川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的探讨川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将64只健康雄性SD大鼠随机分为四组：（1）假手术组;（2）缺血再灌注组;（3）川芎嗪20 mg/kg处理组;（4）川芎嗪40 mg/kg处理组。每组各16只,8只用于脑梗死体积测定,8只用于mRNA和蛋白的测定。采用线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h再灌注24 h。术后对大鼠神经功能进行评分;2,3,5-氯化三苯四氮唑染色观察脑梗死体积;酶联免疫吸附法测定脑组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和核因子-κBp65（NF-κBp65）水平;实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法分别检测Toll样受体4（TLR4）mRNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠的神经功能缺陷评分和脑梗死体积明显增加;脑组织中TNF-α、IL-1β和NF-κBp65水平以及TLR4的表达也显著升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。川芎嗪处理组上述指标,与缺血再灌注组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;不同剂量川芎嗪处理组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论川芎嗪可抑制脑缺血再灌注诱导的损伤,其机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路,进而减少炎症因子的产生有关。     

杜仲提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的 观察杜仲提取物对缺血再灌注损伤大鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。方法 采用大鼠大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,造模前以杜仲提取物不同剂量连续ig给药14 d,缺血2 h,再灌注24 h后,观察杜仲提取物对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能症状,脑梗死范围改变,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测脑缺血再灌注损伤大鼠海马TNF-α、IL-1β及iNOS mRNA的表达。结果 杜仲提取物可显著改善脑梗死范围(P<0.05),下调海马TNF-α、IL-1β及iNOS mRNA的表达(P<0.05)。结论 杜仲提取物可下调大鼠脑组织中TNF-α、IL-1β及iNOS mRNA的表达产生抗局灶性脑缺血再灌注损伤作用。     

知母皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型中,初步研究知母皂苷对水通道蛋白4（aquapo rin-4,AQP-4）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）表达的影响。方法 240只SD大鼠分为6组（40只/组）：假手术组、模型组、知母皂苷低、中、高剂量组（SA,10,20,40 mg·kg^-1）和尼莫地平组（12 mg·kg^-1）。采用"插线法"造模。再灌注48 h后,观察每组大鼠的神经症状,并进行神经行为学评分;测定脑梗死范围、脑含水量;采用伊文思蓝法对各组血脑屏障的通透性进行检测;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）对各组TNF-α、IL-6和IL-1β的含量进行测定;采用Western blot法对各组AQP-4的含量进行测定;采用HE染色法观察各组大鼠脑组织病理形态的变化。结果 知母皂苷组能改善造模后造成的神经功能缺损、脑组织病理形态学改变;降低脑含水量、脑梗死面积和血脑屏障的通透性;下调AQP-4、TNF-α、IL-6、IL-1β的表达。结论 知母皂苷对脑缺血/再灌注SD大鼠能起到一定的保护作用,这可能是由于AQP-4和TNF-α、IL-6、IL-1β表达下调,从而维持血脑屏障的稳定性有关。     

槲皮素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

摘 要 目的： 探讨槲皮素（QU）对心肌缺血再灌注（MI/R）损伤的保护及炎症反应的影响。方法: 采用结扎左冠脉前降支30 min再灌注2 h的方法复制MI/R损伤大鼠模型,随机分为QU组（25,50,100 mg·kg^-1）、模型组、假手术组（n=10）,各组于术前1周开始灌胃给药,qd。再灌注结束后取血清,采用比色法测定肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）活性,ELISA法测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平;取心脏,染色法测定心肌梗死面积;取心肌匀浆,测定髓过氧化物酶（MPO）活力。结果: QU高、中剂量可分别缩小MI/R损伤大鼠心肌梗死面积至25.00%、25.31%,与模型组（32.55%）比较差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组CK活性（1 123.78 U·L^-1）比较,QU各剂量可分别降低血清CK活性为779.82、793.90、870.86U·L^-1（P＜0.01）;与模型组LDH活性（3 105.32 U·L^-1）比较,QU各剂量可分别降低血清LDH活性为2 138.21、2 277.40、2 416.53U·L^-1（P <0.05或P＜0.01）;QU各剂量组心肌MPO活力分别为185.70,190.66,210.03 U·g^-1,与模型组（311.72U·g^-1）比较差异均有统计学意义（P<0.05或P＜0.01）;与模型组TNF-α水平（119.55pg·ml^-1）比较,QU高、中剂量组血清TNF-α水平分别降低至97.48、97.54pg·ml^-1（P<0.05）;与模型组IL-1β水平（673.34pg·ml^-1）比较,QU各剂量分别降低血清IL-1β水平至419.26、438.72、492.53pg·ml^-1（P＜0.01）。结论:QU预处理可保护MI/R所致心肌损伤,其机制与抑制中性粒细胞浸润、减少炎性细胞因子的释放等有关。     

玉郎伞黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨玉郎伞黄酮(YF)对大鼠心肌缺血再灌注(MIR)引起的氧化性应激损伤的保护作用。方法60只SD大鼠,随机分为假手术组,MIR组,生理盐水组和YF低、中、高剂量组,每组大鼠10只,雌雄各半。结扎冠状动脉左前降支30 min后,再灌注60 min,建立MIR模型。用不同剂量YF在结扎前30 min分别做预处理。再灌注结束后采血,测定血浆中天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的改变,测量心肌梗死面积。结果YF预处理能明显降低血浆中AST、LDH、LDH1和MDA含量,能提高SOD活性,降低心肌梗死面积。结论YF对大鼠MIR氧化性应激损伤具有显著的保护作用。     

玉郎伞提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究玉郎伞(YLS)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响.方法:以Wistar大鼠制备MIRI模型(结扎冠状动脉5 min后再灌注30 min),观察YLS对心肌梗死面积及心肌组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)活性生化指标的影响.结果:YLS明显降低心肌梗死范围、提高心肌组织中SOD活力、降低其MDA含量,同时降低血清中CK和LDH活力(P<0.01或P<0.05).结论:YLS对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有显著的保护作用.     

格列齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的: 以大脑中动脉栓塞(MCAO)/再灌注模型为研究对象,探讨格列齐特对缺血性脑卒中的保护作用及机制。方法: 雄性Wistar大鼠采用线栓法进行2h左侧MCAO/再灌注,对不同再灌注时间点的梗死核心区样本检测mRNA水平及SUR1蛋白表达水平;不同剂量格列齐特静脉注射到右颈内静脉后灌注12h,采用TUNEL法检测凋亡细胞数量、采用Bederson试验评价神经功能缺损、采用TTC染色法观察脑梗死体积。结果: SUR1mRNA和蛋白水平在MCAO/再灌注组织中显著上调,在缺血后8~12h达到最大水平。格列齐特可减少TUNEL阳性细胞数量,减轻神经功能损伤和脑梗死体积。结论: 研究表明SUR1信号通路可能与MACO/再灌注损伤及梗死相关,静脉注射格列齐特可通过抑制SUR1的表达减轻梗死程度,减少MACO/再灌注造成的梗死面积及脑细胞凋亡程度。     

丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤炎性细胞因子的作用

目的观察丹皮酚对局灶性脑缺血再灌注损伤后炎症因子TNF-α和IL-1β的作用,并探讨其作用机制。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型。缺血2h,再灌注22h后,测定缺血侧脑组织及血清中TNF-α和IL-1β的含量。结果丹皮酚组大鼠脑组织及血清中TNF-α和IL-1β含量较模型组下降,尤以高剂量组降低最为明显。结论丹皮酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制炎症因子生成有关。     

玉郎伞多糖对四氯化碳诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用

目的:研究玉郎伞多糖(YLS)对大鼠原代肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用IV型胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养,用四氯化碳(CCl4)体外诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶(AST)和丙氨酸氨基转换酶(ALT)水平,测定肝细胞中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果:YLS(0.125~1.000g.L-1)可明显降低由CCl4升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及肝细胞MDA含量,还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和GSH含量。结论:提示YLS对大鼠原代培养肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

枸杞多糖对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

目的:研究枸杞多糖对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用。方法:采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注损伤模型。84只SD大鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、假手术(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、尼莫地平(0.5 mg/kg)组与枸杞多糖高、中、低剂量(60.0、30.0、15.0 mg/kg)组。于复制模型前2 d开始灌胃给药,每天2次,连续3 d。对大鼠进行神经症状评分,测定大鼠脑含水量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-12 mRNA的表达,Western blot法测定Caspase-12蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经症状评分、脑含水量增加,Caspase-12 mRNA和蛋白表达增强,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,枸杞多糖高、中剂量组大鼠神经症状评分、脑含水量减少,Caspase-12 mRNA和蛋白表达减弱,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:枸杞多糖对脑缺血再灌注损伤模型大鼠有一定保护作用,其机制与减少神经症状评分、脑含水量及调节Caspase-12 mRNA与蛋白的表达有关。     

ST-1抗大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤作用

目的:证实双萜类化合物ST-1的抗大鼠脑局灶性缺血再灌注损伤作用。方法:大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制作脑缺血再灌注模型,以行为学、脑梗死体积、脑匀浆丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活力和海马CA1区神经元的病理学等指标评价ST-1的抗脑局部缺血复灌损伤作用。结果:大鼠静脉注射ST-1 5~20 mg.kg-1,剂量依赖性地降低脑局灶性缺血再灌注引起的梗死体积,降低脑MDA的含量,增加SOD活力,减轻海马CA1区神经元损伤;高剂量组行为学损伤明显减轻。结论:ST-1有抗大鼠脑局灶性缺血再灌注损伤作用。     

滇橄榄提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的：研究滇橄榄提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：大鼠大脑中动脉线栓法制作脑缺血再灌注模型。进行神经功能学评分、梗死面积测定、脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）、核转录因子NF-κB的水平。结果：滇橄榄提取物能减少局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分和脑梗死面积,提高脑组织SOD活性,降低MDA、NO、IL-1β、IL-6、iNOS和NF-κB的水平。结论：滇橄榄提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化和抑制炎症有关。     

依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的 探讨依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其机制.方法 将120只♂ SD大鼠随机均分为假手术组、模型组和依托咪酯高、低剂量组,ip给予各组大鼠相应药物后,采用线栓法制备大脑中动脉栓塞再灌注模型,评价依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注的保护作用.参照Bederson评分标准评价大鼠的神经功能损伤,采用TTC染色法观察大鼠的脑梗死体积,采用免疫组化法分析大鼠海马CA1区NAIP、caspase-3及caspase-7蛋白的表达,采用HE染色法观察大鼠脑组织的病理变化.结果 与模型组比较,依托咪酯组大鼠的神经功能损伤和脑梗死容积明显减轻,大鼠海马CA1区NAIP蛋白的表达明显增强,caspase-3蛋白的表达明显减少;依托咪酯高、低剂量组间比较无明显差异;各组大鼠海马CA1区caspase-7蛋白的表达无显著差异.结论 依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注造成的脑损伤具神经细胞保护作用,其机制可能与上调NAIP蛋白的表达、抑制caspase-3蛋白的活化有关.     

氢溴酸樟柳碱对抗大鼠急性脑缺血/再灌注损伤的作用机制研究

目的探讨氢溴酸樟柳碱对抗大鼠急性脑缺血/再灌注损伤的作用机制。方法体内实验采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)致脑缺血/再灌注损伤模型,氢溴酸樟柳碱尾静脉注射进行干预。HE染色评价脑组织一般病理学情况;尼氏染色评价脑组织健存神经元情况;检测脑组织匀浆过氧化氢酶(CAT)活性、脂质过氧化物(LPO)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用Western blot技术检测脑组织Bax、Bcl-2、caspase-3、p-Akt等蛋白的表达。体外实验采用PC12细胞氧糖剥夺再灌注损伤模型(OGD-R),采用Western blot技术检测细胞内Bax、Bcl-2、caspase-3、p-Akt等蛋白的表达情况,对氢溴酸樟柳碱作用的信号通路进行确认。结果氢溴酸樟柳碱0.15 mg·kg~(-1)能明显降低MCAO模型大鼠一般病理学评分,提高存活神经元数目;氢溴酸樟柳碱0.3、0.15 mg·kg~(-1)能明显提高脑组织CAT活性,氢溴酸樟柳碱0.3 mg·kg~(-1)能明显降低LPO含量;氢溴酸樟柳碱1.2mg·kg~(-1)明显降低LDH活性;各剂量组均能明显降低促凋亡蛋白Bax的表达,提高Bcl-2/Bax比值,促进p-Akt表达,明显提高p-Akt/Akt比值,除氢溴酸樟柳碱0.15 mg·kg~(-1)剂量外,其余剂量均能明显提高抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。体外实验结果显示,氢溴酸樟柳碱在25~100μmol·L~(-1)时能明显提高Bcl-2蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax比值,在50μmol·L~(-1)剂量下能明显提高p-Akt/Akt的比值。结论氢溴酸樟柳碱对抗急性脑缺血/再灌注损伤大鼠的作用机制与抗氧化损伤及提高p-Akt的表达有关。     

8%乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨乳化异氟醚(ISO)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法60只♂SD大鼠,随机分为6组。假手术组仅分离血管,不留置线拴;脑缺血模型(MO)组缺血前吸入纯氧30 min后行大脑中动脉阻闭(MCAO),2 h后抽出线栓恢复再灌注;吸入ISO组缺血前吸入0.9%ISO 30 min;乳化ISO组缺血前给予17 ml.kg?.1h?18%乳化ISO;异丙酚(PRO)组缺血前给予15 mg.kg?1PRO;30%脂肪乳(INT)组缺血前给予30%INT17 ml.kg?.1h?1,各组于再灌注后24 h进行神经功能评分(DNS)并计算24 h时脑梗死体积。结果术后,乳化ISO组、吸入ISO组和PRO组的DNS评分明显低于MO组(P<0.05);再灌注24 h后MO组的脑梗死体积为227.5±18.15 mm3,乳化ISO组、吸入ISO组的梗死面积缩小(P<0.05),但乳化ISO组和吸入ISO组的梗死面积无显著性差异。结论缺血前给予乳化ISO,对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤可起一定的保护作用。     

左卡尼汀对脑缺血再灌注损伤的抗氧化作用及其机制研究

目的:观察左卡尼汀对脑缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法:健康雄性Wistar大鼠40只,随机分成4组:假手术组、生理盐水对照组、左卡尼汀100 mg/kg治疗组及左卡尼汀200 mg/kg治疗组,每组10只。采用线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h,观察左卡尼汀对脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响,HE染色观察大鼠脑组织的病理改变。结果:左卡尼汀可明显减少MDA的含量,升高SOD活性,同生理盐水对照组相比,P<0.01。结论:左卡尼汀对脑缺血再灌注损伤有保护作用,与提高脑组织中抗氧化酶活性、抑制氧自由基产生及脂质过氧化反应有关。     

羟丁酸钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及与GABA的关系

目的　研究羟丁酸钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及该作用与γ 氨基丁酸 (GABA)的关系。方法　采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,观察损伤大鼠行为功能缺失并称量脑梗死区域组织重量。用高效液相 -荧光法测定大鼠脑脊液中氨基酸的含量并计算GABA/Glu的比值。结果　羟丁酸钠可明显降低缺血再灌注后大鼠行为学评分分值 ,减小脑梗死组织重量 ,增加GA BA/Glu的比值。结论　羟丁酸钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用 ,该作用与其提高抑制性氨基酸GABA的含量 ,维持脑内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的动态平衡 ,产生抑制性保护作用有关     

血三七水煎液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究血三七Polygonum amplexicaule D.Don var.sinense Forb.et Hemsl.ex Stew.水煎液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其机制。方法 180只雄性SD大鼠随机分为脑缺血再灌注(模型)组,假手术组,银杏叶提取物(0.2g/kg)组,血三七水煎液高、中、低剂量(0.3、0.2、0.1 g/kg)组,给药组术前连续ig 14 d,于末次给药60 min后行手术,采用结扎颈外动脉建立大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察血三七水煎液组对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能、脑梗死组织质量比、脑含水量、脑组织中生化指标的影响。结果与模型组比较,血三七水煎液高、中剂量组,银杏叶提取物组均可明显改善神经功能障碍,明显降低脑梗死组织质量比、减低脑组织中含水量,升高大鼠脑组织中SOD活性,降低MDA、NO的量(P<0.05、0.01)。结论血三七水煎液对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抗自由基和抑制NO生成有关。     

扎鲁司特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨白三烯受体拮抗剂扎鲁司特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型,观察扎鲁司特(20、40 mg.kg-1,灌胃)对脑梗死体积、脑水肿程度、血脑屏障通透性的影响,测定脑组织中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量。结果:扎鲁司特能有效减少脑梗死体积、脑水肿程度与血脑屏障通透性,增高脑组织GSH-PX活性,降低MDA、MPO含量,抑制iNOS活性并减少NO含量。结论:扎鲁司特对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与降低血脑屏障通透性、抑制脑内炎症反应、抗脂质过氧化、降低NO毒性有关。