多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增生与凋亡的研究

目的研究多囊肾病囊肿衬里上皮的增生与凋亡及相关蛋白表达.方法应用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化法,对3例正常肾组织和12例常染色体显性遗传型多囊肾病(ADPKD)患者(2例为终末期肾病患者,10例为氮质血症期患者)肾组织中囊肿衬里上皮细胞的凋亡细胞和增生细胞核抗原(PCNA)阳性细胞计数,并检测c-myc、bcl-2、bax、p53、Fas蛋白表达.结果多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增生与凋亡均增加,增生较凋亡增加显著,PCNA阳性细胞/凋亡细胞为3.46±1.68.多囊肾组织c-myc蛋白和bcl-2蛋白表达显著升高.bax、p53和Fas的表达并无改变.结论多囊肾病中囊肿衬里上皮细胞的增生和凋亡失调,调节这些过程的基因异常表达介导了多囊肾病囊肿形成.多囊肾组织c-myc蛋白高度表达,与囊肿衬里上皮过度增生、凋亡相关.多囊肾囊肿衬里上皮细胞的凋亡不依赖于bcl-2、p53和Fas.     

辐射对前列腺增生组织中bcl-2和bax表达的影响及临床意义

目的 探讨前列腺增生组织中bcl—2和bax的表达以及β射线内照射对bcl—2和bax表达的影响。方法 应用免疫组织化学法检测9例正常前列腺(NP)、15例良性前列腺增生(BPH)及35例实施^90Sr／^90Yβ射线照射后前列腺增生组织中bcl—2和bax的表达。结果 NP和BPH上皮组织bcl—2阳性表达均高于间质(P＜0．01)；BPH组织上皮和间质中bcl-2表达阳性串高于NP(P＜0．01)；NP上皮细胞中bax表达高于BPH(P＜O．05)；BPH上皮和问质细胞中bcl—2表达高于bax(P＜0．01)；NP上皮和问质中bcl—2与bax表达无显著差异(P＞0．05)。与对照组相比，应用^90Sr／^90Yβ射线内照射4、7、15d后BPH上皮和间质中bcl—2明显下降，bax阳性细胞率明显升高(P＜0．01)。结论 bcl-2和bax与前列腺细胞凋亡的调节有关，β射线能使前列腺组织中bcl—2和bax含量发生变化，促使前列腺细胞凋亡。     

bcl-2,c-myc蛋白在胃癌前病变、胃癌中的表达

目的观察bcl－2，c－myc蛋白在胃癌前病变、胃癌中的表达．方法取内镜活检标本93例，其中慢性浅表性胃炎（CSG）21例，伴有上皮异型增生（gastricepithelialdysplasia，GED）者5例．慢性萎缩性胃炎（CAG）34例，伴有GED、肠上皮化生（IM）者23例．胃癌（GC）38例，癌旁粘膜伴有GED和IM者22例．SP免疫组化法检测bel－2，c－myc基因蛋白．结果bcl－2基因蛋白弥漫分布于细胞浆中，c－myc基因蛋白表达多在细胞浆中，少数细胞核内同时阳性．bcl－2，c－myc基因蛋白表达在CSG伴有GED粘膜中的阳性率分别为100％和60．0％．不伴GED组，前者为零，后者为75．0％在CAG伴有GED和IM粘膜中bcl－2，C－myc的阳性率分别为34．8％和73．9％．无GED和IM粘膜则前者为零，后者为63．6％．在胃炎中，伴有GED，IM与不伴有GED，IM组比较，bcl－2表达有显著性差异P＜0．05—0．001．c－myc表达则差异不明显P＞0．05．在GC中，bcl－2，c－myc阳性表达率分别为47．4％和76．3％．在GC癌旁粘膜中，伴有GED和IM者bcl－2阳性率为54．5％，c－myc为81．8％．不伴有GED，IM者bcl-2无阳性表达，c－myc阳性率为25％．GC及伴有GED，IM癌旁粘膜与不伴GED，IM的癌旁粘膜比较，bcl－2与c－myc的表达差异均非常显著（P＜0．001）．bcl－2，c－     

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺组织中bcl-2家族蛋白的表达

目的研究凋亡相关基因bcl鄄2家族蛋白bcl鄄2、mcl鄄1、bcl鄄XL和bax在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)甲状腺组织中的表达特征及与AITD发病机制之间的内在联系。方法以甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织为对照(C组,20例),采用免疫组织化学ElivisionTM二步染色法检测凋亡相关蛋白bcl鄄2、mcl鄄1、bcl鄄XL和bax在桥本甲状腺炎(HT组,33例)和Graves病(GD组,28例)患者甲状腺组织中的表达与分布。结果bcl鄄2蛋白表达强度GD组>C组>HT组(P<0.01);mcl鄄1蛋白表达强度GD组>C组>HT组(P<0.01);bcl鄄XL蛋白表达强度HT组和GD组强于C组(P<0.01),但HT组和GD组间差异无统计学意义(P>0.05);bax蛋白的表达强度HT组>GD组和C组(P<0.01),但GD组和C组间差异无统计学意义(P>0.05);HT组中,在淋巴细胞浸润区域附近的甲状腺滤泡上皮细胞(TEC)bcl鄄2表达弱,bax和mcl鄄1表达强;远离淋巴细胞浸润区域的TECbcl鄄2表达强,bax和mcl鄄1表达弱(P<0.05)。结论(1)抗凋亡bcl鄄2和mcl鄄1蛋白在HT中表达的减弱以及在GD中表达的增强对于HT甲状腺滤泡细胞凋亡的增加和GD甲状腺滤泡细胞的增殖可能起一定作用;(2)bax蛋白在HT中表达增强所起的促凋亡的作用对疾病的发生发展起一定作用;(3)bcl鄄2与bax表达强度的比值对于凋亡的调控起重要作用;(4)bcl鄄2家族蛋白bc     

吲哚美辛诱导胃癌细胞凋亡的机制研究

目的 :研究非甾体类抗炎药吲哚美辛诱导人胃癌细胞系SGC 790 1的凋亡作用及对COX 2mRNA表达及c myc、bcl 2、cas pase 3凋亡基因蛋白的表达 ,以探索其凋亡机制。方法 :胃癌细胞的凋亡用电子显微镜、AnnexinV FITC染色流式细胞仪技术测定。COX 2基因表达用RT PCR法测定。c myc、bcl 2和caspase 3蛋白表达用免疫细胞化学技术测定。结果 :吲哚美辛在浓度为 50 μmol/L时作用48、72h和浓度为 1 0 0和 2 0 0 μmol/L时作用 2 4、48、72h均可诱导胃癌细胞凋亡 ,凋亡率分别为 6 .48%、8.2 0 % ;9.1 4 %、1 2 .2 7%、1 5 .1 1 %和 9.95 %、1 4 .70 %、1 9.81 % ,呈浓度和时间依赖性。吲哚美辛可降低COX 2mRNA表达和bcl 2蛋白表达 ,增加c myc和caspase 3蛋白表达。 2 0 0 μmol/L吲哚美辛作用 72h ,bcl 2、c myc和caspase 3蛋白表达阳性率分别为 2 2 .8± 6 .5 %、42 .5± 1 3 .1 %和 31 8± 1 2 .7% ;对照组为 44 .6± 1 0 .1 %、2 4 .74± 9.5 %和 1 4 .8± 6 .4%。两者比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1 )。结论 :吲哚美辛可诱导胃癌细胞SGC 790 1凋亡 ,其机制涉及bcl 2表达下调、c myc表达上调及caspase 3激活。说明多基因调控参与其中     

动脉粥样硬化斑块中细胞凋亡及其相关基因的表达

目的 :研究动脉粥样硬化 (AS)病灶中细胞凋亡的发生情况及其相关基因的表达情况 ,探讨细胞凋亡与bcl 2、p5 3、C myc基因表达的内在联系。方法 :选择因AS住院手术患者 2 0例作为研究对象〔其中男 17例 ,女 3例 ,平均年龄 (6 6 .8± 9.86 )岁 ,主要取患者的股动脉〕 ,及因意外伤害手术患者的 10例〔其中男 8例 ,女 2例 ,平均年龄 (5 1.6± 11.97)岁〕作为正常对照。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)技术检测两组动脉标本的细胞凋亡情况 ,采用免疫组化的方法检测bcl 2、p5 3及C myc基因的表达情况 ,应用透射电镜进行两组动脉标本的细胞形态学观察。结果 :AS病灶中 ,细胞凋亡的发生率明显高于正常对照血管 (P <0 .0 1) ,bcl 2蛋白的表达明显降低 ,p5 3蛋白及C myc蛋白的表达明显升高 (P <0 .0 1) ;透射电镜证实AS病灶中有大量的平滑肌细胞发生凋亡。结论 :细胞凋亡是AS病灶中细胞死亡的一种主要形式 ,bcl 2、p5 3及C myc基因的表达可能对细胞凋亡的发生起重要的调控作用。     

缺血-再灌注诱导家兔房室结细胞凋亡的研究

为探讨缺血 再灌注对在体家兔房室结细胞凋亡的作用 ,以及凋亡相关调控基因蛋白 (Fas、bcl 2、bax)的表达 ,以家兔为实验对象 ,麻醉后开胸暴露心脏 ,结扎右冠状动脉 ,建立房室结缺血 再灌注模型。于预定时间处死动物 ,快速取出房室交界区组织 (3mm× 2mm× 1mm) ,10 %福尔马林磷酸盐缓冲液固定。采用TUNEL法检测房室结细胞凋亡 ;免疫组化法检测Fas、bcl 2、bax基因蛋白表达。结果 :①对照组及单纯缺血 10 ,30min组均未检测到细胞凋亡 ,缺血 6 0min组可见少量散在的凋亡细胞 ,缺血 12 0min房室结可见大量的细胞凋亡 ;②缺血 再灌注组 :不同缺血时间组均出现细胞凋亡 ,凋亡细胞数随缺血时间的延长而增加 (P <0 .0 5 ) ;③随缺血时间的延长 ,Fas、bax的表达明显增加 (P <0 .0 1) ,而bcl 2的表达则无明显增加 (P >0 .0 5 ) ;④缺血 再灌注组较相应时间单纯缺血组细胞凋亡数、Fas、bax表达均明显增加 (P <0 .0 1)。结论 :单纯缺血及缺血 再灌注均可诱导房室结细胞发生凋亡 ,这可能与该条件下Fas、bax基因蛋白的过量表达有关。     

幽门螺杆菌L型感染与食管癌及癌前病变中bcl-2表达关系的研究

目的研究幽门螺杆菌L型(HpL)感染对食管癌及癌前病变凋亡调节基因bcl2蛋白表达的影响,探讨Hp-L在食管癌发生发展过程中可能的致癌机制。方法应用免疫组化和革兰染色技术检测51例食管鳞状细胞癌(原位癌16例,浸润癌35例)及69例鳞状上皮增生性病变(单纯增生15例,轻、中、重度不典型增生分别为21例、18例、15例)和20例正常食管粘膜鳞状上皮组织中HpL型和bcl2蛋白的表达情况,对HpL型阳性和阴性组织的bcl2蛋白表达进行比较分析。结果不同组织类型HpL型检出率在中、重度不典型增生、原位癌、浸润癌均比较高(55.6%～62.9%),与正常组相比均有显著性差异(P<0.005)。在120例食管病变组织中,61例HpL型阳性者的bcl2蛋白表达阳性有48例,占78.7%;79例HpL型阴性者的bcl2蛋白表达阳性24例,占40.7%,两者比较有显著性差异(P<0.005)。各病变组中HpL型感染阳性组的bcl2蛋白表达阳性率高于HpL型阴性组的bcl2蛋白表达阳性率,其差异均有显著性(P<0.005～P<0.025)。表明HpL型感染与bcl2蛋白表达存在着相关性。结论HpL型可能通过影响bcl2蛋白表达,使食管粘膜上皮细胞凋亡调控异常而涉及食管癌的发生发展过程。     

胃上皮异型增生及肠化生时PCNA、p27蛋白和Survivin表达

目的检测胃上皮异型增生并不同肠上皮化生组织中PCNA、p27蛋白和生存素(Survivin)的表达。方法应用组织化学法和免疫组织化学S-P法检测44例结肠性化生(其中低度异型增生27例,高度异型增生17例)和51例小肠性化生(其中低度异型增生42例,高度异型增生9例)胃活检组织中PCNA、p27蛋白和Survivin的表达。结果PCNA和Survivin蛋白在胃上皮异型增生并结肠性化生与小肠性化生间的表达率差异有显著性。低度异型增生和高度异型增生间PCNA和Survivin蛋白表达率差异有显著性。p27蛋白在结肠性化生与小肠性化生间、低度异型增生和高度异型增生间表达差异无显著性。结论PCNA、p27和Survivin基因的改变不仅与肠上皮化生的类型有关,而且与胃上皮异型增生的程度密切相关。     

PCNA和FasL在鼻息肉术后囊泡上皮细胞中的表达

目的观察增殖细胞核抗原（PCNA）和凋亡相关因子配体（FasL）蛋白在鼻息肉术后囊泡上皮细胞中的表达,深入了解鼻息肉早期形成的病理特点,加深对鼻息肉发病机制的理解。方法鼻息肉术后2周,取患者术腔内囊泡组织25例,对照组为正常下鼻甲组织15例,石蜡包埋,HE染色确诊并观察组织结构。PCNA和FasL蛋白检测采用免疫组化染色法。结果①光镜下观察：术后增生组织形态学改变与鼻息肉相类似,22例囊泡上皮为假复层纤毛柱状上皮,3例为复层鳞状上皮,基底膜没有明显增厚,固有层水肿,上皮层及上皮下层有炎性细胞浸润;大部分病例上皮下可见黏液腺、混合腺及其导管,上皮下小血管扩张。②术后两周术腔囊泡组织上皮层PCNA、FasL阳性细胞的平均光密度均明显高于对照组（P均〈0.05）。③增生组织上皮细胞PCNA与FasL阳性细胞的平均光密度值呈显著正相关（r=0.742,P=0.017）。结论鼻息肉术后囊泡上皮表现出较强的增殖活性,可能与鼻息肉术后复发有密切关系;FasL介导的免疫逃避机制可能是上皮细胞过度增殖的原因。