A型肉毒毒素对大鼠离体十二指肠平滑肌自发性收缩的影响

目的 观察A型肉毒毒素(botulinum toxin A,BTX-A)对离体十二指肠平滑肌的自发性收缩是否存在抑制作用,这种抑制作用的时效特点与胆碱能M受体抑制剂作用的异同,BTX-A是否可抑制外源性乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)增强的十二指肠收缩,BTX-A预处理平滑肌后外原性ACh是否可增强十二指肠平滑肌的收缩.旨在为临床应用BTX-A治疗小肠收缩功能紊乱所致的疾病提供理论和实验依据.方法 选取Sprague-Dawley大鼠,实验时击头部致昏后,距幽门0.5 cm处取1.0～1.5 cm的肠管,置于37℃Krebs液的恒温平滑肌槽中,肌条的一端固定在肌槽底部的塑料弯钩上,另一端固定在张力传感器上.肌条在1 g的前负荷下孵育,随机分为BTX-A组(n=12),阿托品组(n=12),ACh+ BTX-A素组(n=12),ACh+阿托品组(n=12),BTX-A+ ACh组(n=12).在自发性收缩平稳20分钟后,根据研究方案,分别加入BTX-A( 10 U/ml)或阿托品(1μmol/L)、ACh(100 μmol/L).Biolap 420 E生物机能实验系统记录十二指肠纵形平滑肌条在不同给药条件下的收缩变化.结果 BTX-A抑制了十二指肠平滑肌自发性收缩的频率、张力及振幅(P＜0.01),这种抑制作用持续＞1小时.阿托品抑制了十二指肠平滑肌自发性收缩的频率、张力及振幅(P ＜0.01),但用药5分钟后,十二指肠平滑肌的收缩开始恢复,用药10分钟后,十二指肠平滑肌的收缩已基本恢复;十二指肠平滑肌自发性收缩的频率、张力及振幅与用药前比较,差异无统计学意义(P＞0.05).ACh增强了十二指肠平滑肌自发性收缩的频率、张力及振幅(P＜0.01),BTX-A抑制了ACh增强的十二指肠平滑肌收缩的频率、张力及振幅(P ＜0.01).ACh增强了十二指肠自发性收缩的频率、张力及振幅(P＜0.01),阿托品抑制了ACh增强十二指肠平滑肌收缩的频率、张力及振幅(P＜0.01).BTX-A抑制了十二指肠平滑肌自发性收缩的频率、张力(P＜0.01)及振幅(P ＜0.05),加入外源性ACh后不能增强十二指肠平滑肌收缩的频率、张力及振幅.结论 BTX-A抑制离体十二指肠平滑肌自发性收缩,BTX-A的抑制作用与阿托品不同,表现出不完全抑制十二指肠的收缩频率、张力和收缩幅度,这种作用为逐渐而持续性抑制.BTX-A抑制了外源性ACh增强的十二指肠平滑肌的收缩.BTX-A抑制了十二指肠平滑肌自发性收缩后,外源性ACh不能增强十二指肠平滑肌的收缩,提示BTX-A可作用于突触后膜M受体,从而抑制了ACh与M受体结合,具有类似“阿托品样效应”.     

中药对豚鼠胆囊肌条运动影响的实验研究

目的观察乌梅、芫花、巴豆对豚鼠胆囊肌条运动的影响. 方法用 8个灌流肌槽同时记录实验动物胆囊肌条的自发收缩活动. 结果①低浓度的乌梅对胆囊肌条的收缩活动具有抑制作用( P< 0.01,t=3.918),而高浓度的乌梅对胆囊肌条张力的影响则呈现先降低后增高的双向性反应 (P< 0.05,t=2.297).普萘洛尔、吲哚美辛、雷尼替丁、六烃季胺、 L-NNA均末阻断乌梅对肌条的作用 (P >0.05).②芫花和巴豆均可增高离体胆囊肌条的张力 (P< 0.01,t=16; t=11.79)、加快收缩频率 (P< 0.01,t=5.47; t=4.00)、减小收缩波平均振幅 (P< 0.01,t=12.37; t=10.5).③酚妥拉明、苯海拉明、吲哚美辛可部分阻断芫花和巴豆对胆囊肌条的作用.另外,六烃季胺可部分阻断巴豆的作用. 结论①乌梅对豚鼠胆囊肌条的作用可能是直接作用于平滑肌.②芫花和巴豆对胆囊肌条的作用与肾上腺能α受体、组胺 H1受体、前列腺素合成酶有关.而巴豆还与胆碱能 N受体有关.     

苦豆子对豚鼠内脏平滑肌收缩活动的干预

目的:观察苦豆子水煎剂对豚鼠离体内脏平滑肌作用的影响,分析其发挥作用途径。方法:实验于2004-12在宁夏医学院基础学院生理实验室完成。①选用健康成年三色毛豚鼠24只,雌雄不拘。②苦豆子(由银川市中医院提供,由该院检定)被制备成1kg/L的水煎剂,实验的系列质量浓度为1×10-4,3×10-4,1×10-3,3×10-3,1×10-2,2×10-2kg/L。③实验方法:实验时分别取出豚鼠胆囊、胃、小肠及膀胱。每个胆囊制备3条平滑肌肌条,共72条;胃、小肠及膀胱各制备12条平滑肌肌条。累积于置胆囊、胃、小肠及膀胱平滑肌肌条各12条的肌槽中加入1×10-4,3×10-4,1×10-3,3×10-3,1×10-2,2×10-2kg/L苦豆子水煎剂,加药间隔2min,容量50μL。④按随机抽签法将其余60条胆囊肌条分为5组:阿托品 苦豆子组、酚妥拉明 苦豆子组、维拉帕米 苦豆子组、苯海拉明 苦豆子组、吲哚美辛 苦豆子组,每组12条。上述5组分别加入拮抗剂阿托品(胆碱能M受体阻断剂)1×10-6mol/L,酚妥拉明(肾上腺素能α受体阻断剂)1×10-6mol/L,维拉帕米(Ca2 拮抗剂)1×10-7mol/L,苯海拉明(组织胺H1受体阻断剂)1×10-6mol/L,吲哚美辛(前列腺素受体阻断剂)1×10-6mol/L后2min再依次加入前述“累积加药”中各质量浓度苦豆子。⑤通过JH-2肌肉张力换能器将信号输出BL-410生物机能实验系统读出标本的张力、收缩波平均振幅及收缩频率的变化值。⑥数据间差异性比较采用均数t检验。结果:①累积加入苦豆子水煎剂1×10-4,3×10-4,1×10-3,3×10-3,1×10-2,2×10-2kg/L后,胆囊肌条张力逐渐增高、收缩频率逐渐加快、收缩波平均振幅逐渐减小。②当苦豆子水煎剂累积质量浓度为2×10-2kg/L时,酚妥拉明 苦豆子组离体胆囊肌条张力和收缩频率明显低于或慢于苦豆子组(t=2.3401,2.1404,P<0.05),而收缩波平均振幅明显高于苦豆子组(t=2.8256,P<0.05)。维拉帕米 苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组(t=2.3464,P<0.05)。③当苦豆子水煎剂累积质量浓度为1×10-2kg/L时,酚妥拉明 苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组(t=2.430,P<0.05),而收缩波平均振幅明显高于苦豆子组(t=2.2279,P<0.05)。维拉帕米 苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组(t=2.6576,P<0.05)。④累积加入不同质量浓度苦豆子水煎剂后对豚鼠胃、小肠及膀胱肌条的张力、收缩波平均振幅及收缩频率无明显影响(P>0.05)。结论:①苦豆子水煎剂可呈剂量依赖性增高胆囊平滑肌肌条的张力、加快收缩频率、减小收缩波平均振幅,其作用可被酚妥拉明及维拉帕米部分阻断,且该种作用可能与胆囊平滑肌细胞膜上的肾上腺素能α受体和细胞膜上的Ca2 通道有关。②苦豆子水煎剂对豚鼠胃、小肠及膀胱平滑肌的收缩活动无明显影响。     

阿霉素对大鼠膈肌收缩功能及超微结构的损伤

目的:研究阿霉素(adriamycin)对大鼠膈肌力学和超微结构的影响并探讨其机制.方法:将SD大鼠随机分成对照组和阿霉素组,每组8只.阿霉素组给予阿霉素2.0 mg/kg腹腔注射,隔日1次,共6次,累计量达12 mg/kg.对照组腹腔注射等量的生理盐水.应用体外灌流大鼠膈肌条的方法,分别测量其单收缩张力(Pt)、最大强直张力(Po)、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT)和张力一频率曲线的变化;测定膈肌组织ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性;电镜观察膈肌组织超微结构的变化.结果:大鼠膈肌Pt和Po值,阿霉素组明显低于对照组(P＜0.01);CT和1/2RT,阿霉素组与对照组相比明显延长(P＜0.01);给予10、20、40、60、80、100Hz频率刺激膈肌条,阿霉素组张力明显低于对照组(P＜0.01);阿霉素组ATP酶和SDH活性明显低于对照组(P＜0.01);电镜显示阿霉素导致膈肌组织线粒体数量减少,空泡化.结论:阿霉素降低大鼠膈肌收缩功能,损伤膈肌细胞线粒体超微结构.     

中药对豚鼠胆囊肌条运动影响的实验研究

目的：观察乌梅、芫花、巴豆对豚鼠胆囊肌条运动的影响。方法：用8个灌流肌槽同时记录实验动物胆囊肌条的自发收缩活动。结果：①低浓度的乌梅对胆囊肌条的收缩活动具有抑制作用(P&;lt;0．01，t=3．918)，而高浓度的乌梅对胆囊肌条张力的影响则呈现先降低后增高的双向性反应(P&;lt;0．05，t=2．297)。普萘洛尔、吲哚美辛、雷尼替丁、六烃季胺、L-NNA均末阻断乌梅对肌条的作用(P&;gt;0．05)。②芫花和巴豆均可增高离体胆囊肌条的张力(P&;lt;0．01，t=16;t=11．79)、加快收缩频率(P&;lt;0．01，t=5．47；t=4．00)、减小收缩波平均振幅(P&;lt;0．01，t=12．37；t=10．5)。③酚妥拉明、苯海拉明、吲哚美辛可部分阻断芫花和巴豆对胆囊肌条的作用。另外，六烃季胺可部分阻断巴豆的作用。结论：①乌梅对豚鼠胆囊肌条的作用可能是直接作用于平滑肌。②芫花和巴豆对胆囊肌条的作用与肾上腺能α受体、组胺H1受体、前列腺素合成酶有关。而巴豆还与胆碱能N受体有关。     

常氧、低氧训练条件下肌肉蛋白表达及肌张力的变化

背景:环境因素以及运动水平均可显著引起肌纤维结构的变化。目的:观察常氧、低氧训练条件下大鼠腓肠肌肌球蛋白、肌动蛋白的表达及肌张力的变化特征。方法:将SD大鼠随机分为常氧对照组(氧体积分数20%,不进行任何处理)、常氧训练2,4,6周组、低氧训练2,4,6周组、低氧对照组(氧体积分数12.7%,不进行训练)。结果与结论:无论在常氧还是低氧环境下,运动训练后大鼠腓肠肌质量、腓肠肌肌纤维截面积均明显增加(P<0.05,P<0.01);运动训练6周后大鼠腓肠肌等长收缩最大张力显著增加(P<0.01);经运动训练后大鼠腓肠肌总MHC及α-actin随着训练时间的延长逐步升高,并且低氧训练组升高幅度高于常氧训练组。说明低氧训练可以更有效促进骨骼肌肌球蛋白、肌动蛋白的表达,增强肌张力,强化Ⅰ型肌纤维,并且训练时间越长,效果越显著,表明低氧训练是一种有效的运动训练途径。     

电头针对痉挛型脑瘫患儿运动功能的影响

目的：探讨电头针治疗痉挛型脑瘫(CP)患儿的疗效,为临床治疗该病提供新的方案。方法：将近两年我院收治的痉挛型脑瘫患儿88例随机分为两组,每组44例,对照组采用常规康复训练,观察组在对照组基础上采用电头针治疗,2组均治疗8周,观察对比两组脑瘫患儿治疗前后粗大运动功能量表(GMFM-88)评分、双下肢主要肌肉肌张力评分及生活质量水平变化。结果：①治疗8周后,2组患者的粗大运动功能评分均较治疗前明显增加(P<0.01),与对照组相比,观察组的评分均显著增加(P<0.01);②治疗结束后,两组患者下肢内收肌群、腓肠肌、腘绳肌肌张力均较治疗前明显降低(P<0.01),与对照组相比,观察组内收肌肌张力差异无统计学意义,腓肠肌、腘绳肌肌张力显著降低(P<0.01);③治疗后两组患者生活质量水平均较治疗前升高(P<0.05),观察组更高于对照组(P<0.01)。结论：电头针能显著改善痉挛型脑瘫患儿的临床症状,降低肌肉张力,促进粗大运动功能的恢复,提高患儿的生活质量,值得应用及推广。     

彩超水囊引导下A型肉毒毒素注射治疗面肌痉挛的临床疗效

目的:探讨彩超水囊引导下肉毒毒素注射治疗面肌痉挛的疗效。方法:面肌痉挛患者96例,随机分为A、B组各48例,A组给予口服药物6个月,B组给予彩超水囊引导下局部注射A型肉毒毒素(BTX-A)。治疗前后分别采用Cohen、Acbert痉挛强度分级评估疗效,观察2组疗效、持续时间、显效率和治疗前后肌痉挛强度及变化情况。结果:A组治疗后肌痉挛强度变化无统计学差异,B组治疗后肌痉挛强度变化有显著性差异(P<0.01),且显效率高于A组(P<0.01)。结论:彩超水囊引导下BTX-A注射治疗能显著降低面肌痉挛的肌张力,且安全、简单易行。     

延胡索对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的抑制作用

目的:观察延胡索乙素对未孕大鼠离体子宫平滑肌条运动的抑制作用。方法:实验于2003-11/2004-03在兰州大学医学院生理学教研室进行。①成年未孕Wistar大鼠90只,于实验前72h皮下注射乙烯雌酚0.5mg/kg,造成人工动情期以提高子宫对药物的敏感性。②猛击大鼠头部致昏,取卵巢及子宫分叉处之间的中段子宫,制成8mm×2mm的肌条,将肌条安置在恒温平滑肌肌槽中,每个肌槽中分别盛有5mL37℃Krebs液。③肌条在1g的前负荷下温育,每20min更换一次5mL新鲜的Krebs液(37℃),待肌条的自发活动平稳后加入不同剂量的延胡索乙素(2×10-5,2×10-4,4×10-4,8×10-4,1.6×10-3kg/L),观察延胡索乙素对大鼠离体子宫平滑肌条收缩活动的影响。④分别加入不同的受体拮抗剂5min后(2×10-6mol/L酚妥拉明,2×10-7mol/L异搏定,2×10-5mol/吲哚美辛和2×10-6mol/L苯海拉明),再加入8×10-4延胡索乙素,观察使用拮抗剂后延胡索乙素对大鼠离体子宫平滑肌条作用的影响。⑤计算给药前5min和给药后5min子宫平滑肌条的收缩波的频率、平均振幅和收缩波间隔平均持续时间。结果:①不同浓度的延胡索乙素均能抑制子宫平滑肌收缩运动,可使子宫平滑肌收缩波的频率减慢,在延胡索乙素浓度8×10-4kg/L,1.6×10-3kg/L时为其抑制作用差异具有显著性(P<0.01);延胡索乙素各浓度虽可以降低子宫平滑肌收缩波的振幅但差异无显著性(P>0.05);而当延胡索乙素浓度为4×10-4,8×10-4,1.6×10-3kg/L时,可显著延长收缩波的间歇时间(P<0.01)。②在加入H1受体阻断剂苯海拉明后延胡索乙素使子宫平滑肌的收缩频率降低(P<0.05),收缩波间隔的持续时间延长(P<0.05),而收缩振幅增高(P<0.05);在加入α受体阻断剂酚妥拉明后,延胡索乙素抑制子宫平滑肌的作用与单独使用延胡索乙素组相比差异无显著性(P>0.05);在加入吲哚美辛抑制前列腺素合成酶合成和释放后,延胡索乙素抑制子宫平滑肌的作用与延胡索乙素组相比仍然可以使收缩波的频率降低(P<0.05),振幅减小(P<0.05),收缩波间隔持续时间延长(P<0.05)。加入L型Ca2 通道阻断剂异搏定后延胡索乙素对未孕大鼠离体子宫平滑肌的运动有抑制作用,收缩间隔时间延长(P<0.05),但振幅不变(P<0.05)。结论:延胡索乙素抑制大鼠子宫平滑肌收缩运动的部分作用可能与L型电压依从性Ca2 通道使平滑肌细胞内Ca2 浓度降低有关,也可能与前列腺素的合成与释放有关。     

盐酸埃他卡林对自发性高血压大鼠尾动脉血管条的舒张作用

目的:分析新型抗高血压药物盐酸埃他卡林对自发性高血压大鼠和正常血压Wistar-Kyoto大鼠阻力小动脉的舒张作用特点。方法:实验于2004-03/2005-01在解放军军事医学科学院毒物药物研究所完成。①选取12周龄雄性自发性高血压大鼠30只作为自发性高血压组,以12周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠35只作为正常对照组。盐酸埃他卡林纯度大于99.5%(由解放军军事医学科学院毒物药物研究所合成);乙酰胆碱,L-NAME,吲哚美辛,格列苯脲,4-氨基吡啶,四乙铵均购自美国Sigma化学公司。②尾动脉血管条的制备:两组大鼠处死后迅速分离尾动脉,每只鼠制备2～4个螺旋状血管条,其中1～2个血管条去除内皮,其余血管条保持内皮完整。将血管条的两端扎紧,悬挂于含5mL Krebs-Ringer营养液的37℃恒温浴槽内,下端固定,上端通过张力换能器连于自动平衡记录仪,记录血管条的张力变化,并持续通入体积分数为0.95的O2和0.05的CO2混和气。制备完毕的血管条用于以下各独立实验。③乙酰胆碱诱发大鼠尾动脉内皮依赖性舒张反应实验:自发性高血压组取14个去内皮血管条,14个内皮完整血管条;正常对照组取12个去内皮血管条,12个内皮完整血管条。用40 mmol/L的KCl对两组大鼠尾动脉去内皮及内皮完整血管条进行预收缩,当血管条收缩达到稳定后,累积性加入10-8～10-4 mol/L乙酰胆碱。以KCl诱发最大稳定收缩幅度为100%,检测血管舒张率。④盐酸埃他卡林诱发大鼠尾动脉舒张反应实验:自发性高血压组取12个去内皮血管条,14个内皮完整血管条;正常对照组取10个去内皮血管条,取12个内皮完整血管条。预收缩过程同上,当血管条收缩达到稳定后,累积性加入10-7～10-3 mol/L盐酸埃他卡林,检测血管舒张率。⑤钾通道阻断剂影响盐酸埃他卡林舒血管作用的实验:自发性高血压组、正常对照组各取12个内皮完整血管条。首先将血管条分别与四乙铵、4-氨基吡啶、氯化钡、格列苯脲预孵育30 min,再用KCl预收缩血管,当血管条收缩达到稳定后,在浴槽内加入终浓度为10-3 mol/L的盐酸埃他卡林,观察各种钾通道阻断剂对盐酸埃他卡林舒血管作用的抑制情况。以用Krebs-Ringer营养液预孵育30 min、且不加入任何药物的血管作为空白对照。⑥一氧化氮合酶抑制剂和环氧化酶抑制剂影响盐酸埃他卡林舒血管作用的实验:自发性高血压组、正常对照组各取12个内皮完整血管条。首先将血管条分别与L-NAME、吲哚美辛预孵育 30 min,再用KCl预收缩血管,当血管条收缩达到稳定后,在浴槽内加入终浓度10-3 mol/L的盐酸埃他卡林,观察两种酶抑制剂对盐酸埃他卡林舒血管作用的抑制情况。结果:①正常对照组与自发性高血压组去内皮的尾动脉血管条均未产生舒张反应,而内皮完整的血管条均产生舒张反应,且呈剂量依赖性,最低有效浓度均为10-7 mol/L,乙酰胆碱浓度为10-6～10-4 mol/L时自发性高血压组尾动脉内皮依赖性舒张反应明显低于正常对照组(F=4.12～12.26,P<0.05或0.01)。②两组内皮完整与去内皮的血管条均产生舒张反应,但盐酸埃他卡林诱发自发性高血压大鼠尾动脉舒张效应显著强于正常血压Wistar-Kyoto大鼠(F=4.08～6.15,P<0.05)。③与空白对照血管比较,四乙铵、4-氨基吡啶、氯化钡均不能对抗盐酸埃他卡林的舒血管作用(P>0.05),而格列苯脲可显著对抗盐酸埃他卡林的舒血管作用(F=42.38,P<0.01)。与正常对照组比较,自发性高血压组格列苯脲对尾动脉舒张反应的阻断效应更敏感(F=8.76,P<0.01)。④L-NAME、吲哚美辛均不能抑制盐酸埃他卡林的舒血管作用(P>0.05)。结论:10-7～10-3 mol/L盐酸埃他卡林对大鼠尾动脉血管条均能诱发剂量依赖性舒张反应,该作用在高血压状态时显著增强,可能与ATP敏感性钾通道的功能改变相关。     

黄芪对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨补气益血中药黄芪对脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:实验于2004-06/11在第四军医大学西京医院中医科实验室进行。取36只SD大鼠随机分为3组,每组12只。①模型组:以生理盐水10mL/(kg·d)灌胃,1次/d,7d后线栓法制备大鼠局灶性脑缺血2h再灌注模型,6只在再灌注6h麻醉状态下处死取脑,免疫组织化学法与医学图像分析结合的方法检测Bcl-2蛋白的表达;剩余6只在再灌注24h麻醉状态下处死取脑,TUNEL法检测大鼠脑组织神经细胞凋亡。②黄芪组:以黄芪煎剂6g/(kg·d)灌胃7d,其余处理同模型组。③假手术组:不阻塞大脑中动脉,其余处理同模型组。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①TUNEL阳性神经细胞数目:模型组高于假手术组[(49.9±9.8),(1.6±0.6)个/视野,t=12.05,P<0.01],黄芪组低于模型组[(30.2±2.1)个/视野,t=4.81,P<0.01]。②Bcl-2阳性细胞数目:模型组显著高于假手术组([12.5±1.2),(1.7±0.6)个/视野,t=19.71,P<0.01],黄芪组显著高于模型组([16.4±2.2)个/视野,t=3.17,P<0.01]。③Bcl-2蛋白平均灰度:模型组明显低于假手术组(182.8±13.6,205.9±11.5,t=3.18,P<0.01),黄芪组显著低于模型组(160.8±10.2,t=3.82,P<0.01)。结论:黄芪通过上调Bcl-2蛋白的表达可抑制缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤有明显的神经保护作用。     

氟虫腈对小鼠离体胃平滑肌的作用及甲氧氯普胺对其的影响

目的:观察氟虫腈对小鼠离体胃平滑肌的作用及甲氧氯普胺对其的影响.方法:取小鼠离体胃平滑肌,将其置于50 mL恒温(37℃)灌流肌槽中,记录5个剂量组氟虫腈(1.020、1.275、1.594、1.992、2.490 g/L)作用下肌条的收缩活动;小鼠离体胃平滑肌经氟虫腈(1.594 g/L)预作用后3min加入5个剂量组甲氧氯普胺(0.02、0.04、0.08、0.14、0.24 g/L),观察其对胃肌条收缩活动的影响.结果:急性中毒小鼠胃平滑肌收缩活动与对照组相比肌张力及收缩幅度均下降(P＜0.05或P＜0.01),该作用经甲氧氯普胺干预后无明显变化(P＞0.05).结论:氟虫腈可抑制小鼠离体胃平滑肌收缩活动,急性中毒小鼠经甲氧氯普胺干预后胃平滑肌收缩活动未受影响.     

黄芪对豚鼠体外膀胱逼尿肌条收缩活动的影响

背景:黄芪具有显著的利尿作用,作用时间长,并且对肾炎有一定的对抗作用。目的:观察黄芪对豚鼠离体膀胱逼尿肌条收缩活动的影响,并初步探讨其作用机制。设计、时间及地点:随机对比观察实验,于2005-08/2006-02在兰州大学基础医学院生理学与心理学研究所完成。材料:实验动物选用普通级医学实验动物三色毛豚鼠,雌雄不拘,体质量350～450g。方法:猛击豚鼠头部致昏,迅速取出豚鼠膀胱,切取2条6mm×2mm纵行肌条置于灌流肌槽中,一端与肌肉张力换能器连接,记录肌条的等长收缩活动。待肌条自发活动平稳后加入药物。黄芪采用累计加药法,累计浓度依次为1%,3%,10%,30%,100%,200%,加药间隔2min;加入阻断剂2min后再累计加入不同浓度的黄芪,加入的阻断剂分别为维拉帕米、酚妥拉明、阿托品、六烃季铵。主要观察指标:黄芪及拮抗剂加黄芪对豚鼠离体膀胱逼尿肌条收缩活动的影响。结果:黄芪剂量依赖性增加膀胱逼尿肌条的张力、收缩波平均振幅(r=0.928,0.962,P<0.01),较高浓度时增加收缩频率(P<0.01)。维拉帕米使黄芪增加逼尿肌条收缩张力的作用明显减弱,但不影响黄芪增加逼尿肌条收缩波平均振幅和收缩频率的作用。酚妥拉明使黄芪增加逼尿肌条收缩张力和收缩频率的作用明显减弱,但不影响黄芪增加逼尿肌条收缩波平均振幅的作用。阿托品使黄芪增加逼尿肌条收缩张力、收缩波平均振幅和收缩频率的作用明显减弱。六烃季铵基本不影响黄芪对于膀胱逼尿肌条的作用。结论:黄芪呈剂量依赖性增加膀胱逼尿肌条张力的作用可能是通过激动L-电压依赖性钙通道、α受体和M受体实现的;剂量依赖性增加收缩波平均振幅的作用可能是通过激动M受体实现的;较高浓度时增加收缩频率的作用可能是部分通过激动M受体和α受体实现的。     

电针刺激三阴交穴对压力性尿失禁大鼠脊髓NMDA受体及α2受体表达的影响

目的观察电针刺激三阴交穴对压力性尿失禁(SUI)大鼠控尿能力及脊髓N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体、α2肾上腺素能受体表达的影响。方法采用随机数字表法将48只成年雌性SD大鼠分为3组,其中假手术组大鼠阴道内置入未注水球囊尿管,模型组大鼠行阴道内球囊扩张制作SUI模型,电针组大鼠待阴道内球囊扩张建模成功后,对其三阴交穴给予电针刺激。经1周干预后,3组大鼠均进行尿流动力学检查及腹压漏尿点压(LPP)测定,并同步进行尿道外括约肌肌电描记。另外本研究还分别采用PCR及Western blot方法比较各组大鼠脊髓L₆-S₁节段NMDA受体及α2受体表达变化。结果3组大鼠各项尿流动力学指标组间差异均无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠腹压LPP、尿道外括约肌肌电频率及振幅均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠腹压LPP显著提高(P<0.05),尿道外括约肌肌电频率及振幅均显著增加(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠L₆-S₁脊髓节段NMDA、α₂受体mRNA及蛋白表达均明显上调(P<0.05)。结论阴道球囊扩张是制作SUI大鼠模型的有效方法;电针刺激三阴交穴在改善SUI模型大鼠控尿能力同时,还不会影响大鼠正常排尿功能,其治疗机制可能与上调脊髓中NMDA及α2受体水平、增强尿道外括约肌活性有关。     

跌打颗粒对骨折愈合修复的实验研究

目的:研究跌打颗粒对骨折愈合及软组织损伤后的修复及祛瘀作用。方法:小鼠180只:①60只小鼠右腿向内侧对折90°造成骨折模型,随机分成4组,跌打颗粒两个剂量组,伤科接骨片组和蒸馏水组,分别经口灌胃给药。②40只小鼠麻醉状态下观察耳郭固定区域内毛细血管交叉网点开放数增加值。③40只小鼠造模成右后腿软组织损伤。④40只小鼠右耳两面涂二甲苯造成炎症肿胀。大鼠80只:①40只麻醉后造成骨折模型。②40只按照“小鼠骨折试验”项的方法分组进行大鼠抗折力试验。结果:①跌打颗粒对骨愈合的作用:跌打颗粒两个剂量组、伤科接骨片组断端软骨细胞骨化小鼠均明显高于蒸馏水组(T=15.0,P<0.01),大鼠均明显高于蒸馏水组(T=55,T=59,P<0.01)。跌打颗粒高剂量组大鼠骨折愈合X射线片观察骨痂生成高于蒸馏水组(T=73.5,P<0.05)。②跌打颗粒抗折力的作用:跌打颗粒两个剂量组、伤科接骨片组大鼠的抗折力明显高于蒸馏水组(t=10.44,t=5.53,t=7.03,P<0.01)。③跌打颗粒对软组织损伤及散瘀作用:跌打颗粒两个剂量组、伤科接骨片组小鼠腿部软组织撞击伤积分均明显低于蒸馏水组(T=155,T=150,T=155,P<0.01),跌打颗粒高剂量组、复方丹参片组小鼠耳郭毛细血管交叉网点开放数增加值均明显高于蒸馏水组(t=5.53,t=4.27,P<0.01)。结论:跌打     

A型肉毒毒素抑制大鼠胃平滑肌收缩的放射免疫测定

目的:在胃肌层注射A型肉毒毒素(botulinumtoxintypeA,BTX-A)后,P物质(substanceP,SP)是否参与BTX-A抑制胃平滑肌收缩调节,尤其是局部短期变化,并探讨BTX-A的作用与SP的关系,为临床疗效提供新思路。方法:健康雄性Wistar大鼠14只,随机分为BTX-A组及对照组,在胃体前壁与幽门部交界线中点平滑肌内注射BTX-A5U(25U/ml),或者生理盐水0.2ml;注射3min后切取局部前壁组织行放射免疫测定。结果:胃前壁注射区局限性膨出,逐渐加剧;未见蠕动波/收缩波通过局部。从切取待测的胃前壁侧面观:厚度与周围比较无明显界限,但皱襞减少、变浅。BTX-A组SP平均含量较对照组低39%(P<0.05)。结论:经腹腔在胃前壁注射BTX-A后,不但阻碍了局部粘膜下神经丛或者肌间神经丛突触前膜乙酰胆碱释放,而且也抑制了SP,导致胃平滑肌收缩功能障碍。     

电针刺激三阴交穴对压力性尿失禁大鼠脊髓NMDA受体及α2受体表达的影响

目的观察电针刺激三阴交穴对压力性尿失禁(SUI)大鼠控尿能力及脊髓N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体、α2肾上腺素能受体表达的影响。方法采用随机数字表法将48只成年雌性SD大鼠分为3组,其中假手术组大鼠阴道内置入未注水球囊尿管,模型组大鼠行阴道内球囊扩张制作SUI模型,电针组大鼠待阴道内球囊扩张建模成功后,对其三阴交穴给予电针刺激。经1周干预后,3组大鼠均进行尿流动力学检查及腹压漏尿点压(LPP)测定,并同步进行尿道外括约肌肌电描记。另外本研究还分别采用PCR及Western blot方法比较各组大鼠脊髓L6-S1节段NMDA受体及α2受体表达变化。结果 3组大鼠各项尿流动力学指标组间差异均无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠腹压LPP、尿道外括约肌肌电频率及振幅均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠腹压LPP显著提高(P<0.05),尿道外括约肌肌电频率及振幅均显著增加(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠L6-S1脊髓节段NMDA、α2受体mRNA及蛋白表达均明显上调(P<0.05)。结论阴道球囊扩张是制作SU...     

胰岛素诱导Zucker肥胖大鼠肾小球系膜细胞AP-1活化强度与基因型和鼠龄的关系:一项关于糖尿病肾损伤机制的研究

目的:研究胰岛素(INS)对体外培养的Zucker大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中核转录因子激活蛋白-1(AP-1)活性的影响,观察INS诱导的AP-1活性的变化与Zucker大鼠鼠龄及基因型的相关性。方法:①采用Zucker肥胖大鼠(3月龄和10月龄)及Zucker瘦型大鼠(3月龄和10月龄)的4种GMC株(O3m,O10m,L3m,L10m)进行传代培养。②利用凝胶迁移率实验(EMSA)和超迁移率实验检测不同浓度及不同时相INS对Zucker大鼠GMCAP-1活性的影响,以及AP-1二聚体中c-jun和c-fos成分的变化。结果:①INS诱导后,4组GMC内AP-1活性均较对照组明显增强(F=244.53,P<0.01)。②随着INS刺激浓度增加和时间的延长,GMC内AP-1活性相应增强,0.5mg/L的INS刺激15h时,AP-1活性强度达最高峰。③INS主要激活AP-1二聚体成分中的c-jun。④O10m组AP-1的活性显著高于O3m组(q=10.72,P<0.01),L10m组AP-1的活性显著高于L3m组(q=9.88,P<0.01),O10m组显著高于L10m组(P<0.01),O3m组显著高于L3m组(q=16.37,P<0.01)。结论:INS可诱导Zucker大鼠GMC内AP-1活化,其活化方式呈时间和浓度依赖;活化强度与大鼠的基因型及鼠龄密切相关;INS对GMC内AP-1的诱导活化在Zucker肥胖大鼠晚期的肾损害中起着更为重要的作用。     

苦豆子对豚鼠内脏平滑肌收缩活动的干预

目的：观察苦豆子水煎剂对豚鼠离体内脏平滑肌作用的影响，分析其发挥作用途径。 方法：实验于2004—12在宁夏医学院基础学院生理实验室完成。①选用健康成年三色毛豚鼠24只，雌雄不拘。②苦豆子（由银川市中医院提供，由该院检定）被制备成1kg／L的水煎剂，实验的系列质量浓度为1&;#215;10^-4，3&;#215;10^-4，1&;#215;10^-3，3&;#215;10^-3，1&;#215;10^-2，2&;#215;10^-2kg／L。③实验方法：实验时分别取出豚鼠胆囊、胃、小肠及膀胱。每个胆囊制备3条平滑肌肌条，共72条；胃、小肠及膀胱各制备12条平滑肌肌条。累积于置胆囊、胃、小肠及膀胱平滑肌肌条各12条的肌槽中加入1&;#215;10^-4，3&;#215;10^-4，1&;#215;10^-3，3&;#215;10^-3，1&;#215;10^-2，2&;#215;10^-2kg／L苦豆子水煎剂，加药间隔2min。容量50μL。④按随机抽签法将其余60条胆囊肌条分为5组：阿托品＋苦豆子组、酚妥拉明＋苦豆子组、维拉帕米＋苦豆子组、苯海拉明＋苦豆予组、吲哚美辛＋苦豆子组，每组12条。上述5组分别加入拮抗剂阿托品（胆碱能M受体阻断剂）1&;#215;10^-6mol／L，酚妥拉明（肾上腺素能α受体阻断剂）1&;#215;10^6mol／L，维拉帕米（Ca^2＋拮抗剂）1&;#215;10^-7mol／L，苯海拉明（组织胺H1受体阻断剂）1&;#215;10^-6mol／L，吲哚美辛（前列腺隶受体阻断剂）1&;#215;10^6mol／L后2min再依次加入前述“累积加药”中各质量浓度苦豆子。⑤通过JH-2肌肉张力换能器将信号输出BL-410生物机能实验系统读出标本的张力、收缩波平均振幅及收缩频率的变化值。⑥数据间差异性比较采用均数t检验。 结果：①累积加入苦豆子水煎剂1&;#215;10^-4，3&;#215;10^-4，1&;#215;10^-3，3&;#215;10^-3，1&;#215;10^-2.2&;#215;10^-2kg／L后，胆囊肌条张力逐渐增高、收缩频率逐渐加快、收缩波平均振幅逐渐减小。（函当苦豆子水煎剂累积质量浓度为2&;#215;10^-2kg／L时，酚妥拉明＋苦豆子组离体胆囊肌条张力和收缩频率明显低于或慢于苦豆子组（t=2，3401，2．1404，P〈0．05），而收缩波平均振幅明显高于苦豆子组（t=2．8256，P〈0．05）。维拉帕米＋苦夏子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组（t=2．3464，P〈0．05）。③当苦豆子水煎剂累积质量浓度为1&;#215;10^-2kg／L时，酚妥拉明＋苦夏子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组（t=2．430，P〈0．05），而收缩波平均振幅明显高于苦豆子组（t=2．2279，P〈0．05）。维拉帕米＋苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组（t=2．6576，P〈0．05）。④累积加入不同质量浓度苦赢子水煎剂后对豚鼠胃、小肠及膀胱肌条的张力、收缩波平均振幅及收缩频率无明显影响（P〉0．05）。 结论：①苦豆子水煎刺可呈剂量依赖性增高胆囊平滑肌肌条的张力、加快收缩频率、减小收缩波平均振幅，其作用可被酚妥拉明及维拉帕米部分阻断，且该种作用可能与胆囊平滑肌细胞膜上的肾上腺素能Ⅱ受体和细胞膜上的Ca^2＋通道有关。②苦豆子水煎剂对豚鼠胃、小肠及膀胱平滑肌的收缩活动无明显影响。     

丹参防治自发性高血压大鼠左室肥厚机制的研究

目的　观察丹参防治左室肥厚的作用机制。方法　用自发性高血压大鼠为心肌肥厚模型 ,18只 8周龄的自发性高血压大鼠随机分成三组 :一组于 8周时处死 ,另两组分别经腹腔注射丹参或蒸馏水[(1ml/ (kg·d) ]10周。测量大鼠尾动脉收缩压 (SBP)及左心室重量指数 (LVMI)。检测大鼠心肌组织中去甲肾上腺素 (NE)、多巴胺 (DA)、肾上腺素 (E)及超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)、过氧化脂质 (LPO)、血管紧张素 Ⅱ (AngⅡ )的含量。结果　①丹参组大鼠SBP及LVMI指标与高血压组比较均明显降低 ;②丹参可抑制NE、DA含量的降低和E含量的增高 ;③丹参可增强心肌组织SOD和GSH Px 活性 ,减少LPO的生成 ;④丹参可降低左心室肥厚组织Ang Ⅱ含量的增高。结论　丹参能有效防治自发性高血压大鼠左室肥厚的发生。它作用机制与丹参调整和改善心脏局部儿茶酚胺、氧自由基代谢有关 ,而且还与丹参抑制体内肾素 -血管紧张素系统 (RAS)代谢相关。