腺苷酸活化蛋白激酶在纤维化发生中的作用

<正>1 AMPK的结构和生物学作用腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)被认为是调节能量稳态和代谢应激反应的能量传感器,是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,由调节性β(β1和β2)和γ(γ1、γ2和γ3)亚单位以及催化性α(α1和α2)亚单位组成[1],其中α亚基含有催化核心的N端激酶结构域(kinase domain,KD),Thr172位点的磷酸化可使AMPK活性增     

流式细胞分析在淋巴瘤诊断中的作用

从 195 7年Ｄｒ .Ｒａｐｐａｐｏｒｔ奠定了淋巴瘤的分型后 ,其分类经历了多次大的修改[1 5] 。其修改次数之频繁 ,使病理学家 ,临床医生有时感到不适应。修改的原因在于免疫学 (ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ) ,细胞遗传学(ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃｓ)和分子生物学 (ｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙ)的飞速发展。作为基础医学研究和临床前沿的血液淋巴学科受冲击最大 ,同时亦受益最大。到目前为止 ,最新的亦是最被广泛采纳的是ＷＨＯ分类[5] 。此分类借鉴了形态学 (ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ)、免疫抗原分型(ｉｍｍｕｎｏｐｈｙｎｏｔｙｐｉｎｇ)、细…     

女性不孕者阴道加德纳菌感染状况研究

阴道加德纳菌(Gardnerella vaginalis,GV)是Gardner和Duke于1955年从女性阴道炎者病灶部分离到的棒状杆菌.国外学者认为GV是女性细菌性阴道病和妊娠期并发症(流产、产褥热)的重要病原菌[1].GV是近十年才被确认为我国育龄期妇女的生殖道感染的重要病原菌[2,3].女性不孕者与阴道加德纳菌感染的关系报告较为鲜见[4].为了进一步了解芜湖地区女性不孕患者GV感染状况,我们于2004年2月至2004年12月收集了99例女性不孕患者的生殖道拭子进行了GV菌检测分析,现报告如下.     

耐甲氧西林金黄葡萄球菌的SPA基因分型研究

对于耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)分型,目前最先进的分子生物学技术包括染色体限制性酶切大片段的脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型及核苷酸序列分析[多位点序列分析(MLST)[1]和spa分型[2]].     

血培养报警时间对于鉴别血流感染的价值

目的 旨在评价血培养标本阳性报警时间对于鉴别血流感染污染菌的临床价值。方法 采用回顾性研究方法,收集广州市红十字会医院2019年1月至2020年12月临床各科室所送检的所有血培养阳性标本。结果 两年内临床各科室送检血培养标本共9 517份,阳性标本415株,挑选符合入组标准的菌株384例,其中病原菌299例(77.9%),污染菌85例(22.1%)。病原菌报阳时长为11.5(9.5～15.2)h,污染菌报阳时长为26.03(20.5～44.6)h,明显长于病原菌,二者相比较差异有统计学意义(P<0.001)。污染率最高的为凝固酶阴性葡萄球菌,污染率达69.5%,最低的为大肠埃希菌,污染率为9.4%。绘制ROC曲线,金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、链球菌属、大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌区分病原菌和污染菌的cut-off值分别为≤22.05h、≤19.66h、≤19.12h、≤28.06h和≤17.19h,并且此时具有较高的灵敏度和特异性。同一菌株在厌氧瓶中的报警时间短于需氧瓶,两者差异具有统计学意义。结论 血培养阳性报警时间是鉴别分离菌是否为污染菌的重要指标之一,对于临床判断血流...     

皖籍汉人HLA-DQA1和DQB1等位基因分型

ＨＬＡＩＩ类抗原主要包括ＤＲ、ＤＱ和ＤＰ三个亚区。对其中ＤＱ亚区的ＤＱＡ1和ＤＱＢ1进行等位基因分型在人类学、法医学及疾病关联研究等方面具有重要意义。我们采用序列特异性引物 多聚酶链反应 (ＰＣＲ ＳＳＰ )及触减 ＰＣＲ (Ｔｏｕｃｈ ＤｏｗｎＰＣＲ )对 2 73名皖籍汉人的ＨＬＡ ＤＱＡ1和ＤＱＢ1进行基因分型 ,并与中国南、北方汉族群体ＤＱ分型结果进行比较分析。1　材料与方法1 1　研究对象　随机选取 2 73名无血缘关系的皖籍汉人 ,男性 1 4 7人 ,女性 1 2 6人。年龄分布在 1 0～ 70岁 ,身体健康。每人收集 2ｍｌＥＤＴＡ …     

大面积脑梗死患者血清Hcy检测的临床意义

文献报道[1],高同型半胱氨酸(Hcy)与脑卒中有关,其中有关Hcy与脑梗死[2],与脑梗死病亚型[3]的关系。本文检测了各45例大梗死和小梗死患者血清Hcy的水平,现将结果报道如下。1材料和方法1.1对象2009年2月～2012年4月期间收治的大面积脑梗死患者全部符合2000年广州全国脑血管病会议的分型标准[4]。大梗死45例(男27,女18)指CT分型超过1个脑叶,     

弧菌科6种噬菌体用于弧菌的检测

目的 简化副溶血弧菌等6处弧菌科常见病原菌的检测程序,缩短报告时间,提高防治效果。方法 从外环境标本分离筛选6种特异性噬菌体来诊断其相应病原菌并进行分型。结果 从1400份外环境标本分离到440株噬菌体,从中筛选出54株分别组成诊断和分型噬菌体组,经大量实验室和现场的菌株试用,效果良好,对各相应病原菌的诊断和分型率达80％－90％。结论 应用特异性噬菌体诊断相应病原菌,方法简便、快速、廉价实用,可节省大量实验材料,提高工作效率;用于分型是流行病学调查中追索传染源和传播途径的有效手段。     

短寡核苷酸原位标记和乳头状瘤病毒分型

近年来有关人乳头状瘤病毒 (ＨＰＶ)的研究有了长足的进步 ,特别是在ＨＰＶ的分型以及分型与病理变化的关系上的研究越来越深入[1,2 ] 。目前已经发现有 1 0 0多种不同的ＨＰＶ亚型 ,其中 40种见于肛门和生殖道 ,包括与肿瘤和瘤样病变相关的高危险性ＨＰＶ亚型 (如 1 6、1 8等 )和低危险性ＨＰＶ亚型 (如 6、1 1等 ) [3 ,4 ] 。研究ＨＰＶ分型、定位与宫颈和外阴病变的相互关系 ,对于这些疾病的诊断、治疗和预后判断均具有十分重要的意义。在ＨＰＶ的分子病理检测方面 ,已经建立了几种检测方法 ,包括斑点印记杂交、液相杂交、原位杂交、聚合…     

c-myc基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的意义及其应用

弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)是临床最常见的非霍奇金淋巴瘤,占西方国家成人非霍奇金淋巴瘤的30％ ～ 40％[1],在发展中国家所占比例更高.DLBCL在形态学、免疫表型、生物学特征及临床表现等方面均具有显著的异质性.已有的研究表明[2-4],与DLBCL预后相关的因素主要包括:免疫表型、bcl-2及bcl-6蛋白表达情况、bcl-6基因重排、国际预后指数(IPI)、有无累及骨髓等.依据不同的细胞来源,DLBCL分为生发中心B细胞(germinal center B-cell,GCB)及非生发中心/活化B细胞(non-germinal center B-cell/active B-cell,non-GCB/ABC)两个亚型[5-6],目前临床主要通过免疫组织化学染色方法检测肿瘤细胞CD10、bcl-6、MUM1、GCET1及FOXP1的表达情况进行分型.临床资料显示,在给予常规CHOP(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松)方案化疗后,GCB亚型对药物的反应性及预后明显优于ABC亚型,因此免疫分型被认为是一种独立的预后评估指标,多年来一直被应用于临床,对患者进行低危和高危人群的分层.     

PCR微板杂交对金黄色葡萄球菌凝血酶血清型进行分子分型

在临床微生物检验和污染食物的葡萄球菌流行病学调查中,常常需要对分离的金黄色葡萄球菌的凝固酶进行血清分型。尽管凝固酶被分成10个血清型[1],但目前商品化抗血清只能鉴定Ⅰ～Ⅷ型。每个血清型用兔抗血清的中和抑制试验确定,     

脐带血HLA基因分型质评结果分析

目的探讨建立进行常规HLA基因分型质量监控的标准,减少分型错误率,为临床提供准确、可靠的HLA基因分型结果。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物扩增(PCR-SSP)方法、直接测序分型穴SBT雪方法,随机抽查天津市脐带血造血干细胞库脐带血及查询已选中做脐带血移植的样本共88例SSOP方法的结果进行HLA基因分型复核。结果复核结果表明,本实验室HLA基因分型错误率低于3%[1],分型重复率达到97%,符合美国“国家骨髓供者登记(NMDP)”提供的标准。结论以不同基因分型方法评估本实验室HLA基因分型结果完成情况,可保障分型结果的精确度和可靠性,减少分型错误率,提高脐带血移植成活率。     

成都地区婴幼儿病毒性腹泻分子流行病学研究

目的 通过分子流行病学研究成都地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点,掌握本地区病原分布特征,为疫苗研制和疫情控制提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验( ELISA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对成都地区2006 -2008年度376例婴幼儿腹泻粪便标本进行轮状病毒(RV)、杯状病毒(HuCV)、星状病毒(AstV)及肠道腺病毒(Adv)检测.结果 RV的检出率为37.76％(142/376),其中42例进行G分型,45例进行P分型,G分型以G3型为主21例(50％),其次为G2和G1型,P分型以P[8]型为主21例,其次是P[4]型19例.RV感染主要为6～23月的婴幼儿,发病高峰在10 ～12月份(75.8％).RT-PCR法检出HuCV、AstV及Adv的检出率分别为15.85％、1.64％及2.04％.结论 RV是成都地区婴幼儿病毒性腹泻的主要病原,其流行的主要血清型为G3型、P[8]、P[4]型.除RV外,HuCV也是重要的病原.     

黏着斑激酶与肿瘤

黏着斑激酶(FAK)最初是在1992年被发现的,因其定位于整合素簇集的部位即黏着斑,故命名为之[1].FAK属非受体酪氨酸激酶家族中的FAK/PTK2亚家族,该亚家族仅有两个成员:FAK(PTK2)和PYK2(PTK2B).FAK在哺乳动物以及低等真核生物如果蝇、斑马鱼等的大多数组织及细胞类型中都有表达,且其序列在进化上具有保守性性[2],而PYK2表达具有一定的组织特异性.     

嗜水气单胞菌感染致坏死性软组织感染一例并文献复习

正嗜水气单胞菌是一种广泛分布于水体和泥土中的、有发酵产气能力的兼性厌氧革兰阴性杆菌,是典型的人-兽-鱼共患病病原菌。人类感染通常由外伤伤口暴露于污染水体所致,亦可经食源性途径感染该菌[1]。嗜水气单胞菌可于感染部位引起坏死性软组织感染(necrotizing soft tissue infection,NSTI)、胃肠炎等局部炎症反应,也可播散至远端器官累及全身多处部位,在免疫功能低下的人群可导致严重的败血症[2]。     

多色流式细胞术对40例急性白血病免疫分型的研究

白血病的形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学分型已成为现代白血病诊断所必需,其中流式细胞术免疫分型已成为急性白血病(AL)诊断和分型的重要依据,具有重要的临床诊断意义.我们采用流式细胞仪四色荧光标记技术,CD45/SSC双参数散点图设门方法,可全面地与特异地检测出白血病细胞抗原的分布,使白血病免疫分型的结果更为准确和客观[1].     

全血淋巴细胞流式细胞术精细免疫分型方法的建立

目的建立双平台法(流式细胞仪和血细胞计数仪)检测人外周血淋巴细胞亚类绝对数及相对数的流式方法 ,分析更精细的淋巴细胞亚群数量,全面评估被测者免疫功能。方法取人EDTA抗凝外周血500μl,200μl用于血细胞计数仪测得淋巴细胞绝对数;300μl用于流式细胞分析,测得所需淋巴细胞亚群相对数。各淋巴细胞亚群相对数(百分率)×淋巴细胞绝对数,即得到各淋巴细胞亚群绝对数。此方法用同一标本的全血和PBMC进行分析,评价用微量全血进行精细免疫分型的可行性。结果利用双平台法,采用微量全血标本分析了辅助T细胞、细胞毒性T细胞和B细胞的14个细胞亚群,得到其绝对数和相对数。用本方法对同一标本的全血和PBMC进行检测,结果无统计学差异。结论成功建立使用微量全血检测精细淋巴细胞亚群的多色流式分析方法,较全面地评估被测者免疫功能,为免疫相关疾病早期诊断提供线索和依据,对临床治疗具有重要指导作用。     

人乳头瘤病毒亚型检测技术研究进展

人乳头瘤病毒(human papillomavius,HPV),属于乳多空病毒科的一种DNA病毒,是促使子宫内上皮样瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌[1-4]发生的重要因素,越来越引起医学界的重视.在我国,宫颈癌严重威胁女性生命和健康,因此,对HPV感染的检测、基因分型对临床宫颈癌的防治具有重要意义.鉴于此,本文从HPV分型检测方法的角度出发,对HPV基因的检测和分型方法如核酸杂交、荧光定量PCR、基因芯片等,以及各方法的优缺点进行了系统的综述,以期进一步建立可靠、简便、快速的HPV检测、定量、分型方法.     

血液病骨髓染色体快速诊断及计算机影像应用

恶性血液病是一种凶险的疾病 ,快速诊断、明确分型、早期治疗则十分重要。由于现代技术的发展 ,恶性血液病(包括白血病、淋巴瘤等 )的染色体对其诊断分型已成为不可缺少的一项技术。国际白血病协作组规定确诊白血病必须有形态分型 (包括组织化学 )、细胞免疫分型及细胞遗传学分型 ,简称ＭＩＣ分型法[1] 。但传统的染色体技术比较复杂 ,出报告时间长 ,所以极大的限制实际应用 ,也不宜在基层医院推广。在长期的实践中 ,我们探索出一种恶性白血病染色体快速诊断的方法 ,并采取计算机影像处置 ,从而使诊断时间大大缩短、质量提高。采用该方法只…     

2017—2019年河南省漯河市严重急性呼吸道感染病例人腺病毒基因特征分析

目的了解我国河南省漯河市严重急性呼吸道感染(severe acute respiratory infection, SARI)病例人腺病毒(human adenovirus, HAdV)基因特征。方法对2017年10月至2019年2月SARI病例中鉴定的HAdV阳性标本进行病毒分离后, 扩增并测定其Hexon基因的Loop2区域, 初步鉴定病毒分离株型别。然后根据初筛结果, 分别使用HAdV各型特异性引物扩增病毒株3个靶基因(Penton base、Hexon和Fiber)的序列全长, 并与各型原型株以及国内外相应型别代表株进行系统发育和序列同源性分析, 以确定HAdV病毒株型别并了解其基因特征。结果从河南省漯河市783份SARI病例中鉴定的27份HAdV阳性咽拭子标本中, 共分离获得18株病毒分离株, 分子分型结果显示, 这些毒株分属于B亚属(HAdV-3、HAdV-7和HAdV-55)、C亚属(HAdV-1、P1H2F2、Px1/Ps3H5F5、P89H5F5和HAdV-6)和E亚属(HAdV-4)。其中C亚属HAdV-1分离阳性率最高(33.3%), 其次为B亚属HAdV-3(2...