰胆碱激发各组小鼠,测定其肺阻力,ELISA法观察比较各组血清及BALFIgE、IFN-γ水平变化,肺组织行HE染色,观察病理变化。结果与正常对照组相比,哮喘组肺阻力显著增加（P〈0．01）;与哮喘组相比,IL-4MT组和联合治疗组肺阻力显著降低（P〈O．05）,联合治疗组下降更明显;与sIL-5Ra治疗组相比,联合治疗组肺阻力显著降低（P〈O．05）。与正常对照组相比,哮喘组血清及BALF中IgE含量显著升高,IFN-γ含量显著下降（P〈O．01）;与哮喘组相比,联合治疗组血清及BALF中IgE含量显著下降,IFN-γ含量显著升高（P〈O．01）;与单独治疗组相比,联合治疗组血清及BALF中IgE含量显著下降,IFN-γ含量显著升高（Pd0．05）。与哮喘组比,单独治疗组与联合治疗组肺组织炎症细胞渗出、浸润及对气道上皮的炎性损伤明显减轻,联合治疗组减轻更明显。结论联合应用sIL-5Ra与IL-4MT可以明显减轻哮喘小鼠AHR,降低血清及BALF中IgE含量,同时升高IFN-γ含量,减轻气道炎症。     

IL-27对支气管哮喘患者血清干扰素γ、IL-33水平的影响

目的探讨1L-27对支气管哮喘（简称哮喘）患者干扰素y（lFN-γ）及1L-33的调节作用。方法选择56例非细菌性感染所致中-重度哮喘患者为试验病例组,整群匹配方法选择30名正常者为对照组,酶联免疫吸附试验法检测1L-27、干扰素y（IFN-y）、1L-33水平,全血细胞分析仪检测白细胞数、中性校细胞绝对值、嗜酸粒细胞绝对值;同时收集哮喘组患者外周血单个核细胞（PBMC）.加入不同浓度的（5μgiL或0.5μgiL）重组人白介素27（rh1L-27）进行体外培养12 h.酶联免疫吸附试验法检测其培养 上清1FN-y及1L-33浓度;探讨1L-27对1FN-γ、1L-33的影响及各指标间的相关性。结果哮喘组患者血清1L-33较对照组明显升高（t=34. 53. P 〈0. 05）.哮喘组1FN-γ、1L-27水平较对照组明显降低 （ t IFN-γ=27.52. P IFNγ〈0.01; t IL-27 = 32.77 ？ P IL-27 〈0.01） ;不同浓度的rh1L-27刺激PBMC后进行体 外培养后.IFN-y表达分别为[（85.9±12. 1）μgiL.（19.6± 3.2）μgl日,较细胞剌激素组（11. 3±2. 7）μgiL 均有显著升高（t = 34.57. P 〈0. 01; t = 11. 39. P 〈0. OIL 5μgiL rh 1L-27组1L-33表达较对照组有 明显降低[（33.2士11.8）μgiL vs 016.9土17.的μgiL. t =22.69. P 〈0. 01];哮喘患者1FNγ水平变 化与rh1L-27应用剂量呈正相关性（ r = 0. 949. P 〈 0. 0日,而rh 1L-27与1L-33呈负相关性（r = 0.89. P 〈0. 05）。结论 1L-27、1FN-y、1L-33表达水平间存在一定关联强度。     

诱导支气管哮喘患者痰中IL-25、TSLP指标改变的临床价值

目的 研究诱导支气管哮喘（简称哮喘）患者痰中IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）指标改变的临床价值.方法 选取2012年10月至2013年12月泰山医学院附属医院就诊的哮喘患者52例作为哮喘组,另取52例健康查体者为正常对照组.按照常规方法收集诱导痰标本,应用酶联免疫吸附法（ELISA）对两组痰中IL-25以及TSLP水平进行检测,对比两组的水平差异.同时对于哮喘组患者均行抗炎药物治疗15d左右之后,检测外周血单核细胞（PBMCs）中的CD40、CD80、CD86表达水平,进行治疗前后两组表达水平.结果 哮喘组患者诱导痰中TSLP以及IL-25水平分别为（2.49±0.46） μg/L,（294.38±79.84） ng/L,均显著高于对照组的（1.45±0.36） μg/L和（181.38土56.73）ng/L,差异均有统计学意义（P＜0.05）.哮喘患者治疗后PBMCs中CD40、CD80、CD86的表达分别为（18.9±3.6）,（30.9±2.9）及（38.7±4.5）,均显著低于治疗前的（29.1±4.7）,（30.9±2.9）及（38.7±4.5）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 诱导哮喘患者痰中IL-25、TSLP指标改变的临床价值极高,为今后的哮喘治疗提供了新途径.     

吸入性糖皮质激素对支气管哮喘患儿气道重塑的影响

目的探讨吸入性糖皮质激素对支气管哮喘（简称哮喘）患儿气道重塑的影响。方法对年龄在5～15岁的30例中重度持续哮喘的住院患儿（哮喘组）、30例健康儿童（对照组）、15例经规范化糖皮质激素吸入治疗6个月以上的哮喘缓解期（缓解组）患儿用5％高渗盐水进行超声雾化诱导痰液,以酶联免疫吸附试验（ELISA）测定诱导痰中IL-5水平,免疫细胞化学方法测定诱导痰中转化生长因子β1（TGF-β1）表达,同时进行诱导痰中嗜酸粒细胞（EOS）计数,测定第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1％pred）,进行肺部高分辨CT（HRCT）检查,测定肺CT的段及亚段支气管壁厚度／气道外径（T／D）和气道壁面积占气道总面积百分比（WA％）。结果①哮喘组EOS计数为（17．24±12．11）％、IL-5为（25．45±18．05）pg／L;缓解组EOS计数为（3．66±2．13）％、IL-5为（7．33±4．39）pg／L;对照组EOS计数为（1．40±1．27）％、IL-5为（6．49±5．31）pg／L,哮喘组与对照组、哮喘组与缓解组比较差异有统计学意义,P值均〈0．01。②30例哮喘患儿有27例痰液中出现TGF-β1阳性表达,缓解组有2例TGF-β1阳性表达,而对照组中未见有TGF-β1阳性表达。③哮喘组T／D（18．16±2．42）％、WA％（59．25±6．54）％、FEV1％pred（71．82±23．08）％;缓解组T／D（17．17±1．9）％、WA％（56．01±3．91）％、FEV1％pred（96．18±12．8）％;对照组T／D（16．45±2．30）％、WA％（53．91±7．72）％、FEV1％pred（107.46±17．11）％,哮喘组与对照组、哮喘组与缓解组比较差异有统计学意义,P值均〈0．05。结论气道重塑在儿童哮喘中已经形成;吸入糖皮质激素可有效地调控气道炎症的发生、发展,经较长疗程的吸入糖皮质激素治疗后气道重塑部分可以逆转。     

孟鲁司特钠对支气管哮喘患者血清MMP-9和TIMP-1水平的影响

目的 通过采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定支气管哮喘（简称哮喘）治疗前后血清中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）水平,观察白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠对轻度持续性哮喘患者血清中MMP-9和TIMP-1水平的影响.方法 选取轻度持续性哮喘患者61例,随机分成治疗组29例和对照组32例,治疗组使用常规治疗＋孟鲁司特钠10 mg每日一次口服,疗程为7～14 d,对照组使用常规治疗,疗程为7～14 d,采用ELISA法测定两组治疗前后血清MMP-9和TIMP-1水平,并对其变化进行分析比较.结果 ①治疗后治疗组血清MMP-9水平[（22.75±6.51） μg/L]明显低于对照组治疗后[（28.93±7.59）μg/L]（P＜0.05）;治疗组治疗前血清MMP-9水平[（29.07±7.83） μg/L]明显高于治疗组治疗后[（22.75±6.51）μg/L]（P＜0.05）.②治疗后治疗组血清TIMP-1[（10.74±4.14） μg/L]明显低于对照组治疗后[（13.75±2.59） μg/L]（P＜0.05）;治疗组治疗前血清TIMP-1水平[（13.76±3.53） μg/L]明显高于治疗组治疗后[（10.74±4.14） μg/L]（P＜0.05）.结论 孟鲁司特钠可明显降低轻度持续性哮喘患者血清中MMP-9和TIMP-1的水平.MMP-9和TIMP-1的水平可作为轻度持续性哮喘患者疗效判断的指标之一.孟鲁司特钠可能会通过下调哮喘患者血清MMP-9和TIMP-1的水平,减少气道细胞外基质沉积.