氨溴索对铜绿假单胞菌密度感应缺陷株生物膜细菌活力和黏附作用的影响

目的 研究氨溴索对铜绿假单胞菌野生株PAO1及密度感应缺陷株(ΔlasI ΔrhlI基因缺陷)生物膜(BF)细菌活力及早期黏附的影响.方法 利用平板计数法测定不同浓度(0、1.875、3.75mg/ml)氨溴索对PAO1菌株、ΔlasI ΔrhlI菌株生物膜菌落的清除效应;荧光多功能酶标仪检测不同浓度氨溴索作用后PAO1菌株、ΔlasI ΔrhlI菌株的荧光强度,计算黏附率以反映干预对细菌黏附的影响.结果 氨溴索作用后,两种菌株的活菌生存率和黏附率均出现下降,ΔlasIΔrhlI株活菌生存率较PAO1株下降更明显(P＜0.05),而PAO1株黏附率较ΔlasI ΔrhlI株下降更明显(P＜0.05).结论 氨溴索具有拮抗密度感应系统的作用,可用于抗细菌生物膜活力,为难治性铜绿假单胞菌感染的治疗提供了新思路.     

小RNA对细菌生物膜形成的调控研究进展

小RNA 在细菌的生长过程中发挥重要调控作用,在感受到外界信号,如营养物浓度、温度、pH值和渗透压的改变时,小RNA可通过影响靶标基因的表达以适应环境的变化.细菌由浮游状态向固体附着生长状态的转变过程中自身会产生一种细胞外基质,即生物膜,其主要由蛋白质、多糖和DNA组成.最新研究表明,小RNA在调控细菌生物膜形成的系统中发挥着重要的作用.小RNA通过与靶标mRNA碱基配对或与调节蛋白相互作用,在细菌生物膜形成中发挥调控作用.该文综述了小RNA对细菌生物膜形成的调控机制和途径,阐述了3种经典的小RNA调控细菌生物膜形成的模型,以及小RNA调控对细菌生物膜形成的研究现状和发展方向.     

生物膜形成与留置导尿管相关感染的预防研究

细菌生物膜是指不可逆转粘附在固相表面的细菌团块,被其自身分泌的胞外聚合物基质包埋,不同于单个浮游状态细菌的存在方式.随着导尿管在医院临床上的广泛应用,如何控制生物膜的形成将成为预防留置导尿管相关感染的关键所在,兹就以两者关系的研究进展做一综述.     

细菌生物膜的形成及其耐药性研究进展

细菌生物膜是由许多细菌附着于物体表面构成,表面包被多聚糖基质,由特定的基因调控,不同于浮游状态细菌的一种存在形式.现在已有许多技术可用来检测生物膜的成分.形成的生物膜具有极强的耐药性,其机制主要通过(1)延长抗菌剂渗透生物膜的时间;(2)改变生物膜中微生物生长率;(3)生物膜生长模式的其他生理变化.     

重组人β-防御素3对铜绿假单胞菌生物膜结构影响的初步研究

目的研究重组人β-防御素3（rhBD-3）对铜绿假单胞菌（PA）形成生物膜的体外抑制作用。方法平板培养法培养PA,得到早期和成熟期生物膜;琼脂糖弥散抗菌法测定最低抑菌浓度（M IC）;扫描电镜（SEM）观察载体表面BF形态;连续稀释法行活菌计数。结果 rhBD-3对PA的M IC值是64μg/m l。rhBD-3作用后8、16、24 h,膜片载体表面PA活菌黏附量减少,且随着rhBD-3浓度的增高,活菌群数量进行性减少;SEM观察见rhBD-3组少量散在的游离细菌,有少量小斑片状多糖复合物,而空白对照组可见大量分布均匀的微菌落和游离细菌及多糖复合物交联。结论 rhBD-3可以抑制PA的BF形成,并对早期和成熟期BF具有破坏作用。     

变形链球菌菌斑生物膜初期粘附机制研究进展

<正>细菌生物膜是微生物在自然界中的一种独特存在方式。与浮游细胞相比,细菌生物膜具有更加适应复杂生存环境的特点^[1]。99%以上的自然界中细菌以生物膜形式存在,60%以上临床患者发生感染均与细菌生物膜的形成有关^[2-3]。有研究表明,与浮游状态的同种细菌相比,存在于菌斑生物膜中的变形链球菌具有更强的毒力、更大的耐药性以及更高的对抗宿主免疫防御能力。变形链球菌能否在口腔环境中长期存活并发挥其致龋特性,与菌斑生物膜这一特殊结构密切相关。     

细菌生物膜形成与慢性难愈合创面发生

皮肤慢性难愈合创面的存在巳经成为影响患者工作和生活质量以及造成沉重医疗负担的重要原因之一.因此,这类疾病的处理已经引起人们的高度重视.最近,有关细菌生物膜的研究及其对慢性难愈合创面形成的影响引起了人们极大的兴趣.本文讨论细菌生物膜的特征、形成机制、对慢性难愈合创面发生的作用以及可能的处理方法等.     

脑脊液细胞的三种收集方法比较

目的 挑选一个良好的收集脑脊液细胞，并便于观察的方法。方法 取脑脊液，用离心沉淀法、自然沉淀法、玻片离心法收集脑脊液细胞，瑞－姬染色液染色细胞，观察细胞检出阳性率与形态。结果 玻片离心法的细胞检出阳性率、细胞形态均明显优于离心沉淀法与自然沉淀法，而离心沉淀法与自然沉淀法无明显差异。结论 检查脑脊液细胞时，玻片离心法值得推广。     

模拟微重力对肺炎克雷伯菌表型和基因型的影响

目的 探索肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）在模拟微重力（SMG）环境下的表型和基因型变化。方法 利用旋转细胞培养系统（RCCS）建立地面上的SMG,分别在SMG和正常重力（NG）下培养K.pneumoniae,通过生长曲线、结晶紫染色、纸片扩散法测定2种环境下K.pneumoniae的生长速率、生物膜形成能力和对抗菌药物敏感性的变化;再对样本重测序以分析突变基因。结果 和NG组相比,SMG中的K. pneumoniae生长速率变缓、结晶紫染色程度加深、对多种药物的敏感性明显改变;重测序结果显示共有19个基因发生突变;SMG下2个代谢相关基因发生突变;NG下多个突变基因与信号转导系统和生物膜形成有关。结论 SMG下,K.pneumoniae生长变缓、生物膜形成能力增强、对多种抗菌药物的敏感性发生变化,代谢相关基因发生突变。     

钛-6铝-4钒颗粒对破骨细胞形态和功能的影响

目的在体外条件下观察钛-6铝-4钒（Ti-6AL-4V）颗粒对破骨细胞形态和功能的影响。方法取新西兰大耳兔破骨细胞培养在玻璃盖玻片和牛皮质骨片上，实验组用0．1mg／ml颗粒刺激，经不同时段培养后行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，观察颗粒对破骨细胞形态的影响。对骨片上形成的骨吸收陷窝进行甲苯胺蓝染色观察，并用计算机图像分析软件评估吸收面积的大小。结果破骨细胞可以吞噬颗粒，形态变得不规则，特征性TRAP染色加深，较早出现凋亡征象。经颗粒刺激后在骨片上形成的骨吸收陷窝面积较大、数量较多。结论破骨细胞有吞噬功能，吞噬Ti-6AL-4V颗粒后发生形态和功能的变化，骨吸收功能增强。     

番石榴叶水提取物对11种细菌的体外抑菌实验

目的观察番石榴叶水煎剂对蜡状芽孢杆菌、阴沟肠杆菌等11种细菌的抑菌效果。方法蜡状芽孢杆菌、阴沟肠杆菌等11种实验菌为受试菌,采用微量肉汤稀释法测定番石榴叶水提取物对它们的最低抑菌浓度（MIC）。结果番石榴叶对阴沟肠杆菌、蜡状芽孢杆菌、宋内志贺菌、咽颊炎链球菌、肺炎克雷伯菌、威斯康星米勒菌、产酸克雷伯菌、肠粪肠球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均具有不同程度的抑菌作用,其中对蜡状芽孢杆菌、阴沟肠杆菌、咽颊炎链球菌、威斯康星米勒菌和铜绿假单胞菌的抑菌作用最强,MIC为0．031g／ml。结论番石榴叶水提取物抑菌作用强,抗菌谱较广,它在抗菌药物方面具有较好的开发价值。     

20种滇东南中草药体外抗菌活性筛选

目的测定20种采自滇东南红河州原始森林中草药的80%乙醇提取物的体外抗菌活性及对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测的活性,筛选出抑菌效果好的药材进一步提取分离并追踪其有效成分。方法制备20种云南中草药醇提物,采用常规琼脂扩散法对金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌,白色念珠菌,铜绿假单胞杆菌以及临床分离得到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株进行体外抑菌实验,倍比稀释法测定最小抑制浓度（MIC）和最小细菌浓度。结果 20种云南中草药的醇提物中有16种对标准金黄色葡萄球菌、标准大肠埃希菌、标准铜绿假单胞菌、标准白色念珠菌均有不同程度的抑制活性;其中迟花杜鹃,壮丽含笑等7种中草药对标准金黄色葡萄球菌的抑制作用较好,对标准金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径在11～24 mm,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株抑菌直径在9～26 mm,MIC在8～512μg.ml-1。结论壮丽含笑和迟花杜鹃等7种中药具有广谱的抗菌活性,且对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株也有较好的抑制作用。     

纤维蛋白凝胶包裹的万古霉素藻酸盐微球的制备与优选

目的 制备和优化纤维蛋白凝胶包裹的万古霉素藻酸盐微球(fibrin-gel-coated vancomycin alginate beads,FG-Vanco-AB),探讨其在骨科抗感染治疗中的可能应用.方法 应用滴注法制备万古霉素藻酸盐微球,通过分别改变万古霉素和藻酸盐溶液的浓度,优选万古霉素含量高的微球;然后用不同浓度纤维蛋白凝胶包裹,通过检测各组万古霉素有效的释放时间来筛选适当包裹微球.结果 随着万占霉素和藻酸盐溶液浓度的升高,微球中的万占霉素含量增高,16%藻酸盐和50 mg/ml万古霉素等体积混合液制备的微球中万古霉素含量最高,达(27.36±0.90)%;在前述微球的基础上,用不同浓度纤维蛋白包裹的微球的缓释实验显示,75 ms/ml纤维蛋白包裹的微球释放的万占霉素的浓度达到可有效杀灭金黄色葡萄球菌的天数为19 d.结论 优选后的FGVanco-AB可达到有效杀菌浓度的释放天数显著延长,增加了临床应用的可能性.     

化工企业成批烧伤患者感染病原菌的特点及耐药性分析

目的 回顾性分析本单位近年来成批烧伤患者和非成批烧伤患者院内感染的主要病原菌分布特点及其耐药性的流行病学变化。方法 将本科2008年1月-2014年12月收治的316例成批烧伤患者与同时期收治的361例非成批烧伤患者的病历资料进行对比,分析两组患者各年度创面分泌物、血液、痰液、气管套管及深静脉置管标本中的主要病原菌菌种、分布特点及其耐药性变化。结果 成批烧伤组感染革兰氏阳性(G＋)球菌与革兰氏阴性（Gˉ）杆菌的患者共176例（55.70%）,非成批烧伤组感染革兰氏阳性球菌与革兰氏阴性杆菌的患者共135例（37.40%）,成批烧伤组的感染发生率明显高于非成批烧伤组。成批烧伤组检出主要病原菌253株（52.93%）,其中革兰氏阳性球菌139株（54.94%）,分别为金黄色葡萄球菌91株,表皮葡萄球菌48株;革兰氏阴性杆菌105株（41.50%）,分别为大肠埃希菌63株,铜绿假单胞菌42株;真菌9株（3.56%）。非成批烧伤组检出主要病原菌225株（47.07%）,其中革兰氏阳性球菌127株（56.44%）,分别为金黄色葡萄球菌101株,表皮葡萄球菌26株;革兰氏阴性杆菌90株（40.00%）,与成批烧伤组略有不同,分别为铜绿假单胞菌51株,大肠埃希菌39株;真菌8株（3.56%）。成批烧伤组检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)59株（64.84%）,耐甲氧西林表皮葡萄球菌（methicillin-resistant staphylococcus epidermis,MRSE）31株（64.58%）;非成批烧伤组检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 61株（60.40%）,耐甲氧西林表皮葡萄球菌16株（61.54%）。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌等常见致病菌对常用抗生素的耐药性均增加,并呈多重耐药性。结论 成批烧伤患者的感染发生率较非成批烧伤患者明显增加,且金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌等常见致病菌对常用抗生素的耐药性均增加,并呈多重耐药性。     

几种常用抗MRSA药物在老年患者肺部感染中的疗效比较

目的观察和比较利奈唑胺、替考拉宁、夫西地酸、万古霉素治疗老年患者肺部耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的临床疗效及安全性。方法选取我院2008年1月—2012年7月间肺部MRSA感染的老年住院患者132例,分成四组:A组(利奈唑胺组)29例,B组(替考拉宁组)34例,C组(夫西地酸组)32例,D组(万古霉素组)37例,对其临床疗效、细菌清除率、不良反应进行临床对比分析。结果临床有效率:A组86.21%、B组73.53%、C组62.50%、D组83.78%,C组分别与A、D两组比较,有统计学差异(P<0.05);细菌清除率方面:A组89.66%、B组70.59%、C组65.63%、D组89.19%,C组分别与A、D两组比较,有统计学差异(P<0.05);总不良反应发生率方面:A组34.48%、B组35.29%、C组25.00%、D组48.65%,C组显著优于D组(P<0.05)。结论对于MRSA肺部感染的老年患者,利奈唑胺、万古霉素疗效显著优于夫西地酸;而夫西地酸在安全性方面更具优势,此类患者应采用个体化治疗方案。     

浊度法测定盐酸土霉素注射液的效价

目的建立浊度法测定盐酸土霉素注射液的效价。方法浊度法,以金黄色葡萄球菌为实验菌,加菌量0.2%,（37±0.5）℃培养3～4h测定。结果抗生素线性浓度范围为0.05～0.25.umL^-1,r=0.998 6,平均回收率为100.26%（n=9）,RSD为0.7%。结论本方法具有灵敏,快速的特点,可以作为测定盐酸土霉素注射液效价的方法。     

注射用头孢拉宗体外、体内抗菌研究

目的评价注射用头孢拉宗体内外抗菌活性。方法琼脂2倍稀释法测定该药对临床分离菌最低抑菌浓度(MIC)值及对细菌感染小鼠的体内保护作用,同时与对照药头孢西丁、头孢呋辛、头孢唑林进行对比。结果头孢拉宗对革兰氏阴性菌的抗菌作用较强,优于头孢西丁、头孢呋辛、头孢唑林。头孢拉宗对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌显示杀菌作用,酸性环境下,头孢拉宗的抗菌活性有所降低,随着细菌接种量和血清浓度的增加,头孢拉宗的抗菌活性略微降低;头孢拉宗对大肠埃希菌感染小鼠有较强的保护作用,ED50值为7.3 mg/kg,优于头孢西丁,对金黄色葡萄球菌感染小鼠ED50值为15.7 mg/kg,稍弱于头孢西丁。结论注射用头孢拉宗对临床常见的革兰氏阴性菌有较好的抗菌作用。     

酪氨酸对心理应激大鼠中枢多巴胺含量及其更新率的影响

目的 探讨酪氨酸(Tyr)干预对心理应激大鼠中枢多巴胺(DA)含量及其更新率的影响.方法 40只SD大鼠按数字表法随机分为5组:对照组、心理应激组和3个剂量Tyr干预组(分别经饲料每天给予Tyr 250、500、1000 mg/kg),每组8只.建立大鼠Communication Box心理应激模型,采用高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法测定各组大鼠前额皮质(mPFC)、伏隔核(Nac)和中脑腹侧被盖区(VTA)的DA与3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)含量.结果 与对照组mPFC、Nac、VTA区的DA含量[(0.36±0.15)、(3.47±0.52)、(1.35±0.31)μg/g]相比,心理应激组相应区的DA含量[(0.08±0.05)、(1.88±0.27)、(1.01±0.26)μg/g]降低(P＜0.05),DOPAC/DA升高(P＜0.01).与心理应激组相比,Tyr 500 mg/kg干预组和1000 mg/kg干预组mPFC、Nac、VTA区的DA含量增加(P＜0.05),mPFC、VTA区的DOPAC/DA降低(P＜0.05).结论 心理应激导致大鼠mPFC、Nac、VTA区的DA含量下降和DA更新率升高;Tyr干预能提高心理应激大鼠VTA-Nac-mPFC脑区的DA含量,降低DA更新率.     

金黄色葡萄球菌植入总量对兔桡骨骨髓炎模型的影响

目的通过不同量金黄色葡萄球菌植入兔桡骨,观察影像学及组织学变化,探讨兔桡骨骨髓炎动物模型中金黄色葡萄球菌的合适剂量。方法 35只成年雄性新西兰兔双侧桡骨制造骨窗,注入不同量(1×104~1×109CFU)的金黄色葡萄球菌作为实验组(A~F组),对照组注入0.1m L生理盐水,每组5只。分别于术后当日、术后2周、4周行X线及CT扫描检查。术后4周完成影像学评分后,处死兔取出桡骨完成肉眼观察评分,再作细菌培养、组织病理学检查并完成组织学评分。结果 F组兔因感染过重死亡2只;C、D、E、F组术后4周体重明显减轻,平均减轻量分别为(75.6±24.9)g、(119.0±42.7)g、(184.1±51.7)g、(194.9±63.2)g,体重改变组间无明显差异(P0.05),切口渗出较多,可见窦道形成。术前术后体重变化、肉眼观察评分、影像学评分和组织学评分LSD法比较,P0.05。术后4周影像学、肉眼观察及组织学检查D组只可见少量的骨感染表现,而E、F组可见严重的骨感染表现;E组及F组的肉眼观察评分[(2.6±0.2)和(2.8±0.1)]、影像学评分[(17.6±0.3)和(19.4±0.2)]和组织学评分[(7.2±1.1)和(8.4±0.2)]明显高于其他五组(P0.05);细菌学检查仅D、E、F三组培养出细菌。结论兔桡骨急性骨髓炎动物模型制作的最佳细菌量为1×108CFU,本实验的方法简单易行,适用于建立骨髓炎动物模型。     

腹膜透析相关性腹膜炎发病因素及耐药特征分析

目的探讨持续性不卧床腹膜透析（CAPD）相关性腹膜炎发生的影响因素和药敏特点。方法从患者性别、年龄、基础疾病、营养状况、致病菌种类以及抗药性方面,回顾性分析我院收治的58例次CAPD相关性腹膜炎病例资料。结果腹膜炎的发生率在40岁以下、无糖尿病、Hb〉90 g/L和Alb〉35 g/L患者显著低于其他患者（P〈0.05）。培养出细菌28例次,阳性率为48.3%,最常见的病原菌为表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌;革兰阳性菌对利福平、万古霉素耐药率最低;革兰阴性菌对阿米卡星、亚胺培南耐药率最低。结论 CAPD相关性腹膜炎致病菌仍以革兰阳性菌为主,必须根据病原学选择敏感抗生素治疗该病。