G-CSF干预性治疗对大鼠急性心肌梗死区毛细血管形成的影响

目的探讨G-CSF的作用机制，为临床药物治疗提供依据。方法健康SD大鼠50只随机分为4组：A组（n=5）为正常组，B组（n=5）为药物动员组，C组（n=20）为急性心肌梗死（AMI）组，D组（n=20）为药物动员＋AMI组。C、D两组于术后1d、5d、9d、14d分批处死，收集标本检测。G-CSF给药方法：皮下注射10μg／kg．d．共5d。采用液氮损伤造成大鼠AMI模型。酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清血管内皮生长因子（VEGF）浓度，免疫组化测定心肌中血管内皮生长因子（VEGF）的含量和毛细血管密度。结果（1）B组、术后1dC组和术后1dD组血清中VEGF浓度均显著高于A组（P均小于0．05）。（2）术后1d、5d、9d、14dD组血清中VEGF浓度均明显高于C组（P〈0．05）。（3）术后1d、5d、9d、14dD组心肌梗死区VEGF含量均明显高于C组（P〈0．05）。（4）术后1d、5d、9d、14dD组心肌梗死区毛细血管密度均明显高于C组（P〈0．05）。结论G-CSF能促进大鼠急性心肌梗死区毛细血管增生．其部分机制可能为通过增强VEGF分泌实现。     

海水浸泡对兔脊髓损伤后TNF-α及VEGF表达的影响

目的 建立兔开放性脊髓损伤模型,观察海水浸泡对兔开放性脊髓损伤后TNF-α、VEGF表达的影响。方法 采用改良Allenś打击器造兔脊髓损伤模型。选用日本大耳兔,体质量2.5~3 kg,雌雄不拘。根据随机数字表,将60只大耳白兔随机分为两组,实验组:海水浸泡组(切除椎板并造脊髓损伤模型,海水浸泡60 min,n=30),对照组:单纯损伤组(切除椎板并造脊髓损伤模型,不浸泡,n=30)。分别于致伤后1、6、12、24、48小时5个时间点取伤段脊髓,光镜下观察伤段脊髓组织病理形态,免疫组织化学染色和计算机图形分析技术半定量化检测TNF-α、VEGF表达。结果 两组脊髓组织均发生了创伤性水肿,但水肿高峰期的时间点不同,单纯损伤组致伤后6小时达水肿高峰,而海水浸泡组于致伤后12小时达水肿高峰。免疫组化检测结果显示TNF-α、VEGF在两组中均有阳性表达,但两组在各时间点表达强度有差异(P < 0.05),且海水浸泡组TNF-α、VEGF表达的高峰与对照组不同。结论 海水浸泡早期延迟了创伤性脊髓损伤的病理改变,但最终发生的脊髓损害较对照组加重。TNF-α、VEGF的高表达与损伤有着密切关系,可作为海水浸泡脊髓损伤预后判断、伤情评估的指标。     

G-CSF对化疗后粒细胞缺乏患者NAP作用的研究

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对化疗患者的中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性的变化.方法选择30例恶性循环性肿瘤病人作为观察组,检测使用rhG-CSF治疗前后NAP的活性,另外选择29例恶性肿瘤患者作为对照组.结果治疗组与对照组相比较,使用rhG-CSF治疗后NAP的活性明显增高,两者比较有显著性差异(p<0.01).结论肿瘤患者化疗后粒细胞缺乏应用rhG-CSF治疗后可增强外周血中NAP的活性.     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶对烧伤后残余创面的促愈合作用

目的:探讨局部应用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)凝胶对烧伤后残余创面愈合的影响。方法:采用随机、双盲、安慰剂同体对照的研究方法,将120处烧伤后残余创面,随机分为试验组(n=60)和对照组(n=60)。试验组采用rhGM-CSF凝胶治疗,对照组采用空白基质安慰剂治疗,试验周期为21 d。观察用药后7,14 d的创面愈合率以及愈合时间,病理学观察创面肉芽组织中毛细血管数和纤维母细胞数,免疫组化检测创面增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:用药7,14 d后,试验组创面愈合率分别为(62±13)%,(95±10)%,均显著高于对照组(46±11)%,(83±12)%(P<0.01);试验组创面平均愈合时间为12.6 d[95%可信区间(11.9～13.3)d],较对照组16.8 d[95%可信区间(16.1～17.5)d]明显缩短(P<0.01)。用药7,14 d后,试验组创面肉芽组织中毛细血管数分别为(10.3±0.6),(14.5±0.9),均显著多于对照组(7.2±0.7),(10.4±0.8)(P<0.01);试验组创面肉芽组织中纤维母细胞数分别为(143.1±10.3),(137...     

粒细胞集落刺激因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织VEGF及bax的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑组织血管内皮生长因子(VEGF)及bax的影响。方法7d龄Wistar大鼠168只随机分为3组:假手术对照组(A组),HIBD组(B组),HIBD+G-CSF治疗组(C组)。各组根据处死时间不同又分为7个亚组:6,12,24,48,72h组,5d组,7d组。建立HIBD模型,C组在缺氧缺血后即刻给予G-CSF(100μg/kg)。各组分别于HIBD后不同时间点取脑组织,A组也在相应时间点取脑组织,用免疫组织化学法检测各组脑组织中VEGF及bax的表达。结果A组脑组织各时间点均无明显VEGF和bax阳性表达;B组各时间点脑组织均可见VEGF和bax阳性表达,24～48h为表达高峰期,以后逐渐下降;C组各时间点脑组织VEGF阳性表达较A组和B组均明显增高,bax阳性表达较A组增高,但较B组均明显降低。同一时间点3组VEGF阳性表达相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论①新生大鼠HIBD后各时间点脑组织VEGF表达增加,可能与HIBD后神经组织自身修复能力有关;bax表达亦增加,与神经细胞凋亡有关。②G-CSF治疗后可明显增加新生大鼠HIBD后脑组织VEGF表达,降低bax表达,从而促进脑组织缺氧缺血损伤后结构和功能上的恢复。     

G-CSF对化疗后粒细胞缺乏患者NAP作用的研究

目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对化疗患者的中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性的变化。方法 选择30例恶性循环性肿瘤病人作为观察组,检测使用rhG-CSF治疗前后NAP的活性,另外选择29例恶性肿瘤患者作为对照组。结果 治疗组与对照组相比较,使用rhG-CSF治疗后NAP的活性明显增高,两者比较有显著性差异(p<0.01)。结论 肿瘤患者化疗后粒细胞缺乏应用rhG-GSF治疗后可增强外周血中NAP的活性     

GM-CSF 凝胶对 SD 大鼠深 Ⅱ度烧伤创面溶痂的影响

目的：观察重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ rhGM-CSF）对深Ⅱ度烧伤创面坏死组织溶痂和促进创面愈合的作用效果。方法 SD大鼠70只用热液烧伤的方法（75℃、8 s）制成背部深Ⅱ度烧伤创面,烧伤大鼠随机分为实验组和对照组（每组35只）。对照组（ C组）：创面局部外用不含rhGM-CSF的凝胶基质,实验组（ E组）：创面局部外用rhGM-CSF凝胶（100μg/10 g）。分别于制创后1、3、5、7、10、14和21 d观察2组动物创面情况并摄像,记录创面溶痂时间;用图像分析软件计算不同时相点的溶痂率;并于不同的时相点取创面组织, HE染色观察创面组织形态及修复情况。结果从烧伤后第5天起各时相点,实验组大鼠创面溶痂率与对照组表现出差异;实验组创面溶痂时间为（10．73±2．47）d较对照组（14．26±2．65）d显著缩短（P＜0．01）;实验组和对照组创面愈合时间分别为（16．21±1.27）d和（18．05±1．36）d,差异有非常显著性（P＜0．01）。结论外源性rhGM-CSF的应用可促进深II度烧伤创面溶痂,从而促进深II度烧伤创面愈合。     

骨髓动员对大鼠骨髓源内皮祖细胞功能的影响

目的观察大鼠骨髓动员后骨髓源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能的改变,探讨骨髓动员后骨髓干细胞移植提高下肢缺血性疾病疗效的可能机制。方法按是否接受重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulatory factor,rhG-CSF)注射液注射将Lewis大鼠分为动员组和对照组,获取骨髓单个核细胞用EBM-2培养液进行诱导分化,培养7d后对贴壁细胞进行EPCs的鉴定;采用黏附能力测定实验观察EPCs的黏附能力。另取Lewis大鼠制备单侧后肢缺血模型,在模型制备后7d将8×106个EPCs移植至缺血侧后肢的肌肉内,按照移植EPCs来源不同将后肢缺血大鼠分为动员组和对照组。EPCs移植4周后行后肢血管造影,计算缺血侧后肢侧支血管数目。结果大鼠骨髓单个核细胞培养7d后黏附能力测定实验中动员组黏附EPCs数量为(22.3±2.8)个/×100高倍视野大于对照组(16.8±4.4)个/×100高倍视野(P<0.05);大鼠骨髓源EPCs移植至缺血肢体后4周动员组EPCs移植后缺血侧后肢侧支血管数目为(4.7±1.0)大于对照组(3.3±0.5)(P<0.05)。结论骨髓动员使骨髓源EPCs功能改善,其可能是骨髓动员后骨髓干细胞移植提高下肢缺血性疾病疗效的机制之一。     

老年人G-CSF动员方案的安全性分析

目的探讨应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)在老年供者(≥60岁)中动员外周血干细胞(PB-SC)的安全性。方法研究对象为28例周围动脉硬化闭塞病(PAOD)的老年组患者和29例异基因外周血干细胞移植术(allo-PBSCT)的中青年组供者,检测比较两组动员前后白细胞计数(WBC)、纤维蛋白原(FIB)、D二聚体(D-D)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)和抗凝血酶(AT)的变化。结果两组供者G-CSF动员后D-D、vWF:Ag明显升高(P<0.01),AT明显下降(P<0.01),老年组FIB及TAT亦升高(P<0.05,P<0.01),中青年组FIB升高(P<0.05)。老年组中D-D、TAT升高幅度显著高于中青年组(P<0.05)。老年组血栓事件及心脑血管意外发生率显著高于中青年组(P<0.05)。结论G-CSF动员可活化凝血系统及血小板,抑制抗凝系统,促使血栓事件的发生,对老年人作用更为显著。     

The effect of granulocyte colony-stimulating factor administration on carbon monoxide neurotoxicity in rats

Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) is considered to be a novel neuroprotective agent. Beneficial effects have been demonstrated by administrating G-CSF in different experimental stroke models. In this study, we evaluated the efficacy of G-CSF therapy on carbon monoxide (CO) neurotoxicity in rats exposed to acute CO poisoning. Immediately after exposure to 3,000 ppm of CO for 60 minutes, 50, 100, and 150 µg/kg of G-CSF or normal saline were administered to rats. Rats were sacrificed after 24 hours for serum marker analysis or 1 week for histopathological examination. Brain sections were stained with hematoxylin and eosin to assess leukocyte infiltration and hippocampal injury and with Luxol fast blue to assess demyelination. S100β and glial fibrillary acidic protein (GFAP) serum levels were evaluated by commercial enzyme-linked immunosorbent assay kits. According to histopathological findings, G-CSF administration significantly restricted white-matter demyelination (150 µg/kg) (P = 0.006). Also, serum levels of S100β in G-CSF-treated groups (100 and 150 µg/kg) decreased significantly (P < 0.01and P < 0.05, respectively). In all does, G-CSF significantly reduced serum levels of GFAP (P < 0.01 for 50 µg/kg and P < 0.001 for other doses). Administration of G-CSF after CO poisoning attenuates brain cell damage through remyelination. G-CSF also decreases levels of related biomarkers, such as S100β and GFAP.     

粒细胞集落刺激因子对健康供者的影响

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对正常供者的影响。方法2003年1月至2008年12月,在我院接受rhG-CSF动员剂进行的外周血造血干细胞捐赠者16例,给予rhG-CSF5～10μg/(kg·d),共5d。观察动员及采集过程的不良反应,检测动员前后血常规,观察CD3+、CD19+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+细胞比值在动员前后变化,并随访所有供者。结果10例供者在rhG-CSF动员过程中无严重不适,有3例出现低热、头痛、肌肉及骨骼疼痛、腰痛等,3例供者出现发热,其严重程度均在I级,但无需终止动员。WBC经rhG-CSF动员后,数量较动员前升高,停止动员后3d,全部供者的WBC恢复至动员前水平。Hb、PLT、CD3+、CD19+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+细胞比值在动员前、动员后72h及96h无明显变化,差异无统计学意义。结论健康供者可耐受C-CSF5～10μg/(kg·d)的动员和采集过程,且对T细胞亚群无影响。     

重组人粒细胞集落刺激因子对健康供者免疫细胞的影响及其应用安全性

目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在动员造血干细胞时对健康供者外周血T细胞表面活化信号(CD4 CD28 ,CD8 CD28 )、活化T细胞(CD4 CD25low)和调节性T细胞(CD4 CD25high)的影响及其应用的安全性。方法:30例造血干细胞健康供者[男19,女11,中位年龄28(14～56)岁]皮下注射rhG-CSF5μg/(kg.d),连续4～6d。用药前及停药后第1天、第3天及第7天用流式细胞术检测供者外周血CD4 T细胞和CD8 T细胞表面CD28表达的相对荧光强度(RFI),以及CD4 CD25low和CD4 CD25highT细胞分别在CD4 T细胞中的百分比;并在用药前及停药后第1天、第7天及第30天进行外周血白细胞、血小板、肝功能、肾功能以及脾超声检查。结果:CD4 CD28T细胞和CD8 CD28T细胞相对荧光强度表达在用药前分别为14.91±6.10和11.10±3.74,停药后第3天分别降至11.93±5.39和8.53±3.74;差异有统计学意义(P=0.034,P=0.033)。CD4 CD25lowT细胞在CD4 T细胞中百分比,用药前为(21.4±8.87)%,停药后第3天降至(18.23±5.89)%;差异无统计学意义(P>0.05)。CD4 CD25highT细胞在CD4 T细胞中百分比,用药前为(4.16±1.62)%,停药后第1天升至(6.43±2.46)%,差异有统计学意义(P=0.000)。白细胞计数和脾超声检查用药前分别为(5.91±1.02)×109/L和(33.76±2.76)cm2,停药后第1天分别升至(34.13±8.07)×109/L和(46.85±4.53)cm2;血小板计数用药前为(228.07±73.69)×109/L,停药后第7天降至(158.27±40.69)×109/L,差异均有统计学意义(P均=0.000)。ALT和Cr用药前分别为(28.23±7.69)IU/L和(60.70±15.86)μmol/L,停药后第1天分别为(27.17±7.23)IU/L和(61.10±16.38)μmol/L,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:rhG-CSF能减弱CD28的表达,降低CD4 CD25low和增加CD4 CD25high在CD4 T细胞中百分比,停药后第7天恢复至动员前水平,对健康供者肝肾功能无不利影响。     

诺帝对血管内皮生长因子诱导的人脐血源性内皮祖细胞功能的影响

探讨手性化合物诺帝(Nordy)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐血源性内皮祖细胞(EPCs)功能的影响及其意义。应用密度梯度离心法分离新鲜人脐血的单个核细胞，接种于EGM-2培养液中培养7～10 d获得内皮祖细胞(EPCs)。分别采用MTT法、Millicell-PCF培养小室系统和Matrigel内小管形成试验检测诺帝对VEGF刺激下EPCs增殖活性、迁移能力和体外形成小管样结构能力的影响。结果表明，100 μmol·L^-1诺帝作用24 h明显抑制EPCs增殖活性(P<0.05)，诺帝(25～50 μmol·L^-1)作用48～72 h也明显抑制EPCs增殖活性(P<0.05)。诺帝(25～100 μmol·L^-1)显著抑制VEGF诱导的EPCs迁移活性和体外形成小管样结构的能力(P<0.05)。诺帝能抑制体外VEGF诱导的人脐血源性EPCs增殖、迁移和体外小管形成能力，提示其具有抗EPCs效应。     

重组人粒细胞集落刺激因子在大鼠局灶性脑缺血中的抗炎作用

目的 探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)在大鼠局灶性脑缺血中的抗炎作用.方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血-再灌注(MCAO/R)模型,观察rhG-CSF对神经功能缺损评分的影响;用半定最逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法 测定脑缺血区白细胞介素(IL)-1βamRNA和肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA的表达.结果 与对照组相比,rhG-CSF治疗绀大鼠的神经功能缺损评分明显降低,脑缺血区IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达降低.结论 rhG-CSF可降低IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达,在缺血-再灌注损伤中有抗炎作用.     

Effects of electroacupuncture on endothelial function and circulating endothelial progenitor cells in patients with cerebral infarction

This study evaluated the effects of electroacupuncture (EA) on endothelial function and endothelial progenitor cells (EPC) in patients with cerebral infarction. In a randomized, placebo‐controlled, crossover study, 20 patients with cerebral infarction were randomized into two treatment groups: EA or placebo. Before and after each intervention, pulse amplitude tonometry (PAT) was used to assess endothelial function and peripheral blood was analyzed for the number of EPCs. Circulating EPCs were quantified by flow cytometry as CD45^lowCD34⁺KDR2⁺ cells. Plasma vascular endothelial growth factor (VEGF) and interleukin (IL)‐10 levels were measured. Seven days later, crossover was performed on each group, with each group receiving the other treatment using the same protocol. The PAT hyperemia ratio ranged from 1.57 ± 0.41 to 2.04 ± 0.51 after EA, representing a significant improvement (P = 0.002); however, there was no improvement in the placebo group (P = 0.48). Circulating EPCs, as measured by flow cytometry, increased to 110.6 ± 74.3/100 μL in the EA group (P = 0.001) but did not change in the placebo group (45.9 ± 35.3/100 μL, P = 0.08). The increases in the number of EPCs and the PAT ratio after treatment were correlated (r = 0.78, P < 0.001). Plasma VEGF levels increased with EA compared to baseline (261.2 ± 34.0 vs 334.9 ± 80.5 pg/mL, P = 0.003). The number of circulating EPCs was positively correlated with plasma levels of VEGF (r = 0.50, P = 0.02). In conclusion, EA induced improvement of EPC levels and the PAT ratio in patients with cerebral infarction.     

聚乙二醇单修饰重组人粒细胞集落刺激因子对大鼠血液学及骨髓毒性的研究

目的：研究聚乙二醇单修饰重组人粒细胞集落刺激因子（PEG-rhG-CSF）对SD大鼠血液学和骨髓造血的影响,为其应用于临床治疗提供资料。方法：将SD大鼠随机分为3个实验组和1个对照组,分别sc不同剂量PEG-rhG-CSF和溶媒对照品,每周给药3次,连续给药3个月,恢复期2周。在给药和恢复期结束时进行血液学和骨髓检查,并做t-检验统计分析。结果：给药结束后,高中低剂量组血液白细胞计数显著升高（升高了7.8～28.2倍）,中性粒细胞计数明显增加（增加了2.5～3.9倍）,网织红细胞计数显著增加,淋巴细胞、嗜酸性粒和红细胞计数显著降低;同时,高剂量组血红蛋白量和血小板计数显著降低,高、中剂量红细胞比容显著增加;此外,高中低剂量骨髓红细胞系比例、中幼及晚幼红细胞比例显著降低,而成熟粒细胞比例显著升高（升高了29.1%～79.1%）,粒/红（M/E）比值也显著升高（最高增加1.3倍）。上述改变在停药2周后,均恢复到正常水平,与对照组比较均无显著性差异。结论：PEG-rhG-CSF具有明显的促进造血功能,临床可用于治疗肿瘤化疗引起的中性粒细胞减少症。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对高氧暴露新生大鼠的影响

目的探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对高氧引起的新生大鼠肺损伤的干预作用。方法 32只大鼠随机均分为四组:95%氧浓度+GM-CSF 9μg/kg(A)组、GM-CSF9μg/kg(B)组、95%氧浓度+生理盐水(C)组和生理盐水(D)组。7d后计算肺湿质量与干质量比(W/D),检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数量、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及白细胞介素8(IL-8)水平,RT-PCR检测肺组织中MCP-1mRNA表达,HE染色进行肺损伤病理评分。结果与C、D组相比,A、B组肺损伤评分及W/D、BALF中白细胞和中性粒细胞计数、MCP-1及IL-8水平、MCP-1mRNA表达均明显增加(P<0.05);除MCP-1水平及其mRNA表达外,A组上述各指标与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GM-CSF对高氧暴露引起的新生大鼠肺损伤具有保护作用,这可能与损伤部位炎症反应受抑制有关。     

The efficiency of granulocyte colony-stimulating factor in hemorrhagic mucositis and febrile neutropenia resulted from methotrexate toxicity

Methotrexate (MTX) remains one of the most frequently used anti-metabolite agents in dermatology. MTX is an analog of folate that competitively and irreversibly inhibits dihydrofolate reductase. Oral mucositis is a common side effect of chemotherapy drugs and is characterized by erythema, pain, poor oral intake, pseudomembranous destruction, open ulceration and hemorrhage of the oral mucosa. In this paper, we report a 32-year-old female with a case of mucositis due to MTX intoxication that resulted from an overdose for rheumatoid arthritis. The patient had abdominal pain, vomiting, and nausea. During follow-up, the patient’s white blood cell count was found to be 0.9?×?10⁹/L (4–10?×?10⁹/L). The patient developed fever exceeding 40?°C. The patient was consulted to the hematology service. They suggested using granulocyte colony-stimulating factor for febrile neutropenia. On the fifth day of treatment, the white blood cell count reached 5.3?×?10⁹/L and the patient’s fever and mucositis started to resolve. Here, we presented a case of hemorrhagic mucositis and febrile neutropenia resulted from high-dose MTX that responded very well to granulocyte colony-stimulating factor treatment and we reviewed the literature.     

粒细胞集落刺激因子抗感染及抑制一氧化氮的性质

A proposed scheme between the possibleinteractions of pro- and anti-inflammatory cytokines,NO and G-CSF during severe inflammation/infection ispresented. Taken together, these data indicate that G-CSF exhibits anti-inflammatory properties which mayprove to be beneficial in situations associated with anincreased activity of the cellular immune system.Since the suppressive effects of G-CSF on theproduction of pro-inflammatory mediators like "FNF-αand nitric oxide are most likely neither cell type nor