酶免疫和放射免疫技术在检测单克隆抗体中的应用

随着淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术的迅猛发展和应用,越来越需要有微量、快速、简易、敏感、特异,适于大规模筛选检测单克隆抗体(单抗)的技术方法。放射免疫测定法(RIA)和酶免疫测定法(EIA)是目前免疫学中符合上述要求的两种技术。本文就这两种广泛应用的技术在单抗筛选检测方面的应用加以综述,并讨论其优缺点。     

酶联免疫技术在乙型肝炎表面抗原检测中的应用

目的 分析酶联免疫吸附法（ELISA）在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）检测中的临床应用价值.方法 选择150例乙肝患者和50例健康体检者,分别采用ELISA法、胶体金试纸条法、电时间分辨免疫荧光法（TRFIA）检查血液样本HBsAg,比较三种检查方法检查结果的一致性.结果 三种方法在检测乙型肝炎血清标志物HBsAg结果方面具有很高的一致性.结论 酶联免疫吸附法（ELISA）是检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的有效方法,具有较高的临床应用价值,可以用于检验科的常规检查.     

单克隆抗体在自身免疫和免疫缺陷中的应用

人类T细胞的基因编码相当复杂。不但包括识别特异性抗原和执行独特的效应功能,而且还有免疫调节功能。因此,在可溶性或细胞表面抗原及包括PHA和Con-A等多克隆激活剂的应答中T细胞得以增殖(Chess等,1974 a.b)。它们在细胞介导的淋巴细胞溶解作用中     

单克隆抗体免疫酶直接斑点法检测人绒毛膜促性腺激素

作者报道应用本室研制的抗人绒毛促性腺激素(HCG)-β亚单位单克隆抗体,建立免疫酶直接斑点技术检测尿和血中的HCG含量。本法具有特异简便、快速、斑点呈色清晰稳定,试剂用量甚微等优点。4℃保存可用半年以上,是一种颜色鲜明的斑点妊娠试验新方法,目测敏感程度为6.25～9.5ng/     

癌胚抗原单克隆抗体放射免疫分析和临床初步应用

本文报道 应用杂交瘤技术,获得了8种CEA单克隆抗体(McAb),这8种McAb经~(125)I标记NcA,NFA,NcA(J)抑制试验,证明是什对CEA抗原决定簇的,取其中的三种McAb混合后,其亲和常数为2×10~(-8)M,应用此混合McAb检测239例人次血清标本、85例正     

癌胚抗原单克隆抗体放射免疫分析和临床初步应用

应用杂交瘤技术,获得了8种CEA单克隆抗体(McAb),这8中McAb经~(125)I标记NCA,NFA,NCA(J)抑制试验,证明是针对CEA抗原决定簇的,取其中的三种 McAb混合后,其亲和常数为2×10~(-8)M,应用此混合McAb检测239例人次血清标本,85例正常人的CEA 平均值为3.6±9.1ng/ml,其中96％少于30mg/ml,而 5％位于30～50ng/ml。在 128 例肿瘤患者中,81例结直肠癌,阳性检出率为44％;22 例胃癌为55％;21例肺癌为57％;4例肝癌为25％。在91 例消化道肿瘤病理检测中阳性率达79％,正常胃对照18例皆为阴性。     

固相放射免疫、酶联免疫及免疫电镜检测甲肝抗原

1973年Feinstone首次用免疫电镜(IEM)在甲肝病人的粪液中见到了甲肝病毒(HAV)颗粒。继之,采用补体结合试验(CF),免疫粘连血凝试验(IAHA),近年来又用较敏感的固相放射免疫(SPRIA),免疫荧光(IF)及酶联免疫吸附试验(ELI-     

单克隆抗体在食品检测中的应用

作者对单克隆抗体在食品检测中的应用进行了文献复习。迄今为止,对一些重要的食源性病原体及其产物,如细菌、细菌毒素、真菌毒素以及寄生虫等,已制备出多种单克隆抗体,用于动物的宰前诊断、食品检测及食物中毒的诊断,已显示出胜过常规使用(多克隆抗体)的免疫学方法,具有广阔的应用前景。在食品抗原分析上,一些难以用已有的方法解决的问题,有希望通过单克隆抗体技术得到解决。     

单克隆抗体斑点酶免疫试验检测粪便中血红蛋白的应用研究

应用抗人血红蛋白单克隆抗体(McAb)采用斑点酶免疫技术,对各种动物血及4842例健康人粪便进行潜血试验,研究结果表明抗人Hb-McAb斑点酶免疫试验最大特点是特异性强,不与羊、牛、猪、鸡、鸭鳝鱼的血发生交叉反应,此单抗仅与人Hb     

冰冻切片免疫过氧化物酶染色法在抗细胞性单克隆抗体筛选和鉴定中的应用

本文介绍一种快速准确地筛选和鉴定抗细胞性单克隆抗体(单抗)的冰冻切片免疫过氧化物酶染色技术。它既能筛选融合后的大量单抗(一般在3小时以内能筛选200～400孔杂交瘤细胞上清液);又可根据组织固有结构及细胞分区分布的特性,作为全面鉴定单抗的重要方法。我们运用此法从12次融合中,筛选并经克隆化获得291个单抗,进一步全面鉴定后得到抗T细胞等101个单抗。此外还讨论了消除非特异性染色的体会。     

冰冻切片免疫过氧化物酶染色法在抗细胞性单克隆抗体筛选和鉴定中的应用

本文介绍一种快速准确地筛选和鉴定抗细胞必单克隆抗体(单体)的冰冻切片免疫过氧化物酶染色技术。它既能筛选融合后的大量单抗(一般在3小时以内能筛选200～400孔杂交瘤细胞上清液);又可根据组织固有结构及细胞分区分布的特性,作为全面鉴定单抗的重要方法。我们运用此法从12次融合中,筛选并经克隆化获得291个单抗、进一步全面签定后得到抗T细胞等101个单抗。此外还讨论了消除非特异性染色的体会。     

细胞培养酶免疫法在检测和分析大肠癌细胞McAb中的应用

由于细胞表面抗原的提纯较难,检测抗细胞类抗原McAb常采用全细胞作抗原。一些学者多采用细胞悬液离心干燥法制备全细胞固相抗原,用免疫酶法进行McAb检测。由于细胞悬液包底,不均匀,以致影响结果的观察。本文报道在制备抗大肠癌HR_(8348)细胞McAb中,将HR_(8348)细胞直接培养于微板孔中,利用其贴壁单层生长的特性,制成包被均     

聚苯乙烯珠的研制——在放射免疫及酶免疫试验中的应用

<正> 近年来国外在放射免疫及酶免疫试验中应用聚苯乙烯珠为载体者日益增多。美国Abbott药盒全部采用聚苯乙烯珠,国内北京曾研制了扁平式的聚苯乙烯珠用于SPRIA检测HBsAg,但存在表面吸附及洗涤时有死角,且不易标准化。我们于1981年4月至     

免疫酶技术在修饰的安卡拉痘苗病毒感染性滴度检测中的应用

 修饰的安卡拉痘苗（modified vaccinia Ankara，MVA）是MVA病毒在原代鸡胚成纤维细胞（CEF）中经过一系列的传代得到^[1]，在人体内可以表达 MVA 病毒蛋白及其携带的外源基因蛋白，但却不形成完整的病毒颗粒，为人体内复制缺陷性病毒^[2]，安全性好，即使在免疫功能缺陷病人和免疫抑制的恒河猴体内也未显示出明显的副作用^[3]。近年来，重组 MVA 病毒广泛地用于预防性疫苗和感染性疾病、癌症治疗的基础与临床研究^[4]，其中以 MVA 病毒作为载体的疫苗是最有希望用于预防人类艾滋病的活载体疫苗之一^[5]。由于 MVA 病毒本身的繁殖特点，其滴度的检测不适合采用常规的蚀斑法进行^[6]；而常规微量细胞病变（cytopathic effect，CPE）法相对耗时，对细胞培养要求高，往往受到主观因素的影响，因而不稳定且精确度降低^[7]，给检测工作带来不便。上世纪 90 年代初 Usuba 等^[8]建立了免疫酶技术测定流感病毒感染性滴度的方法，较常规方法省时、结果准确﹑重复性好。我们就免疫酶技术在 MVA 病毒感染性滴度检测中的适用性进行了探讨，旨在建立一种准确、快速的 MVA 病毒感染性滴度检测方法。......     

单克隆抗体在农药残留检测中的应用

自1975年Kohler和Milstem创建了杂交瘤技术制备单克隆抗体以来,单克隆抗体已广泛应用于医学、农业及其他生物领域中。本文阐述了农药单克隆抗体的制备流程、已发展的农药单克隆抗体种类及农药残留常用的免疫分析方法,并就农药单克隆抗体制备值得注意的问题提出了建议。     

单克隆抗体放射免疫显像和治疗副反应初探

报告了应用本科研制的＾１３１Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ对肝癌ＲＩＩ ３３例和ＲＩＴ ２４例，给予的＾１３１Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ量分别为ＲＩＩ：７４－１８５ＭＰｑ／ＩｇＧ０．１－１ｍｇ；ＲＩＴ：７４０－２９６０ＭＢｑ／ＩｇＧ０．５－５ｍｇ，治疗前后检测肝、肾功能，白细胞计数，临床观察给药后有无反应。分析结果３３例ＲＩＩ病人，给药后未见不良反应。２４例ＲＩＴ病人，治疗前后白细胞及肝、肾功能未见显著变化，３例     

生物素-抗生物素在酶免疫技术中的应用

酶免疫技术作为三大免疫标记技术之一,以其敏感性高、特异性强、快速易行的特点在生物学、医学基础研究及临床诊断上得到了广泛地应用,并正在不断改进和发展。70年代初,有人在非标记抗体技术的基础上,将过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)复合物用于免疫酶技术,使该技术的敏感性得到了提高,并使试剂更加通用。70年代末、80年代初不少学者利用生物素(Biotin)与抗生物素(Avidin)高度亲和的特点,把生     

磁分离酶联免疫技术和放射免疫法测定甲状腺功能指标的比较

血清中T3、T4、FT3、FT4、TSH五项指标(简称甲功五项)的含量测定对甲状腺疾病的诊断及疗效评价具有重要意义。甲功五项的测定通常采用放射免疫法(RIA),这种方法虽然灵敏可靠,但存在放射性污染的问题,因此寻找一种灵敏、特异、可靠、无污染的测定方法是一项很有意义的工作。磁分离酶联免疫测定技术(MAIA)是一种非放射性物质标记分析技术,符合上述要求,在临床上具有广阔的应用前景[1,2]。我们用该法检测了135例甲状腺功能异常患者和50例正常人血清甲功五项指标并与RIA法进行了比较,两法结果基本一致(P>0.05),相关系数r=0.974(P<0.01)…