基因工程杀蚊幼蓝藻的研究

基因工程杀蚊幼蓝藻的研究＊阎歌蚊虫是一些热带病的重要传播媒介。人们应用各项技术进行了杀灭和控制蚊虫的研究工作。化学杀虫剂在蚊虫控制方面起到一定的积极作用，但也带来环境污染及蚊虫抗性等问题。生物制剂如球形芽孢杆菌（Ｂ．ｓ）和苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）的应用，...     

基因工程杀蚊幼蓝藻的研究

应用基因工程手段研制杀蚊幼蓝藻,是解决苏云金杆菌和球形芽孢杆菌等短持效问题的途径之一。但国际上基因工程蓝藻的毒效一直限于较低水平,甚至需要破碎细胞才能检测到对蚊幼虫的毒杀作用。本文将球形芽孢杆菌毒素基因装配鱼腥藻启动子后,转移入鱼腥藻进行表达,所得基因工程株对蚊幼虫具有十分显著的毒效,对淡色库蚊幼虫24h半致死浓度为2.31×10~4细胞/ml;其对淡色库蚊、中华按蚊、白纹伊蚊幼虫的毒效依次递减,这与球形芽孢杆菌相似。由于鱼腥藻易培养、生态适应性广等,可望成为蚊虫特效控制的新型武器。     

干燥贮存的基因工程藻杀灭淡色库蚊幼虫的实验研究

目的 :观察干燥贮存的基因工程藻对淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法 :干燥、贮存和毒性测试。结果 :3种转基因工程藻经干燥贮存后仍具有较高杀蚊毒效 ;但随着贮存时间的延长 ,其杀灭作用有所下降。 3种转基因工程藻之间杀蚊幼效果无明显差异。结论 :蓝藻质粒在干燥贮存的工程藻内仍能稳定遗传 ,因而利于现场推广应用     

3种杀幼剂对蚊幼的现场控制效果研究

目的探讨3种杀幼剂对蚊幼的现场控制效果,为世博会期间蚊虫孳生地控制提供药物和技术储备。方法选择雨水井、水池、沟渠等为现场测试场所,根据面积或体积布施不同剂量的药物,观察施药后蚊幼密度下降情况并计算其持效期。结果 1.0~1.5 mg/L甲基嘧啶磷对雨水井中白纹伊蚊的控制效果达14 d以上,2.0~2.5 mg/L可维持21 d以上。1.0 mg/L甲基嘧啶磷对沟渠中三带喙库蚊的控制效果达10 d,1.5~2.5 mg/L可维持12 d。1.0~1.4 mg/L毒死蜱能有效控制雨水井中的白纹伊蚊和沟渠中的淡色库蚊,持效期长达35 d或更长,0.6~0.8 mg/L达14~21 d。0.4~0.8 mg/L 1%双硫磷能有效控制雨水井中的白纹伊蚊和沟渠中的淡色库蚊,但持效期较短,仅为10~14 d;1.2 mg/L为21 d。现场实验中,0.8 mg/L双硫磷对三带喙库蚊有14 d的控制效果,1.0~1.5 mg/L的控制持效期则为21 d。结论 3种药物均对白纹伊蚊、淡色库蚊、三带喙库蚊有较好的控制效果,持效期为毒死蜱双硫磷甲基嘧啶磷。相同药物对不同环境下不同蚊虫的控制效果有一定差异,因此须根据水体流动、水质状况等合理使用杀幼剂。     

基因工程灭蚊幼蓝藻的现场初步观察

将转入球形芽孢杆菌毒蛋白基因表达质粒的工程藻Ａｎａｂａｅｎａｓｕｂｔｒｏｐｉｃ（ｐＤＣ２６）大量培养后，应用于山东省平阴县进行现场观察。结果表明：工程藻在９．４１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ浓度以上时，４８ｈ可杀死９９～１００％蚊幼虫；在９．１３×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌ浓度时，４ｄ可杀死９９％以上蚊幼虫，连续观察２个多月，工程藻仍有明显杀蚊效果，实验组最多１４条／勺幼虫，而对照组２１０条／勺左右。观察还发现，工程藻对库蚊幼虫杀灭效果最好，其次为伊蚊，但高浓度时，对伊蚊仍有明显杀灭效果；由于按蚊幼虫密度太低，未能观察。此结果比单独使用球形芽孢杆菌杀灭蚊幼虫有明显提高，持续时间也延长，这将为蚊虫的持续控制提供一个新的有力武器。     

转基因蓝藻对不同龄期淡色库蚊幼虫杀灭作用的实验研究

目的：观察３种基因工程杀蚊幼蓝藻对不同龄期淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法：利用不同浓度基因工程藻，分别作用于不同龄期淡色库蚊幼虫，计算死亡率。结果：３种基因工程藻对不同龄期淡色库蚊幼虫杀灭作用相似；在藻细胞浓度低于１０４ｃｅｌｓ／ｍｌ时，杀灭作用由强到弱依次为Ⅰ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫；而当藻细胞浓度高于１０５ｃｅｌｓ／ｍｌ时，对该蚊不同龄期幼虫的杀灭作用均高效。结论：应用基因工程藻现场控制蚊幼虫宜尽早喷施，可提高杀灭效果。     

杀飞克水乳剂对淡色库蚊的药效观察

为评价杀飞克水乳剂 (ＳＯＬＦＡＣＥＷＯ5 0 )对淡色库蚊的杀灭效果 ,2 0 0 0年 2～ 8月在实验室进行了药效观察。1　材料与方法　 (1)试验用药 :杀飞克水乳剂 ,由德国拜耳公司驻京联络处提供。 (2 )试验蚊虫 :3～ 5日龄未吸血淡色库蚊 (Ｃｕｌｅｘｐｉｐｉｅｎｓ) ,由河南省卫生防疫站消杀科养蚊室提供。 (3)试验方法 :测量蚊笼上使用的脱脂纱布面积 ,计算纱布吸水情况。根据纱布吸水情况以 15ｍｇ/ｍ2 、2 0ｍｇ/ｍ2 和30ｍｇ/ｍ2 稀释药液。将纱布在不同浓度的药液中均匀浸湿 ,放至阴凉处晾干 ,并固定于蚊笼上。在不同浓度的蚊笼内各放 …     

转基因蓝藻地不同龄期淡色库蚊幼虫杀灭作用的实验研究

目的：观察３各基因工程杀蚊幼蓝藻对不同龄期淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法：利用不同基因工程藻，分别作用于不同龄期淡色库蚊幼虫，计算死亡率，结果：３种基因工程藻对不同龄期淡以库蚊幼虫杀灭作用相似；在藻细胞浓度低于１０＾４ｃｅｌｌｓ／ｍｌ时，杀灭作用由强到弱依次为Ｉ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫；而当藻细胞浓度高于１０＾５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ时，对该蚊不同龄期幼虫的杀灭作用均高效。结论：应用基因工程藻现场控制蚊     

灭幼宝0.5G对蚊,蝇的现场药效试验研究

本文报道了灭幼宝0.5G对淡色库蚊和家蝇幼虫的药效。现场试验证明,该制剂对蚊、蝇幼虫和蛹具有较好的阻碍化蛹和羽化作用,其持效期达35天之久。     

复方灭蚊缓释剂防治蚊虫的试验研究

参照农药登记卫生用杀虫药剂检测方法GB13917．4-92电热片蚊香的室内药效测定方法。以及GB13917．8—92模拟现场药效测定方法，通过对复方灭蚊缓释剂灭蚊效果测定，该产品对蚊虫不仅具有速效，其效时间达二个月以上。     

仔猪腹泻基因工程疫苗在环境中稳定性的初步研究

观察不同辐射强度的自然光照射下，对不锈钢表面上的仔猪腹泻基因工程疫苗（ＭＭ３）和大肠杆菌野生株（８０９９）存活的影响．结果表明，在日光总辐射条件下．暴在１０ｍｉｎ，累积辐射０．４７６ＭＪ／ｍ２．ＭＭ３同８０９９的存活率比值为１１３．９；散射条件下．暴露８０ｍｉｎ，累积散射０．８９７ＭＪ／ｍ２，ＭＭ３同８０９９的存活率比值为１：１１．２；黑暗条件下，暴露８０ｍｉｎ，ＭＭ３同８０９９的存活率比值为１：８．０。ｔ检验．无论日光总辐射、散射还是黑暗环境，差别都高度显著（Ｐ＜０．０１）．用含有氯霉素的ＬＢ培养基测定日光总辐射对ＭＭ３质粒稳定性的影响，未发现有质粒丢失．     

辽宁省淡色库蚊抗药性研究

目的：探讨辽宁省不同地区淡色库蚊的抗药性状况，以期合理使用杀虫剂。方法：采用浸渍法测定淡色库蚊幼虫的ＬＣ５０。结果：各地试虫对３种杀虫剂的敏感性有差异，采自朝阳、盘锦者对溴氰菊酯和敌敌畏较敏感，采自阜新、营口者具一定抗药性，二者对三氯杀虫酯的敏感性相差６倍。结论：抗药性的产生与用药史和使用频度有关；对溴氰菊酯应控制使用，不同地区对敌敌畏可区别使用。     

奋斗呐对三个蚊种的毒效试验

奋斗呐对三个蚊种幼虫、成虫毒效测定,表明均有较强的毒杀作用。幼虫以三带喙库蚊最敏感(LC_(50) 1.63×10~(-4)ppm),白纹伊蚊最差(LC_(50) 1.75×10~(-2)ppm);成蚊以白纹伊蚊最敏感,三带喙库蚊次之,淡色库蚊最差。但三者差异不显著,KD_(50)分别是0.01996、0.02458、0.0616g/m~2。     

胺菊酯选育淡色库蚊抗性株的研究

目的：实验室选育淡色库蚊胺菊酯抗性品系。方法：ＬＣ５０测定采用浸液法，选育工作参照ＯｍｅｒＳＭｅｔａｌ方法。结果：１９９６年连续用药筛选６代，抗性倍数在第４代曾达到１４倍，尔后种群数量逐渐衰落，至第６代未能继续传代。１９９７年重新选育，共连续用药筛选８代，前３代抗性水平逐步上升，达１３．０７倍；之后逐代下降，第６代降为４．５７倍，第７代有所回升，第８代又有降低。同时进一步研究抗性种群的吸血率、产卵率、各虫期的存活率等种群生存数据发现，与敏感品系相比抗性种群各值均有所下降，种群适合度有一定程度降低，相对适合度为０．２９。结论：本实验中抗胺菊酯品系抗性上升缓慢，可能是胺菊酯的作用机理及其作为击倒剂的作用特点所致。至于抗性种群有无遗传分化，尚需进一步研究。     

淡色库蚊和致倦库蚊对杀虫剂抗药性的调查研究

目的 了解我国不同地区淡色库蚊和致倦库蚊对常用拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性水平,为合理有效地使用化学杀虫剂提供依据.方法 采用滤纸接触筒法测定成蚊对10 000 mg/L溴氰菊酯和10 000 mg/L氯菊酯的1h击倒率和24 h死亡率.结果 北京市、河北和海南省淡色库蚊及致倦库蚊在溴氰菊酯和氯菊酯区分剂量下的24 h死亡率均＜80％,均为抗性种群.7株淡色库蚊对10 000 mg/L氯菊酯的24 h死亡率均＜50％;13株蚊虫对10 000 mg/L溴氰菊酯的抗性高低不一,24 h死亡率1％～66％不等.结论 北京市、河北及海南省淡色库蚊和致倦库蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂均产生了高抗性,蚊虫抗药性的产生与杀虫剂的使用密切相关,在创建文明卫生城市工作中要科学合理用药,开展抗药性监测,采取适当措施延缓蚊虫抗药性的产生和发展.     

仔猪腹泻基因工程疫苗PCR检测方法的建立

以仔猪腹泻基因工程疫苗工程质粒中ＬＴＡ－Ｂ＋变构区为模板，设计了用于该产品检测的一对各长为１８ｂＰ的ＰＣＲ引物和寡核苷酸探针。将菌体直接加热裂解后进行ＰＣＲ扩增，ＰＣＲ产物用琼脂糖凝胶电泳法和同位素标记的寡核苷酸探针杂交检测。研究结果表明，ＰＣＲ－琼酯糖凝胶电泳检测对ＬＴ肠毒汞菌株有良好的特异性，但不能区别野生ＬＴ与改构基因工程ＬＴ肠毒素菌株。用对工程菌特异性探针杂交能将工程菌与食野生ＬＴ肠毒素菌株区别出来，对仔猪腹泻基因工程疫苗具有高度的特异性和敏感性，可检出１ＣＦＵ工程菌。该方法的建立为进一步研究这种基因工程产品的生态环境影响提供了方法学基础。     

不同剂量奋斗呐浸泡不同布质蚊帐灭蚊效果观察

本文使用５％奋斗呐可湿性粉剂，分别以２．５ｍｇａ．ｉ／ｍ２、５ｍｇａ．ｉ／ｍ２、１０ｍｇａ．ｉ／ｍ２、２０ｍｇａ．ｉ／ｍ２和３０ｍｇａ．ｉ／ｍ２五个不同剂量浸泡棉纱，尼龙纱两种不同布质的蚊帐，进行蚊虫防制试验。同等剂量比较，速效和残效尼龙纱较锦质蚊帐毒杀效果为好。各剂量组ＫＴ５０均在３０ｍｉｎ以内，２４ｈ死亡率达１００％；用加热加速试验方法观察，所获指标推算持效可达１年以上。结果还表明，所用剂量尼龙纱蚊帐１０ｍｇａ．ｉ／ｍ２、棉纱蚊帐２０ｍｇａ．ｉ／ｍ２防制效果均较理想。