改良"二袖套法"制备大鼠原位肝移植动物模型

目的：介绍改进的“二袖套法”法大鼠原位肝移植动物模型。方法：采用改进的“二袖套”法进行110只大鼠原位肝移植。结果：切取供肝时间平均37min，修肝时间平均13min，无肝期平均14min，术中和术后4h内死亡8只，手术成功率达93%。术后1周死亡11只，1周存活率为89%，主要死亡原因为感染和胆道梗阻。结论：改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植具有无肝期短、手术成功率高，大鼠术后存活时间长的优点，是大鼠原位肝移植的理想术式。     

大鼠改良式原位肝移植手术技巧探讨

目的 探讨建立稳定大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧. 方法成年雄性SD大鼠200只,体重200～250 g;成年雄性Wistar大鼠60只,体重230～280 g,供体体重小于受体约30 g.其中SD大鼠为供、受体的同基因肝移植70只(SD-SD组),SD、Wistar分别为供、受体的同种异体肝移植60只(SD.Wistar组).采用改良二袖套法行大鼠原位肝移植,充分暴露第一肝门,不翻动肝脏先行门静脉灌注;在体一步法离断肝上下腔静脉,不带膈肌环;吻合肝上下腔静脉采用单线连续缝合;双线牵引法安装门静脉袖套.术后充分补液维持大鼠血液动力学稳定. 结果 供体手术时间(38.2 ±2.5)min,受体手术时间(45.6±3.5)min,无肝期(15.1±2.2)min,手术成功率93%,1周存活率92%,与传统二袖套法比较差异有统计学意义(P＜0.05).SD-SD组手术成功64只,受体存活时间2～9个月,平均145 d;术后约3 d 肝功能恢复正常,肝组织病理无明显变化.SD-Wistar组手术成功57只,受体存活时间8～20 d,平均10.5 d;大鼠于术后3～5 d出现急性排斥反应,未经处理后均死亡. 结论 改良式肝移植操作简便,成功率高,可为大鼠原位肝移植实验提供稳定可靠的动物模型.     

"二袖套法"制备大鼠原位肝移植模型的方法改进

目的在Kamada "二袖套法"的基础上对大鼠肝移植手术方法进行改进,提高大鼠肝移植模型的稳定性和动物存活率.方法在Kamada"二袖套法"大鼠肝移植基础上对供肝切取、受体手术及术中管理进行改进行大鼠肝移植60例,Kamada"二袖套法"行大鼠肝移植20例.比较两组大鼠肝移植术后并发症的发生率和1周生存率.结果在Kamada"二袖套法"基础上改进的肝移植大鼠并发症发生率较少,1周存活率91.7%,经典Kamada"二袖套法"肝移植大鼠1周存活率70%.结论改进的大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率高,模型稳定性好.     

“二袖套法”制备大鼠原位肝移植模型的方法改进

目的 在Kamada“二袖套法”的基础上对大鼠肝移植手术方法进行改进，提高大鼠肝移植模型的稳定性和动物存活率。方法在Kamada“二袖套法”大鼠肝移植基础上对供肝切取、受体手术及术中管理进行改进行大鼠肝移植60例，Kamada“二袖套法”行大鼠肝移植20例。比较两组大鼠肝移植术后并发症的发生率和1周生存率。结果在Kamada“二袖套法”基础上改进的肝移植大鼠并发症发生率较少，1周存活率91．7％，经典Kamada“二袖套法”肝移植大鼠1周存活率70％。结论改进的大鼠原位肝移植术操作简便，手术成功率高，模型稳定性好。     

大鼠原位肝移植模型的建立及术式改进

目的探讨用双袖套法建立大鼠原位肝移植模型的手术改进方法. 方法在Kamada等的袖套法吻合血管的基础上进行改进,供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注,肝上下腔静脉用缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合下进行原位肝移植360例(次). 结果施行大鼠原位肝移植其供体手术时间(31.2±5.0)分钟,供肝修整时间(12.0±3.0)分钟,受体手术时间(45.0±5.5)分钟,无肝期(20.0±2.5)分钟,手术死亡31例,其中出血12例,肝下下腔静脉血栓8例,肝上下腔静脉回流不畅7例,袖套扭转或脱落4例.术后成活2天以上329例,成活率为91.4%.非干预组(非药物治疗组)1周存活率达86.5%. 结论改进的大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率高,可作为肝移植实验可靠、稳定的动物模型.     

大鼠DCD供肝原位肝移植术后早期死亡的原因分析

目的建立稳定的大鼠心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肝原位肝移植模型,分析移植后24 h内大鼠死亡原因并探索相应的改进措施。方法所有供肝获取前经历供体心脏停跳10 min,采用改良Kamada的"二袖套"吻合法完成大鼠DCD供肝原位肝移植手术,记录各个手术阶段所用时间及术后大鼠的死亡情况。结果在40 d内完成大鼠DCD供肝原位肝移植手术100例,供体手术时间为(20±5)min,受体手术时间为(55±5)min,无肝期为(20±3)min。移植术后受体一般情况可。术中死亡9例,其中术中大出血4例、麻醉意外1例、无肝期过长1例、套管置入失败1例、空气栓塞2例;术后12 h内死亡22例,其中术后肠道坏死6例、术后吻合口渗血6例、术后肺水肿3例、术中失血量过多4例、术后血管栓塞2例、不明原因死亡1例;12~24 h死亡19例,其中术后肠道坏死9例、术后吻合口渗血3例、术后肺水肿2例、术中失血量过多1例、术后血管栓塞1例、不明原因死亡3例。结论导致大鼠DCD供肝原位肝移植术后早期死亡的原因很多,其中术后肠道坏死、术中及术后出血、术后肺水肿及术后血管栓塞是主要的致死因素。针对术后死亡原因采取相应的预防及改进措施能大大提高大鼠术后存活率,从而建立稳定的大鼠DCD供肝原位肝移植模型。     

改良单人操作"双袖套法"建立大鼠原位肝移植模型

目的 探讨单人操作高效、稳定地建立大鼠原位肝移植模型的技术改进.方法 参照Kamada"二袖套"法,主要对供肝的灌注、切取、修整和受体缝合等进行改良,分别用传统方法(简称对照组)与改良后的方法(简称为实验组)行大鼠原位肝移植80例,比较两组间成功率及1周、1月的存活率.结果 实验组与对照组比较,实验组在供体手术时间、受体手术时间、无肝期时间均较对照组明显缩短(P<0.05),其在1周存活率、1月存活率均较对照组明显提高(P<0.05).结论 该方法能有效的缩短供、受体手术时间,提高了供肝质量,明显提高了受体存活率,是一种稳定、可靠、有效的建立大鼠肝移植动物模型的方法.     

改良"二袖套法"大鼠原位肝移植及早期并发症预防

目的研究大鼠原位肝移植模型的手术技巧及术后并发症的预防及处理。方法采用改良"二袖套法"建立大鼠原位肝移植模型,其中供体、受体各160只。结果在肝移植初期共行手术120对,48 h存活率为46.7%。后期手术40对,48 h存活率95.0%。结论适量的麻醉、熟练的供肝游离灌洗和修整技术以及精细的显微外科技术操作是大鼠原位肝移植的关键。     

受者肝分步切除的三袖套法大鼠原位肝移植术

目的 制作改进的三袖套法大鼠原位肝移植模型。方法 供肝置入时先不切除受者肝,而是在吻合血管的过程中分步切除受者肝。结果 该术式在大缩短了无肝期,平均仅１１．８分钟,进一步简化了手术操作,手术成功率２４／２６。结论 该模型可用于大鼠肝移植的研究。     

重建肝动脉血供大鼠原位肝移植模型的术式探讨

目的　探讨重建肝动脉血供的大鼠原位肝移植 (OLT)模型的手术操作方法 ,并对几种术式的效果进行了比较。方法　采用重建肝动脉血供的大鼠原位肝移植 60例 ,其中动脉“袖管式微血管缝合法”2 0例 ,动脉“套管法”2 0例和动脉“支架法”2 0例。同期行不吻合肝动脉的经典“二袖套法”96例。结果　各组手术时间 (包括供体手术 ) :“袖管式缝合法”(118.3± 12 .9)min ,“套管法”(10 6.2± 11.6)min ,“支架法”(93 .8± 10 .2 )min ,经典“二袖套法”(88.2± 9.6)min。无肝期均控制在 (2 0 .0± 2 .5 )min。经典“二袖套法”大鼠 1周存活率为 86.5 % (83 /96) ,重建肝动脉血供的大鼠 1周存活率为 86.7% (5 2 /60 )。胆道并发症发生率分别为 17.7% (17/96)和 6.7% (4 /60 )。结论　肝动脉重建的OLT本身并不能延长肝移植大鼠的生存时间 ,而肝动脉重建后可以减少术后胆道并发症的发生率。     

大鼠原位肝移植制作过程中常见失败原因分析及处理策略

目的：分析大鼠位肝移植制作过程中常见失败原因及总结相应的处理策略。
方法：历时10个月,采用改良Kamada二袖套法制作大鼠原位肝移植模型150例。将每完成50例作为1个实验阶段,分早、中、后期3个阶段对失败原因进行分析,总结经验。
结果：大鼠原位肝移植常见失败原因在早期阶段主要以气胸（5.8%）,术中出血（10.6%）,无肝期过长（50.4%）为主;中、后期主要以肝上下腔静脉吻合失败（21.0%）,无肝期过长（20.6%）,门静脉及肝下下腔静脉袖套吻合失败（17.6%）,胆管重建失败（5.6%）为主。
结论：导致大鼠原位肝移植模型制作失败的原因较多,无肝期是影响成功与否的关键,及时地对失败原因进行分析总结并寻找合理的解决办法,有助于初学者熟练地掌握该技术。     

“二袖套法”大鼠原位肝移植的技术改进

目的 探讨大鼠原位肝移植(OLT)模型的技术改进方法,并观察移植后的排斥反应。方法 将“二袖套法”大鼠肝移植技术进行了改进;并行SD→SD,SD→Wistar大鼠肝移植各30例,观察术后排斥情况。结果 全组肝移植手术无肝期约为15min。大鼠无手术死亡。SD-SD大鼠肝移植后3周内存活率为97％;SD→Wistar大鼠肝移植后8～15d死亡,组织病理学证实存在不同程度的排斥反应。结论 采用该改良大鼠肝移植方法可明显缩短手术时间,降低术后并发症,提高移植大鼠的术后生存率。SD-Wistar大鼠的肝移植可作为较理想的研究肝移植排斥反应的动物模型。     

小鼠原位肝移植模型及移植肝24h冷缺血再灌注模型的建立

目的探讨单人袖套法建立小鼠原位不重建动脉肝移植模型的效果,初步研究移植肝24h冷缺血再灌注损伤模型的构建。方法术者接受单人袖套法建立小鼠原位不重建动脉肝移植模型的操作训练,每个训练周期完成10对小鼠的操作,共进行6个训练周期。分析每个训练周期内受体小鼠生存率以及受体小鼠生存率与术中无肝期时间的关系。3只小鼠接受冷保存24h的供肝,以建立移植肝24h缺血再灌注模型,术后6h检N／b鼠血清ALT、AST水平并对移植肝组织进行Suzuki评分。结果术者经过训练后,第6个训练周期内受体小鼠7,14,100d的生存率分别为100％,90％,60％。术中无肝期时间≤20min组与20min〈术中无肝期时间≤24min组术后100d生存率分别为56％和22％,差异有统计学意义（X^2=5．519,P〈0．05）。3只接受24h冷保存供肝的受体小鼠血清ALT、AST中位数分别为12350U／L、9870U／L,移植肝Suzuki评分为（10．6±0．6）分,提示移植肝出现了重度的组织学损伤。结论单人袖套法建立小鼠原位不重建动脉肝移植模型技术简单易学,能够满足研究对小鼠的存活需求。本研究建立的移植肝24h冷缺血再灌注模型出现了损伤改变,能够满足后期研究需求。     

Extrahepatic Metabolism of Sevoflurane in Children Undergoing Orthotopic Liver Transplantation

Background: Sevoflurane is metabolized by cytochrome P450 and produces inorganic fluoride. The anhepatic phase of liver transplantation provides a useful tool to study the extrahepatic metabolism of drugs. The authors therefore studied the extrahepatic metabolism of sevoflurane by measuring the fluoride production in children receiving sevoflurane solely during the anhepatic phase of orthotopic liver transplantation.

Methods: Children with end-stage liver disease undergoing orthotopic liver transplantation were studied. Anesthesia was provided with isoflurane, sufentanil, and pancuronium. In one group, isoflurane was replaced by sevoflurane as soon as the liver was removed from the patient and maintained until reperfusion of the new liver. Arterial blood samples were drawn at induction, before removal of the liver, 15 min and 30 min after the beginning of the anhepatic phase, at the unclamping of the new liver, and finally 60 and 120 min after the unclamping. Plasma fluoride concentrations were determined by ion-selective electrode.

Results: No differences between the two groups (n = 10) regarding age, weight, duration of the anhepatic phase, or basal level of inorganic fluoride were found. The fluoride concentration increased significantly as soon as sevoflurane was introduced; it remained stable in the group receiving isoflurane. The peak fluoride concentration was also significantly higher in the first group (mean +/- SD: 5.5 +/- 0.8 [mu]M (sevoflurane group) versus 1.4 +/- 0.5 [mu]M (isoflurane group) P < 0.05).     

大鼠原位肝移植模型制作过程中麻醉方法的选择

目的 研究在大鼠原位肝移植模型制作过程中麻醉对大鼠的影响，以便合理选择正确的麻醉方法。方法 用SD大鼠以改进的二袖套法制作大鼠原位肝移植模型。将100只大鼠随机分为5组：对照组，乙醚组，氯胺酮组，水合氯醛组，戊巴比妥组。观察每种麻醉剂的麻醉过程、对大鼠生理和肝功能的影响以及无肝期开始后的死亡率。结果 每种麻醉剂的麻醉过程不尽相同。麻醉对大鼠生理均有影响，其中以乙醚的影响较小，戊巴比妥有较大的肝毒性。无肝期开始后氯胺酮组、水合氯醛组、戊巴比妥组死亡率较高，而乙醚组无死亡发生。结论 各种麻醉对肝移植大鼠均有明显影响。乙醚具有对生理、肝功影响小，无肝期开始后死亡率低的优点，可作为制作大鼠原位肝移植模型的首选麻醉方法。     

小型猪原位肝移植模型的建立与评价

目的 探讨建立放弃静脉转流的小型猪原位肝移植模型的可行性。方法 选用广西巴马小型猪(3-6月龄,8-11kg)为实验动物,共实施原位肝移植10例次。供体肝脏游离、冷灌注、切取、修整以及UW保存按常规方法进行。受体术中肝脏游离后夹闭肝上、肝下下腔静脉和门静脉并切除受体肝脏,各血管断端与供肝相应血管进行端端吻合,肝上下腔静脉和门静脉吻合完毕即开放肝脏血流,在此过程中未使用静脉转流,此后吻合肝动脉、胆管。结果 本组10例次肝移植手术后一周存活率90％(9/10),无肝期时间31.3±2.67min,无肝期血压显著下降(MAP4.5±1.58kPa)但肝血流开放后能较快恢复并渐趋平稳。结论 本组结果表明,非静脉转流条件下的小型猪肝移植模型是一操作方便、易于复制同时又具有较好重复性和稳定性的大动物肝移植模型,能应用于肝移植的系列实验研究。     

大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧探讨

目的 建立一个稳定的大鼠原位肝移植模型,探讨其手术技巧。方法在Kamada“二袖套法”的基础上进行改良。供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注;肝上下腔静脉用连续缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合．胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果共施行大鼠原位肝移植140例,无肝期平均11min．手术成功率为97％,大鼠1周存活率为95％。结论改良的两袖套法具有操作简便、无肝期短、手术成功率高、大鼠术后存活时间长的优点,是大鼠原位肝移植的理想术式。娴熟细致的外科操作、受体无肝期的长短是决定动物存活的关键。