盐炙益智仁石油醚部位缩尿作用谱效关系分析

目的:通过盐炙益智仁石油醚部位的指纹图谱特征峰所代表的化学成分及其对豚鼠膀胱逼尿肌抑制作用贡献的大小,阐明盐炙益智仁的药效物质基础。方法:采用HPLC建立盐炙益智仁石油醚部位的指纹图谱,Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~10 min,5%~25%B;10~60 min,25%~65%B;60~75 min,65%~100%B),柱温35℃,检测波长254 nm,进样量10μL,流速1 m L·min~(-1)。考察盐炙益智仁石油醚部位对豚鼠离体膀胱逼尿肌活动的影响,分析盐炙益智仁缩尿药效的物质基础,利用灰色关联分析法建立谱效关系。结果:建立了盐炙益智仁石油醚部位的指纹图谱,相似度均0.9;盐炙益智仁缩尿的药效是多种成分共同作用的结果,各特征峰所代表的化学成分缩尿药效贡献的大小顺序(按特征共有峰编号)为20号9号11号17号16号13号15号24号18号23号14号32号34号22号25号19号31号27号21号29号28号30号。结论:构建的盐炙益智仁石油醚部位HPLC指纹图谱重复性好、稳定性高、方法简单,石油醚部位指纹图谱与其缩尿药效之间有较明显的对应关系,为盐炙益智仁的缩尿药效评价提供参考。     

益智仁盐炙后缩泉丸入血成分的分析

目的分析益智仁Alpinia oxyphylla Miq.盐炙后缩泉丸的入血成分。方法大鼠灌胃缩泉丸(含盐益智仁)石油醚部位后,通过HPLC结合LC-MS法比较含药血清和空白血清化学成分。结果共标定23种入血成分,并鉴定出其中7种,分别为杨芽黄素、白杨素、益智酮甲、7-表-香科酮、益智醇、圆柚酮及其代谢产物11,12-二羟基圆柚酮。结论所发现的入血成分可能是缩泉丸发挥药效的物质基础。     

益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的缩尿部位指纹图谱比较

目的:通过比较益智仁盐炙前后组成缩泉丸缩尿部位的指纹图谱,从物质基础上揭示益智仁盐炙后增强缩泉丸缩尿药效的原因。方法:采用HPLC,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长230 nm。记录10批益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的石油醚部位HPLC图谱,建立相应指纹图谱,标定特征共有峰并比较其平均相对峰面积和平均相对保留时间。结果:益智仁盐炙后组成缩泉丸时,有11个共有峰平均相对面积明显增加,包括对缩尿药效贡献较大的1号,4号(teuhetenone A),5号(7-表-香科酮),7号色谱峰,增加率分别为123.08%,90.91%,53.33%,43.75%。结论:对缩尿作用贡献较大的4个成分含量的明显增加极有可能与缩泉丸缩尿作用的增强紧密相关,此外其他7个成分含量也有明显增加。     

益智仁盐炙有效部位中圆柚酮大鼠在体肠吸收

目的:考察盐炙对益智仁有效部位圆柚酮吸收的影响,研究益智仁盐炙"生熟有别"的内涵。方法:以酚红为标示物,圆柚酮为指标性成分,采用大鼠单向肠灌流模型,运用HPLC法测定肠灌流液中药物的浓度,比较炮制前后药物吸收参数。结果:益智仁有效部位圆柚酮在小肠各肠段吸收较好;不同质量浓度和p H的吸收速率参数(Ka)与有效渗透系数(Peff)值无显著性差异;益智仁盐炙前后圆柚酮Ka和Peff有显著性差异。结论:益智仁有效部位圆柚酮小肠吸收较好,不受质量浓度的影响,提示其吸收机制主要为被动扩散吸收;炮制后圆柚酮吸收增大,可能是盐炙后能增强止尿作用的机理之一。     

益智仁盐炙对豚鼠膀胱逼尿肌活动影响的研究

目的 观察益智仁盐炙后对豚鼠膀胱逼尿肌收缩活动的影响并探讨其作用机理.方法 将膀胱逼尿肌肌条置于灌流肌槽内,采用分别加兴奋剂和累计加药物的方法, 观察肌条的收缩活动.结果 益智仁和盐益智仁剂量依赖性对乙酰胆碱引起的膀胱逼尿肌兴奋具有显著的拮抗作用,可降低肌条收缩的平均张力,且盐炙品效果优于生品.结论 益智仁和盐益智仁作用膀胱的靶点可能是膀胱逼尿肌的M受体,具有类似M受体阻断剂的作用,盐炙后作用更强.     

缩泉丸石油醚部位"缩尿"药理作用研究

目的:考察缩泉丸石油醚部位"缩尿"药理作用。方法:通过预实验筛选合格的SD大鼠30只分为模型组、全粉组、醇水双提组、石油醚部位组和非石油醚部位组,每组6只,各组按3g/kg体积灌胃给药1周,模型组给予等体积的蒸馏水,末次给药前动物禁食不禁水18 h,给药1 h后按50 ml/kg灌胃生理盐水,记录首次排尿时间、6 h内每小时排泄率和总排泄率;利用生物机能实验系统记录缩泉丸石油醚部位对离体豚鼠膀胱肌张力的影响。结果:水负荷实验结果表明,与模型组相比,醇水双提组、石油醚部位组均能显著延长首次排尿时间,石油醚部位组能显著降低总排泄率;离体豚鼠膀胱肌张力实验结果表明,石油醚部位组能够显著降低ACH激动的豚鼠膀胱逼尿肌的张力和振幅。结论:推断缩泉丸石油醚部位为其"缩尿"药效部位。     

益智仁盐炙对水负荷多尿模型大鼠缩尿作用的研究

目的:通过比较盐炙益智仁对水负荷多尿模型大鼠的缩尿作用,进一步验证益智仁盐炙人肾传统炮制理论的正确性.方法:SD大鼠按尿量、体重均匀分成正常组、模型组、缩泉丸组、益智仁石油醚部位生品(低、中、高剂量)组、盐炙品(低、中、高剂量)9组,缩泉丸组剂量为1.5 g·kg-1,益智仁石油醚部位生品和盐炙品低、中、高剂量分别为含生药4.5,9,18g·kg-1.各组按10 mL·kg-1体积灌胃给药1周后,用1％盐水造成大鼠水负荷多尿模型.采用代谢笼法测定大鼠尿量、首次排尿时间,并计算6h排泄率;放免法测定大鼠血清精氨酸加压素(AVP)含量.结果:与模型组相比,益智仁生、炙品(除生品低剂量组外)能显著降低0～1h段大鼠尿量(P＜0.01),延长大鼠首次排尿时间(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品低、中、高剂量组P ＜0.01),显著降低大鼠6h排泄率(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品高剂量组P＜0.01).与模型组相比,各组AVP含量均升高,其中生品高剂量、盐炙品中、高剂量组有极显著性差异(P＜0.01).结论:益智仁石油醚部位具有缩尿作用,盐炙能增强其作用.     

益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿大鼠肾脏改善作用研究

目的比较益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿模型大鼠脏器指数和肾脏病理变化的影响,初步探讨益智仁温肾缩尿机制。方法采用腺嘌呤致大鼠肾阳虚多尿模型,比较益智仁盐炙前后石油醚部位对大鼠尿量,肾上腺、肾脏、脾脏、胸腺指数及肾脏病理变化的影响。结果与模型组相比,益智仁生品和盐炙品组有显著缩尿作用(P<0.05);脏器指数除肾上腺外,各给药组肾、脾、胸腺指数与模型组比较均显著改善作用(P<0.05);模型组大鼠肾脏肾小球萎缩、代偿性肥大,肾小管有萎缩变小或扩张等病理改变,给药各组与模型组相比均有不同程度的改善。结论益智仁盐炙前后对腺嘌呤所致肾阳虚多尿模型大鼠肾脏指数和病理变化均具较好改善作用,但盐炙后作用明显增强。     

益智仁化学成分研究

目的 研究益智Alpinia oxyphylla 仁的化学成分.方法 利用各种色谱技术进行分离纯化·根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定.结果 从益智仁乙醇提取物中分离得到8个化合物·分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、杨芽黄素(tectochrysin,Ⅱ)、益智酮甲(yakuchinone A,III)、益智醇C(oxyphyllol C,Ⅳ)、刺参酮(oplopanone,Ⅴ)、7-表-香科酮(7-epi-teucrenone,Ⅵ)、胡萝卜苷棕榈酸酯(Ⅶ)、胡萝卜苷(Ⅷ).结论 化合物Ⅴ～Ⅶ为首次从该植物中分得,也是首次从该科植物中分得.     

缩泉丸不同提取部位缩尿作用的谱效关系

目的:益智仁盐炙后组成缩泉丸,建立缩泉丸不同提取部位的指纹图谱,阐明各共有峰所代表的化学成分对缩尿药效的贡献大小,揭示其药效物质基础。方法:通过观察不同提取部位对单纯水负荷模型小鼠尿量系数的影响研究缩泉丸的缩尿药效,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长230 nm,建立缩泉丸不同提取部位的HPLC指纹图谱,采用灰色关联分析法建立缩泉丸的谱效关系。结果:不同成分(共有峰编号)对缩泉丸缩尿作用贡献大小排序为8号9号7号11号17号5号19号29号18号10号6号12号23号。结论:建立的HPLC指纹图谱方法简便、重复性良好,可作为缩泉丸中益智仁盐炙后物质基础改变及药效改变的依据。初步证明缩泉丸的缩尿药效物质是一些极性较小的成分,且主要集中在石油醚部位,缩尿作用是这些成分协同作用的结果。     

基于尿液生成排泄探讨缩泉丸配伍机制

目的:探讨缩泉丸配伍的机制,确定各味药物在方中的作用.方法:对缩泉丸进行全拆方研究,正常对照组、模型对照组、缩泉丸组(3.9 g'kg-1·d-1)、益智组、乌药组、山药组(均为1.3 g,kg-1 ·d-i),益智+乌药组、益智+山药组、乌药+山药组(均为2.6g,kg-1,d-1).除正常对照组外各组用D-半乳糖诱导亚急性衰老模型,造模给药后各组用尿动力仪检测膀胱功能,用ELISA法测定与尿液生成相关的水通道蛋白(AQP2),血清中神经内分泌激素醛固酮(ALD)、抗利尿激素(ADH)的含量.结果:与正常组比较,模型组AQP2,ADH,ALD含量显著降低(P＜0.01),尿动力检测中膀胱漏尿点压(BLPP)、腹压漏尿点压(ALPP)、最大膀胱排尿压(MVP)显著升高(P＜0.01),顺应性(BC)显著下降(P＜0.01).缩泉丸全方对所测指标都有显著影响(与模型组比较P＜0.01),且与各拆方组比较作用最强.单味药比较益智作用最强,乌药对尿液生成方面作用显著,与益智配伍后增效;山药能显著改善衰老膀胱功能,与乌药配伍后药效显著增强,对所测指标均有显著作用(与模型组比较P ＜0.01 ～0.05).结论:本研究结果与缩泉丸益智仁为君,乌药为臣,山药为佐的传统配伍诠释相符.     

基于正常小鼠排便作用的益智仁燥性效应表征研究

目的: 观察益智仁对正常小鼠排便作用的影响及作用机制,从而对益智仁的燥性效应进行表征。 方法: 将SPF小鼠分为正常动物组、益智仁20,10,5 g·kg^-1剂量组及益智仁20 g·kg^-1与增液汤20 g·kg^-1联用组,各组动物每天灌胃给药1次,连续28 d,在第7,14,21,28 d观察对动物排便作用的影响,并从肠道水分、结肠肌电方面阐明益智仁燥性对肠道影响的机制。 结果: 在连续6 h观察中,益智仁低剂量组在28 d的首次排黑粪时间为142.7 min,干粪粒数为10.1粒,干粪重量为176.6 mg;中剂量组在21 d的首次排黑粪时间为145.4 min,干粪粒数为10.2粒,干粪重量为177.0 mg;高剂量组在21 d的首次排黑粪时间为160.3 min,干粪粒数为9.7粒,干粪重量为170.5 mg,说明益智仁能呈剂量依赖和时间依赖使得正常动物逐渐出现便秘症状。在28 d时,益智仁低、中、高剂量组的大肠肠腔水分含量分别是66.23%,64.42%,61.53%,均能显著减少大肠肠腔水分含量。在28 d时,益智仁低、中、高剂量组的结肠肌电频率分别是43.40,45.63,48.26次/min,结肠肌电振幅分别是66.23,64.42,61.53 mV,能显著增快结肠肌电频率及降低结肠肌电振幅。增液汤对于益智仁引起的上述便秘作用有显著的拮抗作用。 结论: 益智仁燥性效应表征能引起正常小鼠的便秘作用,且与促进肠道水分重吸收和减弱肠道传输能力有关。     

基于电子鼻技术区分益智仁的不同炮制品

目的:利用电子鼻技术建立气味指纹图谱以区别益智仁不同炮制品。方法:采用电子鼻技术对益智仁生品、清水炒制品、盐炙品进行检测,获得电子鼻在传感器的响应值,利用主成分分析、判别因子分析及统计质量控制分析等化学计量学对响应值进行数据处理。结果:经化学计量学分析,益智仁生品及其炮制品能明显区分开。益智仁生品与炮制品的气味差异较大,清水炒制和盐炙益智仁气味差异较小。结论:电子鼻技术可用于益智仁炮制品的区分,推测益智仁气味的变化主要由加热炮制引起。     

益智的本草考证

通过查阅历代本草、医籍、方书并结合近现代文献资料,对益智的名称、基原、产地变迁、品质评价、采收加工与炮制方法进行梳理与考证。经考证,益智古时为龙眼的别名,且常与草豆蔻、高良姜、白豆蔻等相混杂,唐代以后的益智基原均为姜科山姜属植物益智,至《中华人民共和国药典》 1963年版才准确记载益智来源为Alpinia oxyphylla Miq.的干燥成熟果实。益智产地记载由岭南、交趾、昆仑等地区逐渐细化,如今主要产于广东、广西、海南等,福建、云南等地有少量栽培,以海南为其道地产区。益智一般于夏、秋果实由绿变红时采收,以身干、粒大、饱满、油性足、香气浓者为佳。经炒制及盐制后可减少益智辛燥之气,增强其温肾缩尿的功效。     

基于OPLS-DA结合熵权TOPSIS的不同产地益智仁综合质量评价

目的 对不同产地益智仁进行综合质量评价。方法 采用超高效液相色谱法建立15批不同产地益智仁的指纹图谱,确定共有峰,并进行相似度评价;以挥发油、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、二氧化硫残留量及指纹图谱为指标,采用正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）和熵权逼近理想解排序法（TOPSIS）对益智仁的整体质量进行综合评价。结果 益智仁指纹图谱共标定了15个共有峰,指认了峰1、峰13分别为原儿茶酸、圆柚酮;OPLS-DA结果显示,峰4、峰11、峰13、峰14的峰面积及二氧化硫残留量是影响各产地益智仁质量差异的主要因素;熵权TOPSIS分析结果显示,海南省琼中县、屯昌县、万宁市,广东省阳春市、高州市益智仁质量评价贴近度（C_i）依次为0.520、0.378、0.577、0.206、0.207。结论 海南产益智仁质量整体优于广东产,且以海南省万宁市质量最优。OPLS-DA结合熵权TOPSIS构建的多指标综合评价模型,可排除主观因素的干扰,提高分析结果的科学性与准确性,可用于益智仁的整体质量评价。     

益智总黄酮大孔吸附树脂纯化工艺研究

目的研究优化大孔吸附树脂纯化益智总黄酮的最佳工艺。方法以吸附率和解吸率为指标,利用静态吸附试验对15种大孔吸附树脂进行筛选,并通过与动态吸附相结合的方法,优选树脂的最佳分离纯化条件。结果 HP20大孔吸附树脂宜于FAOF的提纯,最佳纯化工艺为上样液黄酮质量浓度为1.518 mg/mL,上样体积流量为1.0 mL/min,上样量为50 mL,洗脱溶剂为30%乙醇,洗脱体积流量为1.0 mL/min,洗脱体积为6 BV,纯化后黄酮量高达51.68%。结论 HP20大孔吸附树脂能有效分离纯化益智中的总黄酮。